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PROPIEDADES IONICAS DE LOS AMINOACIDOS

DURÁN VELANDIA, Yessica Andrea; GALVIS ROJAS, Marlon Andrés;

PACHECO SUAREZ, María Teresa.

Facultad de ingenierías y Arquitectura, Universidad de Pamplona,

Colombia 2017.

Resumen (falta arreglarlo)

Con esta práctica de laboratorio se determinó la capacidad amortiguadora de

los aminoácidos cisteína y arginina. Para ello fue necesario medir el pH
inicial del aminoácido estudiado previamente. Se llevó a cabo Por el método
de titulación, midiendo la variación del pH al agregar cantidades mínimas de
solución básica y a la vez tomando datos de la base (NaOH) adicionada al
ácido (HCl). Usando el pH-metro para obtener la curva de titulación y
determinar los pK del aminoácido.

Palabras clave:

Aminoácido, Amortiguar, Arginina, Cisteína, punto Isoeléctrico, pH.

ABSTRACT

With this laboratory practice, the damping capacity of the amino acids
cysteine and arginine was determined. It was necessary to measure the initial
pH of the previously studied amino acid. It was carried out by the titration
method, measuring the pH variation by adding minimum amounts of basic
solution and taking data from the base (NaOH) added to the acid (HCl). Using
the pH meter to obtain the titration curve and determine the pK of the amino
acid.

Keywoords:

Amino Acid, Cushion, Arginine, Cysteine, Isoelectric point, pH.

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INTRODUCCION
Los aminoácidos son compuestos
que contienen un grupo amino, un
grupo carboxilo, un hidrógeno y un
grupo R unidos a un carbono alfa,
su estructura depende del pH del
medio en donde se encuentran, el
grupo carboxílico pierde un protón
dando lugar a un ion carboxilato; y
el grupo amino seprotona y da
lugar a un ion amino. A esta
estructura se le denomina ion
dipolar zwitterion y se encuentra en
un punto isoélectrico. En una
solución ácida, el grupo -COO¯ se
protona y se obtiene el grupo –
COOH, y la molécula tiene una
carga total positiva. Si el pH
aumenta, el grupo– COOH
pierdesu protón aproximadamente
a pH= 2. A este punto se le
denomina pKa1, primera constante
de disociación ácida. Si el pH sigue
aumentando, el grupo –
NH3+pierde su protón a un pH
entre 9 y 10. A este punto se le
denomina pKa2, segunda
constante de disociación ácida. Por
encima de este pH, la molécula
tiene una carga total negativa
(Wade, 2004, p.1121). Los
objetivos a realizar en la práctica
fueron determinar gráficamente el
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punto isoélectrico del aminoácido,
utilizando valores de pH y volumen
de titulante agregado. De la misma
manera se tuvo la capacidad de
ubicar en las curvas de titulación,
las regiones que manifiestan la
presencia de las formas iónicas del
aminoácido; y de determinar
gráficamente los valores de pk 1 y
pk 2(1)
Las proteínas son macromoléculas
compuestas por unidades más
pequeñas conocidas como
aminoácidos. En las proteínas se
encuentra básicamente veinte
aminoácidos diferentes, los cuales
contienen un grupo carboxilo y un
grupo amino unidos al mismo
átomo de carbono (carbono α)
estos aminoácidos difieren unos de
otros solo por la naturaleza de sus
cadenas laterales, o grupos “R”
que varían tanto en estructura,
como en tamaño y carga eléctrica
e influyen en la solubilidad en
agua.
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Los grupos carboxilo y amino de
los aminoácidos funcionan como
ácidos y bases débiles,
respectivamente, y como tales, se
ionizan cuando están en solución.
Los aminoácidos tienen al menos
dos pK, por lo que tienen mayor
capacidad amortiguadora, ya que
presentan de tres a cuatro formas
iónicas diferentes. Cuando la forma
iónica tiene una carga neta de cero
se dice que se encuentra en su
punto isoeléctrico o pI. Al variar de
pH, cambia la proporción de la
formas iónicas y es posible ver la
capacidad amortiguadora de los
aminoácidos. Cada aminoácido
tiene sus propio pK, puesto que
presenta diferentes sustituyentes
en sus cadenas laterales. Mediante
una titulación, se puede determinar
el pK de un aminoácido.
Titulación: Es la adición de
sucesivas cantidades de una base
o de un ácido fuertes, a una
solución de ácido o de base a
titular, con la medición simultánea
de su pH, hasta el punto de
equivalencia en el cual los
equivalentes de ácido y de base se
igualan. [2]
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La curva de titulación será bifásica.
Habrá dos porciones separada o
inflexiones en la curva de
titulación. El punto medio de la
primera inflexión (B) es donde el
aminoácido está mitad en forma
ácida y mitad en forma zwitterion.
EL punto de inflexión C ocurre
cuando todo el aminoácido original
ya está en forma de zwitterion. El
pH al cual esto ocurre se denomina
el pH isoeléctrico (punto
isoleléctrico) y se le da el símbolo
pI (asumiendo que el grupo “R” no
tiene carga). En la titulación de pH
de un aminoácido con un grupo no
ionizable “R”, el punto de
equivalencia ocurre en el pI del
aminoácido. En el punto medio de
la segunda inflexión (D),la mitad
del aminoácido está en forma de
zwitterion y la otra mitad está en
forma básica[3]. Las curvas de
titulación proporcionan la siguiente
información:
Medida del pK de los grupos
ionizables: se localizan en el punto
medio de la zona tampón.
Regiones de capacidad tampón:
mesetas donde se localizan los pK;
dichas regiones se encuentran en
el intervalo pK ±1 unidad de pH
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pl: se localiza en el intervalo de Se Pesó cerca de 400 mg de

viraje. muestra, se disolvió en 20 ml de
H2O en un balón aforado. Se
Formas ionizables del aminoácido Introdujo una barra magnética y se
en cada rango de pH. colocó en una placa de agitación,
Carga eléctrica del aminoácido en así como el electrodo para medir
cada rango del pH pH. Se tituló la muestra disuelta
desconocida NaOH al 1M
Solubilidad relativa del aminoácido respectivamente a cada solución
en cada rango de pH.[4] de aminoácidos previamente
preparada, registrando las lecturas
PARTE EXPERIMENTAL
de la bureta y el pH a intervalos
Materiales frecuentes, hasta que la solución
alcance un pH de 1.0. Se tomaron
1 PH-metro (SCHOTT) datos del pH adicionado, se
realizó el mismo procedimiento
1 Agitador magneto
pero con HCl en los respectivos
1 Plancha de calentamiento con aminoácidos.
agitación (HP 220) Hotplate/stirrer
ANALISIS Y RESULTADOS
1 balanza analítica (marca
Preparación de soluciones:
OHAUS)
En La preparación de la solución
Reactivos
de NaOH y HCl se usaron 100 mL
HCl (Marca: Merk KgaA, respectivamente a una
densidad=1,19 g/mol) concentración de 1M. Los cuales
se realizaron los siguientes
Hidróxido de sodio NaOH (Pureza cálculos para dar con la cantidad
99,9%, Marca: Merk KgaA) necesaria de NaOH y HCl que se
Cisteína (Marca: L-cysteine) debían adicionar, dando como
resultado una masa de 4 g de
Arginina (Marca: L-arginina) NaOH y 8,27 mL de HCl. Llevando
así a realizar la preparación de las
PROCEDIMIENTO
soluciones.

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1𝑚𝑜𝑙 40𝑔 solución del aminoácido problema

𝑔 𝑁𝑎𝑂𝐻 = ∗ 0,1𝐿
𝐿 1𝑚𝑜𝑙 arrojando la siguiente tabla y su
= 4 𝑔 𝑁𝑎𝑂𝐻 respectiva gráfica. (Ver tabla 1 y grafico 1)
1 𝑚𝑜𝑙 36,45𝑔 Donde se comprobó con la
𝑚𝐿 𝐻𝐶𝑙 = ∗ 0,1 𝐿 ∗
𝐿 1 𝑚𝑜𝑙 literatura dos pK para el
𝑚𝐿 100𝑔 aminoácido problema, (1,96-
∗ ∗
1,19𝑔 37𝑔 10,28).
= 8,27 𝑚𝐿 𝐻𝐶𝑙
Tabla 1. Titulación del
Una vez realizados los respectivos aminoácido Cisteína con NaOH
cálculos para llevar a cabo dichas mL mL
pH pH
soluciones, se procedió a realizar NaOH NaOH
las soluciones amortiguadoras con 0,0 1,44 5,0 8,59
los aminoácidos donde se usó 20 0,5 1,48 5,5 9,08
mL de A.D, adicionando la arginina 1,0 1,65 6,0 9,47
y la cisteína en una cantidad de 0,4 1,5 1,90 6,5 9,69
g respectivamente. 2,0 2,20 7,0 10,17
2,5 5,74 7,5 10,68
Se llevó a cabo la titulación de un 3,0 6,86 8,0 10,94
aminoácido midiendo la variación 3,5 7,29 8,5 11,07
del pH al agregar cantidades 4,0 7,69 9,0 11,09
mínimas de solución básica y 4,5 8,07
acidas conocida, utilizando para
ello el potenciómetro, es posible
obtener la curva de titulación y en Al incrementar la cantidad de la
ella determinar los pK de éste solución NaOH se vio reflejado un
aminoácido. cambio del pH en la solución del
aminoácido problema.
Titulación del aminoácido
Cisteína con NaOH Grafico 1. Curva de titulación del
aminoácido Cisteína con NaOH.
El pH de la solución del
aminoácido fue de 1,44. Se
observa la adición continúa de 0.5
mL de la solución de NaOH a la

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0,1 1,50 1,2 1,23

0,2 1,47 1,3 1,22
0,3 1,45 1,4 1,21
0,4 1,42 1,5 1,20
0,5 1,40 1,6 1,19
0,6 1,37 1,7 1,18
0,7 1,32 1,8 1,17
0,8 1,29 1,9 1,16
La curva de valoración muestra un 0,9 1,27 2,0 1,14
rango de amortiguamiento donde
1,0 1,26
mantiene un equilibrio del pH que
se ve reflejado en los rangos (1,44-
2,20) comprobado con el pKa de la La adición continua de 0.1 ml de la
literatura 1.96, donde no dio solución de HCl el pH de la
exactamente los rangos de ±1 solución del aminoácido cisteína.
dado a la poca concentración de la
Grafico 2. Curva de titulación del
solución.
aminoácido Cisteína con HCl.
Titulación del aminoácido
Cisteína con HCl

Adición continua de 0.1 ml de la

solución de HCl a la solución
amortiguadora (cisteína), donde
se obtuvo la siguiente tabla y su
respectiva gráfica. Arrojando un pH
inicial de 1,52, teniendo como
literatura un pK (1,96-10,28). (Ver El aminoácido valorado se
grafica 2 y Tabla 2) comenzó con un pH 1,52 hasta
1,16 en este caso la cisteína se
Tabla 2. Titulación del
aminoácido Cisteína con HCl tituló con HCl. Donde se obtuvo un
equilibrio en el rango (1,27-1,16),
mL HCl pH mL HCl pH
donde el pK 1,96 es mayor al
0,0 1,52 1,1 1,24
punto de equilibrio, ya sean por

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factores de mal manejo del Grafico 3. Curva de titulación del

material o errores de la práctica aminoácido Arginina con NaOH.
que nos dieron esos resultados.

Titulación del aminoácido

Arginina con NaOH

Se adiciono de 0.1 a 0.2 mL de la

solución de NaOH a la solución del
aminoácido dando como resultado
la siguiente tabla y su respectiva
gráfica: Entre menor sea la concentración
de la solución amortiguadora esta
Tabla 3. Titulación del mantiene menos el pH. La curva
aminoácido Arginina
de titulación del aminoácido
mL mL
NaOH pH NaOH pH arginina muestra los rangos donde
0,0 4,68 1,1 8,55 se hallan los pK del aminoácido,
0,2 7,36 1,2 8,63 comparados con los pk de la
0,4 7,60 1,3 8,79 literatura (2,17-9,04), además de
0,5 7,92 1,4 9,00 su punto isoeléctrico. Donde se vio
0,6 8,20 1,5 9,14 reflejado un rango de equilibrio en
0,7 8,26 1,6 9,31 la curva entre (8,20 a 8,39) que es
0,8 8,32 1,7 9,59 ±1 del Kp de la literatura, pero no
0,9 8,37 1,8 9,91 son datos exactos dado a que este
1,0 8,49 1,9 10,27 aminoácido es arginina mono
clorado y ello altera el pH.

Titulación del aminoácido

Arginina con HCl

El pH de las soluciones del

aminoácido arginina es 4,89 a
1,04, donde se midió el pH hasta
llegar a un pH 1.

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Tabla 4. Titulación del Grafico 4. Curva de titulación del

aminoácido Arginina con HCl aminoácido Arginina con HCl.
mL HCl pH mL HCl pH
0,0 4,89 2,4 1,34
0,2 2,54 2,5 1,31
0,3 2,37 2,6 1,30
0,4 2,17 2,7 1,28
0,5 2,04 2,8 1,27
0,6 1,98 2,9 1,25
0,7 1,93 3,0 1,22
0,8 1,89 3,1 1,21
0,9 1,85 3,2 1,19
1,0 1,78 3,3 1,18 Se puede observar en la curva el
1,1 1,72 3,4 1,16 pH donde inicia su máxima
1,2 1,69 3,5 1,15 capacidad amortiguadora en un
1,3 1,63 3,6 1,13 rango (1,27-1,16) en donde se
1,4 1,60 3,7 1,12 tiene como pK de 2,17 mayor al
1,5 1,56 3,8 1,10 intervalo de equilibrio dado que el
1,6 1,54 3,9 1,10 aminoácido problema es mono
1,7 1,53 4,0 1,09 clorado.
1,8 1,51 4,1 1,08
1,9 1,47 4,2 1,07
2,0 1,43 4,3 1,06
CONCLUSION
2,1 1,41 4,4 1,05
2,2 1,38 4,5 1,04 Durante el avance de la práctica
2,3 1,37 nos dejó conocimiento acerca de la
A mayor cantidad de HCl varia curvas de valoración que se
más el pH presentaban en la titulación de los
aminoácidos, dado que a partir de
esto se determinó los pK y la
máxima capacidad de
amortiguamiento de las soluciones
tituladas.

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Se realizó una curva de titulación ANEXOS

de los aminoácidos, utilizando una
1. Usando la ecuación de
base y un ácido para determinar
Henderson –Hasselbalch,
las variaciones de pH con el pH- calcular el pKa de cada grupo
metro, en la cual se establecieron ionizable titulado.
los rangos posibles donde R:
pudieran encontrarse los pK de Ecuación de Henderson-
éste aminoácido, donde se Hasselbalch:
comparó con la literatura y se
dedujo que hubo variaciones del
pH dado que el aminoácido
arginina es mono clorado y
Titulación del aminoácido
también se dieron errores de
Cisteína con NaOH:
practica que generaron una
variación de pH. 1
𝑝𝐻 = 1,96 + log = 1,96
1
BIBLIOGRAFIA
Titulación del aminoácido
1.https://es.scribd.com/doc/881891 Arginina con NaOH:
07/propiedades-de-aminoaciods

2.https://es.scribd.com/doc/141971 1
𝑝𝐻 = 9,04 + log = 9,04
272/INFORME-BIOQUIMICA- 1
AMINOACIDOS
2. Coincide con el pKa reportado
3.http://agu.inter.edu/halices/TITUL en los libros?
R: los aminoácidos con dos pK
ACION_AMINOACIDOS.pdf
muestran valores similares, con la
4.http://212.128.130.23/eduCommo identificación del aminoácido
ns/ciencias- arginina y cisteína se puede decir
biosanitarias/bioquimica-ph- que la arginina por no ser pura nos
equilibrios-acido-2013- dará un pH no establecido al de la
base/contenidos/4.%20Curvas%20 literatura del pk dado que es un
de%20titulacion%20de%20aminoa aminoácido mono clorado.
cidos.pdf

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Comprando con la literatura los Arginina se procedió a medir su pH

valores arrojados de la cisteína
fueron más cercanos al pK del
mismo.
3. Cómo se podría confirmar la
identidad del aminoácido?
R: Para la identificación de los
aminoácidos problema cisteína y
en sus dos titulaciones ácido y
base, donde se descartan los
aminoácidos que tienen más de
dos pk, dado a su variación de pH
que arroja diferente pk de la
literatura

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