PROTOCOLOS DE LABORATORIO

BIOLOGÍA
Versión 1 Fecha:22/06/2016

MICROSCOPIA

1. Introducción

El Microscopio es una herramienta óptica muy relevante ya que desde su creación fue posible
poder apreciar elementos y organismos ciertamente diminutos que antes de su aparición no
podían visualizarse. Por eso su llegada, sin lugar a dudas, marcó un salto en este sentido y
una de las grandes beneficiadas fue la investigación científica que encontró en él un gran
aliado y soporte a la hora de avanzar en ciertas investigaciones que justamente implicaban el
conocimiento de elementos y organismos muy pequeños. Entonces el microscopio es aquel
instrumento óptico que está compuesto por unos lentes que son los encargados de ampliar las
imágenes que se enfocan y que son muy pequeñas para ser vistas por el ojo humano.

2. Objetivos:

 Conocer las diferentes partes del microscopio compuesto y sus respectivas funciones
 Aprender a manejar correctamente el microscopio compuesto, adquiriendo
habilidades en su manejo
 Aprender a preparar muestras en fresco.

3. MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS

 Microscopios compuestos
 Aceite de inmersión
Los estudiantes deben traer:
 Portaobjetos
 Cubreobjetos
 Papel periódico con letras pequeñas.
 Hilos de colores

Docente: Julia María Pérez Jiménez, MSc. en Biología.

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4. PROCEDIMIENTO

4.1 Partes del Microscopio Compuesto

4.1.1 Parte Mecánica

4.1.1.1 Pie o Base. Generalmente tiene forma de herradura; es el apoyo de las demás piezas
del microscopio.

4.1.1.2 Columna o Brazo. De bastante solidez, sirva de soporte a las otras porciones, por
ella se agarra el microscopio cuando se traslada de un sitio a otro.

4.1.1.3 Platina o Mesa. Cuadrada o circular o en otra forma para dar paso a la luz por medio
de una abertura central. Sobre ella se colocan los objetos montados en el portaobjetos para
examinarlos, en los microscopios compuestos la platina posee un dispositivo llamado carro
que a su vez sirve para transportar la muestra imprimiéndole movimientos horizontales y
longitudinales.

4.1.1.4 Tubo ocular o porta ocular. Lleva en la parte superior el ocular, este tubo corre en
dirección vertical, con ayuda de una cremallera sobre la columna.

4.1.1.5 Tornillo de Enfoque. Viene a reemplazar a los tornillos micrométricos y

macrométricos desempeñando la función de estos dos tornillos, que son los desplazamientos
amplios; subir y bajar al tubo en forma visible en unos microscopios o la platina en otros,
además da nitidez a la imagen enfocada.

4.1.1.6 Revolver. Disco giratorio, porta objetivos, está por debajo del tubo sirve para cambiar
de aumento y soportar los objetivos.

4.1.1.7 Diafragma o Iris: Dispositivo metálicos de placas o laminillas superpuestas de tal

manera que regula la cantidad de luz que debe pasar.

Docente: Julia María Pérez Jiménez, MSc. en Biología.

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4.1.2 Partes ópticas de un Microscopio compuesto. Las partes ópticas de un microscopio

óptico compuesto, se componen de todo aquello que lleve espejos, vidrios, prismas, lentes
que tengan relación con la visión.

4.1.2.1 Oculares. Se encuentran en la parte superior del tubo ocular y consiste en varios
lentes convergentes que se acoplan a ellos.

La cara superior del ocular va marcada con un número seguido de un signo X que indica el
aumento (10X, 40X, 4X, 100X) si el microscopio tiene un solo ocular se llama monocular,
si tiene 2 binocular, como los que utilizaremos en las prácticas relacionadas con microscopio.

4.1.2.2 Objetivos. Se acoplan al revolver, pueden ser cambiados de posición con sólo rotar
el revolver con el fin de cambiar de aumento. El número de objetivos es variable los de menos
aumento van desde el 3.2 X hasta el 10X y son más cortos, los de mayor aumento van desde
16 hasta 45X, son más largos que los anteriores, los de inmersión son 95X y 100X.

El aumento total de la imagen en un microscopio se obtiene multiplicando el aumento del

ocular por el aumento del objetivo.

4.1.2.3 Sistema de Iluminación. El microscopio compuesto tiene una lámpara enchufada en

el pie con una graduación para la intensidad de luz.

4.2 Cuidados en el Manejo del Microscopio

Por ser un instrumento valioso para investigación y trabajo de laboratorio, además de
delicado y costoso el microscopio debe manipularse y tratarse con un cuidado muy especial.

4.2.1 No mueva bruscamente ninguna pieza móvil, gire suavemente el tornillo de enfoque y
con una sola mano, si encuentra alguna resistencia en el desplazamiento de algunas de las
piezas no la fuerce, llame al profesor.

4.2.2 No destornille ninguna pieza y no toque el vidrio filtro.

Docente: Julia María Pérez Jiménez, MSc. en Biología.

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4.2.3 Para guardar el microscopio

1) Retire la preparación de la platina

2) Limpie todas las partes del microscopio
3) Acerque al máximo el tubo ocular y la platina
4) Deje el objetivo de menor aumento en posición de enfoque

4.3 Preparación de la Muestra

La muestra que se va a estudiar debe ser pequeña, delgada y transparente,

1) Coloque el material a observar en el portaobjetos completamente limpio y libre de grasa.

2) Con un gotero coloque una gota de agua sobre la lámina o portaobjeto, luego se cubre
con la laminilla, también limpia. Para cubrir con la laminilla, coloque ésta sobre la lámina
haciendo contacto con la gota de agua y formando un ángulo de 45º en éste.
3) Deje caer suavemente el cubre-objeto sobre la preparación de tal manera que el agua se
distribuya homogéneamente, en caso de que sobre agua por los lados debe absolverse con
un papel o toalla.
4) Si hay burbujas, éstas impiden la correcta observación para eliminarlas, desplace el
cubre-objeto a ambos lados o presiónelo suavemente.

4.3.1 Observación de una Muestra

4.4. Ubique el microscopio en su sitio de trabajo para transportarlo, sujete con una mano el
brazo y con la otra mantenga la base, colocándolo suavemente sobre la mesa, orientado de
tal manera que el brazo mire hacia usted.

4.4.2 Gire el revolver colocando el objetivo de menor aumento de tal manera que la lente
frontal de éste concuerde con la del condensador y perpendicularmente con relación a la
platina. Un leve clic que es el sonido de encaje nos indica que esto ocurre.

Docente: Julia María Pérez Jiménez, MSc. en Biología.

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4.4.3 Encienda la lámpara con el dispositivo que se encuentra en la base, si a luz es muy
intensa gradúe el diafragma.

4.4.4 Coloque la muestra a observar (tirilla de papel con palabra corta) en la platina y
movilice la lámina con el tornillo que desplaza la platina, haga coincidir la muestra de papel
con la luz y la lente del objetivo a utilizar.
4.4.5 Para enfocar la muestra mueva el tornillo de enfoque hasta que el objetivo esté muy
cerca de la lámina. Hago esto con mucho cuidado evitando romper la lámina, para esto mueva
el tornillo viendo desde el lado, seguidamente mire a través del ocular y gira hacia atrás con
lentitud hasta que la margen aparezca bien clara.

Se debe enfocar inicialmente con menos aumento (3.2X) quedando siempre el objeto en el
centro del campo visual.

4.4.6 Se procede a pasar al mayor aumento (10X) teniendo en cuenta que este objetivo es
más largo, se debe tener cuidado que al girarlo no rompa la lámina o raye otras partes del
microscopio, utilice de nuevo el tornillo de enfoque para dar nitidez a la imagen.

4.4.7 Si desea obtener nuevas imágenes se debe mover la lámina en diferentes sentidos, tenga
en cuenta que el microscopio lleva el sentido contrario y la imagen es invertida.

4.5 CARACTERÍSTICAS DE LA IMAGEN

4.5.1 Visualización de la imagen.
Haga un montaje en fresco de una letra asimétrica. Ej: a, j, b, d, e, f, g, h, m, n, ñ, p, q, r, t,
w, z. Enfoque en menor aumento, haga dibujos. ¿Cómo se ve la imagen con relación a la
posición de la letra en el portaobjeto? ¿Por qué? Haga enfoque a mayores aumentos, efectúe
esquemas.

Docente: Julia María Pérez Jiménez, MSc. en Biología.

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4.5.2 Desplazamiento de la Imagen.

Con el montaje anterior, enfoque de nuevo con 10X. Desplace la muestra hacia la derecha y
mire a través del ocular. ¿En qué dirección se mueve la imagen? Luego repita el
procedimiento desplazando la muestra hacia la izquierda ¿En qué dirección se mueve la
imagen? Luego mueva la muestra hacia arriba hacia abajo ¿En qué dirección se desplaza la
imagen? ¿Por qué?

PREGUNTAS:

1. Consultar: un milímetro, un micrómetro, un Armstrong, un nanómetro.

2. Clase y tipo de microscopios, relacionando los aspectos fundamentales, de su estructura y

función:

3. Microscopio simple, de luz polarizada, de campo oscuro, contraste de fases, electrónico

(clases y tipos actuales).

Docente: Julia María Pérez Jiménez, MSc. en Biología.