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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE BAJA CALIFORNIA SUR Bioingeniería en Acuacultura

Cultivos de Apoyo Profesor: Francisco Javier Jiménez Ordaz


PRÁCTICA No. 4. MANTENIMIENTO Y PRODUCCIÓN DE MICROALGAS MARINAS
Introducción
La manera más común para conservar cultivos de microalgas es mantener estos
continuamente bajo condiciones ambientales controladas. Rutinas de subcultivos en serie
es llevado a cabo usando técnicas asépticas, que consiste en transferir un inoculo de la
fase exponencial final dentro de medio fresco esterilizado. Esto origina cultivos
metabólicamente activos que pueden ser usados en tiempos cortos. El propósito de esta
actividad es retener una población, fisiológicamente, morfológicamente, y genéticamente
saludable. Un factor clave a considerar es que diferentes edades de subcultivos pueden
proveer diferentes estadios del ciclo de vida (por ejemplo, células móviles y dividiéndose en
las primeras fases del cultivo). Las principales limitaciones de perpetuar las células es la
selectividad, naturaleza artificial del medio y régimen de incubación con respecto a
condiciones naturales. Condiciones de laboratorio pueden, en casos extremos, conducir a
la perdida de características morfológicas y fisiológicas importantes. Ejemplos de
inestabilidad incluyen la reducción en tamaño de las frustulas de diatomeas (Jaworski et al.
1988), perdida de composición pigmentaria normal en diversas algas (Warren et al. 2002).
Otras limitaciones incluyen la posibilidad de contaminación de cultivos axenicos por manejo
inapropiado de estos durante la transferencia a volúmenes mayores de producción. Rutinas
de subcultivos en transferencias sucesivas para la producción de microalgas es una labor
intensiva y ciertamente limita la capacidad del cultivador para mantener gran número de
especies en líneas de producción para la alimentación de invertebrados acuáticos.
Objetivo
Mantener diferentes especies de microalgas, mediante los procedimientos de laboratorio
de transferencia de cultivos líquidos de nivel matraz Erlenmeyer, para aumentar la cantidad
y densidad de microalgas.

Materiales
Material Instrumental Otros
4 matraces de 125 ml Campana de flujo Inóculos de microalgas
laminar De cultivo primario
4 Matraces de 1000 mL Microscopio Cloro comercial
Estériles con nutrientes
Puntas de 1ml estériles Agua de mar filtrada
Probeta graduada de 100 ml Algodón y gasas
8 Tubos 1.5 ml
8 Porta y cubre objeto
8 garrafones con tapas
Mangueras
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Método
Mantenimiento de cultivo primario
1.-Verifique la calidad del agua (La salinidad de 32 a 43 partes por mil, Temperatura
del área, Luminosidad, Verificar el funcionamiento del UV, y filtros)
2.- Elabore una tabla con las observaciones realizadas.
3.- Verifique el material a utilizar que esté listo y esterilizado.
4.- Etiquete matraces los que se usaran para tener un respaldo de su cultivo primario
(matraces de 125 ml) y los que utilizaran para inocular para escalar el cultivo (1000
ml).
5.- Verifique la pureza del cultivo tomando muestras en campana, recuerde seguir
las medidas de higiene y seguridad para no contaminar. La muestra ponerla en porta
objetos y verifique en microscopio (Cubra con porta objetos si se le indica
dependiendo del objetivo). La muestra no debe contener bacterias.
6. Realice la trasferencia de inoculo a los matraces. Cierre los matraces con cinta
7. Limpie el área utilizada y ponga los matraces en área indicada para el crecimiento
de las microalgas.
Preparar materiales para la producción de microalgas
1.- Lave los Garrafones en área húmeda, llene con agua de mar, agregue cloro, en
proporción de 1 ml por 1L de agua de mar y tape. Ponga un papel aluminio e indique
con una etiqueta sus datos.
2.- Ponga en agua con cloro las mangueras con un peso, el cual debe estar sujeto
con unos cinchos.
3.- Indique su material que dejara para la siguiente práctica y realicen una bitácora.
Después de ocho días revise sus cultivos.
Resultados
Indique la tabla de verificación de parámetros para el mantenimiento del cultivo
Reporte como se encontraban sus cultivos de microalgas.
De las cepas utilizadas describan algunas características de acuerdo a las
descripciones indicadas por el profesor o la encargada del laboratorio.
Discusiones
Los puntos a discutir serán ¿porque debemos de checar la calidad del agua y
verificarlos? En algún artículo busque que recomiendan para su mantenimiento.
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Indique las diferencia entre un mantenimiento del cultivo y uno escalado para la
producción.
Proponga un tiempo de cosecha del matraz de 1 L, cuanta biomasa obtendrá,
cuantas células por ml, ¿cómo la obtendrá o cosechara?
Bibliografía

Jaworski, G. H. M., Wiseman, S. W., and Reynolds, C. S. 1988. Variability in sinking


rate of the freshwater diatom Asterionella Formosa: the influence of colony
morphology. Br. Phycology. F. 23: 167-76.

Lavens, P; Sorgeloos, P. 1996. Manual on the Production and Use of Live Food for
Aquaculture. FAO Fisheries Technical Paper. No. 361. Rome, FAO. 295 pp.

Warren, A., Day, J. G., and Brown, S. 2002. Cultivation of protozoa and algae. In
Hurst, C. J., Crawford, R. L., Knudsen, G. R., McInerney, M. J., and Stezenbach, L.
D., Eds, Manual of Environmental Microbiology, ed. 2. ASM Press, Washington,
D.C., pp 783.