Escuela Superior de Salud y Medio ambiente

Carrera TNS en Laboratorio Clínico, Banco de Sangre e Imagenología

Módulo Banco de Sangre
Docente Verónica Machaca Parra

LABORATORIO N°2: GRUPO SANGUINEO

Los grupos sanguíneos más importantes son el sistema de grupos sanguíneos ABO y el sistema de grupos
sanguíneos RhD. Los grupos sanguíneos son determinados por una proteína (denominada Antígeno) ubicada en la
superficie del glóbulo rojo. Así, el sistema sanguíneo ABO tiene los antígenos A y B y el sistema sanguíneo RhD
tiene el antígeno D.
SISTEMA ABO
El grupo sanguíneo A, posee en la superficie de los glóbulos rojos el antígeno A. El grupo sanguíneo B posee en
la superficie de los glóbulos rojos el antígeno B. El grupo sanguíneo O no tiene ningún antígeno en la superficie
de los glóbulos rojos, y el grupo AB, tiene ambos, el antígeno A y el antígeno B.
El sistema ABO tiene asociados los anticuerpos anti-A y anti-B, anticuerpos que constituyen una defensa natural
contra antígenos extraños y que se encuentran en el plasma. Se debe recordar que el organismo genera una
respuesta inmune ante la presencia de componentes extraños para el cuerpo.
✓ El grupo sanguíneo A tiene el antígeno A, este grupo reconoce al antígeno B como extraño y puede formar
anticuerpos anti-B.
✓ El grupo sanguíneo B tiene el antígeno B y, por lo tanto, reconoce el antígeno A como extraño y puede
formar anticuerpos anti-A.
✓ El grupo sanguíneo AB tiene tanto el antígeno A como el antígeno B, por lo tanto, este grupo no forma
anticuerpos.
✓ El grupo O no posee ni el antígeno A ni el B por lo que puede formar anticuerpos anti-A y anti-B si es
expuesto a estos antígenos. El grupo O, al no poseer antígenos A y B, puede ser transfundido de manera
segura a cualquier grupo. Por esto a los donantes con grupo O se les conoce como “donantes universales”.
Ejemplo: los anticuerpos anti-A presentes en la sangre de una persona de grupo sanguíneo B, atacarán a
las células A y viceversa. Es por esto que jamás se debe administrar sangre grupo A a una persona grupo
B.
SISTEMA Rh D
Otro sistema de grupos sanguíneos importante es el sistema RhD. Aproximadamente el 95% de nuestra población
posee el antígeno D en la superficie de sus glóbulos rojos y se consideran RhD Positivos, estas personas, no tendrán
anticuerpos contra este antígeno El 5% restante de la población no posee el antígeno D y son considerados RhD
Negativos, y en presencia del antígeno RhD positivo, fabricarán anticuerpos que combatan contra éste (anti-Rh).
Ejemplo: una persona que es de grupo A y RhD negativo será conocida como A Rh Negativo.

Es muy importante tener en cuenta dos puntos:

✓ El grupo sanguíneo de una persona se define por el grupo ABO en conjunto con el grupo RhD.
✓ Transfundir sangre a una persona con el grupo ABO-Rh equivocado, puede comprometer la vida.
CLASIFICACIÓN DE GRUPO SANGUINEO
Para realizar la determinación de grupo sanguíneo ABO-Rh tenemos varias opciones:
✓ Clasificación en Tubo
✓ Clasificación en Lamina (Generalmente para reclasificar o recontrolar)
✓ Clasificación en Gel

A. DETERMINACION EN TUBO:
La determinación de Grupo Sanguíneo ABO en tubo consta de dos partes, una prueba Directa y una prueba
Inversa. La Prueba Directa enfrenta glóbulos rojos del paciente suspendidos en una solución de PBS a
Antisueros que contienen anticuerpos Anti-A, Anti-B, Anti-AB y Anti-D.
Los resultados obtenidos en las pruebas de glóbulos rojos (prueba directa), excepto las realizadas en muestras
de sangre de recién nacidos, deben ser confirmadas mediante una prueba con suero, conocida como Prueba
Inversa. En la prueba inversa, se enfrenta el suero del paciente a glóbulos rojos testigos (que no provienen del
mismo paciente) y que pueden ser de origen comercial o preparados utilizando una mezcla de glóbulos rojos
A y B por separado.
Muestra:
La muestra adecuada para realizar la clasificación ABO es sangre completa con EDTA o sin anticoagulante.
Los glóbulos rojos deben ser suspendidos en PBS (Buffer Fosfato Salino, que mantiene un pH fisiológico
constante junto a una concentración electrolítica similar a la que se encuentra en el interior del organismo).
Materiales:
✓ Antisueros (Anti-A, Anti-B, Anti-AB, Anti-D)
✓ Glóbulos Rojos testigo A y B (Diluidos al 2-4% en PBS)
✓ Muestra del paciente
✓ 8 tubos de hemolisis en gradilla
✓ Centrifuga
✓ Pipeta Pasteur (plástica)
✓ PBS
Procedimiento:
1. Centrifugar la muestra del paciente a 3000 r.p.m por 10 minutos.
2. El tubo con la muestra del paciente quedara separado: Glóbulos
Rojos en la parte inferior y Suero en la parte superior.
3. Rotular 7 tubos con los siguientes rótulos:
▪ Anti-A / Anti-B / Anti-AB / Anti-D / Glóbulos A /Glóbulos B / Prueba Autóloga
4. Con los glóbulos rojos del paciente que están en la zona inferior del tubo preparar una dilución con PBS
al 2-4% (Esta suspensión debe prepararse en otro tubo de hemolisis).
5. Dispensar los reactivos y muestra siguiendo el siguiente orden:

REACTIVO ANTISUERO GLOBULOS GLOBULOS SUERO

TUBO
TESTIGO PACIENTE PACIENTE
Anti-A 50 ul - 50 ul -
Anti-A
Prueba Anti-B 50 ul - 50 ul -
Directa Anti-B
Anti-AB 50 ul - 50 ul -
Anti-AB
Anti-D 50 ul - 50 ul -
Anti-D
Glóbulos A - 50 ul - 100 ul
Prueba Glóbulos A
Inversa Glóbulos B - 50 ul - 100 ul
Glóbulos B
Prueba Autóloga - - 50 ul 100 ul
50 ul = 1 gota

6. Centrifugar todos los tubos a 3000 r.p.m durante 1 minuto.

7. Sacar los tubos de la centrifuga y agitar suavemente para despegar las células y examinar
macroscópicamente la presencia o ausencia de aglutinación. La observación puede facilitarse si se emplea
una fuente de luz difusa. Las reacciones en tubo deben ser leídas inmediatamente e interpretar los
resultados sin demora.
NOTA: Se sugiere dispensar el suero del paciente en los tubos para determinación antes de preparar la dilución
de Glóbulos Rojos del paciente con el fin de no resuspender los glóbulos rojos al sacarlos desde la parte inferior
del tubo y contaminar el suero (de darse este caso hay que volver a centrifugar la muestra para utilizar el
suero).

Interpretación de los resultados:

▪ Reacción Negativa: No se observa aglutinación, lo que indica
ausencia del antígeno correspondiente. La resuspension de los
glóbulos rojos es homogénea.
▪ Reacción Positiva: Los hematíes aglutinan en segundos y
permanecen aglutinados una vez resuspendidos, lo que indica la
presencia del antígeno correspondiente.
 REACCION DE REACCION DE GRUPO REACCION DE GRUPO ABO
CELULAS CON SUERO CON ABO CELULAS CON

Anti-A Anti-B GR GR Anti-D

testigos A testigos B
+ Grupo Rh
0 0 + + Grupo O Positivo
+ 0 0 + Grupo A 0 Grupo Rh
Negativo
0 + + 0 Grupo B
0 = No hay reacción de
+ + 0 0 Grupo AB
aglutinación
0 = No hay reacción de aglutinación + = Aglutinación positiva
+ = Aglutinación positiva

B. DETERMINACION EN LAMINA:
La clasificación de grupo sanguíneo en lamina, en la actualidad no se utiliza como un método diagnostico de
grupo, mas bien, se utiliza para recontrolar o reclasificar a un paciente de una manera rápida y eficaz.
Muestra:
Se utiliza la misma muestra sanguínea que para la clasificación en tubo.
Materiales:
✓ Antisueros (Anti-A, Anti-B, Anti-AB, Anti-D)
✓ Muestra del paciente
✓ Portaobjetos
✓ Pipeta pasteur (plástica)
Procedimiento:
1. Tomar 2 portaobjetos y rotularlos:
▪ Portaobjeto 1: A (Anti-A) y B (Anti-B)
▪ Portaobjeto 2: AB (Anti-AB) y D (Anti-D)
2. Agregar al lado de cada rotulo una gota de Glóbulos Rojos del paciente y sobre estos, agregar el antisuero
correspondiente.
3. Con una puntilla o el extremo de un portaobjeto mezclar cada
gota de glóbulos rojos con el antisuero correspondiente.
4. Tomar el portaobjetos y mezclar suavemente.
Interpretación de Resultados:
▪ Reacción Negativa: No se observa aglutinación, lo que
indica ausencia del antígeno correspondiente.
▪ Reacción Positiva: Los hematíes aglutinan en segundos y
permanecen aglutinados una vez resuspendidos, lo que indica
la presencia del antígeno correspondiente.