Universidad Rafael Landívar

Facultad de Ingeniería
Ingeniería Química
Laboratorio de Bioquímica
Lic. Lucia Escobar

REPORTE PRÁCTICA NO. 1:

TITULACIÓN DE ÁCIDO GLUTÁMICO

Zucely Castillo Monterroso

Carné 1022507
Interciclo 2012

Guatemala, 11 de Junio de 2012

 1. SUMARIO

El ácido glutámico es uno de los 20 aminoácidos naturales más comunes, que se

caracteriza por sus propiedades ácidas. En la práctica de laboratorio fue titulada
una muestra de 10 ml solución 1M de glutamato monosódico utilizando HCl 1M,
con el objetivo de determinar experimentalmente su punto isoeléctrico.

Para ello fueron preparadas dos muestras de ácido glutámico 1M identificadas

como A y B. A la muestra A le fue agregado 7.3 ml de solución de NaOH hasta
alcanzar un pH de 11; mientras que a la muestra B se le agregó un volumen
equivalente de agua.

Para la titulación de la muestra A fueron utilizados naranja de metilo y fenoftaleina

como indicadores, el viraje para la fenoftaleina fue observado al haber agregado
7ml de HCl 1M y tener un pH=7; mientras que para el naranja de metilo se observó
a los 13.5 ml de HCl 1M y pH= 3.16.

En la titulación de la muestra B fue utilizado solamente naranja de metilo como

indicador, y su viraje se observó al haber agregado 7.1 ml de HCl 1M y pH=3.
Mediante un análisis gráfico se determinó un punto isoeléctrico de

2. OBJETIVOS

 Conocer las diferentes formas en que pueden existir los aminoácidos.

 Determinar el punto isoeléctrico del ácido glutámico a partir de gráfica de

titulación

3. DATOS OBTENIDOS

Tabla 3.1: Mediciones realizadas previo a titulación de ácido glutámico 1M con HCl 1M

VARIABLE DE MEDICIÓN VALOR OBTENIDO

pH solución 1M de GMS 7 ± 0.005
Volumen de solución de NaOH utilizado 7.3 ml ± 0.05 ml
para alcanzar pH 11 en muestra A
Volumen de agua utilizado en muestra B 7.3 ml ± 0.05 ml
Volumen de fenoftaleina 3 gotas
Volumen de naranja de metilo 3 gotas
Tabla 3.2. Mediciones obtenidas durante la titulación muestra A con solución de HCl 1M

VOLUMEN HCL (ml) pH

0 ± 0.05 11 ± 0.005
5 ± 0.05 9.17 ± 0.005
6.3 ± 0.05 8.75 ± 0.005
7 ± 0.05 6.45 ± 0.005
7.1 ± 0.05 5.84 ± 0.005
7.5 ± 0.05 5.15 ± 0.005
8 ± 0.05 4.78 ± 0.005
9 ± 0.05 4.39 ± 0.005
11 ± 0.05 3.83 ± 0.005
11.4 ± 0.05 3.75 ± 0.005
12.1 ± 0.05 3.55 ± 0.005
13.5 ± 0.05 3.16 ± 0.005
14 ± 0.05 3.01 ± 0.005
15.2 ± 0.05 2.63 ± 0.005
17 ± 0.05 2.08 ± 0.005

Tabla 3.3. Mediciones obtenidas durante la titulación muestra B con solución de HCl 1M

VOLUMEN HCL (ml) pH

0 ± 0.05 6.99 ± 0.005
1 ± 0.05 4.83 ± 0.005
2 ± 0.05 4.42 ± 0.005
3.2 ± 0.05 4.05 ± 0.005
3.6 ± 0.05 3.95 ± 0.005
4 ± 0.05 3.82 ± 0.005
4.5 ± 0.05 3.70 ± 0.005
5 ± 0.05 3.56 ± 0.005
5.5 ± 0.05 3.24 ± 0.005
7.1 ± 0.05 3.00 ± 0.005
8 ± 0.05 2.61 ± 0.005
10 ± 0.05 2.07 ± 0.005

4. CÁLCULOS

 Cálculo de equivalentes de HCl en titulación de muestra A de GMS

0ml  6ml
Veq 3   3ml
2

7ml  13.5ml
Veq 2   10.25ml
2
 13.5ml  17ml
Veq1   15.25ml
2

 Cálculo de equivalentes de HCl en titulación de muestra B de GMS

1ml  7.1ml
Veq 2   4.05ml
2

7.1ml  10ml
Veq1   8.55ml
2

 Cálculo de pI para muestra A de GMS (los valores de pK obtenidos de

gráfico de titulación)

pK 2  pK1 4  2.6
pI A    3.3
2 2

 Cálculo de pI para muestra B de GMS (los valores de pK obtenidos de

gráfico de titulación)

pK 2  pK1 3.8  2.3

pI B    3.05
2 2

 Cálculo de pI promedio

pI A  pI B 3.3  3.05
pI promedio    3.175
2 2

 Cálculo de porcentaje de error respecto a pI teórico

 valor _ teórico  valor _ práctico   3.2  3.175 

%error    *100    *100  0.8%
 valor _ teórido   3.2 
 5. RESULTADOS Y OBSERVACIONES

Tabla 5.1. Curva de titulación para muestra A

Tabla 5.2: Curva de titulación para muestra B

Tabla 5.1: Valores de pI calculados para muestras A y B

CÁLCULO RESULTADO
pKA2 muestra A 4
pKA1 muestra A 2.26
pIA 3.3
pKA2 muestra B 3.8
pKA1 muestra B 2.3
pIB 3.05
pIpromedio 3.175
%error 0.8%

Tabla 5.2: Observaciones realizadas durante la práctica

DESCRIPCIÓN OBSERVACIÓN
Aspecto solución de glutamato monosódico Incolora
1M

Aspecto muestra A (GMS a pH 11) Rosa intenso

posterior a adición de indicadores
fenoftaleina y naranja de metilo

Titulación de muestra A Se observó el viraje de fenolftaleína a pH

de 7, desapareciendo la tonalidad rosa.
Se observó el viraje de naranja de metilo a
pH 3.1 desapareciendo color amarillo y
obteniéndose color rojo-naranja

Aspecto muestra B (GMS a pH 7) posterior Amarillo

a adición de indicador naranja de metilo

Titulación de muestra B Se observó el viraje de naranja de metilo a

pH 3, desapareciendo color amarillo y
obteniéndose color rojo-naranja.

6. DISCUSIÓN DE RESULTADOS

El objetivo de la práctica de laboratorio fue la determinación experimental del

punto isoeléctrico del ácido glutámico. Para ello se utilizó una muestra de 20 ml de
solución de glutamato monosódico 1M, el cual se dividió en dos muestras de 10 ml
A y B. A la muestra A se le fueron añadidos 7.3ml de solución de NaOH 1M para
obtener un pH 11, mientras que a la B se le añadieron 7.3 ml de agua
desmineralizada.
El ácido glutámico es un aminoácido que se caracteriza por tener un carácter
ácido en soluciones acuosas (pH alrededor de 3.1) y encontrarse en su forma de
zwitterión; pero al medir el pH inicial de la muestra B se obtuvo un valor de pH 7.
Esto se debe a que la titulación fue realizada con glutamato monosódico, la cual
es una sal proveniente de un ácido débil que en soluciones acuosas aumenta el
pH. (Wade (2004))

El pH inicial de la muestra A fue 11; a este pH el glutamato se encuentra en su

especie con carga neta negativa. Para la titulación de esta muestra fue utilizado
fenoftaleina, la cual es un indicador que trabaja en el rango de pH de 8-10; y
naranja de metilo que trabaja en el rango de 3-4.5 (Brown (2004)). El viraje de
fenoftaleina a pH de 7.1 fue utilizado para calcular gráficamente el valor de pKa 3;
mientras que el viraje del naranja de metilo a pH 3.1 se utilizó para el cálculo de
pKa2. A pH 3.1 la especie predominante fue la de zwitterión, y al continuar la
titulación hasta pH 2 predominó la especie con carga positiva. La reacción para la
titulación de la muestra A fue:

El pH inicial de la muestra B fue de 7, correspondiente al pH de la sal de glutamato

monosódico en solución. A diferencia de la muestra A, para la titulación de la
muestra B fue utilizado únicamente naranja de metilo como indicador, y su viraje
fue observado a pH 3, en donde la especie predominante fue la zwitterión. La
titulación continuó hasta obtener un pH de 2.07 en donde la especie predominante
es la de carga neta positiva. El punto de equivalencia de la titulación fue utilizado
para el cálculo de pKa2 y la reacción de la titulación para la muestra B fue:
Para el cálculo del punto isoeléctrico tanto en la muestra A como B, fueron
utilizados únicamente los valores de pKa1 y pKa2 obtenidos de la gráfica de
titulación correspondiente a cada muestra. El pI del ácido glutámico es
dependiente únicamente de los valores de pKa1 y pKa2 ya que éstos provienen de
la disociación de los grupos de ácido carboxílico que se ionizan en forma similar
(grupos con carga positiva que se ionizan a grupos con carga negativa al abstraer
los hidrógenos ácidos). El valor promedio del punto isoeléctrico obtenido
experimentalmente fue de 3.175, con un porcentaje de error del 0.8% respecto al
punto isoeléctrico teórico de 3.2.
El bajo porcentaje de error se encuentra ligado fuertemente al error humano que
existe durante la experimentación, tanto durante el uso de la bureta tituladora
como en la lectura visual de viraje de los indicadores.

7. CONCLUSIONES

 A pH 11 el glutamato monosódico se encontraba en su especie con carga

negativa.
 A pH neutro obtenido en el viraje de fenoftaleína durante la titulación de la
muestra A, así como el pH inicial de la muestra B; la especie predominante
fue la que tiene la carga positiva en el grupo amino (NH 3+) y negativa en los
grupos carboxílicos (COO-).
 A pH 3 obtenido en ambas titulaciones durante el viraje del naranja de
metilo, la especie predominante fue la de zwitterión.
 Al final de la titulación (pH=2) la especie predominante es la cargada
positivamente, la cual tiene todos los grupos ionizables con hidrógenos
ácidos extraíbles.
 El punto isoeléctrico calculado experimentalmente fue de 3.175 con un
0.8% de error respecto al valor teórico. El error estuvo ligado al error
humano durante el uso de la bureta y lectura del viraje del indicador.

8. PREGUNTAS POSTLABORATORIO

1. Construya una gráfica de titulación del ácido glutámico con HCl con
los datos obtenidos en la primera y segunda parte de la práctica

(Ver sección de resultados)

2. Determine en forma gráfica el punto isoeléctrico

(Ver gráficos 5.1 y 5.2 de sección de resultados)

 3. Ubique las regiones que se presentan en la grafica y localice las
formas iónicas del ácido glutámico que existen durante la titulación,
derivadas de los grupos alfa y beta (carboxilo-amino)

Gráfico A1: Especies iónicas presentes durante la titulación de la muestra A

Gráfico A2: Especies iónicas presentes durante la titulación de la muestra B

4. Escriba la ecuación de ionización de ácido glutámico

9. BIBLIOGRAFÍA

 Wade, J. (2004) Química Orgánica (2ª. Ed.). México: Prentice Hall

 Yurkanis (2008) Química Orgánica (2o. Ed). México: Pearson.