UNIVERSIDAD AUTONOMA DEL BENI “JOSE BALLIVIAN”

ALSIE CONSULTORES PEDAGOGICOS S.R.L.

Estudiante: Geraldine Córdova Arancibia

Docente: Dr. Neil Gamarra

Cochabamba-Bolivia
CONTROL DE CALIDAD DEL AGAR MUELLER HINTON

INTRODUCCION

El Agar Mueller Hinton es un medio de cultivo que tiene como uso principal, hacer los
ensayos de sensibilidad y susceptibilidad de los microorganismos frente a los
antibióticos.

En pocas palabras, este es el medio de cultivo que se usa para la prueba de

sensibilidad a los antimicrobianos. Sin embargo, también se usa para aislar y
mantener especies de Neisseria y Moraxella.

Otra de sus múltiples ventajas es que es un medio de cultivo no selectivo y no

diferencial, lo cual significa que prácticamente todos los microorganismos que se
cultivan ahí, crecerán exitosamente debido a su superficie.

Es importante respetar los siguientes puntos para un buen control de calidad:

 Los 4 mm

 Control de ph

 Control de timina-timidina

 Control de cationes bivalentes

Donde se explicara sus efectos en los siguientes puntos según se realizo la practica.

MATERIALES

 Guardapolvo

 Guantes

 Barbijo

 Agar mueller Hilton sólido

 Calibro

 Cepa Pseudomona aureginosa ATCC 27853

 Cepa Escherichia coli ATCC 259222

 Cepa Entecoccus feacalis ATCC

 Hisopos estériles

 Mechero bunsen
  Sensidiscos de tetraciclina, gentamicina y sulfametoxazol / trimetropim

 Tubo del inoculo de escala 0.5 de Mac Farland

 Solución fisiológica

 Jeringa

PROCEDIMIENTO

- Medir la profundidad del agar mueller Hilton en los cuatro cuadrantes (imaginarios)
con el calibro.

- Preparar el inoculo aproximadamente con 2 a 3 ml de solución fisiológica, para cada

cepa previamente cultivada 18 horas antes.

- Proceder a sembrar del inoculo al agar mueller hinton con los hisopos esteriles
consiguiendo estrias estrechas y girando a 60ª.
- Proceder a colocar los sensidiscos en el siguiente orden con separación de 25 a 28
mm de diámetro::

 Para la cepa Pseudomona aureginosa ATCC 27853: colocar gentamicina

 Para la cepa Escherichia coli ATCC 259222: colocar gentamicina y tetraciclina.

 Para la cepa Enterococcus faecalis ATCC: colocar sulfametoxazol / trimetropim

- Incubar en la estufa 24 horas a 37ºC.

- Proceder a medir los halos del antibiograma.

RESULTADOS

1-. Medición de la profundidad del agar mueller hinton

Se observo una menor profundidad por lo tanto presenta falsa sensibilidad, es decir no
se debe utilizar el lote para el antibiograma, pero puede usarse para el cultivo
microbiológico ya que no es selectivo.
2-. Para el control de calidad de ph de 7.2 a 7.4 del agar mueller Hilton; se utilizo la
cepa de E. coli ATCC 25922 con gentamicina (19-26 mm) y tetraciclina (18-25 mm).
Se observo el siguiente resultado:

GENTAMICINA: 21 mm.
TETRACICLINA: 22 mm.
El resultado entra dentro del rango de control de calidad, sin embargo presenta una
menor profundidad que eso ocasiona una falsa sensibilidad y esa sea la razón por la
que entra en el rango.
 Si tuviera un ph acido tendría mayor actividad la tetraciclina y resistencia a la
gentamicina.
 A un ph alcalino la tendría resistencia a la tetraciclina y seria sensible a la
gentamicina.
3-. Para el control de cationes bivalentes se utiliza la cepa Pseudomona aureoginosa
ATCC 27853 frente al disco de gentamicina 10 ug (16-21 mm). Se obtuvo el siguiente
resultado:

GENTAMICINA: 18 mm.

El resultado entra dentro el rango, por lo tanto se puede utilizar el lote, sin embargo
resaltar que presenta una menor profundidad.
 Una mayor concentración de cationes de Ca y Mg principalmente produce falsa
resistencia a los amino glucósidos.
 Una menor concentración tiene mayor actividad los amino glucósidos.

4-. Para el control de timina-timidina el contenido debe ser escasa o nula, se utilizo la
cepa de Enterococcus faecalis ATCC 29212 frente a sulfametoxazol / trimetropim
(mayor a 20 mm). Se obtuvo el siguiente resultado:
STX: 14 mm
Se concluye que presenta una mayor concentración de timina-timidina creando una
falsa resistencia al sulfametoxazol / trimetropim.
CONCLUSION
El control de calidad debe ser un proceso sistemático y continuo en el laboratorio. La
implementación del mismo debe ser por lo menos cada 15 días.
Si se llevan los controles de calidad adecuados y se siguen los procedimientos
estandarizados por la CLSI se puede garantizar la calidad de los resultados.
El laboratorio debe llevar: hojas de registro con los datos de control de calidad que
incluyan fecha de monitoreo, número de lote, fecha de vencimiento, marca del
reactivo, resultados obtenidos con medida de zonas de inhibición e interpretación,
profesional responsable, etc.
Según a la práctica realizada utilizando las cepas para control de calidad de Mueller
Hinton, se llega a una conclusión si se puede usar el medio preparado para el
antibiograma antes de procesar las muestras. Debe estar en optimas condiciones.