 ¿Qué es una enzima?

Son proteínas especializadas que catalizan reacciones biológicas. Son extremadamente

específicos en los sustratos, estas ayudan a incrementar la velocidad de la reacción y
trabajan en forma acuosa a condiciones poco severas de pH y temperatura ya que estas
se encuentran en los seres vivos. (Lehninger Principles of Biochemistry)

 ¿De que fuentes se puede obtener la invertasa?

La invertasa también conocida como -fructofuranosidasa (EC 3.2.1.26) es una enzima
que se encarga de hidrolizar la sacarosa. Esta se encuentra en la mayoría de los tejidos
de las plantas y microorganismos. Pero la principal fuente de invertasa de manera
industrial es de Saccharomuces cerevisiae. En esta levadura se encuentra de manera
intra y extracelular.
Avigade G., Dey P.M. (1997). 4 – Carbohydrate Metabolism: Storage Carbohydrates.
Plant Biochemistry. Academic Press
Kulshrestha S., Sharma K., Sindhi V., y Tyagi P. (2013). Invertase and its applications – A
brief review. Journal of Pharmacy Research.

 ¿Qué es un azúcar no reductor?

Para poder entender que es un azúcar no reductor es necesario saber que es un azúcar
reductor. Un azúcar reductor es cualquier azúcar que contiene un grupo aldehído
oxidado a acido carboxílico, hemi-acetal. Que sea un azúcar reductor quiere decir que
reduce los iones. Mientras que un azúcar no reductor tiene un acetal y no reduce iones.

Hunt, I. (S/F). Reducing Sugars. Chapter 25: Carbohydrates. University of Calgary.

 ¿Cómo va a determinar la concentración de azúcares reductores? Justifique su

respuesta
Existen diferentes métodos para determinar azucares reductores entre ellos esta el
método de DNS (Ácido 3,5-dinitrosalicílico). Este método es sencillo y
espectofotometrico. Donde se detecta la presencia del grupo reductor y se oxida lo que
produce una coloración roja-café que es detectada por el espectrofotómetro a una
longitud de onda de 540 nm.
 Miller, G.L. (1959). Use of dinitrosalicylic acid reagent for determination of reducing
sugar. Analytical Chemistry.

 Explique de qué manera se puede medir la actividad de una enzima (proponga un

experimento diferente al que vamos a realizar)
Actividad de la fosfatasa alcalina
Se utilizaría como sustrato p-nitrofenil-fosfato que seria hidrolizado por la fosfatasa
alcalina generando fosfato y p-nitrofenol el cual da lugar a una solución de color
amarillo el que puede ser medido con un espectrofotómetro.
Para esto se realizarían diferentes soluciones variando la concentración del sustrato y
dejando actuar a la enzima. En este experimento se mediría la cantidad de sustrato
hidrolizado cuando se aumenta la concentración de este. Pero se podría utilizar una
misma concentración y variar el tiempo en el cual se permite reaccionar para
determinar la velocidad de reacción.

Rodríguez J.C., León J., Delgado D., Navas J. (S/F). Práctica 2 Actividad Enzimática y
Determinación de proteínas totales. Bioquímica Estructural y Biológica.
Universiad de Cantabria.
 Explique qué es velocidad inicial.
Es la pendiente de la curva y es la relación con la que aumenta el producto a medida
que pasa el tiempo en la reacción enzimática. Graficamente es la pendiente que se
obtiene de la parte recta, ya que una vez que la grafica se empieza a volver curva, los
datos que se encuentran en esa parte no se pueden considerar para obtener la
velocidad inicial ya que daría una correlación muy lejana a 1.
González J. (S/F)/ Cinética Enzimática, Curso de Biomoléculas. Universidad del País Vasco.

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/B9780122146749500059

https://www.researchgate.net/publication/259139397_Invertase_and_its_applications_-
_A_brief_review

http://www.chem.ucalgary.ca/courses/351/Carey5th/Ch25/ch25-2-5.html

https://ocw.unican.es/pluginfile.php/800/course/section/858/practica_02.pdf

http://www.biorom.uma.es/contenido/UPV_EHU/enzimas/enz3.htm#e