CROMATOGRAFÍA

1. OBJETIVOS.-

 Reconocer y observar como reacciona cada compuesto ante cada

tipo de disolvente.
 Observar cual compuesto puede eluir mejor y porque.
 Verificar si la tecnica de cromatografia es viable.

2. MARCO TEORICO.-

La cromatografía es el método de separación más usual y tiene varias

modalidades dependiendo de la naturaleza de la columna
cromatográfica y de la interacción de los componentes de la muestra.

Las dos formas más importantes son la cromatografía por filtración de

geles, en la que grandes moléculas se separan según su tamaño, y la
cromatografía por intercambio iónico, donde se separan los
componentes iónicos. En la cromatografía en fase gaseosa son los
componentes volátiles los que se separan de la muestra, y en la
cromatografía en fase líquida, las pequeñas moléculas neutras de una
disolución.

Cromatografía, técnica de análisis químico utilizada para separar

sustancias puras de mezclas complejas. Esta técnica depende del
principio de adsorción selectiva (no confundir con absorción). La
cromatografía fue descubierta por el botánico ruso, de origen italiano,
Mijaíl Tswett en 1906, pero su uso no se generalizó hasta la década de
1930. Tswett separó los pigmentos de las plantas (clorofila) vertiendo
extracto de hojas verdes en éter de petróleo sobre una columna de
carbonato de calcio en polvo en el interior de una probeta. A medida que
la disolución va filtrándose por la columna, cada componente de la
mezcla precipita a diferente velocidad, quedando la columna marcada
por bandas horizontales de colores, denominadas cromatogramas. Cada
banda corresponde a un pigmento diferente.

Un químico utiliza la cromatografía para analizar una mezcla compleja

de sustancias. El cromatógrafo emplea un medio adsorbente que, al ser
colocado en contacto con una muestra, adsorbe sus distintos
componentes a velocidades diferentes. De esta forma se separan los
componentes de una mezcla. La cromatografía tiene muchas
aplicaciones importantes, como la determinación del nivel de
contaminantes en el aire, el análisis de medicinas y el análisis de sangre
y de orina.

La cromatografía en columna utiliza un amplio espectro de adsorbentes

sólidos, incluidas la sílice, la alúmina y la sílice gelatinosa. También los
líquidos pueden ser adsorbidos en estos sólidos y a su vez sirven como
adsorbentes (un proceso denominado cromatografía de reparto)
permitiendo al químico elaborar columnas de diferentes propiedades
para diversas aplicaciones. En la cromatografía con líquidos de alto
rendimiento, una variante de esta técnica de uso frecuente hoy en día,
se utilizan líquidos adsorbidos en partículas muy pequeñas y uniformes,
lo cual proporciona una sensibilidad bastante alta. Para llevar la mezcla
a través de la columna se precisa una bomba. La cromatografía de
capas finas es otra forma de cromatografía en columna en la cual el
material adsorbente reposa en un cristal o en una película de plástico.

Como en la cromatografía en columna, un soluto se ve atraído por el

adsorbente tanto más intensamente como mayor es su polaridad. De
esta forma los compuestos como alcoholes, ácidos carboxílicos y aminas
son atraídos por el adsorbente con mayor fuerza que compuestos como
hidrocarburos y sus derivados halogenados.

En la cromatografía en papel, una muestra líquida fluye por una tira

vertical de papel adsorbente, sobre la cual se van depositando los
componentes en lugares específicos. Otra técnica conocida como
cromatografía gas-líquido permite la separación de mezclas de
compuestos gaseosos o de sustancias susceptibles de vaporizarse por
calor. La mezcla vaporizada es conducida mediante un gas inerte a
través de un estrecho tubo en espiral que contiene una sustancia, por la
que los componentes fluyen en diferentes proporciones, siendo
detectados al final del tubo. Otro método es la cromatografía por
infiltración gelatinosa, basado en la acción filtrante de un adsorbente
poroso de tamaño uniforme. Con este método se consigue separar y
detectar moléculas de mayor masa molecular.

La cromatografía en capa fina o delgada constituye otro metodo para

separar y en algunos casos identificar mezclas de dos o mas
compuestos organicos.

Se cubre una placa de vidrio con una capa de un absorbente adecuado,

se coloca en el margen de la placa un compuesto o mezcla en estudio,
se deja que el disolvente adecuado ascienda por la capa del adsorbente
por capilaridad.

Los diversos compuestos ascienden por la capa del adsorbente a

velocidades diferentes con relación al disolvente y de esta forma se
realiza la separación de los componentes de una mezcla.

El uso de la cromatografía está ampliamente extendido en el análisis de

alimentos, medicinas, sangre, productos petrolíferos y de fisión
radiactiva.
3. MATERIAL Y EQUIPO.-

 Vasos de precipitado  Embudo de Butchner o

 Tubos de ensayo Hirsh
 Erlenmeyer  Vidrio de reloj
 Varilla  Pipeta
 Papel filtro  Piseta
 Embudo de pie corto  Hornilla

 Agua destilada
 Cloroformo
 Etanol
 Acetona
 Eter dimetilico
 Azul de metileno
 Naranja de metilo
 Azul de timol
3. METODICA EXPERIMENTAL.-

1ra PARTE

CROMATOGRAFIA
EN PAPEL

Aprox.1 ml de En los Tubos de

disolvente por ensayo Poner los
Tubo disolventes

3 Colorante Puros
Preparar 4 Muestras
1 Mezcla de
De Tinta
Colorante

Colocar pequeñas
muestras de tinta
En el Papel filtro

Observar y medir Sumergir el Papel

el recorrido de en los tubos de
ayb ensayo

Calcular los Rf de
cada muestra

Elegir el Mejor
Disolvente
 2da PARTE

CROMATOGRAFIA
EN CAPA FINA

Poner el disolvente
elegido de la 1ra. Parte
En un vaso de
Precipitado

En la Placa poner las 4

muestras de tinta en
pequeñas cantidades

Sumergir la Placa
en el Vaso de
Precipitado

Observar y medir
Tapar Con Vidrio
los recorridos de
Reloj
ayb

Calcular los Rf de
cada muestra
 3ra PARTE

CROMATOGRAFIA
DE COLUMNA

Machacar
Espinacas y
Zanahorias con
eter

Extraer

Desechar Solidos Filtrar

Extraccion

Lavar con H2O

Extracto de
Hexano

4. DATOS CALCULOS Y RESULTADOS.-

 1ra PARTE

Tabla Nº1
Medidas del desplazamiento
De “a” y “b”

Tintas
Rojo Azul Naranja Mezcla
Disolventes a b a b a b a b
Cloroformo 9.4 3.7 11.4 2.3 9.6 0.8 12.2 2.9
Etanol 6.9 5.6 6.7 4.8 7.2 6.7 6.7 5.9
H2O 12.6 0.3 11.9 0.6 11.9 5.9 12.2 1.9

El factor de Retención se define como:

Rf = b / a

Entonces se obtiene la siguiente tabla:

Tabla Nº 2
Factores de Retención
Por cada muestra de tinta

Factor de Retencion
Rojo Azul Naranja Mezcla
Disolventes

a b a b a b a b
Cloroformo 9.4 3.7 11.4 2.3 9.6 0.8 12.2 2.9
Etanol 6.9 5.6 6.7 4.8 7.2 6.7 6.7 5.9
H2O 12.6 0.3 11.9 0.6 11.9 5.9 12.2 1.9

2da PARTE
5. OBSERVACIONES.-

Los compuestos como el azul de metileno, naranja de metilo y azul de timol

no tuvieron ninguna reacción con respecto a los disolventes elegidos, el
unico que demostro una buena elusión para estas muestras fue el etanol,
pero el etanol no mostró una buena elusión para la mezcla que preparamos
de la combinación de los tres compuestos ya mencionados.

7. CUETIONARIO.-

1. ¿Qué es una resina de intercambio iónico y que es una resina de

intercambio cationico?

a.- resina de intercambio iónico.- es un polímero orgánico que tiene

grupos iónicos unidos en forma covalente, los cuales interaccionan en
forma electrostática con iones moviles de signo opuesto

b.- resina de intercambio cationico.- materia de intercambio de cationes

por iones en un medio circundante. Tales resinas se utilizan con
propósito analítico y de purificación.

2. a que se denomina : eluyente, fase móvil

eluyente es el separador de una mezcla y fase movil es aquella que

percola la fase estacionaria
 3. a que se denomina cromatografía de reparto?

A la cromatografía en la que el soluto de la fase movil se equilibra entre

la fase movil y la superficie estacionaria.

4. cuales son las fases moviles mas utilizadas en la cromatografía

alumina carbonato de calcio

cal carbón activo
resinas sulfidricas gel de silice
sacarosa celulosa

5. En función a que criterio se escoge un disolvente para separaruna

muestra de distintos componentes por cromatografía.

Debe ser insoluble con el adsorbente y preferentemente poco polar.

6. Luego de haber resuelto un cromatograma, se observa que el frnte del

disolvente recorrio 5,6cm a partir de la superficie inicial. La muestra de
dos compuestos A y B se separo a 0.3 de la superficie inicial del
disolvente. Calcule los Rf de A y B, si el componente A recorrio 4cm y B
recorrio 5.8cm

Rfa 4 0.68
5.9

Rfb 5.8 0.98

5.9

8. CONCLUSIONES.-

En el laboratorio pudimos observar que el mejor compuesto para eluir las

mezclas fue el etanol, yo creo que se debe a su polaridad.

Ademas creo que si no nos hubiéramos equivocado al verter el éter de

petróleo por el éter dietilico en el cromatograma de capa fina podriamos
haber observado una mejor separación de los carotenos de la mezcla, ya
que tuvimos que tratar de separar el éter di etílico de la mezcla realizando
una adición del éter de petróleo pero no fue muy exitosa ya que se
presentaron tres fases una de las cuales era emulsión y en gran cantidad,
pero por lo menos logramos observar el color verde de las hojas lo cual
demuestra que el proceso que realizamos no estaba del todo mal.
9. BIBLIOGRAFIA.-

- Microsoft Corporation –“Biblioteca de Consulta 2004” -USA -© 1993-2003

- Juan Luis Gutiérrez Ducóns –“Enciclopedia de Ciencias” –CAYFOSA –
Barcelona - 1994
- Practica de Quimica Organica, Brewster.

3ra PARTE