UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA

LABORATORIO DE DESARROLLO ANALÍTICO
ANÁLISIS VÍA GRUPO FUNCIONAL PARA CUANTIFICAR LACTULOSA EN JARABE

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIO SUPERIORES ZARAGOZA
QUÍMICA FARMACÉUTICO BIOLÓGICA
MODULO
LABORATORIO DE DESARROLLO ANALÍTICO

NOMBRE DEL PROYECTO

ANÁLISIS VÍA GRUPO FUNCIONAL PARA CUANTIFICAR LACTULOSA EN
JARABE

NOMBRE DEL ASESOR

M. en E. LILIANA MARÍA LÓPEZ GONZÁLEZ

INTEGRANTES DEL EQUIPO:

GARCÍA SOLANO IRVING
MARTÍNEZ MORENO BEATRIZ ADRIANA
MÉNDEZ AVENDAÑO ALEXIS
PARTIDA HERNÁNDEZ AMÉRICA ESMERALDA

EQUIPO: 4 (TALIDOMIDA)
GRUPO: 1801
SEMESTRE: 2020-1

ELABORADO POR: REVISADO POR: Vo. Bo. AESOR Página 1 de 12

 UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA
LABORATORIO DE DESARROLLO ANALÍTICO
ANÁLISIS VÍA GRUPO FUNCIONAL PARA CUANTIFICAR LACTULOSA EN JARABE

 FUNDAMENTO
Grupo funcional es un conjunto de átomos, enlazados de una determinada forma, que
presentan una estructura y propiedades fisicoquímicas determinadas que caracterizan a los
compuestos orgánicos que los contienen. Son estructuras submoleculares, caracterizadas
por una conectividad y composición elemental específica que confiere actividad a la
molécula que los contiene. Los grupos funcionales son las características estructurales que
hacen posible clasificar los compuestos por su reactividad.

Los principales grupos funcionales son los siguientes:

 Grupo hidroxilo (– OH)
Es característico de los alcoholes, compuestos constituidos por la unión de dicho grupo a
un hidrocarburo (enlace sencillo).
 Grupo alcoxi (R – O – R)
Grupo funcional del tipo R-O-R', en donde R y R' son grupos que contienen átomos de
carbono, estando el átomo de oxígeno en medio de ellos, característico de los éteres (enlace
sencillo). (Se usa la R ya que estos grupos de átomos constituyen los llamados radicales)
 Grupo carbonilo (>C=O)
Su presencia en una cadena hidrocarbonada (R) puede dar lugar a dos tipos diferentes de
sustancias orgánicas: los aldehídos y las cetonas.
-En los aldehídos el grupo C=O está unido por un lado a un carbono terminal de una cadena
hidrocarbonada (R) y por el otro, a un átomo de hidrógeno que ocupa una posición extrema
en la cadena. (R–C=O–H) (enlace doble).
-En las cetonas, por el contrario, el grupo carbonilo se une a dos cadenas hidrocarbonadas,
ocupando por tanto una situación intermedia. (R–C=O–R) (enlace doble).

El método analítico es aquel método de investigación que consiste en la desmembración de

un de un todo, descomponiéndolo en sus partes o elementos para observar las causas, la
naturaleza y los efectos. El análisis es la observación y examen de un hecho en particular.
Es necesario conocer la naturaleza del fenómeno y objeto que se estudia para comprender
su esencia. Este método nos permite conocer más del objeto de estudio, con lo cual se
puede: explicar, hacer analogías, comprender mejor su comportamiento y establecer
nuevas teorías
Los métodos que emplea el análisis químico pueden ser:
 Métodos químicos (se basan en reacciones químicas) o clásicos:
 Análisis volumétrico
 Análisis gravimétrico

ELABORADO POR: REVISADO POR: Vo. Bo. AESOR Página 2 de 12

 UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA
LABORATORIO DE DESARROLLO ANALÍTICO
ANÁLISIS VÍA GRUPO FUNCIONAL PARA CUANTIFICAR LACTULOSA EN JARABE
 Métodos fisicoquímicos (se basan en interacciones físicas) o instrumentales:
 Métodos espectrométricos
 Métodos electroanalíticos
 Métodos cromatográficos

Los métodos químicos han sido utilizados tradicionalmente, ya que no requieren

instrumentos muy complejos (tan sólo pipetas, buretas, matraces, balanzas, entre otros).
Los métodos fisicoquímicos, sin embargo, requieren un instrumental más sofisticado, tal
como equipos de cromatografía, cristalografía, etc.
El estudio de los métodos químicos está basado en el equilibrio químico, que puede ser de
los siguientes tipos:
 equilibrio ácido-base
 equilibrio oxido-reducción
 equilibrio de solubilidad
 equilibrio de complejos

Los métodos analíticos se deben validar según la naturaleza del método analítico en:
 métodos de cuantificación
 métodos de determinación de impurezas
 pruebas límite
 identidad
Para estudiar éstos se determinan parámetros como linealidad, rango, especificidad,
exactitud, precisión, tolerancia, robustez y los límites de detección y cuantificación según
sea el caso.
En el caso de que no exista dicho método se propone uno mediante un diseño factorial para
determinar las condiciones de trabajo.
En el presente trabajo se utilizaron los métodos espectrofotométricos, gravimétrico y
volumétricos para la cuantificación de la lactulosa presente en el jarabe tomando en cuenta
los grupos funcionales principales que tiene (aldehídos y cetonas).
Lactulosa
Propiedades fisicoquímicas
-Forma: Polvo cristalino -Punto de fusión /campo de fusión: 167-169 °C

-Color: Blanco -Solubilidad en / miscibilidad con agua a 30 °C: 764 g/l

-Olor: Inodoro - índice de refracción: no menos de 1,451; a 20 °C

ELABORADO POR: REVISADO POR: Vo. Bo. AESOR Página 3 de 12

 UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA
LABORATORIO DE DESARROLLO ANALÍTICO
ANÁLISIS VÍA GRUPO FUNCIONAL PARA CUANTIFICAR LACTULOSA EN JARABE

pH: entre 2,5 y 6,5, despues de 15 minutos de contacto con los electrodos

Conservar en envases impermeables, prreferentemente a una temperatura entre 2° y 30°. Evitar

temperaturas inferiores a la de congelación.

Figura 1. Estructura de la lactulosa Figura 2. Presentación comercial del

jarabe de lactulosa

-Formula: C12H22O11

-Peso molecular: 342.296 g/mol -Biodisponibilidad: pobre absorción

-Metabolismo: colon -Vida media: 1,7 – 2 horas
-Excreción: heces
-Forma farmaceutica: jarabe
-Via de administración: oral

La lactulosa es un azúcar sintético usado para tratar el estreñimiento (constipación). Se

procesa en el colon en sustancias que extraen el agua del cuerpo y la evacuan hacia el colon.
Esta agua ablanda las heces. La lactulosa también se usa para reducir la cantidad de
amoníaco en la sangre de los pacientes con problemas al hígado. Funciona al extraer el
amoníaco de la sangre al colon donde se desecha del cuerpo
La solución de Lactulosa es una solución de agua preparada a partir de Concentrado de
lactulosa. Contiene no menos de 90,0 por ciento y no más de 110,0 por ciento de la cantidad
declarada de lactulosa (C12H22O11), deacuerdo con la USP 41.

ELABORADO POR: REVISADO POR: Vo. Bo. AESOR Página 4 de 12

 UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA
LABORATORIO DE DESARROLLO ANALÍTICO
ANÁLISIS VÍA GRUPO FUNCIONAL PARA CUANTIFICAR LACTULOSA EN JARABE

Fundamento de los métodos propuestos

Método 1. Determinación de grupos carbonilo por oximación
El producto de la condensación de un aldehído o cetona con hidroxilamina (NH2OH), se
conoce como oxima. La oximación está específicamente catalizada por ácido. Se produce
pérdida de agua del intermedio tetraédrico para dar la oxima.
Si se añade un exceso de hidroxilamina a la muestra, se puede valorar con un ácido el exceso
de hidroxilamina tras completarse la oximación. Por desgracia, la hidroxilamina libre es
inestable y el oxigeno la oxida. Por lo tanto, este método no es factible. En su lugar, se
efectúa la reacción de oximación con clorhidrato de hidroxilamina que es muy estable. Cada
mol de oxima formado da lugar a 1 mol de HCl, que se puede valora con un álcali
estandarizado, lo cual da una medida del grupo carbonilo en la muestra.
Formación de la oxima:

Método 2. Análisis gravimétrico

El análisis gravimétrico consiste en determinar a cantidad proporcionada de un elemento,
radical o compuesto presente en una muestra, eliminando todas las sustancias que
interfieren y convirtiendo el constituyente o componente deseado en un compuesto de
composición definida, que sea susceptible de pesarse.
Un análisis gravimétrico seguro de aldehídos y cetonas se basa en su conversión a los
correspondientes 2,4-dinitrofenilhidrazonas que son derivados insolubles, cristalinos y
coloreados, se aíslan y pesan fácilmente, y el alto peso molecular de la hidrazona permite
el análisis de muestras relativamente pequeñas.

ELABORADO POR: REVISADO POR: Vo. Bo. AESOR Página 5 de 12

 UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA
LABORATORIO DE DESARROLLO ANALÍTICO
ANÁLISIS VÍA GRUPO FUNCIONAL PARA CUANTIFICAR LACTULOSA EN JARABE

Formación de la hidrazona

Método 3. Determinación por espectrofotometría empleando una curva estándar

La espectrofotometría de absorción consiste en la medida de la absorción, por las diferentes
sustancias, de una radiación electromagnética de longitudes de onda situadas en una banda
definida y estrecha, esencialmente monocromática. L banda espectral empleada se
extiende desde las cortas longitudes de onda de la zona UV hasta la zona visible del
espectro. Los espectros UV y visible de una sustancia no tienen, en general un alto grado de
especificidad. Sin embargo, son muy adecuados para las valoraciones cuantitativas y, en el
caso de muchas sustancias constituyen un útil medio adicional de identificación.
La espectrofotometría UV/visible es un método rápido y preciso que se basa en el empleo
de la ley de Lambert-Beer que relaciona la absorción con la concentración de las moléculas
en solución para una longitud de onda determinada.
Las valoraciones espectrofotométricas requieren normalmente una comparación de la
absorbancia producida por la solución de a sustancia problema (preparada según lo
especificado en la monografía) con la absorbancia de la solución de referencia.
Ley de Lambert-Beer

A = bc
Donde:
A: absorbancia

coeficiente de absortividad molar

b: longitud del paso óptico (celda)

c: concentración del analito

ELABORADO POR: REVISADO POR: Vo. Bo. AESOR Página 6 de 12

 UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA
LABORATORIO DE DESARROLLO ANALÍTICO
ANÁLISIS VÍA GRUPO FUNCIONAL PARA CUANTIFICAR LACTULOSA EN JARABE
Formación del complejo colorido:

II. OBJETIVO
 Proponer un método analítico alterno al de la farmacopea para cuantificar Lactulosa
en jarabe, mediante los grupos funcionales que posee.
III. HIPÓTESIS

IV. METODOLOGÍA
 Método 1. Determinación de grupos carbonilo por oximación
Reactivos:
-Clorhidrato de hidroxilamina 0.3 N. se disuelven unos 21g de reactivo en un 1 litro de
agua.
-Hidróxido de sodio 0.1 N. se diluyen 6 mL de solución saturada de NaOH hasta completar
un litro de agua recientemente hervida.
-Solución de azul de bromofenol. Se prepara una solución de azul de bromofenol al 2% en
etanol
Procedimiento
Estandarización del NaOH:
Se pesan exactamente alrededor de 0.4g del patrón primario biftalato de potasio
(previamente secado durante 2 horas a 105°C) en un matraz Erlenmeyer de 250 mL se
añaden 50 mL de agua recién hervida para disolver la muestra. Se añaden 3 gotas de
solución de fenolftaleína, y se valora con la solución de NaOH mediante una bureta. El
punto final lo señala el primer color rosa permanente. Se realiza por triplicado.

ELABORADO POR: REVISADO POR: Vo. Bo. AESOR Página 7 de 12

 UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA
LABORATORIO DE DESARROLLO ANALÍTICO
ANÁLISIS VÍA GRUPO FUNCIONAL PARA CUANTIFICAR LACTULOSA EN JARABE
Tratamiento de la muestra:
Se depositan 30 mL de NH2OH∙HCl 0.3 N, 20 mL de agua en un matraz volumétrico de 50
mL, 0.5 mL del jarabe y 1 gota de azul de bromofenol y se valoró con hidróxido de sodio 0.1
N hasta la aparición de un color ligeramente azul.
 Método 2. Análisis gravimétrico
Se pesa 0.5 g del reactivo 2,4-dinitrofenilhidrazina y se transfirió a un tubo de ensaye (esto
con el fin de formar la respectiva hidrazona insoluble en agua), se agrega 1.5 mL de jarabe
de lactulosa y 5 mL de ácido clorhídrico 0.2 N. Se observa un precipitado color amarillo.
Filtrar la solución, secar el precipitado en una estufa a una temperatura de 100 °C y pesar.
La prueba se debe realizar a pH 4.
 Método 3. Determinación por espectrofotometría empleando una curva estándar
Reactivos:
-Etanol absoluto
-Ácido acético glacial
-Ácido o-fosfórico
-Metanol absoluto
-Lactulosa estándar
-Antrona: se pesa 0.2g de antrona se agregan 6 mL de ácido acético glacial, se calienta
levemente hasta disolver, se agregan 12 mL de etanol absoluto y 2.8 mL de ácido o-fosfórico
concentrado. Este reactivo se debe preparar en el momento de análisis debido a que al
almacenarse a temperatura ambiente la antrona cristaliza.
Procedimiento:
Preparación del blanco:
Se agregan 4 mL de metanol absoluto y 0.5 mL del reactivo de antrona, se coloca en un
baño de agua hirviendo (dejar 5 minutos). Dejar enfriar y agregar 6 mL de ácido acético
glacial.

ELABORADO POR: REVISADO POR: Vo. Bo. AESOR Página 8 de 12

 UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA
LABORATORIO DE DESARROLLO ANALÍTICO
ANÁLISIS VÍA GRUPO FUNCIONAL PARA CUANTIFICAR LACTULOSA EN JARABE
Preparación de la curva estándar:
Se pesa 15 mg de estándar de lactulosa en un matraz aforado de 10 mL y se afora con
agua destilada. Se realizan las siguientes diluciones
250𝑚𝑔 6𝑚𝐿 0.3𝑚𝑔
( )( )=
100𝑚𝐿 25𝑚𝐿 𝑚𝐿
250𝑚𝑔 5𝑚𝐿 0.5𝑚𝑔
( )( )=
100𝑚𝐿 25𝑚𝐿 𝑚𝐿
250𝑚𝑔 7𝑚𝐿 0.7𝑚𝑔
( )( )=
100𝑚𝐿 10𝑚𝐿 𝑚𝐿
Preparación de las muestras:

Se miden 1 mL del jarabe en un tubo, se agregan 4 mL de metanol absoluto y 0.5 mL del reactivo de
antrona. Se coloca en un baño de agua hirviendo hasta que se evapore la mayoría del líquido y se
forme un residuo amarillo (dejar 5 minutos). Se deja enfriar y se disuelve el producto con 6 mL de
ácido acético glacial.

Realizar un barrido en espectrofotómetro con luz UV para la muestra como para la referencia,
empleando celdas de 1 cm.

La fórmula empleada para obtener la concentración de lactulosa es:

(𝐴 − 𝑏)
𝐶=
𝑚
Donde:
A= Absorbancia
m= pendiente de la curva de calibración
b= intercepto en la curva de calibración
V. RESULTADOS
o Método 1. Determinación de grupos carbonilo por oximación
Resultados obtenidos en la estandarización del NaOH:

Volumen gastado Peso biftalato de

NaOH (mL) potasio (g)

ELABORADO POR: REVISADO POR: Vo. Bo. AESOR Página 9 de 12

 UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA
LABORATORIO DE DESARROLLO ANALÍTICO
ANÁLISIS VÍA GRUPO FUNCIONAL PARA CUANTIFICAR LACTULOSA EN JARABE
20.5 0.4338

19.2 0.4091

19.3 0.4090

𝑚
𝑁=
𝑉 𝑃𝑒𝑞
0.4338 𝑔
𝑁= 𝑔 = 0.1036𝑁
(0.0205 𝐿)(204.22 𝑒𝑞 )

0.4091 𝑔
𝑁= 𝑔 = 0.1043 𝑁
(0.0192 𝐿)(204.22 𝑒𝑞 )

0.4090 𝑔
𝑁= 𝑔 = 0.1037𝑁
(0.0193 𝐿)(204.22 𝑒𝑞 )

N promedio = 0.1038
Resultados obtenidos del contenido de lactulosa en jarabe:

Volumen gastado
Muestra
NaOH (mL)
1 4
2 2.3
3 2.4
Se utilizo la siguiente formula:
g = NVPeq
Muestra 1
g = (0.1038 N) (0.004 L) (342.30 g/eq) = 0.1421g
0.1421g -------> 0.5 mL
4.263 g = x<-------- 15 mL

ELABORADO POR: REVISADO POR: Vo. Bo. AESOR Página 10 de 12

 UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA
LABORATORIO DE DESARROLLO ANALÍTICO
ANÁLISIS VÍA GRUPO FUNCIONAL PARA CUANTIFICAR LACTULOSA EN JARABE
Muestra 2
g = (0.1038 N) (0.0023 L) (342.30 g/eq) = 0.0817g
0.0817g -------> 0.5 mL
2.451 g = x<-------- 15 mL
Muestra 3
g = (0.1038 N) (0.0024 L) (342.30 g/eq) = 0.0853
0.0853g -------> 0.5 mL
2.559 g = x<-------- 15 mL
o Método 2. Análisis gravimétrico

Imagen 3. Resultado de la muestra Imagen 4. Apariencia de la formación de

de lactulosa hidrazonas en aldehídos y cetonas

o Método 3. Determinación por espectrofotometría empleando una curva estándar

VI. ANÁLISIS DE RESULTADOS

VII. CONCLUSIONES
VIII. SUGERENCIAS
IX. REFERENCIAS

ELABORADO POR: REVISADO POR: Vo. Bo. AESOR Página 11 de 12

 UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA
LABORATORIO DE DESARROLLO ANALÍTICO
ANÁLISIS VÍA GRUPO FUNCIONAL PARA CUANTIFICAR LACTULOSA EN JARABE

ELABORADO POR: REVISADO POR: Vo. Bo. AESOR Página 12 de 12