LA REGULACIÓN EPIGENÉTICA EN EL DESARROLLO Y REGENERACIÓN DE LOS DIENTES

Resumen:
Antecedentes: La pérdida de dientes se produce con la edad y afecta significativamente la calidad de vida de personas mayores,
tanto física como psicológicamente. La odontogenesis es un proceso complicado con las interacciones secuenciales y recíprocas
entre tejidos epiteliales y mesenquimales y diferentes tipos de células madre derivadas del tejido dental.
Sin embargo, la epigenética se ha convertido en un mecanismo cada vez más importante para el desarrollo de los dientes y la
regeneración.

Objetivo: Esta revisión tiene como objetivo ilustrar la función de regulación epigenética en odontogenesis, que desempeña un
papel importante en el tejido dental derivada de células madre por auto-renovación y diferenciación. Lo que sería una nueva
estrategia para la regeneración de dientes.

resultados: En esta revisión, introducimos el proceso natural de desarrollo de los dientes y las funciones de las células madre
que participan. Además, se resumieron los conocimientos actuales sobre la regulación epigenética incluyendo la metilación del
ADN, modificación de las histonas, y los ARN no codificante durante la odontogénesis, proporcionando la base teórica para la
regeneración de los dientes.

Conclusión: Junto con una comprensión más profunda de odontogenesis, el mecanismo epigenético implicado se ha vuelto cada
vez más importante. Por lo tanto, es necesario estudiar más a fondo las funciones de regulación epigenética en el desarrollo de
los dientes y la regeneración.

1. INTRODUCCIÓN

Los dientes son órganos complejos que consisten en tejidos duros (esmalte, dentina y cemento) y tejidos blandos (pulpa dental)
encerrado dentro de una pared de la dentina. Los dientes forman un complejo de unión integrado con el hueso alveolar
adyacente, que está rodeado por el tejido conectivo de la encía, por medio de un ligamento especializado (periodontal)

La pérdida de dientes se produce con la edad, y resulta en una menor calidad de vida, tanto física como psicológicamente,
aunque no es mortal. El tratamiento de la pérdida de dientes incluyen la restauración o la implantación de prótesis o
dentaduras postizas hechas de materiales artificiales. Si bien estas medidas terapéuticas pueden cumplir la función de los
dientes naturales; también existen complicaciones, incluyendo lesiones a dientes adyacentes y los tejidos orales, fracaso en la
osteointegración e incluso fracturas de la prótesis.

El enfoque actual de la regeneración de dientes se encuentra en la reproducción del desarrollo de un diente natural del
desarrollo Por lo tanto, se necesitan las células madre que tienen el potencial de diferenciarse en células tanto epiteliales
dentales y células mesenquimales derivadas de la cresta neural.

Durante mucho tiempo, se creía que toda la información genética se almacena en la secuencia de bases dentro de los
moleculars de ADN. Sin embargo, los estudios que investigan las diferencias en la morfología de los dientes entre gemelos
monocigóticos han demostrado que otros mecanismos ejercen su efecto sobre la traducción de genes; estos mecanismos se
denominan epigenética, que son alteraciones en la expresión de genes sin cambios en la secuencia de ADN

DESCRIPCIÓN DEl desarrollo de los dientes y las células madre derivadas de dientes

Los dientes se desarrollan a partir del ectodermo oral y ectomesénquima derivado de la cresta neuronal; el esmalte está
formado por células ectodermicas, mientras que las células-ectomesenquimatosas son responsables de la formación de
dentina, cemento, los ligamentos periodontales, pulpa dental, hueso alveolar, gingival y la mayoría de los otros tejidos
conectivos.

-El inicio del desarrollo del diente comienza con la formación de una banda de herradura continua del epitelio dental engrosada
denominada la banda epitelial primario.
- la banda epitelio dental invade el ectomesénquima subyacente, y las células epiteliales proliferan para formar una estructura
como yema rodeada por las células ectomesenquimatosas condensados, que representa la fase de capullo o yema. En esta
etapa, aparece el germen del diente.

- El germen del diente está formado por el órgano del esmalte, la papila dental y el folículo dental encerrándolos.

-Pequeños divertículos emergen de las papilas epiteliales dentales en el lado externo y forman los brotes de diente de los
dientes permanentes.

-El germen permanente que han estado en silencio desde la etapa de campana, comienzan a
crecer a medida que se reemplazan los dientes primarios

- Posteriormente, el órgano del esmalte se puede distinguir en tres estructuras: (Desde el exterior hacia el interior) del epitelio
del esmalte, el retículo estrellado y el epitelio interno del esmalte.

La aparición del retículo estrellado, que es parte del germen del diente, se observa en la fase de casquete.

-Posteriormente, el estrato intermedio, aparece entre el epitelio del esmalte interno y el retículo estrellado y marca el germen
del diente en la etapa de campana.

En la etapa de campana, epitelio del esmalte interior y exterior se unen e inician el desarrollo de la raíz.

El órgano del esmalte crece de forma desigual en función de la morfología del diente en particular.

Las células periféricas de la papila dental se diferencian en odontoblastos, que son células con forma columnar que secretan
matriz de dentina para formar nuevo esmalte .

La aparición del retículo estrellado, que es parte del germen del diente, se observa en la fase de casquete.

El órgano del esmalte crece de forma desigual en función de la morfología del diente en particular.

EN PRE-BROTE el epitelio dental es capaz de inducir nuevos dientes, y los estudios con ratones han demostrado que el epitelio
dental puede inducir a las células mesenquimales derivadas de la cresta neural para formar dientes. Sin embargo, en la fase
de brote, los potenciales odontogénicos se desplaza hacia el mesénquima, que tiene la capacidad de inducir incluso el
epitelio no dental para formar estructuras de diente específica [21-23].

Después de la fase de capullo, el potencial odontogénico se limita a la papila dental, que está implicado en la determinación de
la morfología del diente hasta el nacimiento [24].

Las células madre embrionarias (CES) proporcionan esperanza para la posibilidad de la regeneración de órganos, incluyendo el
diente, debido a su capacidad de auto-renovación y de diferenciación en las tres capas germinales primarias [28, 29].

Aunque los resultados preliminares utilizando los CES fueron prometedores, los problemas éticos relacionados y las
preocupaciones sobre el rechazo inmunológico y posible tumor génesis deben abordarse [30-32].

- En 1976, se aislaron células madre mesenquimales (MSC) y fueron identificados a partir de la médula ósea (BMMSC). Tienen
la forma de fibroblastos y también poseen la capacidad de auto-renovación y de diferenciarse en las tres capas germinales [33-
37], que puede conducir a la sustitución gradual de las MSC CES en la investigación.

-Posteriormente, las MSC se aislaron de otros tejidos incluyendo el músculo, el tejido adiposo y la piel [38-46]. Estos estudios
sugieren que las MSC se encuentran de forma ubicua, lo que aumenta su potencial aplicación futura en la regeneración de
varios tipos de tejidos.

-Sorprendentemente, las MSC incluso se puede aislar de la leche materna [47]. Estas observaciones motivado a los
investigadores a buscar MSCs en los tejidos dentales y condujeron a la identificación y aislamiento de ocho tipos de células
madre derivadas de tejido dental, incluyendo a partir de pulpa dental [48], el ligamento periodontal [49], el hueso alveolar [50],
encía [51], dientes deciduos humanos exfoliados [52], la papila apical [53], folículo dental [54] y el germen de diente [55], que
se denominan DPSCs, PDLSCs, ABMSCs, GMSCs, SHEDs, SCAPs, DFPCs y TGPCs, respectivamente .

CÉLULAS MADRE DERIVADAS DE TEJIDO DENTAL Y SU POTENCIAL PARA LA REGENERACIÓN DE DIENTES

3.1. Descripción general de las células madre dentales

estudios han sugerido que las MSC derivadas de tejido dental comparten muchas similitudes con BMMSCs.

Por ejemplo, no sólo tienen la propensión a que se adhieran al plástico, también poseen inmunomoduladores y las
capacidades regenerativas.

3.2 células madre de pulpa dental

DPSCs eran las primeras células madre aisladas de tejido dental por Gronthos et al. a partir de los terceros molares. DPSCs
tienen la forma de fibroblastos típicos y comparten marcadores similares con MSCs, incluyendo la expresión de CD13, CD44,
CD29, CD105, CD146, CD73, CD90, CD166 y STRO-1
Bajo cultivo acondicionado, DPSCs diferencian en odontoblastos y los tres linajes de células básicas (osteogénico,
condrogénicas y adipogénicos)
Además, in vitro Producen estimulación osteoinductivo. En la la dentina se asemeja y forma una estructura de dentina
reparadora-como en la superficie de dentina humana existente en vivo

Aunque los resultados de Misako et al. sugieren que la estabilidad de DPSCs después de un uso prolongado depende de los
métodos de aislamiento y cultivo así como la condición original tejido de la pulpa
Estos resultados indican que DPSCs son ideales para la regeneración de dientes, en particular para la dentina y la pulpa.

3.3. células madre de ligamentos periodontales

MSC también puede ser aislado del ligamento periodontal. Estudios previos han indicado que las MSC comparten muchas
similitudes con los pericitos, lo que sugiere que PDLSCs también pueden estar ubicados en la pared perivascular del ligamento
periodontal.

Además de su capacidad de diferenciarse en células osteogénica, las células condrogénicas y adipogénicos, PDLSCs son capaces
de diferenciarse en otros tipos de células in vitro tales como neuronas y miocitos [73-76]. En vivo, PDLSCs forman un ligamento
periodontal / cemento-como tejido [49], lo que indica su potencial regenerativo para deterioro de tejido periodontal.

3.4. Las células precursores del folículo dental

El folículo dental es un tejido ectomesenquimatosas que rodea tanto el órgano del esmalte y la papila dental. Se encuentra en la
región periférica de desarrollar germen del diente antes de la erupción de los dientes y finalmente forma el ligamento
periodontal y el hueso alveolar.

Las observaciones histológicas sugieren que el folículo dental consiste en células madre y células progenitoras que pueden
diferenciarse adicionalmente en cementoblastos y células del ligamento periodontal en el periodonto. Estas células
progenitoras se adhieren a plástico bajo condiciones de cultivo estándar y se llaman DFPCs. DFPCs puede aislarse de los folículos
dentales de los terceros molares en desarrollo antes de la erupción.

Poseen amplias capacidades proliferativas. cuando se cultivan in vitro, DFPCs se diferencian en osteoblastos, condrocitos,
adipocitos, e incluso células nerviosas-similares.

3.5. Las células madre de dientes deciduos exfoliados

En 2003, Miura et al. verificado que las células madre pudo aislarse a partir de la pulpa dental de los dientes exfoliadas.

Han demostrado in vitro para diferenciarse en odontoblastos, osteoblastos y adipocitos.

Otros estudios también han demostrado que arroja tienen el potencial de diferenciarse en células condrogénicas, células
endoteliales y hepatocitos [52, 80-82].

En vivo los estudios han demostrado que pueden diferenciarse en la dentina y el hueso, en lugar del complejo de pulpa dentin-,
cuando se trasplantan junto con HA / TCP [52].

Estos hallazgos sugieren que los dientes de leche ayudan a guiar la erupción de los dientes permanentes y participar en la
formación de hueso alrededor de los dientes a medida que crecen los dientes permanentes.

Otro estudio sugirió que son angiogénico y ayudan a conectar la vasculatura del huésped y recién formado tejido pulpar-como
dental después de la implantación subcutánea en ratones inmunocomprometidos [84]. Estos resultados, junto con los
resultados de Cordeiro et al. confirma que pueden tener el potencial tanto para los dientes y la regeneración ósea [81].

3.6. Las células madre de Papila Apical

La papila apical es el tejido blando que rodea el ápice de los dientes permanentes en desarrollo. A medida que las células
proliferan, la raíz del diente se forma gradualmente. Por lo tanto, la papila dental está implicado en el desarrollo de los dientes y
en última instancia, se diferenció en el tejido de la pulpa y el tejido alrededor del ápice [53, 85].

Cuando se compara con DPSCs, SCAP muestran una mejor tasa de proliferación y potencial de mineralización in vitro [ 85, 86], y
tienen el potencial de diferenciarse en osteoblastos, odontoblastos y células adipogénicas in vitro. Además, en condiciones de
cultivo acondicionado, SCAP pueden diferenciarse en neurocitos y hepatocitos [53, 66, 85]. En vivo estudios han demostrado
que se formó el típico complejo dentina-pulpa. SCAP parecen ser la principal fuente de odontoblastos.

Además, el en vivo aplicación de SCAP dio como resultado la formación de un tejido similar al hueso cemento / alveolar. Estos
estudios sugieren que SCAP pueden tener el potencial para odontogenesis, especialmente para la raíz del diente.

3.7Células madre de dientes germinales

células madre germen del diente son células madre mesenquimales. Yalvac et al. aisló y caracterizó las células
madre de dientes germinal humana (hTGSCs) a partir de los terceros molares y se diferenciaron con éxito en células
osteogénicas y odontogénicas in vitro indicando su posible uso en la ingeniería de tejidos dental

3.8. células madre mesenquimales derivadas de la encía.

Se han aislado y caracterizado células madres mesenquimales derivadas de encía con capacidades de diferenciación de
múltiples potenciales.
Jin SH et al. demostraron que GMSCs podrían reparar las heridas mandibulares y los defectos de la bóveda craneal a los 2 meses
en ratas en reconstrucción posquirúrgica y se notaba multi-potencia con alta proliferación y características de las células madre
mesenquimales [92].

LA REGULACIÓN EPIGENÉTICA EN CÉLULAS MADRE PARA EL DESARROLLO DE LOS DIENTES Y EL POTENCIAL PARA LA
REGENERACIÓN DE DIENTES

4.1. Situación de la regulación epigenética

La expresión génica está regulada por muchos factores, que pueden ser más o menos agrupados en dos categorías amplias:
genéticos y epigenéticos, incluyendo la composición de secuencias de ADN, factores de transcripción (TFS), histomodificaciones
(HMS), la metilación del ADN, y la accesibilidad del ADN, etc.,

93]. La epigenética se definió como un “fenotipo de forma estable heredable resultante de los cambios en un cromosoma sin
alteraciones en la secuencia de ADN” [94]. Las diferencias en el tamaño, número y forma de los dientes, anomalías dentales e
incluso pronunciación entre gemelos monocigóticos sugieren que la epigenética son importantes en la regulación del desarrollo
de los dientes [8, 10,
95-98]. Existen tres principales mecanismos epigenéticos: la metilación del ADN, las modificaciones postraduccionales de las
histonas y la regulación de genes por no codificante ARN (Tabla 1).

Los dos primeros mecanismos funcionan por condensación de la cromatina, mientras que el segundo mecanismo evita
directamente la producción de la proteína [17, 99102].
Tabla 1. Las funciones de la metilación del ADN, la modificación de histonas y miRNAs en desarrollo de los dientes.

Sin embargo, pocos estudios han investigado el papel de la epigenética en la odontología, a pesar de la evidencia que sugiere su
importancia.

4.2. La metilación del ADN en el desarrollo del diente

La metilación del ADN es el mecanismo epigenético más común y mejor estudiado. Se trata de la modificación covalente de
ADN lineal a través de la adición de un grupo metilo de S-adenosil metionina (SAM) a citosinas de localización en las regiones
CpG de ADN [16].

CpG a menudo se producen en grupos, denominados islas CpG, y normalmente existen en las regiones promotoras de los genes
diana [105, 106].

La hipermetilación de las islas CpG inhibe la transcripción génica, mientras que la hipometilación conduce a la activación de la
transcripción de genes [107].

Este efecto de “silenciamiento génico”, que es causada por la hipermetilación de las islas CpG,

Los resultados de este estudio sugieren que la metilación del ADN está implicado en el desarrollo del diente [110]. Además de
metilación, hidroximetilación también tiene un papel en la amelogénesis.

4.3. Las modificaciones de las histonas en el desarrollo del diente

Las histonas son proteínas que se condensan y estructurar el ADN en unidades llamadas nucleosomas, que consisten en ocho
proteínas histonas rodeado por un segmento de ADN. modificaciones de las histonas incluyen la metilación, acetilación,
ribosilación y ubiquitinación [113
En contraste a la metilación, la acetilación de una histona aumenta la transcripción de genes aflojando el complejo de histona-
DNA para permitir que los factores de transcripción se unan. En contraste, la metilación de las histonas puede estimular o
inhibir la transcripción de genes [16].

Estos estudios confirman el papel que las modificaciones de las histonas, especialmente la metilación y acetilación, juegan
durante el desarrollo dental. Sin embargo, odontogenesis es un proceso complicado que implica varios tipos de células madre;
por lo tanto, es importante para estudiar si la metilación y acetilación también funcionan en otras células madre dentales.
Además, la interacción entre la metilación y acetilación debe ser estudiado. Por último, es posible que las vías o mecanismos
adicionales podrían estar implicados en la regulación de odontogenesis.

4.4. RNAs no codificante en el desarrollo del diente

Sólo un 2 a un 5 por ciento del código de ARN de las proteínas, mientras que el resto de los ARN función es posible modificar la
traducción a través de mecanismos complicados. Por lo tanto, los ARN no codificante (ncRNAs) disminuyen ARNm y los niveles
de proteína en células de mamífero por ya sea indirectamente a interferir con la transcripción de ADN a ARN o promover
directamente la degradación del ARN diana [124].

4.4.1. miRNAs en el desarrollo del diente

MiRNAs son un grupo de ARN no codificantes que contienen menos de 22 nucleótidos y la función post-transcripcionalmente.
Los estudios han demostrado que los miRNAs participan en diversas actividades biológicas, incluyendo la proliferación celular, la
diferenciación y la apoptosis.
Los dientes son órganos ectodérmicas que están bajo la regulación de varias vías de señalización, incluyendo las vías de Wnt,
BMP, FGF, Shh y Notch.

Gong et al. mostraron que miRNAs contribuyen a la diferenciación de células madre de pulpa dentaria hacia odontoblastos a
través de las vías de señalización de MAPK y Wnt. Después de determinar que el desarrollo del diente está regulada por
miRNAs, los estudios se han centrado en las funciones de miRNAs específicos para dilucidar sus funciones en odontogenesis.

4.4.1.1. Las funciones de miRNAs en ameloblasto Diferenciación

Para verificar si los miRNAs están involucrados en la amelogénesis, Yin et al. detectado tanto el ARN y transcriptomes de ARNm
expresados en amelogénesis y determinaron que sus perfiles de expresión son dinámicos durante amelogénesis, lo que implica
que juegan un papel en el desarrollo del esmalte. Entre los miRNAs expresadas diferencialmente durante las diferentes etapas
del desarrollo del esmalte, los autores seleccionados miR-153 y miR-31 debido a sus papeles vitales en la regulación de la
expresión de ARNm de Lamp1 y TFRC, respectivamente [

4.4.1.2 Las funciones de los miARN en la diferenciación de odontoblastos

DSPP está involucrado tanto en la odontogénesis como en la mineralización.y es un marcador para la diferenciación
de odontoblastos. Para determinar si los miARN DSPP contribuyen a la dentinogénesis.

Los estudios han demostrado que miR-27 y miR-663 tienen resultados positivos efectos sobre la diferenciación y
posterior mineralización de células odontoblásticas MDPC-23

Este estudio sugiere una nueva forma de miRNAs para regular la dentinogénesis [143]. Aunque varios estudios han
investigado el papel de Runx2 en osteo / odontogenesis, La regulación de miARN de Runx2 representa una nueva vía
para Tanto el desarrollo dental como la regeneración.

Se necesitan estudios adicionales para identificar el mecanismo molecular implicado en la regulación de miARN de
desarrollo dental

4.4.2 ARN largos no codificantes en el desarrollo dental

Los LncRNA reciben su nombre por sus largas secuencias de más de 200 nucleótidos. Con el desarrollo de alto rendimiento
secuenciación y tecnología de chip genético, un aumento

Se ha identificado una cantidad de lncRNAs, incluyendo HOTAIR, NALAT-1, ANRIL y nc-RAN [150-153]. Anterior
los estudios han confirmado que los lncRNAs guían proteínas grandes complejos al ADN, lo que da como resultado alteraciones
en el lugar específico expresión génica y la expresión y abundancianiveles de cadenas complementarias de ARNm.

ARN (ANCR) es un tipo de ARNnc que desempeña un papel en diferenciación de células madre. Recientemente, Jia et al. mostró
que ANCR fue un factor clave que determinó la proliferación y diferenciación de PDLSCs, indicando el papel de ANCR en
células madre dentales.

Estudios han sugerido que los lncRNA tienen funciones que Desde odontogénesis y regeneración ósea hasta el envejecimiento.
dientes y pérdida ósea.
5. PROSPECTIVA EN REGENERACIÓN DE DIENTES
A pesar de que se necesitan más estudios, terapias que involucren regulación epigenética puede tener aplicaciones potenciales
en la regeneración dental.

El diente es un órgano complejo que es formado a través de los esfuerzos combinados de diferentes tejidos y células dentales
por lo tanto, los mecanismos reguladores epigenéticos involucrados en cada tipo de células madre dentales se debe dilucidar
más.

A medida que diferentes células madre participan en diferentes eventos durante la odontogénesis, su regulación epigenética
difiere.

Considerando que los mecanismos epigenéticos no son específicos del diente, las terapias dirigidas a la epigenética
puede dar lugar a consecuencias inesperadas, que deberían evitarse para garantizar la cuidadosa consideración de la seguridad
antes su aplicación en humanos.

CONCLUSIÓN

Se han aislado ocho tipos diferentes de células madre del diente y sus tejidos circundantes, lo que indica la
Diversas funciones de las células madre derivadas de tejido dental en la auto reparación y, posiblemente, la regeneración
dental.

Idealmente, la regeneración dental para la pérdida de dientes implicaría la reproducción de un diente natural
desarrollado para permitir la regeneración de dientes funcionales Con apariencia normal.

Estudios que investigan la epigenética, regulación de la odontogénesis. Metilación del ADN, histona
la modificación y los ARN no codificantes han concluido que estos procesos contribuyen a mecanismos reguladores en varios
células madre dentales, incluidas DPSC, PDLSC y SCAP, en diferentes puntos durante la odontogénesis, como
amelogénesis y odontogénesis.

Se necesitan más estudios para ilustrar mejor las funciones de la regulación epigenica tanto en el desarrollo como regenración
dental.

Bibliografía

Yao Lin 1, Liwei Zheng et al., The Epigenetic Regulation in Tooth Development and Regeneration. REVIEW ARTICLE. Current
Stem Cell Research & Therapy, 2018, 13, 4-15 DOI: 10.2174/1574888X1166616112914