INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Laboratorio de Bioquímica Microbiana

“Balance de fermentación.”

Integrantes:
Esquivel Arvizú Lizbeth
García Paredes Jazmín
Martínez Arce Claudia Lizethe
Morán Carpio Abigail
Vilchis Torrez Joel David

Grupo 5IV1

Sección 1

Profesores:
Susana Alfaro Aguilar
Eduardo Montoya Díaz

Hipótesis y diseño experimental 3%

Objetivos 1%
Registro de datos 3%
Manejo de datos 4%
Discusión de resultados 5%
Conclusiones 3%
Referencias Biliográficas 1%
1
Hipótesis.

https://edoc.pub/practica-3-determinacion-de-actividad-de-succinato-deshidrogenasa-en-escherichia-coli-pdf-
free.html

Si la fermentación llevada a cabo por Saccharomyces cerevisiae es una fermentación alcohólica entonces
tendrá como productos el Etanol y liberación de CO2.
Sí las determinaciones por el método de Conway para etanol, gravimétrico de CO 2 y glucosa residual se
llevan a cabo con la mayor precisión posible, entonces tendrá un índice de O/R cercano a 1.

Diseño experimental.

Se realiza un micro-ensayo de fermentación con Saccharomyces cerevisiae, utilizando glucosa como sustrato, en
el cual se cuantificará los productos obtenidos: etanol y dióxido de carbón, así como la glucosa residual.

Método de Conway

Se basa en el poder oxidante del dicromato de potasio (K2Cr2O7) en ácido sulfúrico (H2SO4), el Cr2O7= de color
amarillo-naranja produce, por reducción, al ión cromoso de una tonalidad verde-azul que es oxidado
cuantitativamente ácido acético (CH3COOH) y agua.

2 K2Cr2O7 +8 H2SO4 + 3 CH3CH2OH  2 K2SO4 + 2 CH3CHOO + 2 Cr2(SO4)3 + 11 H2O

El ión reducido es colorido, se puede leer en el espectro visible a 445nm debido a que ésta es la longitud de onda
máxima a la que absorbe el dicromato de potasio. Lo que se lee realmente es el dicromato que no reaccionó, ya
que al aumentar la concentración de etanol aumenta el cromato. La gráfica resulta ser una recta cuya pendiente
es negativa.

Determinación de C02 por gravimetría.

A partir de la formación de bicarbonato de sodio por la reacción del CO2 con el NaOH se pone a reaccionar con
BaCl2 se forma el precipitado BaCO3 que se recolecta en papel filtro y por diferencias de pesos entre el papel
filtro sin el precipitado y el papel filtro con el precipitado se obtiene la cantidad de precipitado que en base a la
conversión por un factor gravimétrico se cuantifica la cantidad de CO2 producido durante la fermentación.

2 NaOH + CO2  Na2CO3 + H2O

Na2CO3 + BaCl2  BaCO3 + 2 NaCl

CO2  BaCO3

Determinación de la glucosa residual

2
Se realizara por medio del método del DNS. El cual se basa en la reducción del DNS (color amarillo) por la Glucosa
(azúcar reductor) al acido 3-amino-5-nitrosalicilico (Fig. 1) de color rojo previo calentamiento por 10 min en baño
maría en ebullición. El cual el 3-amino-5-nitrosalicilico es equivalente a la concentración de glucosa en el medio,
siendo así que se leerá la absorbancia a 540nm en el espectrofotómetro.

Reactivos.

Ilustración 1. Reacción del DNS con la glucosa como azúcar reductor.

Reactivo Función

N2 Crea una atmosfera de anaerobiosis dentro del matraz lo que permitirá

el desarrollo de la fermentación.

Ácido tricloroacético Detiene el proceso de fermentación.

Agua destilada Llevar a volúmenes indicados, realizar lavado o aforar.

Agua detilada libre de CO2 Realizar los lavados del precipitado formado por el método de
gravimetría para la determinación de CO2.

DNS en tartrato de sodio-potasio La determinación de azúcares reductores, involucra la oxidación del

grupo funcional aldehído presente.

Carbonato de potasio saturado Agente liberador del etanol.

Cloruro de bario al 5% en agua Forma un precipitado (BaCO3) con el CO2, para ser determinado por
libre de CO2 gravimetría.

Dicromato de potasio Agente atrapante de etanol, este realiza una oxidación sobre el etanol

Glucosa Sustrato a fermentar.

Glucosa 100 mg/mL Se realiza la curva tipo para determinar la glucosa residual.

Etanol 1500mg/mL Se realiza la curva tipo para la derminación de etanol por el método de
Conway.

NaOH 10% Reacciona con CO2 de la fermentación para la formación de Na2CO3.

KOH 10% Neutralizante de Ac. Tricloroacético.

3
 Regulador de fosfatos Mantiene el pH a 6.8 constante durante la fermentación.

Suspensión Celular Microorganismo que realiza la fermentación. S. cerevisiae.

Objetivos generales.

Realizar un micro ensayo para la fermentación de glucosa por la levadura Saccharomyces cerevisae
para la cuantificación de sus productos.
Llevar a cabo un proceso de fermentación utilizando una levadura de uso industrial y conocer la eficiencia
de dicho proceso.

Objetivos específicos.

Cuantificar los productos de interés liberados durante un proceso de fermentación (etanol y dióxido de
carbono) a través del método de Conway, para el caso del etanol y gravimetría, para el caso de CO2.
Realizar un balance de fermentación utilizando los datos obtenidos experimentalmente.
Determinar la pérdida de carbono efectuada durante el proceso de fermentación de Saccharomyces
cerevisiae.

Registro de datos.

1. Curva tipo etanol.

Tabla 1. Curva tipo de etanol 1500 mg/mL leída a 445nm.

µg de etanol Absorbencia a
445nm
0 1.075
250 0.979
500 0.849
1000 0.691
1500 0.520
2000 0.432
2500 0.220

4
 Gráfica 1. Curva tipo de etanol preparada de 0 a 2500µg de
etanol para el método de Conway leído a 445nm.
1.200

1.000

y = -0.0003x + 1.0453
0.800
R² = 0.9899
A 445 nm

0.600

0.400

0.200

0.000
0 500 1000 1500 2000 2500
µg de etanol

2. Determinación de etanol formado en la fermentación.

Tabla2. Absorbancia obtenida a 445nm por el etanol producido

en la fermentación de glucosa por S. cerevisiae.

Muestras Absorbencia a 445

nm
0.2 mL de muestra fermentada 0.419
0.4mL de muestra fermentada 0.551
1.0 mL de muestra testigo 0.902

3. Curva tipo de glucosa

Tabla 3. Curva tipo de glucosa 100 mg/mL a

540nm por método colorimétrico DNS.

µg de Absorbencia a
glucosa 540nm
0 0
100 0.188
200 0.405
300 0.656
400 0.883

5
 500 1.098

Gráfica 2. Curva tipo de glucosa preparada de 0 a 500µg

por el método del DNS leída a 540 nm.
1.2

y = 0.0022x - 0.0207
0.8 R² = 0.9986
A 540nm

0.6

0.4

0.2

0
0 100 200 300 400 500
µg de glucosa

4. Determinación de glucosa residual por la fermentación

Tabla 4. Absorbancia obtenida a 540nm por la glucosa residual producida

de la fermentación de glucosa por S. cerevisiae.

Muestras Absorbencia a
540nm
0.2 mL de sobrenadante diluido 1:10
0.4 mL de sobrenadante diluido 1:20 0.325
1 mL de sobrenadante testigo sin diluir 0.221

5. Determinación de CO2

Tabla 5. Determinación de BaCO3 por el método gravimétrico

a través de diferencia de pesos de papel filtro.

Muestras Peso en gramos

(g)
Papel filtro 0.8131
Papel filtro + BaCO3 0.9261
BaCO3 de fermentación 0.1130
Papel filtro Testigo 0.8158
6
 Papel filtro + BaCO3 Testigo 0.8548
BaCO3 Testigo 0.0390

Manejo de datos.

1. Determinación de etanol producido durante la fermentación.

Ecuación de la recta y = ax+b

Ecuación empírica y= - 3.28x10-3 X + 1.0445

r2=0.9899
a=-3.28x10-3
b = 1.0445

𝑦−1.0445
Despeje de x x=
−3.28𝑥10−3

Se sustituyen los datos de A (445nm) obtenidos en la tabla anterior en la ecuación de la recta obtenida de la
curva tipo de Etanol.

Problema:

Alícuota 0.2ml:

0.419 − 1.0445 (1907.012µ𝑔)(1𝑚𝑔) 1.907𝑚𝑔 𝑚𝑔

𝑥= −3
= = = (9.535 ) (10𝑚𝑙)
3.28x10 1000µ𝑔 0.2𝑚𝑙 𝑚𝑙
𝑚𝑔
𝑥 = 95.351
10𝑚𝑙

Alícuota 0.4ml:

0.551 − 1.0445 (1504.573µ𝑔)(1𝑚𝑔) 1.505𝑚𝑔 𝑚𝑔

𝑥= −3
= = = (3.761 ) (10𝑚𝑙)
3.28x10 1000µ𝑔 0.4𝑚𝑙 𝑚𝑙
𝑚𝑔
𝑥 = 37.614
10𝑚𝑙

Testigo:

0.902 − 1.0445 (434.451µ𝑔)(1𝑚𝑔) 0.434𝑚𝑔 𝑚𝑔

𝑥= −3
= = = (0.434 ) (10𝑚𝑙)
3.28x10 1000µ𝑔 0.2𝑚𝑙 𝑚𝑙
𝑚𝑔
𝑥 = 4.345
10𝑚𝑙
7
Se obtiene un promedio de la interpolación de los testigos:

95.351 + 37.614 𝑚𝑔
promedio = = 66.483
2 10𝑚𝑙

y se le resta al testigo el promedio del problema para obtener:

𝑚𝑔 𝑚𝑔 𝑚𝑔
66.483 − 4 = 62.483
10𝑚𝑙 10𝑚𝑙 10𝑚𝑙

Y se obtiene al fin el número de moles deEtanol formado en la fermentación en mmoles, tomando en cuenta
que se tienen 46mg/mol de Etanol teóricamente:
𝑚𝑔
62.483 ×1𝑚𝑚𝑜𝑙
𝑚𝑙
𝑛 = 𝑚𝑔 = 1.358𝑚𝑚𝑜𝑙 𝑑𝑒 𝐸𝑡𝑂𝐻
46
𝑚𝑙

n=1.358mmol de EtOH

2. Determinación de glucosa residual.

Ecuación de la recta y = ax+b

Ecuación empírica y= 2.236 x10-3 X + 0.0206

r2=0.999
a= 2.236x10-3
b = 0.0206

𝑦−0.0206
Despeje de x x=
2.236𝑥10−3

Se sustituyen los datos de A (540nm) obtenidos en la tabla anterior en la ecuación de la recta obtenida de la
curva tipo de Glucosa.

Problema (dilución 1:20):

0.325 + 0.0206 (154.562µ𝑔)(1𝑚𝑔) 0.155𝑚𝑔 𝑚𝑔

𝑥= −3
= = = (0.310 ) (20𝑚𝑙)
2.236x10 1000µ𝑔 0.5𝑚𝑙 𝑚𝑙
𝑚𝑔 𝑚𝑔
𝑥 = (6.182 ) (10𝑚𝑙) = 61.825
𝑚𝑙 10𝑚𝑙

Testigo:

0.221 + 0.0206 (108.050µ𝑔)(1𝑚𝑔) 𝑚𝑔

𝑥= −3
= = (0.108 ) (10𝑚𝑙)
2.236x10 1000µ𝑔 𝑚𝑙
𝑚𝑔
𝑥 = 1.081
10𝑚𝑙
8
y se le resta al testigo el resultado del problema para obtener:
𝑚𝑔 𝑚𝑔 𝑚𝑔
𝐺𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 𝑟𝑒𝑠𝑖𝑑𝑢𝑎𝑙 = 61.825 − 1.081 = 60.744
𝑚𝑙 𝑚𝑙 𝑚𝑙

Se obtiene la glucosa fermentada, tomando en cuenta que se tienen 180mg/ml de Glucosa inicial:

Glucosa inicial:

180g --- 1M--- 1000 ml

360g --- 2M ---1000 ml
x-------------- 0.5 ml

𝐺𝑙𝑐 𝑓𝑒𝑟𝑚𝑒𝑛𝑡𝑎𝑑𝑎 = 𝐺𝑙𝑐 𝑖𝑛𝑖𝑐𝑖𝑎𝑙 − 𝐺𝑙𝑐 𝑟𝑒𝑠𝑖𝑑𝑢𝑎𝑙

𝑚𝑔 𝑚𝑔 𝑚𝑔
𝐺𝑙𝑐 𝑓𝑒𝑟𝑚𝑒𝑛𝑡𝑎𝑑𝑎 = 180 − 60.744 = 119.256
𝑚𝑙 𝑚𝑙 𝑚𝑙

Y se obtiene así el número de moles de Glucosa fermentada en mmoles:

𝑚𝑔
119.256 ×1𝑚𝑚𝑜𝑙
𝑚𝑙
𝑛 = 𝑚𝑔 = 0.663𝑚𝑚𝑜𝑙 𝑑𝑒 𝐺𝑙𝑐. 𝑓𝑒𝑟𝑚𝑒𝑛𝑡𝑎𝑑𝑎
180
𝑚𝑙

𝑛 = 0.663𝑚𝑚𝑜𝑙 𝑑𝑒 𝐺𝑙𝑐. 𝑓𝑒𝑟𝑚𝑒𝑛𝑡𝑎𝑑𝑎

3. Determinación de CO2.

Fg= factor gravimétrico

𝑔
𝑃𝑀 𝐶𝑂2 44 𝑔
𝑚𝑜𝑙
𝑓𝑔 = = 𝑔 = 0.223
𝑃𝑀 𝐵𝑎𝐶𝑂3 197.34 𝑚𝑜𝑙
𝑚𝑜𝑙

Se resta BaCO3 testigo a BaCO3 de fermentación para después multiplicarlo por el factor gravimétrico y obtener
con este el número de moles de BaCO3 obtenidos en la fermentación.
(0.074𝑔) (1000𝑚𝑔)
𝐵𝑎𝐶𝑂3 𝑓𝑒𝑟𝑚𝑒𝑛𝑡𝑎𝑐𝑖ó𝑛 − 𝐵𝑎𝐶𝑂3 𝑡𝑒𝑠𝑡𝑖𝑔𝑜 = 0.113 − 0.039 = 1𝑔
= 74 𝑚𝑔

𝑔
74 𝑚𝑔𝐵𝑎𝐶𝑂3 × 𝑓𝑔 = (74𝑚𝑔 ) (0.223 ) = 16.503 𝑚𝑔 𝐶𝑂2
𝑚𝑜𝑙
16.503𝑚𝑔
𝑛= = 0.375𝑚𝑚𝑜𝑙 𝑑𝑒 𝐶𝑂2
44𝑚𝑔

𝑛 = 0.375𝑚𝑚𝑜𝑙 𝑑𝑒 𝐶𝑂2

4. Balance de fermentación.

Tabla 6. Balance de fermentación.

9
 1 (mmol) 2 (mmol) 3 4 5 6 (mmol) N° de C
Fuente de
Carbono
Glucosa 0.663 1 0 6 6

Productos
EtOH 1.358 2.048 -2 -4.096 4.096 2

CO2 0.375 0.566 +2 1.131 0.566 1

Σ= 4.662

Columna 3: H=-0.5 O= +1

Etanol (CH3-CH2-OH): CO2:

H = -0.5 X 6 =-3 O = +1 X 2 = +2
O = +1 X 1 = +1
Σ = -2

Columna 4: Productos oxidados Columna 5: Productos reducidos

CO2= (0.564)(2)= 1.131 EtOH= (2.048)(-2)= -4.096

Columna 6:

1 mmol x 6= 6mmol
2.048mmol x 2= 4.096 mmol
0.566 x 1 = 0.566 mmol

Índice O/R: % de Carbono recuperado:

6 mol --- 100 %
𝑂⁄ = 1.131 = 0.276 4.662 mol --- x %
𝑅 4.096

X=77.7 %

Discusión.

Cuando en una fermentación se producen varios productos finales la bacteria dispone de diferentes alternativas
para reoxidar del NADH, no existe a priori una estequiometria definida. En cada caso concreto, según sea la
bacteria y las condiciones de cultivo, puede cuantificarse tanto el consumo de glucosa (u otro sustrato) como la
producción de productos finales I.

10
Las levaduras como microorganismos quimioheterótrofos, necesitan compuestos orgánicos como fuentes de
carbono y energía (FCE). Los glúcidos, principalmente las hexosas, son los compuestos más utilizados como FCE
tanto para el metabolismo aeróbico como anaeróbico VIII.

Saccharomyces cerevisiae es un microorganismos muy utilizado en la microbiología industrial, en la producción

de pan, grasas glicerina y la más importante la de bebidas fermentadas I. En las levaduras, bajo condiciones
anaeróbicas el NAD+ se regenera por medio de la fermentación alcohólica: la conversión del piruvato en etanol
y CO2. Mediante dos reacciones consecutivas catalizada por dos enzimas III (ilustración 2). Por cada mol de glucosa
que entra en la vía Embden Meyerhof Parnas se producirá 2 moles de piruvato, los cuales al incorporase al
metabolismo fermentativo (fermentación alcohólica), se producirá 2 moles de dióxido de carbono y 2 moles de
etanol. Esto es muy importante que sea tomado en cuanta en el momento de elaborar un balance de
fermentación IX.

Ilustración 2. Reacciones llevadas a cabo en fermentación alcohólica.

Por lo anterior podemos decir que S. cereviciae, en condiciones de anaerobiosis, por cada mol de glucosa
produce 1 mol de Dióxido de carbono y 1 mol de etanol, por esta razón nuestros cálculos dependen de muchos
factores, tales como el método y los errores cometidos durante su ejecución.

Saccharomyces cerevisiae, Zymomonas mobilis (fermentación del pulque) y otras levaduras como Leuconostoc
descomponen la glucosa para producir etanol, reoxidando NADH aunque cabe mencionar que la estequiometria
varía dependiendo el microorganismo, pues teóricamente no tienen la misma relación de productos oxidados y
reducidos y en la práctica estos pueden variar aún más.

La fermentación alcohólica es un proceso muy complejo; el incremento de la concentración de etanol a medida

que transcurre la fermentación supone un obstáculo para el correcto crecimiento y desarrollo de la levadura por
los efectos negativos que esto conlleva. El etanol afecta la permeabilidad de la membrana celular disminuyendo
su selectividad, de forma que las levaduras en un medio con alta concentración alcohólica pierden propiedades
funcionales y no pueden retener cofactores y coenzimasVIII. Una diferencia importante entre las levaduras
silvestres y las levaduras de vino cultivadas es su tolerancia al etanol. La mayor parte de las levaduras silvestres
pueden tolerar solamente alrededor de un 4 % v/v de etanol; cuando la concentración de alcohol llega a este
punto, la fermentación se detiene.X

Los balances de fermentación son esenciales para su aplicación en la industria, el principal objetivo del análisis
de las fermentaciones es el de dirigir tanto carbono como sea posible desde un sustrato hacia un producto
metabólico de importancia industrial, y obtener el máximo rendimiento posible. VIII

Ahora bien en la práctica se realizo un microensayo de una fermentación alcohólica, una de las fermentaciones
que solo tiene dos productos metabólicos: el etanol y el dióxido de carbono. Los cuales se les determinó su
11
concentración por los métodos de Conway y gravimétrico, respectivamente, para conocer el % de carbono
recuperado en el proceso fermentativo, así como también se determinó la concentración de glucosa fermentada.
Estos métodos pueden presentar interferencias que afectan los balances de fermentación.

El método de Conway, como ya hemos mencionado, se basa en la oxidación del alcohol por acción de una
solución de dicromato de potasio en medio ácido por ácido sulfúrico. El alcohol es oxidado cuantitativamente a
ácido acético y el dicromato es reducido a cromo trivalente, de acuerdo con la siguiente reacción.

2 K2Cr2O7 +8 H2SO4 + 3 CH3CH2OH  2 K2SO4 + 2 CH3CHOO + 2 Cr2(SO4)3 + 11 H2O

En cuanto a la manera en que fue llevado a cabo el experimento, podemos decir que fue adecuada, ya que se
estuvo al tanto de que no se mezclaran el contenido de la cámara central (K2Cr2O7), con el contenido de la
cámara externa (H2SO4 y K2CO3) y se procuró recuperar la mayor cantidad posible de K2Cr2O7.

El rendimiento teórico estequiométrico para la transformación de glucosa en etanol es de 0.511 g de etanol y

0.489 g de CO 2 por 1g de glucosa XI. Nosotros obtuvimos una recuperación de 1.358 mmol de Etanol que
correspondería a 67.9% del total, tomando como base 2 mmol de Etanol. Por lo que podemos decir que nuestro
rendimiento fue bueno.

Como resultados observamos en la tabla 6 el balance de fermentación obtenido, el rendimiento de la reacción

se aprecia en el porciento de carbono recuperado, siendo este entre 80% y 100%. Cuando hay un bajo
rendimiento es atribuido a una pérdida de productos, en el caso del CO2, una fuga en el sistema, o en el caso de
que en el sistema presentara un escaso residuo de oxigeno en el medio, el cual se vería afectado por el efecto
PasteurI. En el caso de la glucosa pudo ser una interferencia del método del DNS como no controlar el Ph, ya que
el método reacciona en condiciones alcalinas, el no controlar la temperatura ya que es a ebullición durante 10
minutos,se podría utilizar un método como el de glucosa oxidasa es un método de referencia por su alta
especificidad gran sensibilidad. El método se basa en la siguiente reacción enzimática:

-D-Glucósa + NAD D-glucono-lactona + ,

catalizada por la glucosa-dehidrogenasa; por adición simultánea de mutarotasa se aumenta la velocidad de la

reacción. Se determina finalmente la cantidad del formado, la cual es proporcional a la concentración
de glucosa. La lectura se hace fotométricamente a una longitud de onda de 340 ó 366 nm.XII
Este método es apropiado para la determinación de glucosa en diversos jugos y néctares de fruta (naranja,
durazno, tomate) y de verduras (zanahoria), como también en vinos y mieles. Dada la especificidad de la
glucosadehidrogenasa frente a la glucosa, no reacciona con la fructosa, ni la sacarosa. Se eliminaría la incubación
a ebullición ya que la incubación es a temperatura ambiente y el tiempo de incubación ya que son 5 mim además
de poder trabajas con alícuotas pequeñas.VIII

La ventaja del método de Conway, es que el material y el equipo que se utiliza para la determinación es más
accesible, aunque también presenta una fuerte desventaja, ya que es relativamente inespecífico, ya que otros
alcoholes, cetonas y aldehídos reducen el dicromato, así como también existe la posibilidad de la descomposición
del dicromato por exposición a la luz y considerando que es un método indirecto de oxido reducción
colorimétrico y depende del complejo colorido que se forma por la reacción del dicromato con el etanol, éste no
es muy estable, con lo que se pierde la intensidad del color y el complejo colorido no tiene la misma absorción
por lo que produce una señal distinta a la inicial y existe pérdida.

12
Otra situación a considerar por pérdida es que el etanol presenta una elevada presión de vapor, en donde es
parcialmente miscible y la presión atmosférica es relativamente baja. Otras formas para determinar etanol son:

 Cromatografía de gases

 Micro difusión

 Determinación por picnómetro

 Determinación enzimática (Alcohol Deshidrogenasa)

 Titulación

Si bien los métodos sugeridos requieren del tratamiento previo el que podría presentar mayores inconvenientes
sería la determinación por medio de una titulación, ya que presenta “interferencias” en el método, al no ser
específico para un sola especie química y en general para un cambio de vire solo depende el pH.

Asimismo, la relación de productos oxidados entre productos reducidos es de 0.276 (donde el producto oxidado
es CO2 y el reducido es el CH3CH2OH), lo que significa que existe mayor cantidad de productos reducidos que de
oxidados y a sabiendas de que para determinar la cantidad de CO2 se realizó por un método gravimétrico,
podemos pensar que de entrada, el CO2 no se capturó totalmente en el NaOH acuoso y por consiguiente en los
lavados no se encontraría el CO2 en su totalidad, también podemos considerar como una pérdida con sólo
destapar el matraz microfermentador ya que el gas contenido en este es CO2. Sabiendo que se trata de un
método gravimétrico, también se puede considerar que hay pérdidas al momento de realizar los lavados, ya que
pudieran quedar trazas de BaCO3 en el matraz y obviamente estas no son cuantificadas.

Viendo las anteriores situaciones podemos considerar que la relación entre la cantidad de productos oxidados y
reducidos (O/R) no es cercana a uno debido a que durante las determinaciones para cada producto, pudieron
haber tenido pérdidas de producto en la determinación de la relación, y podemos corroborarlo con nuestro por
ciento de carbono recuperado.

Notamos que la cantidad de carbono recuperado en función de la glucosa suministrada a Saccharomyces

cerevisiae, existe un rendimiento del 77.7 %, cuando las pérdidas de CO2 permitidas están en un intervalo del
87-95%. Por lo que en cuanto a recuperación de CO2 podemos decir que fue deficiente.

Tomando en cuenta, la citas bibliográficas y los antecedentes, podemos dar análisis de la pérdida de producto
que existió o que delimitó la cuantificación total de los productos en medida de la glucosa que se añadió para
obtener etanol y dióxido de carbono y deducir que las variaciones presentadas por la relación de los productos
oxidados y reducidos se debió meramente a errores aleatorios tanto del método como de los analistas, sabiendo
que Saccharomyces cerevisiae se encontraba en las condiciones óptimas para llevar a cabo la fermentación.

Conclusiones.

 El índice O/R fue de un valor de 0.276 donde el producto oxidado es CO2 y el reducido es el CH 3CH2OH
por lo que no se llevó a cabo un flujo de carbonos correspondiente únicamente a la fermentación
alcohólica.
 La recuperación de CO2 fue deficiente al tener un rendimiento de 77.7% con respecto a los intervalos
establecidos de 87-95%
13
  Los errores en la fermentación representados en el balance de fermentación pudieron verse en su
mayoría por errores de los analistas al formarse más producto reducido durante la fermentación.
 La fermentación por Saccharomyces cerevisiae debido al análisis de sus productos fue una fermentación
alcohólica.
 Para un mejor balance de fermentación para la cepa utilizada S. cerevisiae es necesario utilizar equipos
para evitar su pérdida de gas y un equipo que se encuentre estable para su óptimo manejo.

Referencias bibliográficas.

I. Parés I Farras, R., y et. al., “Bioquímica de los microorganismos”. Editorial Reverté, España. 1997. pp. 79-
81.
II. Brock J.” Biología de los microorganismos”.10° ed., Editorial Pearson Prentice Hall, pp. 585-587.
III. Voet D. Voet J. G. “Bioquímica”. 3ra ed., Editorial John Wiley and Sons. 2004., pp. 343, 476-480.
IV. Lehninger A.L., “Principios de bioquímica”., 4ta ed., Editorial Omega. 2005., Pp.: 538-542.
V. Rose. A. H., “Microbiología química”., Editorial Alhambra., Pp.: 242-49
VI. Togores. J.H., “Tratado de enología”., 2da ed., Editorial Mundi-Prens. 2010., Pp.: 569.
VII. Schlegel. H.G., “Microbiología general”, Nueva ed., Editorial Omega., 1997., Pp.: 292, 295-2966, 300.
VIII. Mercedes Ferreyra, María., 2006, Tesis Doctoral, “Estudio del proceso biotecnológico para la elaboración
de una bebida alcohólica a partir de jugo de naranja”, Facultad de Ciencias de la Alimentación. UNER,
Universidad Politécnica de Valencia. Departamento de Tecnología de alimentos.
IX. Ralph S. Becker y Wayre G. Ventwort, “Química General”, Ed. Reverté. Madrid.1997, pp. 521-523.
X. O. Soto Cruz, J. Páez Lerma, Art. “Balances en procesos de fermentación: Análisis de consistencia y flujos
metabólicos”. Revista mexicana de ingeniera química Vol. 4. México, 2004, pp. 59.
XI. Vázquez, H. J., y Dacosta O. “Fermentación alcohólica: Una opción para la producción de energía
renovable a partir de desechos agrícolas”, UAM Unidad Azcapotzalco, Departamento de Sistemas,
México, Mayo 2007.
XII. Thomas M. Devlin, 2004, “Bioquímica: libro de aplicaciones clínicas”, 4ta edición. Ed. Reverte España,
pág. 657-659

14