IDENTIFICACION CUALITATIVA DE MONOSACARIDOS Y

DISACARIDOS
Vicente Estrada, Iván Corena, Kevin Castillo

1
universidad de sucre; facultad de ingeniería; tercer semestre ingeniería agroindustrial;
laboratorio Bioquímica; grupo 1; puesto 5; Sincelejo/Sucre;
(24/09/2019)

RESUMEN
Las propiedades bioquímicas y las reacciones características de las diferentes biomoléculas
dependen de los distintos grupos funcionales que las constituyen. En esta práctica se
analizó una de las principales macromoléculas (Carbohidratos) y se realizaron algunas
reacciones químicas específicas que permitió la identificación de dicho grupo. Para su
identificación se procedió a realizar primero la prueba de Molisch, seguida de la prueba de
Benedict, Fehling, Seliwanoff, Tollens y por último la de ensayo de Bial para las cuales se
utilizaron soluciones de glucosa, fructosa, sacarosa, ribosa, agua y extracto de jugo el cual
era de Pera. Después se analizaron los procedimientos y se tomaron los resultados
obtenidos por experimento. El objetivo fue identificar cualitativamente monosacáridos y
disacáridos.

PALABRAS CLAVE: Molisch, Benedict, Seliwanoff, Bial, Tollens, Glucosa,

Fructosa, Sacarosa, Ribosa, Agua y Extracto de jugo de Pera.

INTRODUCCIÓN
Los carbohidratos hacen presencia en los diferentes sistemas biológicos como integrantes
estructurales y se pueden metabolizar o almacenar para la obtención de energía química. La
estructura química indica presencia de carbono, hidrogeno y oxígeno en una relación de
1:2:1; además, se puede representar en su fórmula química general (CH2O)n y se
caracterizan por ser moléculas con el grupo funcional aldehídos o cetonas. Los
carbohidratos se clasifican como monosacáridos y sus derivados, oligosacáridos y
polisacáridos, los cuales pueden ser identificados cualitativamente por diferentes ensayos y
determinar su poder reductor por el grupo carbonilo que tiene en su molécula. Entre los
métodos cualitativos se puede citar las pruebas de Fehling, Tollens, Barfoed, Seliwanoff,
Bial (Orcinol-HCl), Lugol, Osazonas, Molisch, etc.
 OBJETIVOS

General:
-Identificar cualitativamente monosacáridos y disacáridos.
Específicos:
-Aplicar pruebas de identificación de monosacáridos.
-Identificar las propiedades del azúcar a través de la interpretación de los resultados.

METODOLOGIA
Para la identificación cualitativa de monosacáridos y disacáridos se realizan varias pruebas
las cuales son:

1) Prueba de Molisch:
 Tubo de ensayo #1: Glucosa 1ml + 0,2ml de Molisch + 1ml de H2SO4.
 Tubo de ensayo #2: Sacarosa 1ml + 0,2ml de Molisch + 1ml de H2SO4.
 Tubo de ensayo #3: Fructosa 1ml + 0,2ml de Molisch + 1ml de H2SO4.
 Tubo de ensayo #4: Extracto de jugo (pera) 1ml + 0,2ml de Molisch + 1ml de
H2SO4.
 Tubo de ensayo #5: Agua 1ml + 0,2ml de Molisch + 1ml de H2SO4.
2) Ensaya de Benedict:
 Tubo de ensayo #1: Glucosa 1ml + 0.5 ml de Benedict + Calentar en baño de maría
a ebullición durante 3 minutos.
 Tubo de ensayo #2: Fructosa 1ml + 0.5 ml de Benedict + Calentar en baño de maría
a ebullición durante 3 minutos.
 Tubo de ensayo #3: Sacarosa 1ml + 0.5 ml de Benedict + Calentar en baño de maría
a ebullición durante 3 minutos.
 Tubo de ensayo #4: Extracto de jugo (pera) 1ml + 0.5 ml de Benedict + Calentar en
baño de maría a ebullición durante 3 minutos.
 Tubo de ensayo #5: Agua 1ml + 0.5 ml de Benedict + Calentar en baño de maría a
ebullición durante 3 minutos.
3) Prueba de Fehling:
 Tubo de ensayo #1: Glucosa 1ml + 0.5 ml de Fehling A y B + Calentar en baño de
maría a ebullición durante 3 minutos.
 Tubo de ensayo #2: Fructosa 1ml + 0.5 ml de Fehling A y B + Calentar en baño de
maría a ebullición durante 3 minutos.
 Tubo de ensayo #3: Sacarosa 1ml + 0.5 ml de Fehling A y B + Calentar en baño de
maría a ebullición durante 3 minutos.
 Tubo de ensayo #4: Extracto de jugo (pera) 1ml + 0.5 ml de Fehling A y B +
Calentar en baño de maría a ebullición durante 3 minutos.
 Tubo de ensayo #5: Agua 1ml + 0.5 ml de Fehling A y B + Calentar en baño de
maría a ebullición durante 3 minutos.
4) Ensayo de Seliwanoff:
 Tubo de ensayo #1: Glucosa 0.5ml + 0.5ml de Seliwanoff + Calentar en baño de
maría a ebullición durante 2 minutos.
 Tubo de ensayo #2: Fructosa 0.5ml + 0.5ml de Seliwanoff + Calentar en baño de
maría a ebullición durante 2 minutos.
 Tubo de ensayo #3: Sacarosa 0.5ml + 0.5ml de Seliwanoff + Calentar en baño de
maría a ebullición durante 2 minutos.
 Tubo de ensayo #4: Extracto de jugo (pera) 1ml + 0.5ml de Seliwanoff + Calentar
en baño de maría a ebullición durante 2 minutos.
 Tubo de ensayo #5: Agua 0.5ml + 0.5ml de Seliwanoff + Calentar en baño de maría
a ebullición durante 2 minutos.
5) Reactivo de Tollens:
 Tubo de ensayo #1: 2ml de Tollens + Glucosa 5 a 10 gotas + Calentar en baño de
maría a 50 °C o 60°C y agitar durante 5 a 10 minutos.
 Tubo de ensayo #2: 2ml de Tollens + Fructosa 5 a 10 gotas + Calentar en baño de
maría a 50 °C o 60°C y agitar durante 5 a 10 minutos.
 Tubo de ensayo #3: 2ml de Tollens + Sacarosa 5 a 10 gotas + Calentar en baño de
maría a 50 °C o 60°C y agitar durante 5 a 10 minutos.
 Tubo de ensayo #4: 2ml de Tollens + Extracto de jugo (pera) 5 a 10 gotas +
Calentar en baño de maría a 50 °C o 60°C y agitar durante 5 a 10 minutos.
 Tubo de ensayo #5: 2ml de Tollens + Agua 5 a 10 gotas + Calentar en baño de
maría a 50 °C o 60°C y agitar durante 5 a 10 minutos.
6) Ensayo de Bial:
 Tubo de ensayo #1: Glucosa 1ml + 2.0ml del reactivo de Bial + Calentar en baño de
maría a ebullición.
 Tubo de ensayo #2: Fructosa 1ml + 2.0ml del reactivo de Bial + Calentar en baño de
maría a ebullición.
 Tubo de ensayo #3: Ribosa 1ml + 2.0ml del reactivo de Bial + Calentar en baño de
maría a ebullición.

RESULTADOS

Extracto
PRUEBA Glucosa Sacarosa Fructosa de jugo Agua Ribosa
(pera)
Molisch positivo positivo positivo positivo negativo ---------

Benedict positivo negativo negativo Positivo negativo ---------

Fehling positivo negativo positivo negativo negativo ---------

Seliwanoff negativo positivo positivo positivo negativo ---------

Tollens positivo negativo positivo negativo negativo ---------

Bial positivo ----------- negativo ---------- ---------- positivo

 ANALISIS DE RESULTADOS
Molisch: El objetivo principal de la prueba de Molisch es identificar si las muestras de
glucosa, fructosa, sacarosa, extracto de jugo y agua poseen carbohidratos en su estructura.
La reacción de Molisch es una reacción que tiñe cualquier carbohidrato presente en una
disolución, La presencia de carbohidratos en una muestra, se pone de manifiesto por la
reacción de Molisch que a cierto punto es la reacción universal para cualquier carbohidrato.
A continuación, podemos observar la foto tomada en laboratorio:

Benedict: En el ensayo de Benedict los carbohidratos utilizados debían presentar un

precipitado amarillo o anaranjado rojizo para así identificar la presencia de monosacáridos
y disacáridos. A continuación, las fotos tomadas en laboratorio de esta prueba:
Fehling: Para la identificación de monosacáridos y disacáridos en esta prueba es necesario
que los carbohidratos utilizados tornen a un color rojizo, aunque algunos tornaron a marrón
con un tono rojo como la glucosa y la fructosa.

Seliwanoff: Lo mismo para esta prueba los carbohidratos utilizados tenían que tornar a
coloración roja para identificar la presencia de monosacáridos y disacáridos, los únicos que
tornaron a coloración roja fueron el extracto del jugo de pera, la fructosa y la sacarosa una
miguita.
Tollens: Este reactivo se prepara por adición del hidróxido de amonio a una solución del
hidróxido de plata, la plata y el hidróxido de amonio forman un compuesto (AgCuH3)2OH,
plata diamino que reacciona con el aldehído. El agente oxidante es el ion Ag, esta reacción
provocada sobre la superficie de un cristal permite la formación de una placa metálica que
convierte la lámina de cristal en un espejo, es decir la glucosa y la fructosa reaccionan con
Tollens debido a que los azucares contienen grupos hidroxilos en su molécula, lo cual hace
que se forme el color plata tipo espejo. Y la sacarosa cambio notablemente pero no obtuvo
el espejo de plata, al igual que el extracto de jugo y el agua ni se diga.

Bial: En el ensayo de Bial los carbohidratos deben tomar un color azul verdoso para que
estos den positivo obteniendo así la ribosa como positiva y la glucosa, aunque esta obtuvo
un color más verde, pero vale como positivo.
 CONCLUSIONES
En esta práctica de identificación cualitativa de monosacáridos y disacáridos se llegó a
conocer que es de gran importancia la realización de cada una de estas pruebas para llegar a
determinar la presencia de carbohidratos.
Es fundamental saber sobre el tema de carbohidratos ya que estos contribuyen en gran parte
a la estabilidad del organismo y así saber que sustancias pueden ingerir ciertos cuerpos y
cuales las pueden rechazar.

ANEXOS
CUESTIONARIO

¿Cuál es el fundamento de cada uno de los ensayos utilizados para la identificación de

carbohidratos?

1) PRUEBA DE MOLISCH
La prueba de Molisch permite detectar la presencia de hidratos de carbono en una muestra;
se utiliza el ácido sulfúrico en reacción de deshidratación (del monosacárido) y el alfa-
naftol en reacción de condensación del furfural. Al aplicar esta prueba cualitativa, todos los
carbohidratos producen un complejo morado; por eso se dice que es una prueba general.

2) ENSAYO DE BENEDICT
El ensayo de Benedict se fundamenta en la reacción del azúcar reductor, que ocurre al
oxidarse el azúcar. El reactivo de Benedict es una solución estable que contiene sulfato de
cobre, carbonato de sodio y citrato de sodio. El carbonato de sodio mantiene el pH del
medio alcalino (alrededor de 10). El citrato de sodio actúa como secuestrante del presente
en el reactivo, para prevenir la remoción de este ion por precipitación. El citrato forma con
el cobre un complejo azul. En la preparación del reactivo de Benedict, primero se observa
una precipitación verde, que es hidróxido de cobre, el cual se encuentra en equilibrio con
los iones de cobre e hidroxilo, estoces se prosigue a disociar el hidróxido de cobre por la
presencia del citrato, el precipitado se disuelve después de agitar y la solución se torna de
color azul.
3) PRUEBA DE FEHLING
La prueba de Fehling se basa en las propiedades de la reducción de los monosacáridos y
disacáridos, que a su vez depende de un grupo cetona o aldehídos libres. Esta prueba se
realizar mediante la adición una solución de carbohidratos a una mescla de Fehling A
(KOH) y reactivo de Fehling B (Na-k). Cuando la solución alcalina de hidrogeno cúprico se
calienta en la presencia de un azúcar reductor, que se reduce a oxido cúprico de color
amarillo o rojo. La prueba de Fehling reacciona de manera positiva por monosacáridos
(glucosa, fructosa, galactosa) y por disacáridos (lactosa, maltosa) que tienen un grupo
cetona o aldehído libre.

4) ENSAYO DE SELIWANOFF
Esta prueba es específica para las cetosas. Las cetosas se deshidratan más rápidamente que
las aldosas, dando furfurales. Estos se condensan con el resorcinol produciendo un
complejo coloreado. Si el tiempo de ebullición se prolonga, puede dar también positivo
para otros azúcares.

5) REACTIVO DE TOLLENS
El reactivo de Tollens se usa para identificar aldehídos, este consiste en un ion complejo
que se forma entre el nitrilo de plata y el amoniaco mediante la siguiente reacción (sin
equilibrar):

Los aldehídos reaccionan con el reactivo de Tollens y se observa la formación de un espejo

de plata; como esta reacción se realiza en medio alcalino (NaOH), también se forma la sal
del ácido correspondiente.

6) ENSAYO DE BIAL
El reactivo de Bial contiene orcinol en ácido clorhídrico, el cual forma complejos de
coloración sólo con las pentosas. La prueba de Bial es una reacción característica de
pentosas y está basada en la formación de furfural a partir de pentosas y posterior
condensación con el floroglucinol dando un color rojo verdoso.

¿Por qué se considera reductor un azúcar?

Por la presencia de un grupo carbonilo libre sea cetona (-CO-) o aldehído (-CHO), lo cual
permite a los monosacáridos y polisacáridos actuar como azúcares reductores.

Escriba la relación de cada una de las pruebas efectuadas en las prácticas.

La relación que tienen las pruebas realizadas en laboratorio (prueba de Molisch, prueba de
Fehling, Ensayo de Seliwanoff, reactivo de Tollens, ensayo de Bial) es que estas pruebas
son para identificación cualitativa de carbohidratos, la prueba de Molisch es para el
reconocimiento general de carbohidratos, la prueba de Fehling permite el reconocimiento
de carbohidratos reductores, el ensayo de Seliwanoff es una reacción para diferenciar
cetosas de aldosas, y el reactivo de Tollens es para identificar aldosas de cetosas, La prueba
de Bial es una reacción característica de pentosas, todas estas pruebas nos ayudan a
identificar carbohidratos y tipos de carbohidratos.

Escriba las reacciones siguientes:

1. Oxidación del grupo carbonilo para producir azucares ácidos.

2. Reducción del grupo carbonilo y/o –OH para producir azúcares alcoholes.
 3. Sustitución de uno o más –OH por otros grupos químicos. H, amino NH2,
fosfoazúcares, sulfoazúcares.

Comparación de disacáridos más importantes: sacarosa, lactosa, maltosa, trealosa;

teniendo en cuenta todas las características estudiadas previamente.

 SACAROSA:
 LACTOSA:

 MALTOSA:

 TREALOSA:

BIBLIOGRAFIAS

 https://sites.google.com/site/bioquia9/reaccion-de-molish
 https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica-
i/carbohidratos/reaccion-de-molish
 http://www.quimicaorganica.net/ensayos-fehling-tollens.html
 https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica-
i/carbohidratos/reaccion-de-seliwanof