PRECIPITACIÓN CON SULFATO DE AMONIO.

Equipo________________

Anexe a este cuestionario, I) Introducción e Hipótesis, II) Resultados: Deben de

contener:
a) Una tabla con las concentraciones de sulfato de amonio utilizadas, las
absorbencias medidas cada 15 segundos de cada determinación de la actividad de
LDH de cada una de las fracciones obtenidas,
b) Una tabla con el cálculo de las pendientes de las curvas obtenidas y con la
cantidad de proteína medida a una absorbencia de 280 nm.
c) Las gráficas de los datos de las actividades de LDH de cada fracción obtenida,
las gráficas deben de contener unidades en sus ejes.
d) Una tabla de volúmenes de cada fracción, la actividad total y proteína total.
De acuerdo a los RESULTADOS en la purificación de la enzima Lactato Deshidrogenasa
de pechuga de pollo, que usted obtuvo y comparándolos con los del grupo, conteste
las siguientes preguntas:

1.- Con respecto a los resultados del grupo, ¿cuál es la concentración de sulfato de amonio a la
cual se inicia la precipitación de la actividad de la LDH? Discuta el por qué de su respuesta.

2.-¿Qué dice acerca de la LDH y de las proteínas que se encuentran en el homogenado el que hayan
iniciado su precipitación a determinado porcentaje de sulfato de amonio?,

3.- De acuerdo a sus resultados, al repetir la purificación de Lactato Deshidrogenasa de pechuga de

pollo por precipitación con sulfato de amonio, ¿haría algún cambio en su metodología? Justifique
claramente el por qué tanto si su respuesta es sí como no.

4.- ¿Cuál es el resultado que obtendría con el cambio propuesto por usted?

5.- Comparando sus resultados con los resultados del grupo, ¿considera usted que encontró la
concentración a la cual se precipita la mayor parte de la actividad de la LDH ó a la que está en mayor
estado de pureza en el sobrenadante? Fundamente su repuesta

6.-. Los datos obtenidos por usted, ¿confirman su hipótesis? Fundamente su respuesta tanto si la
confirman ó la prueban equivocada.

7- ¿Qué fue lo que aprendió en la realización de esta práctica?