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MATERIALES Y MÉTODOS
ANIMALES DE EXPERIMENTACIÓN
Veintiún conejos blancos machos de Nueva Zelandia fueron utilizados en este estudio. En
promedio, fueron de 4 meses de edad, y su peso promedio fue de 3,5 kg. Los animales
se verificaron para el cierre de la placa de crecimiento. Los animales fueron alojados
individualmente en cabinas de metal con una temperatura ambiente de 21 ° C y con 50% humedad
del aire de acuerdo con las directrices de la Unión Europea directrices para el cuidado y el uso de
animales de laboratorio (Directiva del Consejo de noviembre de 1986, 86/609/cee). El sistema de
alumbrado artificial fue utilizada para mantener un normal ritmo de día / noche. Ellos fueron
alimentados a C.15 extralaboratorio dieta (Pietrement) que contenía 16,2% de proteína cruda,
11,9% de fibra de celulosa en bruto, el 10,5% de agua, y 2,9% de materia grasa. Tres conejos no
operados, fueron utilizados como controles, y los 18 restantes eran animales divididos en 2 grupos
experimentales (A y B) de acuerdo con los procedimientos de desplazamiento de disco.
PROTOCOLOS QUIRURGICOS Y EXPERIMENTALES
Todos los conejos se pesaron antes de la cirugía y se pesaba en el postoperatorio para cada día
del estudio experimental. Cada conejo fue anestesiado por inyección intramuscular de clorhidrato
de ketamina (2 mL / kg) y Domitor (Farmos) (0,15 mL / kg). La región preauricular se le rasuró entre
el meato externo y el ángulo lateral del ojo y los animales fueron operados para exponer la sutura
cigomatoescamosa. Una incisión arciforme (con sus revestimientos laterales cóncavos izquierdos
anterosuperiormente) se hizo para contactar al hueso, de 1 cm detrás de los bordes orbitales
laterales e inferior y el proceso cigomático. Los tejidos blandos quedaron reflejados para exponer la
pared ósea lateral de la ATM.
La cápsula articular fue incidida a lo largo del borde superior del arco cigomático para identificar la
escotadura cigomatoescamosa. Una osteoplastia en forma de V se realizó con una pieza de mano
dental de baja irrigación para obtener acceso a la unión del disco lateral adjunto al cóndilo. La
parte mas baja del proceso cigomático también fue resecado para facilitar el procedimiento
quirúrgico, y un pequeño agujero se hizo en el borde inferior del borde orbital
para fijar el dispositivo de tracción. La sutura se pasó de la cavidad orbital a la fosa temporal
por debajo del proceso cigomático lateralmente a la articulación. A continuación, la mandíbula fue
empujado posteriormente para revelar el polo lateral, y la sutura se pasó de la fosa temporal a la
cavidad orbital entre la parte lateral del disco y el cóndilo, sobre la unión disco-cóndilo.Los 2
filamentos corren bajo el proceso cigomático involucrados en la cavidad orbital y retorcido juntos
(Figs. 1a a 1d).
En 9 conejos (grupo A), una sutura reabsorbible (Monocryl, Ethicon) fue utilizada para tirar y
desplazar el disco anteriormente. En los otros 9 animales (grupo B), una sutura no reabsorbible
conectado a un resorte de niquel titanium se utilizó para desplazar el disco. El resorte fue alargado
para aplicar una tensión de 1 a N en la unión lateral del cuando los dientes estaban en
oclusión. En los 18 especímenes, la parte lateral del disco fue sometido a una tensión orientada
hacia adelante y abajo. Como consecuencia de ello, el disco rotó en el plano axial en torno a su
unión medial y fue mas anteriormente desplazada lateralmente que mediáticamente. El sitio
quirúrgico se cerró desde adentro con sutura 4.0 vicryl. La articulación contralateral conjunta se
dejo intactos o presentado un simulacro de intervención quirúrgica. Una inyección de Rilexine
(Lectura) (25 mg / kg) se administró después de cada cirugía.
La fijación de tejidos y procedimientos
Los animales fueron asesinados por una sobredosis de Dolethal (Parke-Davis) (1,5 ml / kg).
Algunos de los animales de cada grupo fueron asesinados a las 12 semanas (n = 4) y algunos (n =
5) a las 24 semanas. Las cabezas eran peladas, y fijadas por 3 semanas en el 10% de formalina.
El ATMs fueron removidos en bloque, preparadas para una descalcificación histológica, y
embebidos en metacrilato de metilo de acuerdo con Lebeau et al.14 Después de la polimerización,
los bloques se radiografiaron y orientadas perpendicular al eje condilar transversal antes de que
fueran seccionadas. Las secciones sagitales 750 - μ m de espesor se cortaron con una sierra de
Micrótomo (Leica 1600). Cada sección transversal se adelgazo a 300 - μ m de espesor con una
máquina de moler (Exakt), y pulida a 0,5 μ m por una mezcla de alúmina, montado sobre un
portaobjetos de vidrio acrílico, y teñidas con azul Stevenol y picrofuchsin. Los bordes lateral y
medial de los polos condilar se han descartado de examen para eliminar los artefactos de corte
tangencial.
Resultados
No se observó ningún problema postoperatorio en los 2 grupos de conejos después de la cirugía.
Una dieta blanda era preparada, pero los conejos regresaron a su dieta normal
dieta en plazo de 24 horas. No hubo pérdida de peso durante el experimento, y todos los animales
aumentaron su peso de 600 g a 1.000 g, dependiendo de la duración del periodo experimental..
Los cambios de la ATM inducidos por la rotación del disco fueron analizados del medio a la parte
lateral de la articulación en los 2 grupos. Dado que no hubo evidentes
diferencias entre la articulación operada y la articulación contralateral operada, el término
"articulación opuesta"se utilizará en lo sucesivo, para referirse a ambos tipos de articulaciones
contralaterales.
El disco correcto
Grupo Control. En el grupo control, el disco desplazado muestra una forma típica de arqueado
observado en secciones sagitales, con una zona intermedia correctamente interpuesto
funcional entre las superficies del cartílago (Fig 2). La escasez de células precondrocitos podía
distinguirse dentro de la red colagénica del disco.
Grupo A. En este grupo, la anatomía macroscópica de la articulación fue preservada y la
congruencia entre el disco y las superficies articulares fue mantenida. En la parte lateral de la
articulación, la banda posterior fue ligeramente cuneiforme entre las areas del cartílago funcional,
mientras que la zona intermedia parece más larga y más delgada que mediáticamente. Este
entrampamiento de la parte posterior de banda entre las superficies articulares puede ser
observados en sección secuencial sagital y el incremento de las rebanadas intermedias a las
laterales( figs 3 a y 3b)
Grupo B. En todas las articulaciones experimentales, la cantidad de desplazamientos de disco
varió del 1 de conejo a otro, pero siempre fue más pronunciada en el parte lateral de cada
articulación. En algunos animales, el disco y el cóndilo se posicionaron más anteriormente
que los del grupo control.
Desde la Anatomía macroscópica del disco se vio afectada más o menos según la cantidad de
desplazamiento, el grupo B se dividió en 2 subgrupos basados sobre este criterio. Observación de
secciones histológicas mostró la interposición de la zona bilaminar para el grupo con gran
desplazamiento y la interposición de la banda posterior del disco para la grupo con
desplazamiento pequeño
Grupo de los desplazamientos pequeños. En la parte lateral de la articulación, el espesor de la
banda posterior fue mantenida, dando lugar a una falta de contacto entre las superficies articulares
y el disco (Fig. 4a). Sin embargo, en el área de la cuña a, donde la tensión fue concentrada ,la
banda posterior exhibía espesamiento de sus fibras colágenas y la diferenciación de la células
condrocíticas en condrocitos. En esta área, las tensiones mecánicas resultó en un choque de la
banda posterior en el cartílago articular como consecuencia del desplazamiento discal. El
desarrollo del disco ocurrió dentro el receso anterior de los compartimentos superior e inferior. Por
el contrario, las sección más medial demostró una mejor congruencia de la articulación
relacionados con un aplanamiento de la banda posterior ocurriendo progresivamente desde la
parte lateral a la parte medial (Figs. 4b a 4d). La relación entre el disco y los huesos de la
articulación fue subnormal-, pero la persistencia de un doblez anterior en el compartimiento
superior prueba el desplazamiento del disco.
La membrana sinovial se convirtió en hiperplásicas en el receso anterior de los compartimentos
sinoviales. La hiperplasia de las células sinoviales parecía extenderse sobre la superficie articular,
y el aumento de la vascularidad podían ser vistas (Figs. 5a y 5b). En todos los conejos
experimentales, un gradiente negativo de la densidad celular fue observada en la parte posterior
de la banda de lateral a medial. Las células condrocíticas fueron dispersadas entre las fibras
colágenas en la sección medial y la agrupación de condrocitos apareció en la sección lateral,
donde el engrosamiento de las fibras de colágeno se produjo (Figs 6 a 6b).
Grupo de los Grandes desplazamientos En este grupo, los cambios del tejido fino eran más
pronunciados, con un patrón de alteraciones de lateral a intermedio similar a vistos en el grupo de
los pequeños desplazamientos. La carencia de la congruencia entre las superficies articulares era
obvio, según lo demostrado en la fig 7a.Esto era asociado con (1) la interposición de la zona
bilaminar zona entre el área funcional, (2) la compresión de la banda posterior, y (3) de la
extensión de la zona intermedia y el aplanamiento de banda anterior. El acontecimiento más
característico concerniente a la zona bilaminar, con una pérdida de tejido fino graso y
espesamiento de las fibras sagitales de colágeno que fueron similar a ésos observados en un
zona intermedia normal.
En las secciones intermedias, el disco perdió su típica forma arqueada, pero su congruencia con
las partes del hueso piezas incremento progresivamente cuando se comparó a las secciones más
laterales (Figs 7b).La morfología de los bordes de la banda posterior con la zona intermedia y la
zona bilaminar desaparecieron, pero el área se podía identificar por su alta densidad de las fibras
de colágeno. En 1 conejo, islotes de condrocitos y las áreas mineralizadas fueron observados en
zona bilaminar comprimida, sobre todo en la sección lateral (Fig 8).
Articulaciones opuestas. Las articulaciones opuestas a la ATMs experimentales no era
idénticas a las articulaciones normales. Sin importar el dispositivo mecánico empleado para
desplazar el disco contralateral, un sujetador definido de la zona intermedia del disco fue
observado, mientras que la congruencia entre las superficies articulares seguía siendo óptimo (Fig
9a).Cuando era un resorte utilizado en la articulación experimental, el disco opuesto aparecía más
de largo, con un adelgazamiento de la zona intermedia, y el cóndilo fue desplazados ligeramente
posteriormente en comparación a la articulación de control (Fig9b).
Grupo B. En todos los sectores, el esbozo del cartílago fue regular, cuando el disco expuesto
menor desplazamiento o remodelación, pero en los casos de desplazamientos marcados, la
superficie era irregular y muy incongruente. Como resultado de la rotación del disco, las
alteraciones marcadas del cartílago se observaron en la parte lateral de la articulación, mientras
que en todos los animales operados a, primaria se plantea cambios en la parte medial.
Grupo de los desplazamientos pequeños. En las secciones laterales, el espesor del cartílago
varía en diferentes zonas, con un aproximado de transición en los bordes de la
zonas sobreestresadas enfrentándose al desplazamiento de la banda posterior y un mayor
espesor uniforme en la sección medial secciones en comparación con el grupo control.
Cambios progresivos en el cartílago puede ser remontados desde medial a lateral en cada
articulación por la comparación de 4 a 5 secciones seriadas (Figs 12 a a 12d). En la primera
sección (Fig. 12a), el disco fue ligeramente desplazado y las zonas articulares se enfrenta a la
banda posterior exhibiendo un aumento en el componente fibroso. La capa fibrosa contiene
gruesa capa de fibras de colágeno , orientadas sagitalmente, con sólo ocasionales fibroblastos.
Algunas fibras colágenas alcanzaron a las capas subyacentes a través de la proliferación y a las
capas condroblasticas. En la siguiente sección (Fig 12b), el proceso de fibrilación aumento en la
capa fibrosa y también en el interior de la capas inferiores, donde el paquete vertical de colágeno
dividió la capa condroblastica y separándola en columna de condrocitoss y llegó al hueso
subcondreal. Las células precondroblastica disminuyeron pero la morfología celular del condrocito
se mantuvo. En la siguiente sección (Fig. 12c), la capa fibrosa dentro de la matriz del cartílago
ampliado y se organizó como líneas curvadas alrededor de las principales poblaciónes celulares,
que era compuesto por condrocitos hipertróficos En la l sección final (Fig. 12d), la capa articular
estaba conectado y anclado en el hueso subcondreal por haces arciformes de fibras colágenas
gruesas que cruzan la matriz de cartílago entre menos numerosas agrupaciones de condrocitos.
Los cambios histológicos progresivos previamente descritos para el cartílago condilar también
podría ser observadas en el cartílago articular que cubre el eminencia.No obstante, teniendo en
cuenta todas las secciones, se produjo a menudo un cambio hacia la alteración en el estado
estructural de la cóndilo a alcartilago temporal Como se muestra en la Fig 13, la organización de
cartílago temporal fue completamente perdido en las secciones laterales; el cartílago desapareció y
dejó una capa fibrosa gruesa.
Grupo de los desplazamientos grandes. Las alteraciones del cartílago fueron más pronunciadas,
con notable engrosamiento de la zona que hace frente a la zona bilaminar interpuesta, que se
convirtió en un "neodisc" con fibras colágenas gruesas orientadas horizontalmente,Alrededor el
contornos del hueso formado fueron siempre modificados en este grupo, con forma local de V
defectos óseos en torno a paquetes verticales de colágeno, tejido de reacción ósea en el cóndilo y
el tubérculo articular, división horizontal y la necrosis de condrocitos (Figs 14 a a 14 b)
Las articulaciones opuestas. El tejidos finos del cartílago revelaron un engrosamiento de la
capa fibrosa con engrosamiento sagital de las fibras colágenas. La proliferación y las capas
condroblasticas contenían fibras verticales y horizontales de colágeno que rodean las
agrupaciones de condrocitos. Estas fibras llegaron al hueso subcondreal (Fig 15).
Discusión
Varios modelos de conejo se han propuesto para el estudio histológico de los cambios asociados
con la disfunción de la ATM , especialmente los desplazamientos anteriores del disco sin
reducción en la articulación craneomandibular del conejo. Tallents et al7 indujo el desplazamiento
del disco por transection de ambas partes temporal y condilar de la parte posterior de medial a
lateral,y luego empujó el disco anteriormente entre el cóndilo y la eminencia articular. Ali y
Sharawy8 separaron todas las uniones discales, excepto las uniones posteriores, que fueron
dejadas intactas. A continuación, el disco propiamente fue tirado anteriormente
y fijado al arco cigomático con una sutura. La posición de la zona bilaminar entre el cóndilo y la
eminencia articular se utilizó como referencia de posición en este modelo. El desplazamiento
agudo del disco sin reducción fue creado, y la fuerte sobrecarga de la zona bilaminar explicó los
primeros cambios histopatológicos de las articulaciones, que fueron similares a las observadas en
osteoartrosis. Por último, Mills et al9 propuso otra técnica para estudiar la evolución de los cambios
patológicos del desplazamiento del disco en la ATM de los conejos. Las uniones escamosas del
disco fueron identificadas y cortadas para desplazar el disco anteriormente. El disco fue
preparado adelante y hacia abajo para el cóndilo y unido a través de una sutura al proceso
condilar. Esta última técnica fue menos destructiva, pero el disco era incapaz de moverse sobre el
cóndilo.
En el presente estudio, hemos propuesto un nuevo conejo modelo se centró especialmente en la
preservación de la anatomía de ATM y que imiten el desplazamiento parcial del disco con
reducción, que es conocido por ser el primer paso en el transtorno interior .4, 13 Teóricamente,el
anclaje anterior del dispositivo mecánico dentro del borde inferior de la órbita permitió el
movimiento del disco sobre el cóndilo durante la traslación mandibular cuando el resorte llego a
ser menos activo. No obstante, una dificultad importante era controlar la tensión puesta en el
disco, ya que una gran variabilidad en los desplazamientos se produjeron en este estudio. Todavía
este inconveniente fue en parte contrarrestada por la ventaja del disco de rotación iniciada por este
procedimiento. El movimiento de rotación del disco sobre el cóndilo en el plano axial determinó
positivamente gradiente de estrés de la parte medial a lateral de la articulacion, ya que la banda
posterior fue más anteriormente desplazadas lateralmente que mediánamente.
Dibujo
Fig 1a Aspecto lateral de la ATM derecha del conejo. El proceso cigomatoescamosa abarca el
complejo cóndilo-disco y el tubérculo articular.
Dibujo
Fig 1b La técnica quirúrgica requería de osteotomía anterior y superior para obtener acceso al
disco y un pequeño agujero en la borde inferior orbital del hueso cigomático para fijar el dispositivo
de tracción.
Dibujo
Fig 1c Una sutura se pasa de la cavidad orbital a la fosa temporal lateralmente a la articulación y,
luego continuación de la fosa temporal a la cavidad orbital entre la parte lateral
del disco y el cóndilo, a lo largo de la unión disco cóndilo.
Dibujo
Dibujo
Fig 2 sección Mid-parasagital a través de una articulación de control con la mandíbula en posición
cerrada. El disco muestra su forma arqueada típica (ampliación a 100). AT = tubérculo articular
; C = cóndilo; BZ= zona bilaminar, D = disco.
Dibujo
Dibujo
Figs 4a a 4d secciones seriadas parasagital a través de una articulación experimental (grupo B, los
grupo desplazamiento pequeño, de la sección lateral a medial). Interposición de la banda posterior
del disco entre las superficies articulares llevado a una falta de congruencia en las secciones
laterales como consecuencia de la rotación axial del disco (arriba) y un aplanamiento de la parte
posterior de la banda secciones medial (abajo). Este conjunto de secciones sagitales ilustra la
rotación axial del disco y el gradiente inducido por el estrés en el tejido articular (aumento por 100).
Dibujo
Figs 5a y 5b de hiperplasia (a la izquierda) la parte postero superior de la membrana sinovial (a la
derecha) un aumento de la vascularización (ampliación x500).
Figs 6a a 6d secciones seriadas parasagital de discos experimentales (grupo B, grupo de
desplazamientos pequeños, de lateral a sección medial) (ampliación x 1000).
Dibujo
Dibujo
Figs 6c y 6d en la seccion medial, sólo unos pocas células condrociticas al igual que las células
son observadas dispersas entre las fibras colágenas.
Dibujo
Fig 8 islotes de condrocitos y en zonas mineralizadas interpuesta la zona bilaminar fibrosa en una
articulación experimental con grandes desplazamientos. (magnificación x 1.000).
Dibujo
Figs 9 a y 9b secciones Mid-parasagittal a través de las juntas frente a la posición cerrada pack
mostrando (a la izquierda, el grupo A conjunta) apretamiento de la zona intermedia y (a la derecha,
el grupo B conjunta) apretamiento y prolongación de la zona intermedia (ampliación a 100).
Dibujo
Fig 10sección Mid-parasagittal a través del cartílago articular condilar que muestra la característica
5 capas celulares (ampliación x 500)
Dibujo
Fig 11 sección Mid-parasagittal a través del cartílago articular de control (grupo A). La organización
en capas regulares es preservada, con un engrosamiento de la capa
fibrosa (ampliación x 1.000).
Figs 12 a y 12d secciones seriadas a través de una articulación experimental (grupo B, los
pequeños desplazamientos discales, de medial a la sección lateral ) (ampliación x 1000).
Dibujo
Dibujos
Figs 12c y 12 d La capa fibrosa parecía cada vez más engrosada de medial a
secciones laterales, y la fibras colágenas verticales constituyen haces de fibras dispuestas en
líneas curvas y anclado al hueso subcondreal. Los condrocitos se convirtieron en hipertróficos,
y las agrupaciones de condrocitos fueron rodeados por haces de colágeno.
Dibujo
Fig 13 sección Mid-parasagittal del cartilago articular temporal a través de una articulación
experimental (grupo B, grupo de desplazamiento pequeño). Una capa fibrosa gruesa remanente de
la eminencia articular después de la degeneración del cartílago relacionados con el
desplazamiento de disco (ampliación x500).
Dibujo
Figs 14 a y 14 b graves alteraciones del cartílago condilar caracteriza por gruesos haces verticales
de fibras de colágeno defectos óseos subcondreales , y (a la derecha) necrosis de condrocitos
Dibujo
Dibujo
Fig 15 sección Mid-parasagittal a través del cartílago articular de una articulación opuesta.
Moderada fibrilación del cartílago es vista, con engrosamiento de las fibras colágenas horizontaes
y verticales (ampliación x500).