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Escuela de Química
EFECTO PASTEUR
Integrantes:
Profesora:
Ema Obando
II Semestre
2019
OBJETIVOS:
INTRODUCCIÓN
La aceptación de que la glucólisis se controla fundamentalmente por la actividad de la
fosfofructoquinasa se produjo en gran parte gracias a un descubrimiento realizado hace
más de un siglo por Louis Pasteur. Cuando los cultivos anaerobios de levaduras que
metabolizaban glucosa se exponían al aire, se reducía drásticamente la tasa de utilización
de glucosa. Quedó claro que este fenómeno, el efecto Pasteur, comporta la inhibición de la
glucólisis por el oxígeno. Este efecto tiene cierta lógica desde el punto de vista biológico,
puesto que se obtiene mucha más energía a partir de la oxidación completa de la glucosa
que sólo a partir de la glucólisis (Mathews, 2002). El efecto Pasteur se produce en
microorganismos capaces de realizar metabolismo fermentador y respiración aerobia
(anaerobios facultativos). En presencia de O2 utilizan la respiración aeróbica, pero pueden
emplear la fermentación si no hay O2 libre en su medio ambiente. Pasteur fué el primero en
observar que el azúcar es convertido en alcohol y CO2 por levaduras en ausencia de aire,
y que en presencia de aire se forma muy poco o nada de alcohol, siendo el CO2 el principal
producto final de esta reacción aeróbica. Este efecto indica el mayor rendimiento energético
de la respiración sobre la fermentación (Ramírez, 2002).
Reactivos de materiales
Nombre Formula PM PE PF Aspecto y Densidad Solubilidad Toxicidad
color
Glucosa C6H12O6 88,01 100 0°C Liquido 1.54 g/cm3 Muy soluble Contacto ocular:
g/mol °C incoloro Enjuagar
inmediatamente con
abundante agua
durante 10 ó 15
minutos.
Contacto dérmico:
Eliminar la ropa
contaminada y los
residuos con agua.
Inhalación: Irritación.
Reactivo - - - 191 Solido 1.8 g/cm³ Poco Puede ser nocivo si
de °C blanco soluble se inhala. Provoca
benedict una irritación del
tracto respiratorio.
Nocivo si es
absorbido por la piel.
Provoca irritación de
la piel, provoca
irritación de ojos.
Esquemas
Esquema Nº1, preparación de la levadura
1 2 3 4 1 2 3 4
DISCUSIÓN:
Este laboratorio tuvo el objetivo principal de comprobar de manera cualitativa el Efecto
Pasteur; tanto en condiciones anaerobias como aerobias. “El efecto Pasteur es un efecto
de inhibición de la fermentación alcohólica debido a la participación de oxígeno (O 2). La
fermentación es un proceso completamente anaeróbico (sin la participación del aire) y la
inclusión del oxígeno la detiene o minimiza” (Quesada, 2007).
Inicialmente se añadió la levadura en vaso químico con agua, a 37°C y agitando durante
cinco minutos; esto con el propósito de que dicho microrganismo se adapte a las
condiciones y trabaje en un ambiente óptimo. “Las levaduras son hongos unicelulares que
se reproducen principalmente por gemación, son organismos eucarióticos, es decir que
tienen una membrana nuclear bien definida que envuelve el núcleo” (Voet, 2004). “Las
levaduras son las causantes principales de la fermentación de los alimentos, lo cual puede
ser perjudicial (deterioro) o favorable (producción de cervezas, vinos, pan, quesos, enzimas,
etc)” (Voet, 2004). “La temperatura óptima de crecimiento de este microorganismo está
entre 28 y 38°C” (Sun, 2002).
Seguidamente se procedió a realizar la fermentación; tanto de manera aeróbica como
anaeróbica. Se separaron 8 tubos de ensayos en dos grupos de 4. Los tubos en el cual se
realizaría la fermentación anaerobia se les añadió aceite mineral después de haber tenido
lista la solución de levadura con glucosa, esto con el propósito de no dejar entrar oxígeno
al sistema.
Los tubos aislados anaeróbicamente, realizaron la glucólisis anaerobia, y con ello se
produjo etanol y CO2, esta fermentación hace que se consuma de manera muy rápida la
glucosa, con el fin de obtener energía, debido a qué las moléculas energéticas sintetizadas
son muy limitadas (ATP) y con ellos demanda más glucosa para degradarla y suplir a la
célula con la energía suficiente.
“La glucólisis forma parte, pues, de una fermentación, que se define como una ruta
metabólica productora de energía que no comporta un cambio neto del estado de oxidación.
Otra fermentación importante es la que comporta la ruptura del piruvato a acetaldehído y
CO2, para que luego el acetaldehído se reduzca a etanol por la alcohol deshidrogenasa”
(Murray, et al; 2013).
Reacción de la glucólisis anaerobia:
Por otra parte, los tubos restantes, fueron destinados para la fermentación aerobia, en este
caso la degradación de glucosa fue más lenta. En esta fermentación también se acoplan
otras rutas metabólicas, como el ciclo de Krebs y la cadena de transporte electrónico. Y
obteniendo así, CO2 y ATP, esta última en mayor cantidad en comparación con la anaerobia.
“Consideremos, en cambio, lo que ocurre en una célula con una respiración activa, esto es,
la degradación oxidativa y la liberación de energía a partir de las moléculas de nutrientes
mediante la reacción con el oxígeno. En estas células, el piruvato se oxida a acetil-CoA,
que entra en el ciclo del ácido cítrico.” (Voet, 2004). “El NADH producido durante la
glucólisis se oxida de nuevo mediante la cadena de transporte electrónico mitocondrial para
producir más energía y los electrones se transfieren finalmente al O2, que es el aceptor
electrónico terminal. La conversión de la glucosa en piruvato en una célula que respira se
denomina glucólisis aerobia.” (Peña, 2000).
Según Mathews (2002); durante la glucólisis aerobia, como se ha indicado antes, este
NADH se oxida por la cadena de transporte electrónico mitocondrial y los electrones se
transfieren finalmente al oxígeno. Esta oxidación del NADH, proporciona más energía con
la síntesis de unos 3 moles de ATP a partir de ADP por mol de NADH oxidado. Dado que
se producen 2 moles de NADH por mol de glucosa que entra en la ruta, la glucólisis aerobia
proporciona una cantidad de ATP considerablemente superior a la de la glucólisis
anaerobia. Además, la oxidación del piruvato a través del ciclo del ácido cítrico genera
mucha más energía.
Posteriormente se la añadió a cada tubo NaF, con el propósito de inhibir la glucólisis. “El
paso subsiguiente es catalizado por la enolasa, y comprende una deshidratación del 2-
fosfoglicerato, lo que forma fosfoenolpiruvato. La enolasa es inhibida por el fluoruro, y
cuando se obtienen muestras de sangre para medición de glucosa, se deben recolectar en
tubos que contienen fluoruro a fin de inhibir la glucólisis.” (Murray, et al; 2013).
Según Rivera (2011); la prueba de Benedict es otra de las reacciones de oxidación, que
como conocemos, nos ayuda al reconocimiento de azúcares reductores, es decir, aquellos
compuestos que presentan su OH anomérico libre, como por ejemplo la glucosa, lactosa o
maltosa o celobiosa, en la reacción de Benedict, se puede reducir el Cu2+ que presenta un
color azul, en un medio alcalino, el ión cúprico (otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de
reducirse por efecto del grupo aldehído del azúcar (CHO) a su forma de Cu+. Según
Quesada (2007), este nuevo ion se observa como un precipitado rojo ladrillo
correspondiente al óxido cuproso (Cu2O), que precipita de la solución alcalina con un color
rojo-naranja, a este precipitado se lo considera como la evidencia de que existe un azúcar
reductor.
CONCLUSIONES:
3. ¿Baja que condiciones puede darse un efecto pasteur inverso? (Investigar efecto
cabtree).
El efecto Crabtree describe el fenómeno a través del cual la levadura
Saccharomyces cerevisiae produce alcohol (etanol) en condiciones aerobias y con
una gran concentración de glucosa externa en lugar de producir biomasa mediante
el ciclo de Krebs, proceso que ocurre mayoritariamente en todas las levaduras.
Ahern, K.; Mathews, C.; Van H. (2002). Bioquímica (tercera edición). Madrid:
Addison-Wesley.
Lozano, J. (2013). Laboratorio de Química Orgánica. Disponible en:
http://avalon.utadeo.edu.co/comunidades/estudiantes/ciencias_basicas/organica/g
uia_7_carbohidratos.pdf
Murray R.; Bender, D.; Bothan, K.; Kennelly, P.; Rodwell, V & Weil, P. (2013).
Bioquímica Ilustrada. 29va Edición. Editorial McGrawHill. México.
Peña, A., Arroyo, A., Gómez, A., Tapia, R. (2000), Bioquímica. Ciudad de México,
México: LIMUSA.