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INTRODUCCION

El presente se muestra a través de la realización de un taller las diferentes


actividades realizadas en el laboratorio y que es un complemento a la materia
Biología molecular que estamos cursando. Este trabajo muestra la experiencia del
laboratorio agrupado en siete prácticas (la numero cuatro no realizada). La primera
llamada bioseguridad abordamos el concepto de dilución de hipoclorito para la
desinfección y los diferentes elementos del laboratorio con su respectiva utilidad,
definimos bioseguridad importante para la realización de la práctica. La segunda
practica del laboratorio llamada microscopía mostramos todos los montajes
húmedos para observación, en los que observamos, agua estancada, hebra hilo,
papel milimetrado, letra, tela, en esta práctica se pueden observan tanto fotos como
conceptos. En la tercera practica abordamos el tema célula: crenación, citolisis,
plasmólisis y turgencia”, donde a través de diferentes montajes pudimos observar
estos fenómenos. La quinta practica se aborda el tema de acción de lisosomas, a
pesar de las dificultades que tuvimos en el laboratorio para observar bien este
proceso mediante un ciliado, se define y explica lo realizado. La sexta practica
“Tejidos vegetales: Aislamiento de cloroplastos intactos” no se realiza la practica en
el laboratorio como tal, pero se definen en este taller conceptos vistos de
fotosíntesis, la última practica y que corresponde a la número siete, abordamos la
mitosis y meiosis, reconocemos el ciclo celular, los cromosomas y genes.
Apreciamos el proceso de división celular por mitosis con sus fases: interface,
profase, metafase, anafase, telofase. También el proceso de división celular por
Meiosis, pero solo en la parte teórica.
OBJETIVO GENERAL

La guía de prácticas del curso de Biología Celular y Molecular tiene como


objetivo dar herramientas al estudiante para comprender las propiedades,
estructura, funciones, orgánulos celulares y las interacciones bioquímicas,
genéticas, con el ambiente y su ciclo vital desarrollando su pensamiento científico y
crítico respecto a las relaciones que se dan en la Biología celular y Molecular.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

• Conocer las normas de bioseguridad en el laboratorio.


• Comprender el funcionamiento del microscopio y reconocer los diferentes
poderes del microscopio mediante diferentes montajes.
• Aprender a hacer los montajes o preparaciones húmedas y las principales
sustancias usadas. Reconocer las principales funciones del microscopio y
comparar sus propiedades de resolución, ampliación y penetración.
• Observar los fenómenos de hipotonía, isotonía e hipertonía en células
animales y vegetales.
• Observar la función de los lisosomas de manera análoga en ciliados.
• Aprender a diferenciar los periodos del ciclo celular.
PRACTICA 1 “BIOSEGURIDAD”
Presentación de resultados

1. Teniendo en cuenta la fórmula V1xC1=V2xC2; en una tabla presente


diluciones al 0.5%, 1%, 1.5% y 5% de hipoclorito de sodio que tiene una
concentración inicial de 10% indicando la concentración inicial,
concentración final, volumen inicial de hipoclorito, volumen de agua y
volumen final para cada dilución.

Volumen
Concentración Volumen final
Concentración inicial de Volumen de
Inicial (C1) para la
Final (C2) Hipoclorito agua (ml)
10% dilución (V2)
(V1)
100.000 ppm 5.000 ppm 50 ml 5.000 ppm 950 ml

100.000 ppm 10.000 ppm 100 ml 10.000 ppm 900 ml

100.000 ppm 15.000 ppm 150 ml 15.000 ppm 850 ml

100.000 ppm 50.000 ppm 500 ml 50.000 ppm 500 ml

PRACTICA 2 “MICROSCOPÍA”

Presentación de resultados

Elaborar los esquemas correspondientes para cada una de las preparaciones.

Cada esquema debe incluir: título, aumento y además señalar las distintas
estructuras celulares que se observen.
MONTAJE 4X 10X 40X 100X

AGUA
ESTANCADA

Se observa un
protozoo que
es muy
encontrarlos en
aguas
estancadas
Se observa Se enfoca que contienen
en más directamente materia
Se observan detalle lo que uÑna de las orgánica en
fibras y puede ser partículas vistas descomposició
partículas una especie en 10x pero aún n y que son
contenidas en de habitad en o se define ricas en
la gota de el agua ningún micro sustancias
agua. estancada. organismo. nutritivas.
MONTAJE 4X 10X 40X 100X
Hebra de hilo

Se aprecia
que el
Se observan hilo Se observa los
las fibras del está dos hilos
hilo y como se conformado Sobrepuestos, Casi no se
encuentran Por unas se ven los diferencia el
trenzadas. De hilo a no ser
fibras aún espacios entre
Textura fibrosa. por el color rojo
más las fibras que lo
de uno. Es la
delgadas que componen y a microfibra en
al la vez las un tamaño
entrelazaren microfibras que muy amplio.
forman el hilo componen a
inicial. estas.
Papel No aplica
milimetrado

Diámetro
Diámetro aproximado Diámetro
aproximado del campo aproximado del
del campo visual campo visual
visual 4.5mm. 1.7mm. 0.5mm.

Cuestionario

1. ¿Qué organismos pueden observarse en la gota de agua estancada?

Mayormente podemos apreciar los paramecios (género Paramecium) que son


protozoos ciliados con forma ovalada, que abundan en aguas dulces estancadas
con abundante materia orgánica, como charcos y estanques. “Son probablemente
los seres unicelulares mejor conocidos y los protozoos ciliados más estudiados por
la Ciencia. El tamaño ordinario de todas las especies de paramecios es de apenas
0.5 milímetros”. (blogs, 2015, párr 1).

2. Para las muestras de la letra, la hebra de hilo observadas determine:


2.1. ¿Cómo se manifiesta el poder de resolución?

Las mejores imágenes se para nuestro concepto fueron en la resolución 10x, pues
se puede
apreciar bien la textura del hilo y de la tinta de las letras. “El poder de resolución del
microscopio es la capacidad de los lentes de mantener separado dos puntos que a
simple vista parece uno solo”. (Armas, Sf, Capitulo 3). En 40x y 100x la letra se
distorsiona y el hilo sigue estando compacto y se observan las fibras en las
terminaciones.

2.2. ¿Cómo se manifiesta el poder de aumento?

En 40x y 100x se distorsiona la tinta y la forma de la letra, mientras en el hilo se


pueden observar el color de base del hilo, los micro cortes y el color. “Cada sistema
de lentes es capaz de producir una imagen aumentada cuyo valor se enuncia con
la letra x, así que 10x significa que la imagen está aumentada 10 veces”. (Armas,
Sf, Capitulo 3).

2.3. ¿Cómo se manifiesta el poder de definición?

En 40x y 100x la letra ya la letra no tiene forma, mientras el hilo sigue manteniendo
la forma y se observa mejor las fibras que lo compone.

2.4. ¿Cómo se manifiesta el poder de penetración o profundidad?

En la letra se observa que traspasa la tinta y se alcanza a ver el papel en la cual fue
impresa, y en el hilo no se alcanzan a ver las fibras a profundidad. Podemos decir
que la penetración o profundidad es la capacidad que tiene el microscopio de
permitir la observación de diversos planos del objeto estudiado de manera
simultánea.

8. Fuera de las estructuras u organelas que se observaron, hay otras que no se


hicieron visibles, explique ¿Por qué y cómo podrían observarse?

Por el tamaño y el aumento en el cual tengamos nuestro objetivo.

15. Explicar algunas razones por las cuales ciertos colorantes son específicos
para las estructuras celulares.

Por sus características químicas.

Ejemplo la hematoxilina es un colorante catiónico, entonces se une a los aniones,


como los ácidos, en las células los ácidos nucleicos ADN, se tiñen con hematoxilina,
por eso los núcleos son de color violeta.

La eosina es un colorante ácido, entonces tiñe las estructuras básicas que están en
el citoplasma, por eso se ven color rosa.

PRACTICA 3 CÉLULA: CRENACIÓN, HEMÓLISIS, PLASMÓLISIS Y


TURGENCIA”

Presentación de resultados

Elaborar los esquemas correspondientes para cada una de las


preparaciones. Cada esquema debe incluir: título, aumento y además señalar las
distintas estructuras celulares que se observen. En un cuadro presente los
resultados de las soluciones hipotónicas, isotónicas e hipertónicas para los dos
tipos de células.
MEDIO AGUDA DESTILDA MEDIO AGUDA DESTILDA

CELULA CELULA
VEGETAL ANIMAL

(ELODEA) (GOTA DE
SANGRE)

Aumento 10x, Se observa la


pared celular, la forma de la Aumento 40x, Se pueden
célula, las micro fibrillas de observar las células muy
celulosa, los cloroplastos (de juntas y podríamos decir que
color verde por la presencia de identificamos dos tipos de
clorofila), el núcleo que es el células los linfocitos y los
cuerpo grande y denso y la basófilos, por los granulas que
vacuola la zona clara en el se contienen en toda ella.
centro de la célula.

NaCl 0,6% NaCl 0,9% NaCl 1,2% NaCl 10%


CELULA Sol. Sol. Sol.
VEGETAL Sol. Hipotónica Isotónica Hipertónica Hipertónica

Objetivo
100x
En la solución
hipertónica se Esta solución
En el medio observó la hipertónica
pared celular Contiene mucho
isotónico la
En el medio más alargada, soluto y se
célula se porque para
hipotónico el observa aun la
observó sin equilibrar el forma de la
contenido de la
cambios en medio con su pared celular,
célula se
forma y exterior, salió solo que a
alcanzó a ver
tamaño, ya agua de la diferencia de la
Que se diluido, ya que
que la célula al anterior existió
observa entro agua a la
concentración medio, sin una ligera
célula para deformar
de solutos deformación de
alcanzar el demasiado a la la célula.
tanto en su
equilibrio entre célula, porque También vimos
interior con en
su interior y el que la que los
su exterior se
medio. concentración cloroplastos se
encontraba en
del medio agrupan entre
equilibrio. estaba cerca al ellos.
equilibrio.

CELULA NaCl 0,6% NaCl 0,9% NaCl 1,2% NaCl 10%


ANIMAL
Sol. Hipotónica Sol. Sol. Sol.
Isotónica Hipertónica Hipertónica
Objetivo
100x

Que se En la solución En la solución En esta En la Solución


observa hipotónica lo isotónica solución aún hipertónica se
glóbulos rojos debido a su se observan destruyeron los
se hinchan hay equilibrio los glóbulos rojos glóbulos rojos y
osmosis con el eritrocitos los cuales han al deshidrataren
perdido
medio y ellos. "glóbulos estos estallaron.
tamaño por la
rojos" no
deshidratación
presentan
algunos se han
ninguna
estallado ya.
alteración
gracias medio
equilibrado en
el que se
encuentran.
Cuestionario

1. Mencione las diferencias observadas entre el comportamiento de la célula


vegetal y animal. Explique.

2. Describe lo que sucede en una célula cuando se coloca en un medio:


a) hipotónico, b) isotónico, c) hipertónico.

Figura 1Célula Vegetal Figura 2 Célula Animal


a) Hipotónico: La célula al estar expuesta en una concentración con menos
solutos, la célula tiende a buscar el equilibrio y deja pasar líquido al interior de ella
y tiende a sobreexponerse ante el medio.

b) Isotónico: Este proceso ocurre cuando el medio tiene la misma


concentración de soluto tanto dentro y por fuera de la célula.
c) Hipertónico: Es la concentración de solutos más grande que se encuentra
en el medio externo en donde se encuentra la célula, y esta tiende a perder líquido
(agua) inclusive hasta llegar a deshidratarse por completo.

DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD PRÁCTICA No. 4

“Permeabilidad selectiva de la membrana del eritrocito”

Cuestionario

2. Explique las características que debe presentar una molécula para que
pueda atravesar fácilmente la membrana plasmática.

HAY SUSTANCIAS que las células no necesitan y deben ser eliminadas; hay
otras en el exterior que deben tomar para nutrirse. A la gran mayoría de ellas
les está prohibido, ya sea por su naturaleza polar o por su tamaño, cruzar la
bicapa lipídica de la membrana. Antes que otras funciones más complicadas
de las células, está la de su propia nutrición y excreción. Con este fin
primordial se desarrollaron los sistemas de transporte; moléculas o grupos
de ellas, generalmente proteínas, que en ocasiones funcionan como poros
selectivos, permiten simplemente el paso de las sustancias, o en otras,
inclusive, las "obligan" a entrar o salir, según las necesidades de la célula.
3. Si hubiéramos utilizado sangre de otro animal mamífero, ¿esperaríamos los
mismos resultados?, explíquelo en función de la permeabilidad de la
membrana.

La permeabilidad de las membranas es la facilidad de las moléculas


para atravesarla. Esto depende principalmente de la carga eléctrica y, en
menor medida, de la masa molar de la molécula. Pequeñas moléculas y
moléculas con carga eléctrica neutra pasan la membrana más fácilmente que
elementos cargados eléctricamente y moléculas grandes. La membrana es
selectiva, lo que significa que permite la entrada de unas moléculas y
restringe la de otras. La permeabilidad depende de los siguientes factores:
 Solubilidad en los lípidos: Las sustancias que se disuelven en los
lípidos (moléculas hidrófobas, no polares) penetran con facilidad en la
membrana dado que está compuesta en su mayor parte por
fosfolípidos.
 Tamaño: La mayor parte de las moléculas de gran tamaño no pasan
a través de la membrana. Sólo un pequeño número de moléculas no
polares de pequeño tamaño pueden atravesar la capa de fosfolípidos.
 Carga: Las moléculas cargadas y los iones no pueden pasar, en
condiciones normales, a través de la membrana. Algunas sustancias
cargadas pueden pasar los canales proteicos o con la ayuda de una
proteína transportadora.

DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD PRÁCTICA No. 5


“Meiosis y Mitosis”
CUESTIONARIO:

1. ¿Qué etapas de la meiosis y mitosis observo?


Durante la práctica empleando la raíz de cebolla pudimos observar las
diferentes etapas de la mitosis, donde se proceden dos células hijas
genéticamente idénticas entre sí, con la de cebolla vista al microscopio
como se observa en las imágenes anteriores pudimos observar 4 etapas
o fases: Profase, Metafase, Anafase y Telofase. Durante la práctica no
realizamos montajes para poder observar las meiosis y sus dos
divisiones.
Observamos la metafase y la anafase

a. ¿Qué tipo de células se están observando?


Al trabajar con la raíz de cebolla estamos observando células vegetales

7. ¿Cuáles son las etapas del ciclo celular y que caracteriza a cada una
de ellas?
G1 y G2 son denominadas como "huecos", por la palabra en inglés
"gaps". Esto se refiere al hecho de que nada demasiado obvio ocurre en
el núcleo de la célula en estas etápas. Sin embargo, las células están
muy activas realmente, ya que están creciendo y se están preparando
para la división.
S se refiere a la síntesis. Esta es la fase en la que el ADN es copiado o
replicado.
M se refiere a la mitosis. En esta fase del ciclo celular la célula realmente
se divide y forma dos células hijas.

8. ¿En cuál fase del ciclo celular se duplica el material genético y por
qué?

Google.dz
16. ¿En cuál fase de la meiosis ocurre la reducción del número de
cromosomas en la célula (pasa de condición diploide a haploide)?

La Meiosis puede considerarse como una fase de reducción del número


de cromosomas seguida de una mitosis ligeramente diferente.
La Meiosis solo ocurre en relativamente pocas células de un organismo
multicelular, mientras que la mitosis es más común.

DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD PRÁCTICA No. 6


“Extracción de ADN”

Cuestionario
2. ¿Para qué se utiliza el detergente y la sal?

Se utiliza detergente para romper la pared celular y la membrana


plasmática, a continuación sirve para romper la membrana nuclear y
llegar al núcleo donde se encuentra el material genético o ADN y
liberarlo.

6. El ADN de una célula se encuentra enrollado a proteínas formando la


cromatina ¿En qué etapa del experimento se separa el ADN de las
proteínas?

Cuando se hace la mezcla junto con la sal, y el en momento que se


añade el colorante se visualiza la línea blanca que es el adn

7. ¿En qué parte exacta del tubo se observan los filamentos de ADN?
¿qué se deduce sobre la solubilidad de ADN en el agua salada y el
etanol?

En la parte superior del tubo de ensayo, la solubilidad es menor debido a


la mezcla de la sal con la solución con el alcohol isopropilico.

CONCLUSIONES

Aprendimos que las normas de seguridad son importantes tanto en el laboratorio


con en la vida cotidiana.
Los cambios en la célula vegetal fueron observados con forme a la teoría de la
plasmólisis y turgencia, aunque en la metodología de la práctica asegura de forma
implícita la observación de los cambios en la célula animal, la verdad no fue bien
observable, la crenación y la citólosis.
Pudimos observar como ocurren los procesos de plasmólisis y turgencia en las
células vegetales comprobando así la teoría repasada antes de entrar a la práctica.
Adicional pudimos comprobar los fenómenos de hipotonía, isotonia e hipertonía.
Observamos y aprendimos que, a diferencia de las células animales, todas las
células vegetales presentan pared celular que poseen plastos que son los
responsables de la fotosíntesis, los almidones y la pigmentación, y como los
diferentes tipos de cloroplastos les dan el color verde a las plantas y hacen las
fotosíntesis. La célula es un diseño perfecto de la naturaleza de los organismos
vivos.
Se identificaron las fases de la mitosis que se representaron en la célula vegetal
(telofase e interface). Pudimos observar al microscopio las características de cada
fase, ejemplo la profase, metafase, anafe hasta llegar a la telofase donde es
totalmente visible la división de la célula madre en dos células hijas. Esta práctica
nos ayudó a entender mejor el proceso de mitosis de una manera visual, pues
nosotros mismos lo observamos a través del microscopio.

BIBLIOGRAFIA

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ESTUDIAR
CÉLULAS Y TEJIDOS:
http://www.medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/inicio.
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blogs, M. (19 de Enero de 2015). Mis blogs. Obtenido de Biología aplicada - 4º A -
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D. B., D. F., & C. R. (1979). Enciclopedia medica pra la familia moderna. Valencia
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http://www.fca.uner.edu.ar/files/academica/deptos/catedras/WEBFV_2010/
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Raisman, D. R., & D. G. (20 de Febrero de 2008). Hipertextos del área de bilogía.
Obtenido de Transporte de y hacia la célula:
http://www.biologia.edu.ar/cel_euca/transporte.htm
Tplaboratorioquimico. (Sf). Tplaboratorioquimico. Obtenido de Materiales e
Instrumentos de un Laboratorio Químico:
https://www.tplaboratorioquimico.com/laboratorioquimico/materiales-e-
instrumentos-de-un-laboratorio-quimico.html

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