Fundamentos teóricos

Los nitratos son iones formados por tres átomos de oxígeno, uno de nitrógeno y
con una carga negativa (NO3-), no tienen color ni sabor y se encuentran en la
naturaleza disueltos en el agua.
¿Cómo llegan los nitratos al agua potable?
Su presencia natural en las aguas superficiales o subterráneas es consecuencia
del ciclo natural del nitrógeno, sin embargo, en determinadas zonas ha habido
una alteración de este ciclo en el sentido de que se ha producido un aumento en
la concentración de nitratos en aguas subterráneas es principalmente de
fertilizantes, sistemas sépticos y almacenamiento de estiércol, así también , los
residuos industriales constituyen una fuente importante de nitratos en las aguas, siendo las
industrias más contaminantes los mataderos, destilerías, azucareras, industrias de levadura,
de almidón, textiles y fertilizantes. Los fertilizantes nitrogenados no absorbidos por
las plantas, volatilizados, o arrastrados por la escorrentía superficial acaban en
las aguas subterráneas en forma de nitratos. Esto hace que el nitrógeno no esté
disponible para las plantas, y puede también elevar la concentración en aguas
subterráneas por encima de los niveles admisibles de calidad del agua potable.

¿Cómo afecta los nitratos en la salud de las personas?

El nitrato debe ser controlado en el agua potable principalmente porque niveles
excesivos pueden provocar metahemoglobinemia, o “la enfermedad de los
bebés azules”.
En personas con problemas gástricos o en niños de menos de tres meses, el nitrato puede
reducirse a nitrito, el cual se absorbe en los glóbulos rojos de la sangre, oxidando el hierro
de la hemoglobina a metahemoglobina, disminuyendo la capacidad de los glóbulos rojos
para transportar oxígeno. Asimismo, algún tipo de cáncer del tracto gastrointestinal ha sido
atribuido a la acción de compuestos nitrosos, formados en el interior del organismo a partir
de los nitritos, los que a su vez proceden de la reducción de los nitratos consumidos con el
agua.

Niveles permisibles de nitratos y la OMS (Organización Mundial de la Salud)

En los estándares europeos para el agua potable, segunda edición, publicada por la OMS
después de la convención de Génova en 1970, encontramos lo siguiente:

Sustancia Naturaleza del problema Nivel aproximado por

que puede aparecer encima del cual pueden
aparecer problemas
Nitrato (como NO3) Peligro de - Recomendado: menos de
metahemoglobinemia 50 mg/l.
infantil si el agua es - Aceptable: de 50 a 100
consumida por niños mg/l.
- No recomendado:
pequeños.
más de 100 mg/l.
 Determinación de nitrato (NO3- )

La determinación del nitrato es compleja, debido a:

 La alta probabilidad de que se

hallen sustancias interferentes.
 Los rangos limitados de
concentración de las diferentes
técnicas.
 Los procedimientos relativamente
complejos que se precisan.

Existen básicamente 3 métodos para

analizar nitratos:

1. Método espectométrico ultravioleta selectivo.

Esta técnica solamente se utiliza para seleccionar muestras con bajo

contenido en materia orgánica (aguas naturales incontaminadas y suministros
de agua potable).

Las medidas de absorbancia -UV a 220 nm permiten la determinación de

nitratos que son absorbentes a esta longitud de onda. Debido a que las materias
orgánicas también pueden absorber a esta longitud de onda debemos hacer una
segunda lectura a 275 nm para obtener la medida relativa sólo a nitratos.

Instrumental:

 Espectrofotómetro para uso a 220 nm y 275 nm .

 Cubetas de sílice iguales, de 1cm de recorrido de luz o más.

2. Método del electrodo de nitrato.

El electrodo del ion NO3- es un sensor selectivo que desarrolla un potencial

a través de una membrana delgada, porosa e inerte que se mantiene en posición
en un intercambiador iónico en un líquido inmiscible con agua. El
electrodo responde a la actividad del ión nitrato entre aproximadamente 10-
5 y 10-1 M. El límite inferior de detección está determinado por la solubilidad

escasa pero finita del cambiador iónico líquido.

3. Cromatografía de iones.

Método utilizado para el análisis de aniones. Es una técnica separativa. Todos

los métodos cromatográficos tienen en común la utilización de una fase
estacionaria y una fase móvil, las separaciones están basadas en las diferencias
en la velocidad de migración entre los componentes de la muestra.
DESCRIPCIÓN DE LA TÉCNICA EMPLEADA
EQUIPOS Y MATERIALES
 ESPECTROFOTÓMETRO UV- VISIBLE SHIMATZU 1700
 Celda de cuarzo
 Balanza analítica
 Pipetas volumétricas de 1,2,3,5,10,15y 25ml
 Fiolas de 50, 100,500y 100ml
MÉTODO ESPECTROFOMÉTRICO ULTRAVIOLETA SELECTIVO (NO3-)
Esta técnica solo se utiliza para soluciones con bajas concentraciones de materia
orgánicas, es decir, aguas naturales no contaminadas y suministros de agua
potable. La curva de calibrado de NO3- verifica la ley de Beer
La medida de la absorción UV a 220nm hace posible la determinación rápida de
NO3-. Dado que la materia orgánica disuelta puede absorber también a 220nm
y NO3- no lo hace a 275 nm, se puede utilizar una segunda medida a 275nm
para obtener la medida relativa solo a nitratos
Se debe realizar los siguientes pasos:
 se debe preparar una solución patrón primario de (100ppm (NO3- -
N)),Pesar 0.1805 de KNO3, disolver en agua, agregar 2ml de CHCl3 y
diluir a 250ml en fiola, enrazar y homogenizar.
 se debe preparar una solución patrón intermedia de nitrato 5 ppm de
[NO3- - N] : diluir 5 ml de solución patrón primario de nitrato con agua
destilada , llevar a fiola de 100 ml , enrasar y homogenizar.
 preparar HCl 1N
 Preparar las soluciones patrón para curva de calibracionen el rangode
0.1,0.2, 0.4 y 0.5ppm [NO3- - N] llevar a fiola de 50 ml, añadir 1 ml de HCl
, enrazar y homogenizar.
 Preparar el blanco: en una fiola de 50ml añadir 1ml de HCl de 1N, enrazar
y homogenizar.
PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS:

1. En una fiola de 50 ml añadir 10 ml de agua cielo+1ml de HCl,

enrazar y homogenizar con agua destilada
2. En una fiola de 50 ml añadir 20 ml de agua san Luis +1ml de HCl,
enrazar y homogenizar con agua san Luis
3. En una fiola de 50 ml añadir 20 ml de agua San Mateo +1ml de HCl,
enrazar y homogenizar con agua San Mateo.
 Luego se pasa a las respectivas mediciones y lecturas de absorbancia y
concentraciones de nitratos en el espectrofotómetro ultravioleta.
 DESCRIPCIÓN DE LOS INSTRUMENTOS:

ESPECTROFOTÓMETRO UV- VISIBLE SHIMATZU 1700

Permite comparar la radiación transmitida por una solución que contiene

una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad
conocida de la misma sustancia.

Características:

 Espectrofotómetro de doble haz.

 Banda 1nm (190 a 900nm).

 Rango de longitud de onda 190-110nm.

 Con sistema de inyección directa SIPPER 160L (unidad succionaria).

 Utiliza celdas de cuarzo para la medición

 CÁLCULOS DETALLADOS

Preparación de la solución de patrón primario de nitrato (5ppm NO 3- -N)

100ppm×V= 100ml×5ppm

V=5ml de la solución de patrón primario de nitrato (NO3- - N)

Preparación de las soluciones para la curva de calibración

 Para el patrón P1:

5ppm×V =0.1ppm×50ml
V=1ml

 Para el patrón P2:

5ppm×V =0.2ppm×50ml
V=2ml
 Para el patrón P3:

5ppm×V =0.3ppm×50ml
V=3ml
 Para el patrón P4:

5ppm×V =0.4ppm×50ml
V=4ml
 Para el patrón P5:

5ppm×V =0.5ppm×50ml
V=5ml

CÁLCULO DEL CONTENIDO DE [NO3-]

De la gráficaN°1: absorbancia Vs concentración la ecuación obtenida
Y = 0.669X - 0.0121
Y=Absorbancia
X=Concentración
Remplazando los datos de la absorbancia de las muestras se calculas las
concentraciones
 Para el agua cielo.

0.367= 0.669X -0.0121

X=0.5667 ppm

 Para el San Mateo.

0.364= 0.669X -0.0121

X=0.5622 ppm

 Para el agua San Luis.

0.344= 0.669X -0.0121

X=0.5323 ppm

Ahora determinamos las concentraciones en [NO3-] según la grafica

 Para agua cielo:

50𝑚𝑙 62[NO3−]
[NO3-] =0.5667ppm× ×
10𝑚𝑙 14[𝑁]

[NO3-] = 12.5484ppm

 Para San Mateo:

50𝑚𝑙 62[NO3−]
[NO3-] =0.5622ppm× ×
49𝑚𝑙 14[𝑁]

[NO3-] = 2.5406ppm

 Para agua San Luis:

50𝑚𝑙 62[NO3−]
[NO3-] =0.5323ppm× ×
49𝑚𝑙 14[𝑁]

[NO3-] = 2.405ppm

RESULTADOS OBTENIDOS EN EL ESPECTROFOTÓMETRO UV- VISIBLE

SHIMATZU 1700
 BLANCO
Concentración ABSORBANCIA []
[]
0 0.008

 Soluciones para la curva de calibración

λ Max 196nm
ppm [NO3-N]
Concentración (WL)Absorbancia
[]
0.1 0.056
0.2 0.11
0.3 0.203
0.4 0.257
0.5 0.317

 Resultados de las muestras

ppm [NO3-N]
Muestra (WL)Absorbancia Concentración
[]
Cielo 0.367 0.234 Muestra V (ml)
San Mateo 0.364 0.232
Cielo 10
San Luis 0.344 0.219
San 49
mateo
 Resultados de la gráfica N°1 de las San Luis 49
concentraciones de [NO3-] de las muestras obtenidas

ppm [NO3]
Muestra Concentración []
Cielo 12.5484ppm
San mateo 2.5406ppm
San Luis 2.405ppm

Gráfico N°1: Curva de Calibración

 Absorbancia VS Concentración
0.35

0.3
(wl)Absorbancia

0.25

0.2

0.15 y = 0.669x - 0.0121

R² = 0.9916
0.1

0.05

0
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6
concentracion

DISCUSION DE REAULTADOS

 La longitud de onda máxima para determinar nitratos es de 196 nm

 Con los resultados obtenidos de las absorbancias de los patrones, se

obtuvo una gráfica tendencia lineal con la cual obtenemos una ecuación
para poder calcular las concentraciones de las muestras de nitratos.

 Los resultados obtenidos de [NO3-] de agua cielo es 12.5484ppm, agua

San Mateo 2.5406ppm, San Luis 2.405ppm concentraciones por debajo de lo
permitido según OSM (< 50ppm) y las concentraciones de agua San Luis y San
Mateo están por debajo de lo permitido según EPA (< 10ppm)

CONCLUSIONES
 el método utilizado es adecuado para la determinación de nitratos en
agua, pero solo en aguas en bajo contenido de materia orgánica.
 se concluye que el agua San Luis es la que tiene menos concentración de
nitratos.
 al realizar la determinación con la concentración de [NO3-] de las
muestras, se observó que las concentraciones del agua cielo es mayor es
por ello que se utilizó una pequeña cantidad de muestra respecto a las
otras muestras cumpliéndose a si la ley de Beer.

RECOMENDACIONES

 Agitar las muestras antes de la lectura en el espectrómetro.

 Para determinar la lectura de una muestra, se debe lavar primero con

agua destilada, luego con la misma muestra y finalmente secar la celda
con papel tisú

 No tocar con los dedos por donde se realiza las lecturas, ya que las
huellas dactilares generan dispersión (se recomienda tocarlas o las partes
opacas).

BIBLIOGRAFÍA

 Tesis PUC “Análisis fisicoquímico de fuentes de agua y termominerales

de callejón de Huaylas Mg.Químico, Edson Gilmar,2008.

 WWW.digesa.minsa.gob.pe/publicaciones/descargas/eglamento–calidad
–agua.pdf

 https://www.equipnet.com/es/espectrofot%C3%B3metro-shimadzu-uv-
1700_listid_574072/