PRÁCTICA 2

CUANTIFICACIÓN DE FENOL EN AGUA MEDIANTE

ESPECTROFOTOMETRÍA ULTRAVIOLETA

1 OBJETIVO:
1.1 Determinar cuantitativamente el contenido de fenol en una muestra de agua residual,
mediante espectrofotometría ultravioleta.

2 ASPECTOS TEÓRICOS.

Consultar: Instrumentación espectrofotométrica para análisis en el ultravioleta cercano y

lejano, cromóforo, auxocromo, efecto hipsocrómico, efecto batocrómico, efectos hiper e
hipocrómico, transiciones electrónicas.

3 EXPERIMENTACION

3.1 Reactivos
• Solución de NaOH al 10% (p/v)
• Solución de H3PO4 al 10% (p/v)
• Solución de CuSO4 al 10% (p/v)
• Solución de fenol de 1000 ppm
• Solución de fenol de 100 ppm (preparada a partir de la anterior)

3.2 Preparación de soluciones patrón – Curva de calibración

• A partir del patrón de 100 ppm de fenol, prepare 50.0 mL de las soluciones de calibración
indicadas a continuación

Volumen Patrón 100

0 1 2 3 4 5 6 7
ppm (mL)
Volumen NaOH (10%)
20 20 20 20 20 20 20 20
(mL)
Volumen final (mL) 50 50 50 50 50 50 50 50
Concentración Fenol
0 2 4 6 8 10 12 14
(ppm)
Concentración NaOH (%) 4 4 4 4 4 4 4 4

3.3 Espectrofotometría UV

3.3.1 Línea base.

• Coloque el espectrofotómetro en las condiciones adecuadas para obtener espectros en la

región ultravioleta: Lámpara de H2 o D2,
• Revise la línea base del instrumento, para intervalo de longitudes de onda, realizando un
barrido de NaOH (4%) Vs NaOH (4%) entre 190 nm y 320 nm.

3.3.2 Espectro UV de fenol en NaOH.

a. Asegure la preparación de todas las soluciones de fenol en NaOH al 4%

b. Tome el espectro del fenol en el intervalo de 190 nm a 320 nm, usando NaOH al 4%
como referencia
c. Tenga en cuenta el diagrama de distribución de especies (Figura 1) para justificar uso de
la base (NaOH) en la preparación de las muestras. Consulte la constante de disociación
del fenol en agua.
d. Averigüe: ¿Cuál es la especie predominante en solución acuosa al pH generado por el
NaOH al 4%?, ¿Cuál es la especie responsable de la absorción en UV?, escriba la reacción
que ocurre entre el fenol y el NaOH

<
Distribución de especies FENOL <— aHiB aB—>
1.0

0.8

0.6
ai

0.4

0.2

0.0

pH
Figura 1. Diagrama de distribución de especies del fenol.

e. ¿Establezca cuáles son las longitudes de onda de absorción para el fenol y para su base
conjugada?
f. Escriba las estructuras resonantes de las dos especies. ¿Cuál especie presenta mayor
deslocalización electrónica?
g. Calcule los coeficientes de absortividad molar para las MÁXIMAS.
h. Compare con los datos de la literatura los valores de MÁXIMAS y 

3.4 Análisis cuantitativo de fenol en agua residual por espectrofotometría ultravioleta

3.4.1 Tratamiento de la muestra

• Mida 50.0 mL de la muestra de agua residual. Transfiera cuantitativamente a un balón de
destilación y agregue algunas perlas de ebullición. Añada 2 mL de CuSO4 al 10% P/V
para inhibir la acción bacteriana sobre el fenol. Agregue 5 mL de H3PO4 al 10%. Lave
las paredes del balón con 20 mL de agua desionizada.
• Destile y recoja alrededor de 40 mL del destilado en un matraz aforado de 50 mL. Retire
el mechero o la fuente de calor y deje enfriar hasta temperatura ambiente. Lave el
refrigerante con agua y recoja en el matraz hasta completar el volumen de destilado a
50.0 mL.
• Homogenice el destilado y guárdelo para el análisis cuantitativo del fenol.

3.4.2 Determinación del porcentaje de recuperación del método.

• Prepare 50.0 mL de una solución patrón de fenol en agua de 3.0 ppm

• Aplique el tratamiento dado a las muestras en 3.4.1 Tratamiento de la muestra
• Lea la absorbancia e interpole en la curva de calibración
• Determine la recuperación del método por triplicado para establecer la repetibilidad del
método

Calcule la concentración de fenol recuperado.

Calcule el % de recuperación así:
% recuperación=100 x (concentración fenol recuperado / concentración fenol esperado)
Discuta sobre el resultado obtenido y la validez del método.

3.4.3 Determinación del contenido de fenol en la muestra problema

• Tome una alícuota de 20,0 mL de la solución del destilado, adicione NaOH (4%) sobre
ella (use el mismo volumen que para las soluciones patrón). Complete a volumen con
agua desionizada
• Realice la lectura de la solución problema.
• Construya la curva de calibración mediante el ajuste por mínimos cuadrados de la mejor
recta que representen la relación Absorbancia Vs Concentración.
• Interpole la absorbancia de la muestra diluida y halle la concentración de fenol en la
muestra original – realice las correcciones necesarias de acuerdo con la recuperación del
método y diluciones realizadas.

Establezca si la muestra cumple con las normas establecidas para vertimientos de aguas
residuales en Colombia

Bibliografía.

Silverstein, Robert, Clayton Bassler, C. Morril. Spectrometric Identification of Organic

Compounds. 3ra. ed. John Wiley & Sons, Inc. 1974. USA. Cap. 5
International Critical Tables. National Research Council of the EEUU, New York, 1929.