INFORME DE LABORATORIO Nº 1 BIOLOGIA GENERAL

UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA

FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA DE HIGIENE Y SEGURIDAD
INDUSTRIAL

LABORATORIO 1: CONOCIMIENTO Y MANEJO DEL MICROSCOPIO

COMPUESTO.
PRIMER LABORATORIO DEL CURSO BIOLOGÍA GENERAL- SA-301

 ALUMNOS: CODIGOS FIRMA

- GARCIA SABREA ANGIE 20192264F ___________________

- GUTIERRES CARBAJAL MELANIE 20192252H ___________________
- CASTILLO CALLUPE, MANUEL 20192248K ___________________
- RAMOS MAGALLANES, ANDERSON 20190623I ___________________

• DOCENTE: MSc. Blgo. ALVARO MARTÍN MARTÍNEZ VILA

LIMA-PERU
20 de septiembre de 2019

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 INFORME DE LABORATORIO Nº 1 BIOLOGIA GENERAL

INDICE:

Contenido

RESUMEN .............................................................................................................. 3
INTRODUCCION ................................................................................................... 3
OBJETIVOS ............................................................................................................ 4
FUNDAMENTO TEÓRICO ................................................................................... 4
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL ............................................................... 10
RESULTADOS ..................................................................................................... 13
DISCUSIÓN DE RESULTADOS......................................................................... 14
CONCLUSIONES ................................................................................................. 14
RECOMENDACIONES ....................................................................................... 14
CUESTIONARIO .................................................................................................. 15
BIBLIOGRAFIA ................................................................................................... 17
APÉNDICE ........................................................................................................... 18
DIAGRAMA DE FLUJOS.................................................................................... 18
DATOS ORIGINALES Y OBSERVABLES ....................................................... 19

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I. RESUMEN

El presente informe tiene como objetivo principal conocer el uso adecuado del microscopio
compuesto como también su mantenimiento, también nos ayudara a conocer las partes
mecánicas y ópticas del microscopio.

Empezamos con instalar el microscopio en un soporte fijo, con la intención de que no haya un
peligro de poder golpear las partes de microscopio y tener una mayor comodidad a la hora de
empezar a utilizarlo.

El objeto que se desea examinar debe colocarse en un portaobjetos, que se una lámina de
vidrio de 1mm d espesor y a continuación se cubre con un cubreobjetos, un cuadrado de 2cm
de lado o un circulo con esa medida de diámetro. La distancia del microscopio al filo de la mesa
no debe ser menor a 15 cm, ya que esto no permitirá una caída por casualidad que podría
afectar seriamente al microscopio; luego se procede a limpiar los objetivos, condensadores,
oculares y espejo para tener una mejor visualización en el microscopio.

Para poder enfocar el objetivo; buscamos el objetivo de menor aumento 10X y lo ponemos en
el tope del revolver; el objetivo hará su ruido característico al estar en posición correcta,
acomodamos el espejo a fin de iluminar la totalidad del campo que se observa por el ocular.
Colocamos la lámina sobre la abertura de la platina y centramos el objeto que vamos a mirar.
Luego mira a través del microscopio y sube las lentes girando el micrómetro hasta que el objeto
entre en foco y su imagen se vuelva nítida y clara.

Luego de ver las células de cebollas, el piojo, algas, etc.; se analizará el aumento utilizado en
el microscopio como también sus características

II. INTRODUCCION

EL microscopio es un instrumento óptico que aumenta la imagen de los objetos. En los últimos
tres siglos ha permitido ampliar el campo de las investigaciones biológicas y se ha convertido
en el instrumento básico para abrir nuevas fronteras en la biología. La lupa puede considerarse
como el microscopio más simple y fue usada inicialmente por algunos investigadores para
adquirir los primeros conocimientos del mundo microscópico. Posteriormente se perfeccionó y
en la actualidad existen varios tipos de microscopios, algunos de ellos altamente especializados

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para una gran variedad de usos. Entre los diferentes tipos podemos citar: microscopio simple,
compuesto y electrónico.
El microscopio, al aumentar la imagen de los objetos, nos permite analizar la estructura, forma
y tamaño de diferente tipo de muestras. En esta práctica se utilizará el microscopio compuesto
en el cual se combinan dos lentes, el ocular y el objetivo, para aumentar la imagen.

III. OBJETIVOS

 Identificar las partes del microscopio y comprender sus características y la visión con él.
 Manejar el microscopio correctamente.
 Observar las características de varias muestras (la cebolla, pulga, etc.).
 Iluminar correctamente el microscopio óptico de campo claro, enfocar adecuadamente el
microscopio en todos sus aumentos

IV. MARCOTEORICO

- MICROSCOPIA
Microscopía, es el conjunto de técnicas y métodos destinados a hacer visible los objetos de
estudio que por su pequeñez están fuera del rango de resolución del ojo humano. Si bien el
microscopio es el elemento central de la microscopía, el uso del mismo se requiere para
producir las imágenes adecuadas, de todo un conjunto de métodos y técnicas afines pero
extrínsecas al aparato.

- MICROSCOPIO
Un microscopio es un instrumento que amplifica una imagen y permite la observación de
mayores detalles de los posibles a simple vista. El microscopio más simple es una lente de
aumento o un par de anteojos.

El poder de resolución del ojo humano es de 0,2 mm es decir que para ver dos objetos
separados estos deben estar como mínimo a esa distancia.

El microscopio aumenta la imagen hasta el nivel de la retina, para captar la información. La

resolución depende de la longitud de onda de la fuente luminosa, el espesor de la muestra a
observar, la calidad de la fijación y la intensidad de la coloración.

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Teóricamente la máxima resolución que se puede alcanzar es de 0,2 µm, dada por una luz con
longitud de onda de 540 nm, la cual pasa por un filtro verde (muy sensible por el ojo humano)
y con objetos condensadores adecuados. El ocular aumenta la imagen producida por el
objetivo, pero no puede aumentar la resolución.

Podemos clasificar los microscopios según su descubrimiento:

 Microscopio simple o lupa: lente convergente situada entre el ojo y el objeto.

 Microscopio compuesto: formado por 2 sistemas de lentes: oculares y objetivos.
 Microscopio moderno: produce una imagen aumentada e invertida.

Fundamentos:
Cuando se acerca un observador a un objeto, crece el ángulo visual y ese objeto parece ser
mayor. Sin embargo, por debajo de una determinada distancia (unos25 cm) entre el ojo y el
objeto, éste no se ve con claridad. Este límite se debe a la capacidad máxima de deformación
del cristalino. Si se sitúa entre el ojo y el objeto un sistema óptico capaz de aumentar el ángulo
visual, se podrá ver el objeto con mayor amplitud y claridad. Ese sistema óptico es el
MICROSCOPIO. Produce una imagen aumentada de un objeto no visible de forma que sea
perceptible por el ojo humano. Se consigue mediante el uso de lentes u otros sistemas.

Esta ampliación de la imagen se puede conseguir de dos formas:

 Ondas luminosas: microscopio Óptico

 Haz de electrones (é): microscopio Electrónico

Términos que describen las características ópticas del microscopio

Aumento:
Es la magnificación total que sufre la imagen del objeto debido al efecto de los lentes oculares
y objetivos. Se obtiene multiplicando el número de veces que aumenta el lente ocular por el
número de veces que aumenta el lente objetivo. Si el objetivo aumenta la imagen de un objeto
40 veces, ésta al pasar por la lente ocular será nuevamente aumentada.

Si el ocular aumenta 10 veces, la magnificación total en este caso será:(10X) x (40X) = 400X.
Este resultado permite saber cuántas veces más grandes estamos viendo la imagen de un
objeto.

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Contraste:
Diferencia en la absorción de luz entre el objeto estudiado y el medio que lo rodea. Puede
aumentarse mediante procedimientos de tinción.

Poder de resolución:
Capacidad de mostrar distintos y separados dos puntos muy cercanos. Determina la
máxima amplificación útil del microscopio. Depende de la longitud de onda (L) y de la apertura
numérica (AN): cuanto menor es L y/o mayor la AN, mayor es la resolución. La resolución
máxima de un microscopio óptico es de 200 nm. La distancia límite en la cual dos puntos
pueden ser todavía distinguibles se denomina Límite de Resolución.
d = (0,5 x L) / AN
Apertura numérica:
Capacidad de la lente para juntar los rayos de luz proyectados hacia ella. Determina la eficacia
del condensador y del objetivo. La AN depende del índice de refracción del medio que hay
entre la muestra y la lente (IR), y del seno de la mitad del ángulo del cono de luz que penetra
en la lente (senα).
AN = IR x senα
Si se rellena el espacio existente entre la muestra y el objetivo no con aire, sino con una
sustancia de mayor IR (ejemplo, aceite), se consigue que la mayor parte de los rayos perdidos
por los fenómenos ópticos ocasionados en el condensador y en el portaobjetos, se refracten y
penetren en el objetivo, con lo que se incrementa la resolución del microscopio.

Profundidad de campo:
Espesor de la preparación enfocada en cualquier momento. Será mayor cuanto menor sea
el aumento.

Área del campo:

Es el diámetro de la parte de la preparación que se está viendo. Será mayor cuando menor
sea el aumento.

Distancia de trabajo:
Es la distancia que existe entre el objeto en observación y el lente objetivo. Esta distancia
variará según el aumento del lente objetivo con la cual se trabaje. Es inversamente proporcional
al grado de aumento; es decir, cuanto mayor sea el aumento del lente objetivo menor será la
distancia de trabajo. Cuando se trabaje con un lente de inmersión la distancia de trabajo será
mínima. En estos casos es necesario usar aceite de inmersión entre el lente objetivo y la

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preparación debido a que el índice de refracción para este tipo de lente es la del aceite y no la
del aire. Esto permite obtener una imagen de gran tamaño y al mismo tiempo de gran nitidez.

PARTES DE UN MICROSCOPIO ÓPTICO

SISTEMA MECÁNICO:
Dentro del sistema mecánico se incluyen todos los elementos estructurales quedan estabilidad
al microscopio y mantienen los elementos ópticos correctamente alineados.

 Base o pie:
Es la pieza que se encuentra en la parte inferior del microscopio y sobre la cual se montan el
resto de elementos. Acostumbra a ser la parte más pesante para proporcionar suficiente
equilibrio y estabilidad al microscopio. Es habitual que incluya algunos topes de goma para
evitar que el microscopio se deslice sobre las superficies donde se encuentra.

 Brazo:
El brazo constituye el esqueleto del microscopio. Es la pieza intermedia del microscopio que
conecta todas sus partes. Principalmente conecta la superficie donde se coloca la muestra con
el ocular por donde ésta se puede observar. Tanto las lentes del objetivo como del ocular se
encuentran también conectadas al brazo del telescopio.

 Platina:
Esta es la superficie donde se coloca la muestra que se quiere observar. Su posición vertical
con respecto a las lentes del objetivo se puede regular mediante dos tornillos para generar una
imagen enfocada. La platina tiene un agujero en el centro a través del cual se ilumina la
muestra. Generalmente hay dos pinzas unidas a la platina que permiten mantener la muestra
en posición fija.

 Pinzas:
Las pinzas tienen la función de mantener fija la preparación una vez esta se ha colocado
sobre la platina.
 Tornillo macrométrico:
Este tornillo permite ajustar la posición vertical dela muestra respecto el objetivo de forma
rápida. Se utiliza para obtener un primer enfoque que es ajustado posteriormente mediante el
tornillo micrométrico

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 Tornillo micrométrico:
El tornillo micrométrico se utiliza para conseguir un enfoque más preciso de la muestra.
Mediante este tornillo se ajusta de forma lenta y con gran precisión el desplazamiento vertical
de la platina.

 Revólver:
El revólver es una pieza giratoria donde se montan los objetivos. Cada objetivo tiene
proporciona un aumento distinto, el revólver permite seleccionar el más adecuado a cada
aplicación. Habitualmente el revólver permite escoger entre tres o cuatro objetivos distintos.

 Tubo
El tubo es una pieza estructural unida al brazo del telescopio que conecta el ocular con los
objetivos. Es un elemento esencial para mantener una correcta alineación entre los elementos
ópticos.

SISTEMA OPTICO:
Comprende los lentes oculares, los lentes objetivos y los dispositivos de iluminación.
 Fuente de iluminación:
Se trata de una lámpara halógena de intensidad graduable. Está situada en el pie del
microscopio. Se enciende y se apaga con un interruptor y en su superficie externa puede tener
una especie de anillo para colocar filtros que facilitan la visualización.

 Condensador:
El condensador es un sistema de lentes situadas bajo la platina su función es la de concentrar
la luz generada por la fuente de iluminación hacia la preparación.

 Diafragma:
En el interior del condensador existe un diafragma (iris) cuya función es limitar el haz de rayos
que atraviesa el sistema de lentes eliminando los rayos demasiado desviados (regula la
cantidad de luz y ajusta la Apertura Numérica).

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 Oculares
Lentes dispuestos en la parte superior del tubo cercano al ojo del observador. Se denominan
así, porque están muy cercanos al ojo. Su función es la de captar y ampliar la imagen formada
en los objetivos. En los modernos microscopios hay dos oculares
(Microscopios binoculares) que están unidos mediante un mecanismo que permite ajustar la
distancia interpupilar. En general los más utilizados son los de10X (producen un aumento de
10 veces).

 Objetivos:
Están e objetivo se indican sus características principales, aumento, apertura numérica, y llevan
dibujado un anillo coloreado que indica el número de aumentos (rojo 4X, amarillo 10X, azul 40X
y blanco100X).

 Espejo o luz incorporada:

Proporciona la luz que llega hasta el objeto a estudiar y el sistema óptico del microscopio. Existe
un espejo plano por un lado y cóncavo por el otro, para ser usados cuando se disponga de
abundante o escasa luz, respectivamente. La luz incorporada corresponde a un foco de luz
eléctrica adaptado en el lugar que ocupa el espejo.

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V. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
a) Materiales

PORTAOBJETOS
Pieza clave para observar una muestra en
el microscopio. Un portaobjetos es una
lámina rectangular de vidrio transparente
sobre la cual se coloca la muestra que
deberá ser observada con el microscopio
Los portaobjetos suelen fabricarse con
vidrio sodocálcico o vidrio borosilicatado

El gotero es un instrumento de laboratorio,

GOTERO el cual se usa para trasvasar pequeñas
cantidades de líquido vertiéndolo gota a
gota.
El gotero también es conocido con el
nombre de cuentagotas.
Es un tubo hueco terminado en su parte
inferior en forma cónica y cerrada por la
parte superior por una perilla o dedal de
goma.
CUBREOBJETOS
Lámina de vidrio muy delgada de forma
cuadrada, rectangular o circular, que cubre
la muestra o preparación microscópica
para su observación, examen o
conservación.

PAPEL FILTRO

El papel filtro es un papel utilizado como

tamiz que se usa principalmente en el
laboratorio para filtrar.
Es de forma redonda y este se introduce
en un embudo, con la finalidad de filtrar
impurezas insolubles y permitir el paso a la
solución a través de sus poros.

AGUA ESTANCADA

agua estancada crea un ambiente propicio

para el crecimiento de bacterias y hongos
peligrosos ya que es fácil que se formen
bacterias dañinas como el Coli y el tétanos, así
como los mosquitos y otros insectos
portadores de enfermedades
El

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b) Equipos

MICROSCOPIO COMPUESTO

Los microscopios compuestos sirven para ampliar

mucho (típicamente un microscopio moderno está
preparado para elegir ampliaciones de entre 40 y
1500 veces) un objeto transparente, el cual es
iluminado desde el otro lado, al trasluz. Se
emplean para examinar cosas que no se
distinguen a simple vista, como las células de una
muestra de sangre o un tejido.

a) Reactivos
AZUL DE METILENO
El azul de metileno es un compuesto
heterocíclico aromático, sólido verde
oscuro, soluble en agua, produciendo
solución oscura, sin olor, con fórmula
molecular: C16H18CIN3S y masa molar
319,85 g/mol.
El azul de metileno se utiliza como un
colorante bacteriológico y como
indicador químico

LUGOL

El lugol es una solución de yodo al 1% y

yoduro de potasio 2% en agua destilada
Este reactivo reacciona con algunos
polisacáridos como los almidones,
glucógeno y ciertas dextrinas, formando
un complejo de inclusión termolábil que
se caracteriza por ser colorido, dando
color diferente según las ramificaciones
que presente la molécula.

b) Metodología

1. Quitar la funda protectora del microscopio, enchufar/encender el microscopio.

2. Tomar el portaobjeto limpio y seco con delicadeza.
3. Tomar muestra de agua estancada con el gotero y echar una gota sobre el
portaobjeto.
4. Cubrir la muestra con el cubreobjeto y con el papel filtro retirar el exceso de agua.

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5. Observar primero el objetivo con el menor aumento (4x ó 10x) hasta el objetivo de
mediano aumento (40x)
6. Con el fin de observar correctamente nos colocamos a una distancia de 1 cm o 1.5
cm aprox. Del objetivo.
7. Encendemos la fuente de luz del microscopio procurando que la muestra quede
centrada en el rayo de luz que pasa por la platina.
8. Acercamos lentamente la platina con el tornillo macrométrico hasta lograr enfocar la
imagen.
9. Realizamos las mismas operaciones con la muestra fija cuando cambiamos de
objetivo como fue en el caso del insecto observado y la cebolla.

Imagen 1.cubriendo la muestra con el cubreobjeto

Imagen 2. Enfocando la muestra para lograr ver el objetivo

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VI. RESULTADOS

GRUPO

MUESTRA AUMENTO CARACTERÍSTICA

Ocular 10x
Objetivos 4x  Insecto del reino animal
Aumentos 40x  Género: Odontomachus
 Reino: Animalia

Ocular 10x  Color violeta

Objetivos 4x  Reino: Plantae
Aumentos 40x  Familia: Amarillidaceae
 Epidermis de la cebolla

Ocular 10x  Color marrón

Objetivos 4x  Paramecios protozoos
Aumentos 40x ciliados en forma ovalada
 No se notó movimiento.

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VII. DISCUSIONES

- En el agar endo-les no se pudo contar debido a que el crecimiento era demasiado junto para
poder contarlos.
- La diferencia en la cantidad de agar endo-les y m-FC se puede deber a un mal uso de los
materiales de laboratorio
- El mayor número de coliformes en 100 ml. de muestra que en dilución de muestra.

VIII. CONCLUSIONES

- Los coliformes totales y fecales son muy caercanos en la cantidad encontrada.

- A pesar de no haber podido contar en agar ENDO-LES se puede saber que su numero es muy
cercano a el agar m-FC.
- La cantidad de coliformes encontrado en 100 ml. De muestra es mayor a que los encontrados
en disución esto debido a que estos microorganismos crecen mas en la superficie
-
IX. RECOMENDACIONES.

- Se debe familiarizarse con los elementos de seguridad disponibles (debe conocerse

la localización de extintores, mangueras, duchas de seguridad y lavaojos) y estar al tanto de
las salidas principales de emergencia, las cuales deben respetarse y evitar que sean invadidas
por objetos innecesarios.
- Los instrumentos de laboratorio o materiales no se deben utilizar en mal estado debido que
aumenta las probabilidades de accidentes en el laboratorio.
- Antes de abandonar el laboratorio se debería lavar las manos.
- Para el uso de microscopio se tendría que comprar una funda para que cuando no se
está utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se
ensucien y dañen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe guardar en su
caja dentro de un armario para protegerlo del polvo.
- Desechar el material contaminado en los recipientes adecuados, que serán esterilizados
posteriormente. Nunca se debe tirar nada contaminado por el fregador o en la basura común.

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X. CUESTONARIO
 Esquema de un microscopio señalando las partes y sus funciones.

 ¿Define que es el poder de resolución?

Es la capacidad de un sistema óptico para diferenciar entre dos puntos o líneas muy próximos
entre sí y mide la riqueza de detalles que son capaces de ofrecer los sistemas ópticos como
microscopios, telescopios, monitores, o la combinación de lentes y sensor (o película) en una
cámara. La apertura numérica determina el Poder de Resolución de un objetivo.

 ¿Cuál es la parte más importante del microscopio que utilizaste?

Los objetivos debidos que proporciona el poder de resolución del microscopio y determina la
cantidad total del aumento de 4X,10X,40X
y hasta 100X.

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 ¿Cuántos tipos de Microscopio existen?, menciónalos.

 Microscopio óptico
 Microscopio simple
 Microscopio de luz ultravioleta
 Microscopio de fluorescencia
 Microscopio petrográfico
 Microscopio de campo oscuro
 Microscopio de contraste de fases
 Microscopio con focal
 Microscopio compuesto
 Microscopio electrónico
 Microscopio electrónico de transmisión
 Microscopio electrónico de barrido
 Microscopio de iones en campo
 Microscopio de sonda de barrido
 Microscopio de efecto túnel
 Microscopio de fuerza atómica
 Microscopio virtual
 Estereomicroscopio

 ¿Por qué el cambio de objetivo a otro, provoca una modificación en la imagen

observada?
Cuando realizamos un cambio de objetivo a otro, provoca una modificación en la imagen
observada debido a que cada objetivo tiene una cierta cantidad de aumento sobre la muestra.
Las características de los objetivos:

 Lupa (4X) que sirve para hacer observaciones a bajo aumento

 El objetivo seco débil (10X) que se utiliza para ubicar la imagen que se va a observar
 El objetivo seco fuerte (40x) que aumenta la imagen anterior. Para poder observar se necesita
primero acercar el objetivo al portaobjetos y posteriormente acercar el objetivo hasta que
aparezca la imagen

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 El objetivo de inmersión (100X) que es un lente especial para observar imágenes tan
pequeñas como las bacterias. Para ello se requiere del aceite de inmersión para lograr una
buena observación.

 ¿Cómo y porque varia la luminosidad del campo al variar cada objetivo?

Se debe a la cantidad de luz que entra por el objetivo según la apertura del diafragma y la
distancia focal. La apertura es el diámetro del diafragma situado en el interior del objetivo y
cuanto mayor sea, más cantidad de luz llegará.

 ¿Cómo se determina la cantidad de aumentos que observas en el microscopio?

La cantidad de aumentos que se observa en un microscopio, se calcula multiplicando el
aumento del ocular por el del objetivo que se esta usando, como por ejemplo si utilizas el
aumento ocular de 10x por un objetivo de 4x tendrás un aumento de 40x.

XI. BIBLIOGRAFIA

- Manual de prácticas de Microbiología básica y Microbiología de alimentos. Programa de

Nutrición. Luis Roberto Alarcón
- Microbiología práctica de los alimentos, Roberts D., Hooper W., Greenwood
- Microbiología Pascual Anderson Maria del Rosario, Calderón y Pascua Vicente.

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XII. APENDICE

DIAGRAMA DE FLUJO

•En un porta
objetos limpio y
Otro
seco ,coloca una
microorganismo
gota de agua
observado en le
estancada y
microscopio
observa en el
microscopio.

Para observar
correctamente, debes
Observa primero tener una distancia
con el menor aprox 1cm o 1.5cm del
aumento de 4X objetivo,enciende la
fuente de luz
preocurando que la
muestra este centrada
en el rayo de luz

Posteriormente se
Despues observar va acercando con el
con un aumento de tornillo macrometico
10X y despues con y finalmente con el
un aumento de
tornillo micrometico
40X
se enfoca aclarando
mejor la imagen.

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DATOS ORIGINALES Y OBSERVABLES

AGUA ESTANCADA

ORGANISMO VIVO

CEBOLLA

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