Universidad Autónoma de Chiriquí

Facultad de Ciencias Naturales y Exactas

Licenciatura en Biología con Énfasis en Microbiología

Bioquímica

QM 230

Identificación Cualitativa de Carbohidratos

Integrantes:

Jenifer Rojas 4- 804-907

Nathalie Solé 4-798-383

Profesor:

Dr. Aristides Quintero Rueda

II Semestre

2019
Resumen. Para la identificación de carbohidratos se
realizaron diversas pruebas químicas en glucosa, fructuosa,
sacarosa, arabinosa, maltosa, almidón, leche, jugo de
naranja, jugo de pipa y papa. Primero se realizó la prueba
de Molish dando positiva en todas las muestras, debido a
que permite el reconocimiento general en todos los
carbohidratos, para la prueba de Benedict solo
reaccionaron aquellos que son azúcares reductores por
ende no reaccionaron el almidón, la leche y papa. Luego se
llevó a cabo la prueba de Lugol donde solo reacciono la
papa y almidón por ser polisacáridos, en la prueba de
Seliwanoff dieron positivos aquellos que poseen en su
estructura el grupo cetona como la fructuosa y sacarosa.
Por último, se hizo la prueba de Bials marcando positivo
para pentosas por ende la arabinosa fue la única que
reacciono. En conclusión, las propiedades químicas y
físicas que poseen los carbohidratos nos permiten
identificarlos a través de pruebas ya sea de manera general
o especifica.
Objetivos
1. Realizar pruebas químicas para la identificación de
carbohidratos.
2. Estudiar algunas propiedades químicas y físicas de los
carbohidratos.
Introducción
En la química de la vida los carbohidratos son compuestos
de gran importancia, se encuentran distribuidos en
sustancias de tipo familiar como la celulosa, los azúcares y
los almidones.
Los carbohidratos poseen una estructura basada en una
cadena de carbonos con los siguientes grupos funcionales:
Alcohol, aldehído, cetona. Los carbohidratos son
polialcoholes aldehído o polialcoholes cetona o el
resultado de procesos de hidrólisis (Rodríguez, 2015).
Los carbohidratos se clasifican en monosacáridos,
oligosacáridos y polisacáridos de acuerdo con el número
de grupos simples que contengan. Los monosacáridos
como la ribosa, fructosa, glucosa y galactosa son aquellos
que no pueden ser hidrolizados para dar moléculas más
simples que sean catalogadas como carbohidratos. A su vez
son clasificados de acuerdo con el número de átomos de
carbono que tienen en triosas, penosas, hexosas, etc. Los
monosacáridos son buenos agentes reductores, por lo que
fácilmente reducen a los reactivos de Benedit, Fehling,
Tollen’s, etc.
Los disacáridos como la sacarosa, maltosa, lactosa son
aquellas que al ser hidrolizados liberan dos moléculas de
carbohidratos.
Los polisacáridos son considerados polímeros, por estar
formados por muchas unidades de monosacáridos. El
almidón, el glucógeno y la celulosa son ejemplos de
polisacáridos. (Castro M. et al,2017).
Pruebas que permiten el reconocimiento de carbohidratos:
Prueba de Molisch: Este ensayo permite el reconocimiento
general de carbohidratos en el que los polisacáridos y
disacáridos se hidrolizan con ácido sulfúrico concentrado
hasta monosacáridos y se convierten en derivados del
furfural o 5-hidroximetil furfural los cuales reaccionan con
α-naftol formando un color púrpura violeta.
Prueba de Benedict: El ensayo de Benedict permite el
reconocimiento de carbohidratos eductores, al igual que el
reactivo de Felhing, el de Benedict contiene ion cúprico en
medio alcalino que se reduce hasta óxido cuproso en
presencia de azúcares con el hidroxilo hemiacetálico libre.
Prueba con Lugol: El reactivo de Lugol que contiene una
mezcla de yodo y yoduro, permite reconocer polisacáridos,
particularmente el almidón por la formación de una
coloración azul-violeta intensa.
Prueba de Seliwanoff: Este ensayo es específico para
cetosas y se basa en la conversión de la cetosa en 5-hidro-
metil-furfural y su posterior condensación con resorcinol
formando así complejos coloreados.
Prueba de Bial: El reactivo de Bial contiene orcinol en
ácido clorhídrico, el cual forma complejos de coloración
sólo con las pentosas (Lozano, 2018).
Materiales y Reactivos
Reactivos: Soluciones de carbohidratos: glucosa, fructosa,
arabinosa, sacarosa al 1%, Maltosa, Almidón, Reactivo de
Molish, Reactivo de Benedict, Reactivo de Seliwanoff,
Reactivo de Bials, Ácido sulfúrico concentrado, Lugol.
Materiales: Tubos de ensayo, gradillas, vasos químicos 250
mL, 100 mL, probetas 10 mL, baño maria, plancha,
goteros.
Muestras de: agua de pipa, jugo de naranja, leche, papa.
Toxicidad
-H2SO4: Es corrosivo para todos los tejidos del cuerpo.
Provoca severas quemaduras, irritación (enrojecimiento,
inflamación, dolor), dificultad respiratoria, náuseas, tos,
sofocación.
-Reactivo de Benedict: Causa irritación en el tracto
respiratorio, ojos. En caso de ingestión puede ser toxico,
puede ser dañino al contacto con la piel
-Reactivo de Molish: Contiene H2SO4 concentrado, que es
tóxico y corrosivo. Puede causar quemaduras graves.
 Evitar contacto con los ojos, piel, ropa, material Almidón + - + - -
combustible. Leche + - - - -
-Reactivo de Seliwanoff: Sustancia corrosiva para todos Jugo de
+ + - + -
los tejidos del cuerpo especialmente piel y ojos. Provoca naranja
irritación en la nariz. Tracto respiratorio, ulceración, Jugo de
+ + - + -
opresión en el pecho y falta de aliento. pipa
Papa + - + - -
-Reactivo de Bials: El material es extremadamente
(+) prueba positiva (-) prueba negativa
destructivo para el tejido de las membranas mucosas y
tracto respiratorio superior. Nocivo si se absorbe a través
de la piel, quemaduras al contacto con los ojos, piel.
-Lugol: La toxicidad aguda de la solución de lugol está
relacionada con su contenido de todo, aunque la alta
concentración de potasio puede causar irritación en las
membranas mucosas.
Metodología
-Prueba de Molish: Se colocó 2 mL de la solución de
estudio (glucosa, fructuosa, sacarosa, arabinosa, maltosa, Fig. 1 Estructura de la glucosa y sacarosa.
almidón, leche, jugo de naranja, jugo de pipa, papa) en un
tubo de ensayo, se le adiciono 7 gotas de Molish, luego por
las paredes del tubo se le agregaron poco a poco 20 gotas
de H2SO4 (sin agitar). Se observó el cambio de coloración.
-Prueba de Benedict: Se agregaron 20 gotas de la solución
de estudio en un tubo de ensayo, se le adiciono 40 gotas del
reactivo de Benedict, se colocó los tubos en un baño de
agua hirviendo y se observaron los cambios de coloración
durante el calentamiento. Fig. 2 Estructura de la sacarosa.
Grupo
- Prueba de Lugol: En un tubo de ensayo se colocó 40 gotas
de la solución de estudio, luego se le adiciono una gota de aldehído
lugol y se observaron los cambios de color producidos.
-Prueba de Seliwanoff: Se colocó 2 mL de las soluciones
de estudio, luego se le adiciono 2 mL del reactivo de
Seliwanoff, se calentó a baño maría a ebullición hasta la
aparición de un color rojo intenso.
-Prueba de Bials: Se colocó 2 mL de la solución de estudio
en tubos de ensayo, luego 3 mL del reactivo de Bials y se Fig. 3 Estructura de la arabinosa.
calentó a baño maría a ebullición hasta la aparición de una
coloración azul verdosa.
Resultados
Cuadro 1. Identificación de Carbohidratos.

Muestra Molish Benedict Lugol Seliwanoff Bials

Glucosa + + - - -
Fructuosa + + - + -
Sacarosa + + - + -
Arabinosa + + - - + Fig. 4 Estructura de la maltosa.
Maltosa + + - - -

Fig. 4 Estructura del almidón.
Fig. 5 Reacción de Molish en carbohidratos.
Discusión
Para identificar cualitativamente carbohidratos en las
soluciones de estudio se llevaron a cabo diferentes pruebas:
-Prueba de Molish: La prueba de Molish permite detectar
la presencia de hidratos de carbono en una muestra; está
basada en la formación de furfural o derivados de éste
(originado por los ácidos concentrados que provocan una
deshidratación de los azúcares) a partir de los
carbohidratos para obtener el furfural que se combina con
el -naftol sulfonato originando un complejo púrpura como
se observa en la Fig. 5. Es una reacción muy sensible
puesto que soluciones de glucosa al 0.001% y sacarosa al
0.0001% dan positiva la prueba. También sirve para el
reconocimiento general de carbohidratos donde
polisacáridos y disacáridos se hidrolizan formando
monosacáridos formando un color púrpura violeta. En
nuestro caso la prueba de Molish dio positivo con todas las
muestras como se observa en el cuadro 1. Todos los
glúcidos por acción del ácido sulfúrico concentrado se
deshidratan formando compuestos furfúricos (las pentosas
dan furfural y las hexosas dan hidroximetilfurfural). Estos
furfurales se condensan con el reactivo de Molish (solución
alcohólica de alfa-naftol), dando un producto violeta.
(Aguilar et al, 2014)
-Prueba de Benedict: Algunos azúcares tienen la propiedad
de oxidarse en presencia de agentes oxidantes como el ión
Fe+3 o Cu+2. Debido a la presencia de un grupo carboxilo
libre (C=O), que es oxidado y genera un grupo carboxilo (-
COOH). Por lo tanto, los azúcares con un grupo carbonilo
libre son los azúcares reductores y aquellos en los que el
grupo carbonilo se encuentra combinado en unión
glicosídica se conocen como azúcares no reductores.
(Domínguez, 2015), como se observa en el cuadro 1. No
reaccionaron el almidón, leche y papa debido a que estos
no son azucares reductores. Además, la solución de
Benedict es de color azul claro porque contiene sulfato de
cobre. Cuando se mezcla y se calienta con un azúcar, como
la glucosa, la cual tiene electrones disponibles para donar,
el cobre acepta estos electrones y se reduce, con lo cual se
vuelve marrón anaranjado. Durante este proceso, el ion
cobre azul (II) se reduce a ion cobre rojo (I). Mientras que
el cobre se reduce, la glucosa dona un electrón y se oxida.
Como la glucosa es capaz de reducir al cobre en la solución
de Benedict, la llamamos azúcar reductor. (Brooke, 2017).
Prueba de Lugol: El lugol contiene una mezcla de yodo y
yoduro, permite reconocer polisacáridos, particularmente
el almidón por la formación de una coloración azul-violeta
intensa, esta prueba se basa en la formación de un complejo
I-3 y la molécula de amilosa de almidón, esta última tiene
forma helicoidal. Cuando se introduce el ión I-3 dentro de
la hélice se forma una solución negra o violeta intenso
dependiendo de la concentración (Martín et al, 2013).
-Prueba de Seliwanoff: Esta prueba consiste en la reacción
del resorcinol (1,3 dihidróxibenceno) con las cetosas
deshidratadas por el HCI concentrado. Se observa la
formación de un complejo rojo (Jiménez, 2011). En
nuestro caso utilizamos H2SO4 pero al ser un ácido fuerte
posee la misma función. Como se muestra en el cuadro 1.
Reaccionaron la fructuosa, sacarosa, jugo de naranja, jugo
de pipa debido a la presencia del grupo cetona en su
estructura. Esta prueba se basa en el hecho de que las
cetosas son deshidratadas más rápido que las aldosas al
calentarlas, aunque ambas dan la reacción. (Carrasco,
2014) La sacarosa presentó una variación de color muy
baja debido a que está formada por glucosa y fructosa por
lo tanto tiene un bajo carácter de azúcar cetosa en su
estructura.
Prueba de Bials: Únicamente la arabinosa dio un resultado
positivo a esta prueba puesto que según la teoría el reactivo
se usa para diferenciar pentosas de hexosas. El reactivo de
Bial contiene orcinol en ácido clorhídrico, el cual forma
complejos de coloración sólo con las pentosas (Lozano,
2018).
Conclusión
-Se identificó la presencia de carbohidratos mediante
diversas pruebas químicas.
- Se observó que la prueba de Molish es para identificar
carbohidratos en general, la prueba de Benedict solo para
azucares reductores, la prueba de Lugol para polisacáridos,
la prueba de Seliwanoff para carbohidratos que poseen en
su estructura cetosas y la prueba de Bials para pentosas.
-Se observó mediante las pruebas que los carbohidratos
poseen propiedades químicas y físicas que nos permiten su
identificación como la presencia del grupo carbonilo en su
estructura.
Cuestionario
1. ¿Cuál de los carbohidratos o muestras exhibe poder
reductor?
R: Glucosa, fructuosa, sacarosa, arabinosa, maltosa, jugo
de naranja y el jugo de pipa.
2. ¿Qué grupo químico es responsable del poder reductor
que tienen algunos carbohidratos?
R: El grupo químico responsable del poder reductor en
algunos carbohidratos es el grupo carbonilo: cetonas,
aldehídos.
3. ¿Cuáles carbohidratos no tienen poder reductor?
R: Almidón, leche y la papa.
4. ¿Cuál de los carbohidratos utilizados es clasificado
como una cetosa?
R: Fructuosa, sacarosa, jugo de naranja y el jugo de pipa.
5. ¿De los azucares usados cuales son monosacáridos y
cuales son disacáridos?
R: Monosacáridos: glucosa, fructuosa, arabinosa,
Disacáridos: maltosa.
6. ¿Qué pentosa forma parte de la estructura de los ácidos
nucleicos?
R: Pentosas que forman parte de la estructura de los ácidos
nucleicos: Desoxirribosa (ADN) ribosa (ARN).
7. ¿Que indica una prueba de Benedict positiva?
R: La prueba de Benedict indica la presencia de azucares
reductores.
8. ¿Que indica una prueba de Lugol negativa?
R: La prueba de lugol negativa indica que la muestra o
sustancia no posee polisacáridos.
Bibliografía
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