FACTORES AMBIENTALES Y NUTRICIÓN

EPIGENETICA
Y
REPROGRAMACION FETAL

AMRonco, PhD, 2014

Puede la dieta afectar la salud del individuo???

Bases moleculares de la respuesta

EPIGENETICA
 AMBIENTAL GENETICO

Nutrientes Digestion
Contaminantes Absorcion
ambientales GENOMA Distribucion
Estrés Transformacion
PO2 Almacenamiento
Excrecion

Expresión del genoma

Transcripción
(mRNA)

SALUD NUTRICIONAL
 Qué es la epigenética??

La epigenética (epi: del griego, en o sobre)

Se define como la regulación de la expresión génica sin cambio en la
secuencia de nucleótidos que perdura más allá de 2 divisiones mitóticas e
incluso puede llegar a ser heredable (3 generaciones).

Hace referencia, en un sentido amplio, al estudio de todos aquellos factores

no genéticos ( ambientales) que pueden afectar la expresión de un gen.
Intervienen en la determinación de la ontogenia o desarrollo de un organismo,
desde el óvulo fertilizado hasta su senescencia, pasando por la forma adulta.

El término fue acuñado por C. H. Waddington en 1953 para referirse al

estudio de las interacciones entre genes y ambiente que se producen en los
organismos.
En qué etapas de la vida la expresión de genes es más susceptible de
ser modificada por el ambiente??

- Desarrollo fetal y perinatal

- Pubertad

- Vejez
Nutrientes
Agentes externos
Oxígeno
Stress
Genoma

? Patrón de
expresión génica

Crecimiento y Desarrollo Fetal

adecuado
GC
Rinaudo and Wang, Annu Rev Phisiol, 2012
Rinaudo and Wang, Annu Rev Phisiol, 2012
Reprogramación: se ha definido para explicar las asociaciones entre
ambiente ( interno y externo) y alteraciones estables en el fenotipo.

Los efectos sobre la Reprogramación reflejan la influencia de un factor

específico durante un período del desarrollo sobre la organización de tejidos
blancos y/o patrones de expresión génica que afectan su función a través de
la vida
Trastornos maternos predicen una disminución del crecimiento fetal (retraso) y
un aumento en la actividad del eje hipotálamo-hipófisis-adrenal (HHA)

La actividad HHA predice el PN; GC reducen PN y se altera la expresión de

ciertos genes de una manera tal que se favorece la producción y almacenamiento
de sustratos energéticos y se aumenta la reactividad.

Estos efectos aumentan el riesgo de hiperlipidemia, hipergliceridemia e

hipertensión.
Del mismo modo el stress pre y perinatal aumentan la actividad HHA en la vida
futura aumentando el riesgo de desórdenes metabólicos.
McMillen and Robinson, 2005
Por lo tanto el origen temprano de enfermedades tardías emerge como una
conjunción de los siguientes eventos:

Exposición a un agente ambiental adverso

SEÑAL (Inducción de GC y exposición

fetal a ellos)

-Programación de la expresión génica favoreciendo la producción aumentada de

energía ( lípidos y glucosa)

-Estos efectos son consecuencias de la modificación en la expresión de genes a

nivel de la transcripción
Cambios epigenéticos

Modificaciones covalentes que afectan al DNA y las estructuras proteicas que

envuelven al DNA (cromatina), que determinan la accesibilidad de la maquinaria
transcripcional al genoma por lo que determinan LA EXPRESION DE UN GEN

Tipos de modificaciones epigenéticas

-Metilación del DNA: metilación de residuos de citosina presentes en la

secuencia de dinucleótidos CG en el DNA en regiones promotoras del gen.
-Modificación de histonas: metilación y acetilación de histonas
-Micro RNAs
Cada molécula de DNA está empacada en un cromosoma y toda la información
genética está almacenada en un cromosoma separado y constituye su genoma.

Los cromosomas están empacados en una estructura compacta con la ayuda de

proteínas especializadas divididas en 2 clases: histonas y no-histonas

El complejo de las proteínas con el DNA es lo que se llama Cromatina.

Las histonas son únicas de los eucariontes.

Las histonas son proteínas pequeñas con alta proporción de aa cargados

positivamente ( lis y arg) lo que las ayuda a permanecer muy unidas al DNA ( que
está cargado negativamente).

Hay 5 tipos de histonas divididas en 2 grupos principales:

- H1 responsable de empacar al DNA en nucleasoma
. H2A, H2B, H3, y H4.
Metilación de histonas se extiende, induce compactación de la
cromatina e induce represión masiva de la actividad
transcripcional
La acetilación de histonas modula positivamente
la actividad transcripcional
Metilación del DNA y sus consecuencias para la
transcripción

La metilación del DNA afecta la estructura covalente del DNA

Las enzimas DNA metiltransferasas (DNMTs) catalizan la transferencia

de un grupo metilo desde el dador S-adenosilmetionina (SAM) a la
posición 5′ del anillo de citosina que en la mayoría de los casos está en la
secuencia del dinucleótido CG

DNMT1; DNMT de mantención, está involucrada en copiar el patrón de

metilación durante la replicación celular.
DNMT3a y 3b: DNMT de novo, inician la metilación

Los vertebrados tienen un patrón de metilación de sus secuencias CG

que es específico del tejido; no todas las secuencias CG están
metiladas.
La metilación del DNA es crítica en la inhibición de la expresión de genes por
2 mecanismos:

1. Si el DNA se metila en sitios críticos, inhibe la unión de factores de

transcripción a sus elementos de reconocimiento

2. La metilación de una región regulatoria del DNA recluta la unión de

proteínas de unión al DNA tal como la MeCP2 y enzimas de modificación
de la cromatina tal como las HDACs que deacetilan las histonas resultando
en la inhibición de la cromatina.

Por lo que cualquier evento al azar o programado de metilación del DNA en

sitios críticos en respuesta a un agente ambiental adverso puede resultar
en un cambio en el fenotipo similar a una mutación en la misma secuencia.

Metilación del DNA regula negativamente la transcripción y es heredable

Dieta materna y epigenética

1. Restricción proteica: crías: hipertensión, alteración metab glucosa,

dislipidemia, alteración función vascular e inmunidad
Esto se exacerba si en las crías adultas se aumenta de
4 a 10% el consumo de grasa

2. Restricción dietaria global: retraso del crecimiento, menor peso al nacer,

hiperI, hiperleptinemia, hiperfagia, obesidad.
Alteración eje H-H-A
3. Dietas elevado consumo de grasa: obesidad, Diabetes -2, IR, metab alterado
colesterol, hipertensión

Mecanismos epigenéticos alterados. P. ej hipometilación de GR , PPAR y

expresión en hígado de crías

AF en la dieta revertía la metilación

La dieta puede contribuir a modificaciones en la metilación del DNA??

La dieta puede afectar el fenotipo especialmente si se relaciona con modificaciones

al aporte de grupos metilos ( dieta baja en proteínas: glicina y metionina, y acido
fólico) en períodos de modificaciones epigenéticas: perinatal: gestación y neonatal,
pubertad, envejecimiento.

Por qué???

Las DNMTs requieren SAM cuya síntesis es dependiente de la disponibilidad de

folatos dietarios, vitamina B12, metionina, betaina y colina.
Etapas en la modificación epigenética por la dieta
1. Dieta influencia aporte de
grupos metilo para SAM

2. Dieta modifica uso de metilos

para actividad DNMTs

3. Efectos dietarios
sobre demetilación de DNA

4. Huella de metilación se ve influenciada por

compuestos bioactivos de la dieta
Factores dietarios involucrados en el metabolismo de 1 –C que
influencian la disponibilidad de SAM y probablemente la
metilación del DNA
Otros factores dietarios tales como Zn y alcohol pueden influenciar la disponibilidad
de grupos metilo para la formación de SAM y por lo tanto influenciar la metilación
de CpG

Otros componentes dietarios tal como dialil disulfuros, sulforafanos y butiratos

pueden actuar como HDACi.
Ej: el brócoli (contiene elevados niveles de sulforafanos), ha sido asociado con la
acetilación de histonas en las células mononucleares ( en ratón) 3-6 h después de su
consumo.
No se sabe aún sus consecuencias a largo plazo.
Sin embargo se sabe que HDACis actuan como anti-inflamatorios y agentes
neuroprotectivos ( lupus, esclerosis múltiple)

El butirato de sodio tiene efectos antidepresivos

Inhibición de DNMT en línea celular de cáncer esofágico por diferentes polifenoles
Barnett et al.,2010
La dieta materna induce cambios en el color del pelaje debido a alteración en la
expresión del gen Avy debido a cambios en la metilación de su DNA
Distribución del color en crías de madres suplementadas con genisteína
Y su correlación con la metilación de CpG específicas dentro del gen
Avy IAP
Impacto de antioxidantes, folato y dieta rica en vitamina sobre el perfil epigenético de MLH1:
gen responsable de la reparación del DNA especialmente importante en pacientes diabéticos

Muestra: se compara metilación de MLH1 en muestras sanguínea de pacientes con DM2 (G1); pacientes
con niveles de glucosa en ayuno alterada (G2) y control (normales, GC)
Intervención nutricional por 8 semanas

Resultados: en G1 y G2 aumenta significativamente metilación de MLH1 aunque sin correlación con la

expresión del gen

Conclusión: intervención dietaria con antiox y vitaminas puede modificar metilación del MLH1 como
consecuencia del poder atrapador de ROS de la dieta conduciendo a una inactivación de enzimas
demetilantes
Influencias ambientales: dieta y estrés materno afectan el fenotipo de las crías como consecuencia
de cambios permanentes en la expresión de genes, incluyendo GR. Esos genes cambian su expresión debido
a una alteración de los mecanismos epigenéticos: acetilación de histonas y metilación del DNA.
Algunos efectos se pueden revertir con administración de metionina en la dieta materna
Varios factores de transcripción ligados a cardiogénesis son regulados por Vit A
GATA-4 es un factor de transcripción que media la diferenciación, proliferación y sobrevivencia
de los cardiomiocitos por lo que su expresión es crítica durante el desarrollo cardiaco
Hipótesis: metilación de GATA-4 conduce a defecto cardiaco congénito en crías con deficiencia de vit A.

Modelo: ratas con deficiencia de vit A durante la gestación

Resultados: crías deficientes en vit A mostraron elevada incidencia de defectos cardiacos congénitos
asociado a una mayor metilación y menor expresión del promotor de GATA-4
Este grupo mostró mayor expresión de DNMT1 y menor DNMT3(a y b) sugiriendo que los defectos
cardiacos asociados a deficiencia de vit A se asocian con mecanismos de metilación alterado
Se estudia los efectos de dietas maternas con déficit y exceso de proteínas y se analiza en músculo
e hígado de las crías (cerdo) la expresión de genes claves en el metabolismo de metionina.

La expresión de los genes DNMTs variaba por dietas con exceso y déficit de proteínas lo que indica
que la metilación de DNA se ve afectada por el suministro dietario de proteínas
El método más usado es la conversión con bisulfito. El DNA se trata con bisulfito
que convierte citosinas no metiladas en uracilo. Las citosinas originalmente
metiladas no cambian durante el tratamiento. Luego, el perfil de DNA se
determina por PCR seguido por secuenciación.