Universidad Central de Venezuela

Facultad de Medicina
Escuela Luis Razetti
Cátedra de Bioquímica

TEMA 2. Aminoácidos
Estructura y propiedades ácido base

Vanessa Miguel
@bioquitips

Noviembre 2012
Objetivos generales del Tema 2

 Describir la estructura de los aminoácidos

 Explicar las propiedades ácido-base y la ionización de los aminoácidos
 Interpretar la curva de titulación de los aminoácidos

Estructura y propiedades de los aminoácidos

Objetivos
1) Reconocer la fórmula
general de los aminoácidos
2) Describir las características
de los tipos de cadena
lateral de los aminoácidos
3) Clasificar los aminoácidos
según las características de
su cadena lateral
4) Describir las propiedades
ácido-base de los
aminoácidos.
5) Definir punto isoeléctrico (pI)
de los aminoácidos.
6) Representar la curva de
titulación de los aminoácidos
7) Interpretar la curva de
titulación de los aminoácidos
8) Representar las formas
iónicas de los aminoácidos a
diferentes pH
9) Calcular la carga neta de los
aminoácidos a diferentes pH
y el punto isoeléctrico
Contenidos
Carbono alfa, grupo amino, grupo carboxilo y
cadena lateral (R)
Cadenas alifáticas, aromáticas, ácidas y
básicas
Polaridad, carga eléctrica, grupos aromáticos,
propiedades ácido-base
Ionización de los grupos alfa amino, alfa
carboxilo y cadenas laterales
Carga del aminoácido
Representación de pH versus equivalentes de
base añadidos a soluciones de aminoácidos
monoamino-monocarboxílico, aminoácidos
diamino-monocarboxílico y aminoácidos
monoamino-dicarboxílico.
Identificación de pKs y pI
Ionización de los grupos alfa amino, alfa
carboxilo y cadenas laterales a la
concentración de H+
Suma algebraica de cargas de los grupos alfa
amino, alfa carboxilo y cadenas laterales

2
 Actividad de Aprendizaje

Consulta alguno de los siguientes libros:

Champe, P., Harvey, R. y Ferrier, D. (2005) Bioquímica. 3ra ed. México:

Editorial Mc Graw Hill.

Devlin, Thomas. (2004). Bioquímica. Libro de texto con aplicaciones clínicas.

4ta ed. Editorial Reverté S.A.

Mathews-Van Holde-Ahern. (2003). Bioquímica. 3ra ed. Editorial Addison

Wesley.

McKee, T. y McKee, J.R (2009) Bioquímica. 4ta ed. Madrid: Editorial Mc Graw
Hill.

Murray, R.; Bender, D.; Botham, K.; Kennelly, P. Rodwell, V. y Weil, P. (2010)
HARPER, Bioquímica ilustrada. 28o ed. México: McGraw Hill.

Nelson, D. y Cox, M. (2005). Lehninger. Principios de Bioquímica. 4ta ed.

Editorial Omega.

Smith, C.; Marks, A. y Lieberman, M. (2006). Bioquímica básica de Marks. Un

enfoque clínico. 2da ed. McGraw Hill-Interamericana.

Voet, D.; Voet, J. y Pratt, C. (2007). Fundamentos de Bioquímica. La vida a

nivel molecular. 2da ed. Editorial Médica Panamericana.

Puedes utilizar cualquier libro de Bioquímica ya que éste tema se encuentra en

todos ellos.

3
 Actividad de Aprendizaje

• Realiza la siguiente lectura: Estructura y propiedades ácido base de los

aminóacidos

Estructura y propiedades ácido base de los aminóacidos

Estructura de los aminoácidos

Los aminoácidos son los bloques constituyentes de las proteínas. Casi todas las
proteínas consisten en diversas combinaciones de los mismos 20 aminoácidos,
conocidos como aminoácidos estándar o alfa aminoácidos. Desde el punto de vista
químico, los alfa aminoácidos son compuestos que presentan, unido al mismo
átomo de carbono (conocido como carbono α), un grupo ácido débil, carboxilo (-
COOH), un grupo básico débil, amino (-NH2), y una cadena lateral (R), que define
las propiedades particulares de cada aminoácido. La estructura general de los α-
aminoácidos (a excepción de la prolina que es cíclica) es la siguiente:

Dado que ambos grupos funcionales (amino y carboxilo) son susceptibles a los
cambios de pH, ningún aminoácido se encuentra de esa forma, sino que se
encuentra ionizado. De acuerdo con la naturaleza del grupo R se pueden clasificar a
los aminoácidos en polares (con y sin carga) y aminoácidos no polares (ver Fig, 1).
Para una mejor visualización, puedes revisar el esquema de clasificación de los
aminoácidos en http://www.educaplus.org/play-47-Amino%C3%A1cidos.html

4
 Figura 1. Clasificación de los aminoácidos
(http://www.genomasur.com/lecturas/Guia02-2.htm)

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Propiedades ácido base

Tanto el grupo amino como el grupo carboxilo, son grupos químicos ionizables o
protonables, es decir, son grupos capaces de ceder o ganar un protón y en ese
proceso, ganar o perder una carga negativa o positiva, tal como se observa en las
siguientes ecuaciones:

COOH ↔ COO- + H+ (1) Ka1 = [COO-] [H+] / [COOH]

NH3+ ↔ NH2 + H+ (2) Ka2 = [NH2] [H+] / [NH3+]

Debido a su capacidad de ceder o ganar protones, los aminoácidos pueden actuar

bien como un ácido o como una base. Las sustancias que tienen este
comportamiento dual son anfóteras y reciben el nombre de anfolitos.

Un aminoácido puede tener hasta tres grupos con carácter ácido-base: el α -amino,
el - α carboxilo y, en algunos casos, el grupo –R. Lo importante es que estos grupos
poseen un carácter ácido-base débil, lo que hace que dependiendo del pH, el
correspondiente equilibrio pueda desplazarse hacia la formación de la especie
protonada o hacia la formación de la especie desprotonada. En otras palabras, la
forma iónica predominante de los aminoácidos en soluciones acuosas depende del
pH, es decir, de la concentración de protones libres en el medio. Este aspecto es
importante, pues de ello dependen las propiedades químicas y la funcionalidad
biológica de los péptidos y las proteínas que ellos conforman. Entre otras cosas, las
propiedades ácido-base de los aminoácidos también se aprovechan para la
separación y purificación de los aminoácidos y las proteínas.

Como hemos dicho antes, las propiedades ácido-base de un aminoácido vienen

determinadas por los grupos protonables que posee, cuyo equilibrio puede
desplazarse en un sentido o en otro (hacia la forma protonada o hacia la
desprotonada), dependiendo del pH del medio.

Ahora bien, dada la estructura general de un aminoácido y asumiendo que éste no

posee ningún grupo protonable en su cadena lateral -R, podríamos ver cuál sería el
comportamiento de sus dos grupos protonables: el α-amino y el α-carboxilo, frente a
los cambios de pH. A pH fisiológico (≈ 7,4), los aminoácidos presentan una
estructura donde el grupo α-carboxilo está desprotonado y el grupo α -amino se
encuentra protonado:

6
Veamos por qué esto es así:

El grupo α-carboxilo presenta dos formas posibles, una protonada y sin carga (-
COOH), y otra desprotonada y cargada negativamente (-COO-), según el equilibrio
anteriormente presentado en la ecuación (1). Si el pH de la solución aumentase
(disminución de la concentración de protones libres), el equilibrio se desplazaría
hacia la derecha (predominando en la solución la forma con carga -1) y si el pH
disminuyese (aumento de la concentración de protones libres), el equilibrio se
desplazaría hacia la izquierda (predominando en la solución la forma con carga 0).
De igual manera, con el grupo α-amino ocurriría algo similar. El grupo α-amino
presenta dos formas posibles, una protonada y cargada positivamente (-NH3+), y
otra desprotonada y sin carga (-NH2), según el equilibrio anteriormente presentado
en la ecuación (2). Si el pH de la solución aumentase, el equilibrio se desplazaría
hacia la derecha (predominando en la solución la forma con carga 0) y si el pH
disminuyese, el equilibrio se desplazaría hacia la izquierda (predominando en la
solución la forma con carga +1). De modo que en función del pH, la proporción de
forma protonada o forma desprotonada de cualquiera de estos dos grupos variará,
con predominio de una forma u otra (Ver Fig. 2)

Figura 2. Cambio en la ionización de un aminoácido al cambiar el pH

(http://www.scrigroup.com/limba/spaniola/332/AMINOCIDOS35654.php)

7
Supongamos que la solución se encuentra a pH 1. Bajo estas condiciones
tendríamos un exceso de protones en el medio y ambos equilibrios estarían
desplazados hacia las formas protonadas. Si aumentamos el pH los equilibrios
comenzarían a desplazarse hacia la derecha hasta llegar a un pH muy básico, en el
cual, las formas predominantes serían las desprotonadas.

Pero, ¿qué ocurriría a valores de pH intermedios? En estos casos, debemos tomar

en cuenta la Ka para cada equilibrio, o mejor dicho su pKa (que sería el -logKa). En
general, el pKa de los grupos α -amino presenta un valor cercano a 9. A un pH igual
al pKa, es decir a un pH igual a 9, el 50% de los grupos amino estarán protonados y
50% estarán desprotonados, según se desprende de la ecuación que relaciona el
pH con el pKa (ecuación de Henderson-Hässelbalch).

pH = pKa + log [anión] / [ácido]

ya que para que el pH sea igual al pKa, se debe cumplir que las concentraciones del
ácido y de la base conjugada sean iguales:

[A-] / [HA] = 1 por lo tanto,

pH = pKa + log 1 = pKa + 0

pH = pKa

Por su parte el grupo α -carboxilo tiene un pKa cercano a 2, por lo que el 50% de
este grupo estará protonado cuando el pH del medio sea igual a 2.

En general,

• Si el pH < pK predomina la especie iónica protonada

• Si el pH > pK predomina la especie iónica desprotonada

• Si el pH = pK el grupo está 50% protonado y 50% desprotonado

Si se tratase de un aminoácido con tres grupos ionizables, como es el caso de los

aminoácidos básicos y ácidos, los tres grupos ionizables darían lugar a tres
equilibrios ácido-base distintos, cada uno con su correspondiente pKa. Por ejemplo,
para un aminoácido ácido, como el aspártico. los valores de pKa estarían cercanos
a 2 para el grupo α -COOH, cercanos a 4 para el grupo R-COOH y cercanos a 9
para el grupo α -NH2.

Para este aminoácido, si la solución se encontrase a pH= 1, el pH sería menor que

el pKa del grupo α -COOH y por tanto este grupo estaría protonado y su carga sería
0. Lo mismo le ocurriría al grupo R-COOH, que también estaría protonado y con

8
carga 0. Por su parte, el grup α-amino también estaría protonado, aunque en este
caso la carga del grupo sería +1, como se observa en la Fig. 2

Fig. 2. Representación del ácido aspártico al variar el pH

(http://jano-coach.blogspot.com/2011/09/propiedades-acido-base-de-los.html)

A pH= 2, tendríamos que este valor de pH sería igual al pKa del grupo α-COOH, por
lo que un 50% del mismo estaría protonado y un 50% estaría desprotonado. Por lo
tanto la mitad del grupo - α COOH estaría cargado negativamente y la otra mitad no
tendría carga. A este pH el grupo a-COOH seguiría protonado y con carga 0, puesto
que se cumpliría que pH<pKa. Lo mismo le ocurriría al grupo α -amino, cuya carga
sería de +1.

A pH= 4, el pH coincide con el pKa del grupo R-COOH que estaría protonado en un
50%. El α-COOH estaría desprotonado y el α-amino estaría protonado. A pH=7 los
dos grupo -COOH estarían desprotonados y el de grupo amino seguiría igual, hasta
llegar a pH= 9, donde el α- amino estaría desprotonado en un 50%. Visto esto,
podemos concluir que la carga total de un aminoácido depende del pH de la
solución en la que se encuentre. Los amino son excelentes amortiguadores, gracias
a la capacidad de disociación del grupo carboxilo, del grupo amino y de otros grupos
ionizables de sus cadenas laterales (carboxilo, amino, imidazol, fenol, guanidino,
etc).

Existe un pH al cual la carga neta del aminoácido es cero (si lo colocamos en un

campo eléctrico no se desplazará hacia ninguno de los polos). El pH al cual un
aminoácido posee carga neta igual a cero recibe el nombre de punto
isoeléctrico (pI), que es la media aritmética de los valores de pKa que
delimitan la forma con carga cero. En el caso de los aminoácidos sin grupos R
disociables

pI = (pKa1 + pKa2) / 2
Por ejemplo, para la glicina (pK1=2,22 y pK2=9,86, el pI es 6,04. A pH=6,04 las
moléculas de glicina estarán en forma de iones zwitterión y no se desplazan hacia
ningún polo al aplicarles un campo eléctrico.

En la siguiente tabla se presentan los valores de pK de algunos aminoácidos

9
 Valores de pK de algunos aminoácidos

Actividad de Aprendizaje

Revisa la presentación del Tema 2 disponible en

http://www.slideshare.net/vcmiguel/tema2-propiedadesaa-2012vmiguel

Actividad de Práctica

 Realiza los siguientes ejercicios de práctica.

1. Partiendo de la fórmula general de los aminoácidos:

1.1 Identifica los grupos ionizables

Trata cada uno por separado: R-NH3+y R-COOH. En este caso R es todo el resto
del aminoácido.

1.1 Escribe la reacción de ionización del R-NH3+:

R-NH3+ +

1.2 ¿Cuál es la base conjugada y la forma ácida sin disociar?

10
1.3 ¿Qué sucede si aumenta la concentración de H+?
1.4 ¿Qué sucede si disminuye la concentración de H+?

1.5 Escriba la reacción de ionización del R-COOH

R-COOH +

1.6 . ¿Cuál es la base conjugada y la forma ácida sin disociar?

1.7. ¿Qué le sucede a este grupo si aumenta la concentración de H+?

1.8. ¿Qué le sucede a este grupo si disminuye la concentración de H+?

1.9. Escribe la ecuación de Henderson-Hässelbalch

Sustituye en la ecuación de Henderson-Hässelbalch las formas de base conjugada
(aceptora de protones) y de ácido sin disociar (donadora de protones) para cada
uno de los grupos ionizables.
Cada uno de estos grupos ionizables tiene un respectivo valor de pK en cada
aminoácido.

Todos los grupos R-COOH en los aminoácidos tienen valores semejantes entre sí
(cercanos a 2) e igualmente ocurre con los grupos R-NH3+ (cercanos a 9).
Recuerde que la ionización de un grupo comienza aproximadamente a un valor pH
cercano a 2 unidades de por debajo de su pK y alcanza un 100% de ionización
aproximadamente a 2 unidades de pH por encima de su pK.

1.10. ¿Cuál es el porcentaje de ionización del grupo R-NH3+, a un pH igual a su pK?

1.11 ¿Cuál es el porcentaje de ionización del grupo R-COOH, a un pH igual a su

pK?

2. Ahora trabajemos con ambos grupos ionizables presentes en la misma molécula,

por ejemplo la glicina:

pK1= 2,35
pK2= 9,78

2.1 Escribe la estructura iónica en la cual se encuentra la glicina en una solución de

pH muy bajo.
La concentración de H+ es muy alta. Ambos grupos están "protonados". Fíjate que
en este caso el grupo -NH3+ se encuentra con una carga positiva, que es su forma
"protonada", pero la forma "protonada" del grupo -COOH no tiene carga. Entonces
cada molécula de glicina tiene carga neta +1 y el conjunto de todas las que se
encuentren en una solución a pH muy bajo, tiene la misma carga.

11
Si se comienza a agregar una base como NaOH, la cual es una base fuerte que se
disocia completamente según la reacción:
-
NaOH Na+ + OH

Los grupos OH- se comienzan a unir con los H+ y forman agua:

-
NaOH Na+ + OH + H+ HOH

El efecto neto que produce esto es una diminución de la concentración de H +, lo

cual provocará que el grupo -COOH comience a perder protones porque es un ácido
más fuerte (aunque de todas maneras débil) que el grupo -NH3+. Recuerda que el
grupo -COOH tiene un pK menor que el grupo -NH3+.
A medida que el pH aumenta, también aumenta la disociación del grupo -COOH.

2.2. Representa las formas iónicas del aminoácido glicina a un pH igual al pK del
grupo carboxilo.

2.3 ¿Cuál es la carga neta que tendrán de las moléculas de glicina?

2.4 Si aumenta más el pH, llega el momento en el cual todos los grupos carboxilos
estarán disociados (habrán perdido un protón cada uno). Dibuja la forma iónica
molecular en la cual se encuentra la glicina a un pH 7, el cual es aproximadamente
intermedio entre los valores de pK de los grupos carboxilo y amino.

2.5 ¿Cuál es la carga neta que a este pH tendrán las moléculas de glicina?

2.6 Cuando el pH llegue a estar aproximadamente a 2 unidades por debajo del pK

del grupo amino, comienza su disociación. Dibuje las formas iónicas de la glicina a
un pH igual al pK del grupo amino. Recuerda que a este pH ya todo el grupo
carboxilo se encuentra disociado:

2.7 ¿Cuál es la carga neta que a este pH tendrán moléculas de glicina?.

2.8 Dibuja la forma iónica de la glicina a un pH 12:

2.9 ¿Cuál es la carga neta que a este pH tendrán las moléculas de glicina?

Debes poder dibujar las formas moleculares a pH muy bajo, muy alto, igual a cada
uno de los pK y al punto isoeléctrico del aminoácido.

2.10. Calcula el pI de la glicina

3. Ahora consideremos un aminoácido con un grupo disociable extra en la cadena

lateral o R. Por ejemplo uno que tenga un grupo carboxilo extra en la cadena
lateral, como el ácido glutámico:

12
 pK1= 2,19
pKR= 4,28
pK2= 9,66

El cual, para simplificar vamos a representar así, sólo tomando en cuenta los grupos
disociables:

Al agregar base (OH) a la solución, se irá disociando paulatinamente, comenzando

por el grupo que tiene el pK mas bajo. Es decir el ácido más fuerte (aunque todavía
débil), el que tiene menos afinidad por los protones que es la razón por la cual se
comienza a disociar primero.

3.1 Dibuja la forma iónica en la cual se encuentra el ácido glutámico a pH 1:

3.2 Dibuja las formas iónicas a un pH igual al pK1 y calcule la carga neta.
3.3 Dibuja las formas iónicas a un pH igual al pKR y calcule la carga neta.
3.4 Dibuja las formas iónicas a un pH igual al pK2 y calcule la carga neta.
3.5 Identifique un intervalo de pH al cual el glutamato no tenga carga neta.
3.6 Los dos pK más cercanos al punto en el cual el aminoácido no tiene carga son
los que se tomarán en cuenta para calcular el pI. Calcúlalo.

4. Ahora consideremos un aminoácido con un grupo amino extra en la cadena

lateral: la arginina

pK1= 2,17
pK2= 9,04
pKR= 12,48

El cual vamos a representar así, tomando en cuenta solo los grupos disociables:

Al agregar una base (OH), se irá disociando paulatinamente,

comenzando por el grupo que tiene el pK mas bajo. Es decir el
ácido más fuerte (aunque todavía débil), el que tiene menos
afinidad por los protones que es la razón por la cual se comienza

13
a disociar primero.
4.1Dibuja la forma en la cual se encuentra la arginina a pH 1:
4.2 Dibuja las formas a pH igual al pK1 y calcula la carga neta.
4.3 Dibuja las formas a pH igual al pK2 y calcula la carga neta.
4.4 Dibuja las formas a pH igual al pKR y calcula la carga neta.
4.5 Identifica un intervalo de pH al cual la arginina no tenga carga neta.
4.6 Los dos pK más cercanos al punto en el cual el aa no tiene carga son los que se
tomarán en cuenta para calcular el pI. Calcúlalo.

El cálculo de la carga neta que tienen los aminoácidos a un determinado pH,

permite predecir hacia cuál de los polos migrará si son colocados en un campo
eléctrico. Igualmente permite predecir si serán retenidos o no en una resina de
intercambio iónico.

5. Identifica las cadenas laterales de los aminoácidos que pueden interactuar con el
agua (polares). Dibuja algunas de esas interacciones.
6. Identifica las cadenas laterales de los aminoácidos que no pueden interactuar con
el agua (no polares).

7. ¿Cuál o cuáles de las siguientes formas iónicas de la alanina no pueden existir?

8. En los siguientes dibujos hay 8 errores. Encuéntralos:

14
 Actividad de Laboratorio

Titulación de Aminoácidos

Objetivo General:

 Interpretar la curva de titulación de los aminoácidos

Objetivos Específicos:

 Titular con NaOH una solución ácida del aminoácido

 Representar gráficamente la curva de titulación de la glicina.
 Identificar las formas moleculares de los aminoácidos a valores de pH igual al
pKa de sus grupos ionizables.
 Identificar el punto isoeléctrico (pI) de los aminoácidos.

Introducción

En la práctica, un procedimiento comúnmente utilizado para comprobar si una

molécula es capaz de ionizarse es la titulación con una base o ácido fuerte,
generalmente, hidróxido de sodio o ácido clorhídrico. La titulación es un método que
consiste en la determinación de la cantidad de una sustancia en solución, por medio
del desplazamiento de la reacción de equilibrio con otro compuesto cuya
concentración y volumen se conocen.
Para realizar una titulación, se prepara una solución ácida (o básica) de la
sustancia que se quiere cuantificar y se le añaden lentamente pequeños volúmenes
conocidos de NaOH (o HCl) y, después de cada adición de la base (o el ácido), se
mide el pH de la solución con un pHmetro. Posteriormente, estos resultados se
grafican (pH vs. volumen agregado) y se obtiene el punto de equivalencia.
En esta demostración estudiaremos las propiedades ácido-base de los
aminoácidos mediante la realización de la curva de titulación del aminoácido glicina.

Materiales
Medidor de pH con su electrodo (pHmetro).
Pipetas.
Fiola o vaso de precipitado.
Agitador magnético.
Barra magnética.

15
Soluciones
- Solución preparada con 1,5 g de Glicina, diluidos en agua hasta un volumen
de 400 mL y ajustada a pH 1,7
- Solución preparada con 0,8 g de NaOH, diluidos en agua hasta un volumen
de 400 mL.

Procedimiento

Las titulaciones se hacen agregándose volúmenes conocidos de NaOH a

fiolas que contienen la solución de glicina. El pH se mide con un pHmetro provisto
de un electrodo de vidrio que es introducido en la fiola. La solución se agita
constantemente con la ayuda de una barra y un agitador magnéticos.
Luego de haber introducido el electrodo en la fiola, teniendo cuidado que el
electrodo se encuentre sumergido en la solución y no choque con la barra
magnética, se mide el pH inicial. Seguidamente, se agrega 1 mL NaOH, se agita, se
mide el pH y se anota el valor de pH obtenido. Se continúa la titulación agregando
volúmenes iguales de NaOH hasta que el pH se mantenga constante. Esto ocurre
cuando se alcanzan valores de pH cercanos a 11.

Realiza los siguientes ejercicios de práctica.

1. Escribe la fórmula del aminoácido glicina. Calcula su Peso Molecular.

2. Calcula la concentración molar de la solución de glicina preparada.

3. Calcula los moles de NaOH añadidos por cada mL.

16
4. Completa la siguiente tabla:

NaOH añadido pH
mL moles
Solución de glicina
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21

5. Grafica los valores de pH obtenidos en función de las cantidades de NaOH

añadidas.

17
18
 6. Identifica en el gráfico los rangos de amortiguación ¿Cuáles son los valores?
¿Cuál corresponde al grupo carboxilo y cuál al grupo amino?
7. Completa el siguiente cuadro:

Valores de: Especie(s) químicas presentes y carga neta

pKa1 =

pKa2 =

pI =

8. En las figuras siguientes se ilustra la curva de titulación de la histidina y el

ácido aspártico.
a) Compara ambas curvas con la curva de titulación de la glicina. ¿A qué se
deben las diferencias?

b) Identifica en el gráfico los rangos de amortiguación y el punto isoeléctrico (pI)

de cada aminoácido.

19
 c) Identifica las formas moleculares de los aminoácidos a valores de pH igual
al pKa de sus grupos ionizables.
d) Identifica el punto isoeléctrico (pI) de los aminoácidos

Investiga en línea

Realiza la siguiente simulación de titulación

Ingresa al campus virtual y en el tema 1 (Introducción a la Bioquímica), bajo la

sección de “Recursos” haz click en el enlace “Simulador de titulación ácido-base” o
directamente en http://bitly.com/c6kHdR. Para utilizar el simulador, sigue los
siguientes pasos:

1) En el número 1, selecciona la reacción “Weak Acid vs. Strong Base”, es decir,

una reacción para titular un ácido débil con una base fuerte.
2) En el número 2, debes escoger con qué tipo de sustancia vas a llenar la
pipeta. Selecciona “Acid” (ácido). De esta manera, vamos a averiguar cuál es la
concentración del ácido débil que se encuentra en la pipeta, utilizando una base
fuerte de concentración conocida que se encuentra en el vaso de precipitado.
3) Dale click al número 3 para desplegar un pequeño menú. Ahí debes escoger
el ácido débil y la base fuerte que vas a utilizar. Selecciona el ácido acético
(CH3COOH) y cualquiera de las bases: Hidróxido de potasio (KOH), hidróxido de
sodio (NaOH), hidróxido de estroncio ( Sr(OH)2 ) o hidróxido de bario ( Ba(OH)2 ).
4) En el número 4 vas a seleccionar el indicador de pH a utilizar. Selecciona
cualquiera de las dos opciones: “Methyl red” (rojo de metilo) o “Bromothymol Blue”
(azul de bromotimol).
5) A la izquierda del vaso de precipitado podrás ver la cantidad de base que se
encuentra en el vaso de precipitado y su concentración expresada en molaridad.
6) Debajo de la pantalla del pH-metro, hay un botón rosado con el mensaje
“Insert Probes”. Dale click para colocar dentro de la solución los electrodos del
instrumento y así poder medir el pH de la solución en todo momento.
7) En la parte superior derecha hay una barra roja y un botón rojo. Con la barra
puedes agregar ácido de la pipeta al vaso de precipitado en cantidades
relativamente grandes (0,5 o 1 mL como mínimo). Con el botón pueden agregar
gotas (0,02 mL por gota) de ácido al vaso de precipitado. A la derecha de la pipeta
verás la cantidad de ácido que has agregado utilizando la barra, mientras que a la
izquierda de la pipeta verás la cantidad de ácido total que has agregado (barra más
botón).
8) Agrega ácido progresivamente al vaso de precipitado hasta que encuentres el
pH al cual el indicador de pH vira (cambia) de color. Utiliza este pH (así como la
concentración y volumen de la base fuerte) para calcular la concentración molar del
ácido y escribe dicha molaridad en el recuadro que se encuentra a la izquierda de la
pipeta, sobre un botón rojo con la palabra “OK”. Haz click en el botón para confirmar
el resultado. Debes escribir la concentración molar utilizando mínimo 2 decimales y
utilizando un punto (.) para separar las unidades de los decimales. En el caso del
20
rojo de metilo, el indicador cambia de amarillo a rojo a medida que el medio se
acidifica, mientras que el azul de bromotimol cambia de azul a amarillo (pasando por
verde) a medida que disminuye el pH.
9) En caso de que necesites volver a comenzar porque agregaste demasiado
ácido de la pipeta, haz click en el botón rojo “Concordant Values”. No le des click al
botón “Reset”. De esta manera, puedes volver a realizar la titulación con las mismas
opciones que habías seleccionado anteriormente, y manteniendo la concentración y
el volumen de base en el vaso de precipitado.

Respuesta

Al momento de titular para conseguir el pH al cual vira el indicador, es importante

hacerlo progresivamente. Ten en cuenta que inicialmente el pH no disminuye
considerablemente a medida que se agrega ácido, pero progresivamente el pH
disminuye cada vez más por cada mL de ácido que se agrega. Es importante que
encuentres el punto de viraje mediante el uso de las gotas. Te puedes acercar a ese
pH utilizando la barra roja, pero si agregas de más, lo recomendable es que vuelvas
a comenzar y agregues menos con la barra. Luego poco a poco utilizando las gotas
encuentra el punto de viraje. Recuerda que este punto es el pH que se mide apenas
el medio cambia de color. En el caso del azul de bromotimol, el punto de viraje se
mide apenas el medio cambia de azul a verde, no cuando cambia de verde a
amarillo.
Una vez que has identificado correctamente el punto de viraje, utilízalo para calcular
la concentración molar de protones que se encuentran en la solución a ese pH
determinado (aplica las propiedades de los logaritmos).

Ten en cuenta que la concentración de protones en la solución es el resultado de la

diferencia entre los equivalentes de ácido que se agregaron menos los equivalentes
de base, ya que éstos contienen iones hidronio y oxidrilo que se combinan entre sí
para formar agua (neutralizándose).

[H+] = Eq ácido - Eq base

Calcula los equivalentes de base que se encuentran en el vaso de precipitado.

Utiliza esos equivalentes de base y la concentración de protones para calcular los
equivalentes de ácido, despejando de la fórmula anterior. Ahora utiliza los
equivalente de ácido y el volumen del mismo (que agregaste de la pipeta al vaso de
precipitado) para calcular su concentración expresada en molaridad. Confirma tu
resultado utilizando el botón rojo “OK”.

Este ejercicio de titulación fue elaborado por el Bachiller Miguel Ortiz.

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