Guia de Laboratorios de Parasitologia 2019 PDF

FACULTAD DE SALUD
DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGÍA
GUIA PARASITOLOGÍA
Depto de Microbiología/Área parasitología 1

RECOMENDACIONES PARA EL TRABAJO EN EL LABORATORIO DE PARASITOLOGIA
REQUERIMIENTOS DE LABORATORIO
1. Manual de prácticas
2. Bata de laboratorio
3. Gafas de seguridad
4. Preguntas de la guía resueltas
5. Leer la teoría de la práctica correspondiente
6. Ser puntual y entrar en el grupo designado
NORMAS DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO
1. La bata de laboratorio es requisito indispensable para el trabajo del laboratorio

2. Uso de guantes
3. Gafas de protección
4. Zapatos cerrados o el uso de polainas.
5. Evitar comer, beber agua, usar el teléfono o maquillarse en el área de trabajo.
6. El lavado de manos después de abandonar el laboratorio es indispensable.
7. En caso de un accidente este debe ser reportado inmediatamente.
8. Deben ubicarse las salidas de emergencia y rutas de evacuación.
USO DEL MICROSCOPIO
Es importante que recuerde cada una de las partes del microscopio, su función y la forma apropiada de
utilizarlo
1. Movimientos involuntarios pueden desenfocar fácilmente el microscopio por lo que el área

alrededor del mismo debe estar despejada.
2. Siempre comience enfocando con el objetivo de menor aumento, se sugiere el 10x. En ese objetivo
puede enfocar fácilmente y centrar la imagen al igual que previene el daño en las preparaciones.
3. Ajuste el espacio interpupilar de manera que solo vea un círculo con los dos ojos abiertos.
4. Comience enfocando con el botón macrométrico y luego ajuste con el micrométrico.
5. Una vez enfocado ajuste el diafragma y gradue la luz de manera que le permita distinguir detalles
en la imagen.
6. Ya enfocada la imagen puede cambiar al objetivo 40x sin tocar el botón macrométrico solo utilizar
el micrométrico para ajustar en el objetivo de mayor amplificación. Tenga presente que si usa el
macrométrico esto puede dañar o romper la placa.
7. Cuando monte un preservado o un coprológico tenga en cuenta que la muestra no debe estar muy
gruesa si es asi debe diluir con solución salina. Debe colocar la laminilla en ángulo de 45°
8. Si utiliza aceite de inmersión debe verificar que es el indicado para el modelo del microscopio
respectivo. Nunca debe dejar el aceite de inmersión en el objetivo o en otras partes del
microscopio.

9. Los lentes pueden limpiarse con un papel de arroz que no genere residuos. El papel puede estar
impregnado con metanol.
Indique este microscopio cuales son las principales partes y su función al lado.

CONTENIDO
INTRODUCCION- TAXONOMIA.
LABORATORIO N° 1 DIAGNÓSTICO DE MALARIA ....................................................................... 14
LABORATORIO No. 2 DEMOSTRACIONES DE PLASMODIOS DE IMPORTANCIA MÉDICA .. 18
2.1 Esporozoito coloreado .................................................................................................................... 18
2.2 Esquizonte hepático ........................................................................................................................ 18
2.3 Trofozoitos ameboides de P. vivax extendido ............................................................................... 18
2.4 Esquizonte en extendido ................................................................................................................. 19
2.5 Macrogametocito en extendido ....................................................................................................... 19
2.6 Microgametocitos en extendido ...................................................................................................... 19
2.7 Trofozoito ameboide en gota gruesa ............................................................................................... 19
2.8 Esquizonte en gota gruesa ............................................................................................................... 19
2.9 Macrogametocito en gota gruesa .................................................................................................... 20
2.10 Microgametocitos en gota gruesa ................................................................................................. 20
2.11 Anillos en extendido ..................................................................................................................... 20
2.12 Esquizonte en extendido ............................................................................................................... 20
2.13 Macrogametocito en extendido ..................................................................................................... 21
2.14 Microgametocitos en extendido .................................................................................................... 21
2.15 Anillos en gota gruesa ................................................................................................................... 21
2.16 Esquizonte en gota gruesa ............................................................................................................. 21
2.17 Macrogametocito en gota gruesa .................................................................................................. 21
2.18 Microgametocitos en gota gruesa ................................................................................................. 22
2.19 Trofozoitos en extendido y/o gota gruesa ..................................................................................... 22
2.20 Esquizonte en extendido y/o gota gruesa ...................................................................................... 22
2.21 Macrogametocito en extendido y/o gota gruesa ........................................................................... 22
2.22 Microgametocitos en extendido y/o gota gruesa .......................................................................... 23
LABORATORIO No. 3 DIAGNÓSTICO DE MALARIA..................................................................... 29
LABORATORIO No. 4 ESTADIOS DIAGNÓSTICOS DE COCCIDIAS ............................................ 31
4.1 Ooquiste de Cystoisospora belli ..................................................................................................... 31
4.3 Ooquiste de Cyclospora cayetanensis ............................................................................................ 31
4.5 Ooquiste de Cryptosporidium sp ................................................................................................... 32
4.6 Taquizoitos de Toxoplasma gondii ................................................................................................. 32
4.7 Cyclospora cayetanensis en directo (para montar) ......................................................................... 32
LABORATORIO NO. 5. DEMOSTRACIONES DE AMEBAS ............................................................. 34
5.1 Entamoeba histolytica Trofozoito................................................................................................... 34
5.2 Entamoeba histolytica Quiste ......................................................................................................... 34
5.3 Entamoeba histolytica Trofozoito................................................................................................... 34
5.4 Entamoeba histolytica Quiste ........................................................................................................ 34
5.5 Entamoeba coli Trofozoito ............................................................................................................. 35
5.6 Entamoeba coli Quiste .................................................................................................................... 35

5.7 Entamoeba coli Trofozoito ............................................................................................................. 35
5.8 Entamoeba coli Quiste ................................................................................................................... 35
5.9 Iodamoeba butschlii Trofozoito ...................................................................................................... 36
5.10 Iodamoeba butschlii Quiste .......................................................................................................... 36
5.11 Iodamoeba butschlii Trofozoito .................................................................................................... 36
5.12 Iodamoeba butschlii Quiste ......................................................................................................... 36
5.13 Endolimax nana Trofozoito .......................................................................................................... 37
5.14 Endolimax nana Quiste ................................................................................................................. 37
5.15 Endolimax nana Trofozoito .......................................................................................................... 37
5.16 Endolimax nana Quiste (para montar) ........................................................................................ 37
5.17 Blastocystis hominis en coloración ............................................................................................... 38
5.18 Blastocysttis hominis en directo .................................................................................................... 38
LABORATORIO NO. 6. DEMOSTRACIONES DE FLAGELADOS ................................................... 39
6.1 Giardia intestinalis Trofozoito ....................................................................................................... 39
6.2 Giardia intestinalis Quiste .............................................................................................................. 39
6.3 Giardia intestinalis Trofozoito ....................................................................................................... 39
6.4 Giardia intestinalis Quiste .............................................................................................................. 40
6.5 Chilomastix mesnili Trofozoito....................................................................................................... 40
6.6 Chilomastix mesnili Quiste ............................................................................................................. 40
6.7 Chilomastix mesnili Trofozoito....................................................................................................... 40
6.8 Chilomastix mesnili Quiste ............................................................................................................. 41
6.9 Trichomonas vaginalis trofozoito ................................................................................................... 41
6.10 Pentatrichomonas hominis............................................................................................................ 41
6.11 Balantidium coli ............................................................................................................................ 41
6.12 Balantidium coli ............................................................................................................................ 42
LABORATORIO No. 7 CINETOPLASTIDOS ....................................................................................... 44
7.1 Leishmania sp ................................................................................................................................. 44
7.2 Impresiones en tejido con amastigotas. ......................................................................................... 44
7.3 Lutzomya ......................................................................................................................................... 44
7.4 Trypanosoma cruzi.......................................................................................................................... 44
7.5 Leishmania sp tripomastigotes ........................................................................................................ 45
7.6 Trypanosoma cruzi.......................................................................................................................... 45
7.7 Trypanosama cruzi.......................................................................................................................... 45
LABORATORIO No. 8. EXAMEN DIRECTO Y POR CONCENTRACIÓN PARA EL
DIAGNÓSTICO DE PARÁSITOS INTESTINALES ............................................................................. 46
LABORATORIO No. 9 CLASE DIGENEA............................................................................................ 49
9.1 Fasciola hepatica Adulto ............................................................................................................... 49
9.2 Fasciola hepatica Huevos.............................................................................................................. 49
9.3 Fasciola gigantica Adulto ............................................................................................................. 49
9.4 Clonorchis sinensis Adulto ............................................................................................................. 49
9.5 Shistosoma mansoni Macho adulto. ................................................................................................ 50
9.6 Shistosoma mansoni Hembra Adulto. ............................................................................................. 50
9.7 S. mansoni Huevos. ......................................................................................................................... 50
9.8 Paragonimus sp Huevos ................................................................................................................. 50
LABORATORIO No. 10 CLASE CESTODA ......................................................................................... 53
10.1 Taenia saginata............................................................................................................................. 53

10.2 Taenia solium ................................................................................................................................ 53
10.3 Proglótidos inmaduros .................................................................................................................. 53
10.4 Proglótidos maduros ..................................................................................................................... 53
10.5 Proglótidos grávidos ..................................................................................................................... 54
10.6 Hymenolepis nana Adulto............................................................................................................. 54
10.7 Dipylidium caninum ...................................................................................................................... 54
10.8 D. caninum. Escólex. .................................................................................................................... 54
10.9 D. latum......................................................................................................................................... 55
10.10 Echinococcus granulosus Adulto ............................................................................................... 55
10.11 Huevos de Taenia sp ................................................................................................................... 56
10.12 Hymenolepis nana ....................................................................................................................... 56
10.13 Hymenolepis diminuta ................................................................................................................ 56
10.14 D. caninum ................................................................................................................................. 56
10.15 D. latum...................................................................................................................................... 57
Forma ligeramente ovalada y con una tapa u opérculo discreto................................................................ 57
LABORATORIO No. 11 CLASE ADENOPHOREA ............................................................................ 59
11.1 Trichiuris trichiura Macho ........................................................................................................... 59
11.2 Trichiuris trichiura: Hembra ........................................................................................................ 59
11.3 T. trichiura .................................................................................................................................... 59
LABORATORIO No. 12 CLASE SECERNENTEA: ASCARIDOS Y OXIURIDOS .......................... 61
12.1 Ascaris lumbricoides. Huevo no fertilizado.................................................................................. 61
12.2 Ascaris lumbricoides. Huevo fertilizado....................................................................................... 61
12.3 Ascaris lumbricoides. Huevo decorticado .................................................................................... 61
12.4 Ascaris lumbicoides Huevo embrionada ....................................................................................... 61
12.5 Enterobius vermicularis. Hembra ................................................................................................. 62
12.6 Enterobius vermicularis. Macho ................................................................................................... 62
12.7 Enterobius vermicularis. Huevos en cinta de Graham ................................................................. 62
12.8 Enterobius vermicularis. Huevos en materia fecal ....................................................................... 62
LABORATORIO No. 13 CLASE SECERNENTEA : ESTRONGILIDISO Y RABDITIDOS
13.1 Ancylostoma duodenale. Hembra ................................................................................................. 66
13.2 Ancylostoma duodenale. Macho ................................................................................................... 66
13.3 Necator americanus. Hembra ....................................................................................................... 66
13.4 Necator americanus. Macho ......................................................................................................... 66
13.5 Ancylostoma caninum. Macho ..................................................................................................... 67
13.6 Huevo de uncinaria ....................................................................................................................... 67
13.7 Larvas rabditoides de S. stercoralis .............................................................................................. 67
13.8 Larvas filariformes de S. stercoralis (para montaje) .................................................................... 67
LABORATORIO No. 14 CLASE SECERNENTEA: FILARIAS ........................................................... 72
14.1 Wuchereria bancrofti: ................................................................................................................... 72
14.2 Brugia malayi: .............................................................................................................................. 72
14.3 Mansonella ozzardi: ...................................................................................................................... 72
14.4 Onchocerca volvulus:.................................................................................................................... 73
14.5 O. volvulus: ................................................................................................................................... 73
14.6. Dirofilaria inmitis: ....................................................................................................................... 73
14.7 Filaria de primate. ......................................................................................................................... 73

INTRODUCCIÓN
El término parásito tiene un significado muy amplio y se refiere a un organismo que vive a expensas de otro
generalmente causando daño al hospedero. En ciencias el término parásito hace referencia a protozoos y
helmintos, éstos últimos incluyendo los nemátodos, céstodos, tremátodos y acantocéfalos. En la parasitología
médica, alrededor de 200 especies de helmintos y 80 especies de protozoarios causan infecciones humanas de
importancia. En el laboratorio de parasitología se estudiarán la clasificación, morfología, características y métodos
que permitan la detección e identificación de los parásitos más relevantes encontrados en humanos.
La clasificación consiste en establecer y definir grupos sistemáticos de organismos en una forma jerárquica que
refleje las relaciones evolutivas pasadas y presentes entre los grupos. La taxonomía es el estudio de la
clasificación de los organismos vivos. Todos los organismos son colocados en grupos específicos o taxones (en
latín taxa). Las especies son agrupadas en géneros, los géneros en familias, las familias en órdenes, los órdenes
en clases, las clases en filos y los filos dentro de uno de los seis reinos existentes ( Bacteria, Animalia, Fungi,
Plantae, Chromista, Protozoa) (figura 1.)
La morfología y características han sido el estándar de oro para el sistema de clasificación e identificación de
parásitos. Sin embargo, recientemente otros métodos han permitido determinar las distancias evolutivas y una
base racional para las jerarquías. Estos métodos incluyen el análisis de secuencias de ADN y ARN, matrices que
miden las distancias genéticas, probabilidad Bayesiana entre otros. Aunque no existe un consenso en cuanto a la
clasificación definitiva, para efectos del estudio de parásitos de interés en infección humana, se ha adoptado una
clasificación que sea menos compleja para aquellos profesionales y científicos que estudian los parásitos desde la
perspectiva del impacto en salud humana.
La clasificación que se adoptará será la desarrollada por Cavalier-Smith la cual considera al reino Protozoa en
lugar del anterior reino Protista y todas las especies se nombran de acuerdo con el código internacional de
nomenclatura zoológica (http://www.iczn.org). (cuadros 1 al 6)
Dominios
de vida
Plantae
Archaea Bacteria Eukarya Animalia Helmintos
Fungi
Protozoa Protozoos
Chromista
Bacteria
Figura 1. Dominios de vida según Carl Woese 1990.

CUADRO 1 a . REINO PROTOZOA (parásitos protozoarios encontrados en humanos)
Filum Clase Orden Especies importantes en Otras especies

humanos
Metamonada Flagelados
(flagelados) intestinales
Trepomonadea Diplomonadida Giardia duodenalis Enteromonas hominis
Retortamonadea Retortamonadida Chilomastix mesnili,Retortamonas

intestinalis
Trichomonadea Trichomonadida Dientamoeba fragilis, Trichomonas tenax,
Trichomonas vaginalis Pentatrichomonas hominis
Percolozoa Heterolobosea Schizopyrenida Naegleria fowleri

(flagelados y (flagelados
amebas) oportunistas y
de vida libre) y
amebas
flageladas
Euglenozoa Kinetoplastidea Trypanosomatida Leishmania donovani, L infatum, L. aethiopica, L.amazonensis, L

(flagelados) (flagelados L major, L. tropica, L. colombiensis.
tisulares) braziliensis, L. mexicana.
Tripanosoma cruzi, T. brucei T. rangeli
gambiense, T. brucei
rhodesiense

CUADRO 1 b . REINO PROTOZOA (parásitos encontrados en humanos)

humanos
Amebozoa Amoebaea
(amebas) (amebas de Acanthopodida Acanthamoeba castellani, Acanthamoeba astronyxis, A.
vida libre y Balamuthia mandrillaris culbertsoni, A. hatchetti, A.
parásitos polyphaga,
oportunistas)
Archamoebea Euamoebida Entamoeba histolytica, E. coli, E. Entamoeba gingivalis, Endolimax

(amebas dispar, E. hartmanni nana, Iodamoeba butschlii
intestinales)
Apicomplexa Coccidea Eimeriida Crytosporidium parum, Crytosporidium hominis, C. canis

(esporozoarios Toxoplasma gondii, Cyclospora Sarcocystis hominis, S. suihominis
y cayetanensis,
dinoflagelados) Cystoisospora belli
Piroplasmida Babesia microti Babesia divergens
Haemosporida Plasmodium knowlesi, P.

falciparum, P. malariae, P. ovale,
P. vivax
Ciliophora Litostomatea Trichostomatia Balantidium coli

(ciliados) (ciliados de
vida libre)
CUADRO 2 . REINO CHROMISTA (parásitos encontrados en humanos)

humanos
Bigyra Blastocystes
Blastocystis hominis

CUADRO 3 . REINO ANIMALIA, PHYLUM NEMATHELMINTHES
Clase Orden Superfamilia Familia Especies importantes Otras especies
en humanos
Adenophorea Enoplida Trichinelloidea Trichinelliidae Trichinella spiralis, Trichinella nativa, T.
nelsoni,, T.pseudospiralis
(Trichuroidea) (Trichuriidae) Trichuris trichiuria Capillaria spp, Trichuris
suis
Secernentea Rhabditida Rhabditoidea Strongyloididae Strongyloides Strongyloides, Procynormis

stercoralis, S.
fuellerborni
Spiruroidea Gongylonematidae Gongylonema pulcrum

Strongylida Ancylostomatoidea Ancylostomatidae Ancyslostoma Ancylostoma braziliense, A.
duodenale, Necator caninum, A. ceylanicum
americanus
Metastrongyloidea Metastrongylidae Metastrongylus elongatus
Angiostrongylidae Angiostrongylus
(Parastrongylus)
cantonensis, A.
costaricensis
Strongyloidea Chabertiidae Oesophagostomum
bifurcum
Sygamidae Mammomonogamus
laryngeus
Thelazioidea Thelaziidae Thelazia californiensis, T.
callipaeda
Trichostrongyloidea Trichostrongylidae Trichostrongylus axei,
Trichostrongylus spp
Dioctophymatidae Dioctophyme renale
Oxyuroida Oxyuroidea Oxyuridae Enterobius vermicularis E. gregorii
Physalopteroidea Physalopteridae Physaloptera caucasica
Ascarida Ascaridoidea Ascarididae Ascaris lumbricoides Ascaris suum,

Lagochilascaris minor,
Toxocara canis, T. cati
Anisakidae Anisakis physeretis, A.
simplex
Spirurida Dracunculoidea Dracunculidae Dracunculus medinesis
Gnathostomatoidea Gnathostomatidae Gnathostoma G. binucleatum

spinigerum
Filaroidea Onchocercidae Brugia malayi, Loa loa, Brugia beaveri, Dirofilaria
Wuchereria bancrofti, immitis, Manzonella
Onchocerca volvulus, streptocerca
Manzonella perstans

CUADRO 4 . REINO ANIMALIA, PHYLUM PLATYHELMINTHES, CLASE TREMATODA SUBCLASE DIGENEA
(DUELAS)
Orden Superfamilia Familia Especies importantes Otras especies

en humanos
Diplostomida Diplostomoidea Diplostomidae , Alaria alata, A. americana,
Diplostomum spathaceum.
Schistosomatoidea Schistosomatidae Schistosoma Schistosoma bovis, S.

haematobium, S. malayensis, Microbilharzia spp.
japonicum, S. mansoni, S. Orientobilharzia
mekong, S. intercalatum
Clinostomidae Clinostomum complanatum
Plagiorchiida Gymnophalloidea Gymnophallidae Gymnophalloides seoi
Echinostomatoidea Echinostomatidae Echinostomum equinatum, E.

hortense, E. ilocanum, E.
revolutum
Fasciolidae Fasciola hepatica, Fasciola gigantica
Fasciolopsis buski
Opisthorchioidae Heterophyidae Metagonimus yokogawai, M.
miyatai, Heterophyes
heterophyes
Opisthorchidae Clonorchis sinensis, Opistorchis guayaquilensis

Opisthorchis felineus, O
viverrini
Paramphistomoidea Zygocotylidae Gastrodiscoides hominis Watsonius watsoni
Plagiorchioidea Lecithodendriidae Phaneropsolus bonnei
Paragonimidae Paragonimus P. africanus, P. pulmonalis,
westermanii, P. kelicotti, P Paragonimus spp
mexicanus
Plagiorchiidae Plagiorchis spp
Troglotrematidae Nanophyetus salmincola
Achillurbainiidae Achillurbainia spp
Dicrocoelioidea Dicrocoeliidae Dicrocoelium dendriticum Eurytrema pancreaticum

CUADRO 5 . REINO ANIMALIA, PHYLUM PLATYHELMINTHES, CLASE CESTODA
Orden Familia Especies importantes en Otras especies

humanos
Pseudophyllides Diphyllobothridae Diphyllobothrium latum D. pacificum, Diphylobothrium spp,
Diplogonoporus spp, Spirometra mansoni.
Cyclophyllidea Anoplocephalidae Bertia spp, Bertiella mucronata, B. studeri,
Davaineidae Buginetta alouattae, Raillietina celebensis.
Dipylidiidae Dipylidium caninum
Hymenolepididadae Hymenolepis nana Hymenolepis diminuta

Mesocestoides variabilis
Mesocestoidae
Taenidae Taenia saginata, T. solium, Taenia taeniaeformis, T. multiceps,

Echinococcus granulosus, E. Echinococcus vogeli, E. oligarthrus
multilocularis
CUADRO 6 . REINO ANIMALIA, PHYLUM ACANTHOGNATA. Acantocéfalos encontrados en humanos
Clase Orden Familia Especies importantes Otras especies

en humanos
Moniliformis Moniliformidae Moniliformis
Archiacanthocephala
Oligacanthorhynchida Oligacanthorhynchidae Macracanthorhynchus
hirudinaceu
Cuadros tomados de Cox F.E. Taxonomy and Classification of Human Parasitic Protozoa and Helminths. En :
Manual of clinical microbiology.ASM Press, Washington DC 2015. Modificado por Maria del Pilar Crespo, 2017.

FILUM APICOMPLEXA
Los apicomplexos son protozoarios que durante su ciclo de vida, uno o mas estadios, presentan una serie de
organelas que en conjunto conocemos como el complejo apical. En general los miembros del grupo son
Intracelulares obligatorios, con complejo apical en una o mas fases del ciclo de vida, la membrana esta compuesta
por 2 o tres componentes llamados membrana externa, membrana interna y, cuando existe membrana intermedia;
la membrana interna se interrumpe en el sitio donde se desarrollan los microporos. Reproducción sexual y asexual,
parasitan en muchos grupos de animales, vertebrados e invertebrados y algunos tiene notable importancia como
causantes de enfermedad en animales de importancia comercial y en el hombre ya como parásitos propios de él o
como zoonosis. El complejo apical está involucrado en los procesos de ingreso del parásito a la célula hospedera y
en la mayoría de los casos, una vez el parásito llega al interior de la célula, el complejo apical desaparece y se
vuelve a sintetizar para los estadios desarrollados que deben liberarse para ingresar en una nueva célula. Las
organelas que componen el complejo apical, visible solo por microscopía electrónica, son roptrías u órganos pares,
micronemas, anillos polares y conoide. El conoide no está presente en todos los grupos y constituye la
característica básica para separar las 2 clases mas importantes dentro del filum.
El ciclo de vida incluye fases asexuales y sexuales. La fusión de los gametos genera un cigoto que por fisión
múltiple o esporogonia da origen a los esporozoitos que en realidad son troozoitos infectivos y que una vez dentro
de la célula cada esporozoito crece y multiplica por esquizogonia para dar origen a múltiples merozoitos; las
generaciones de merozoitos pueden ser una o varias y dependen de la especie, cepa, hospedero, tamaño del
inóculo o del estado inmune de este. Para cerrar el ciclo, algunos merozoitos darán origen a macrogamontes que
maduran a macrogametos mientras que otros dan origen a microgamontes que pueden dar origen a un
microgameto o, por fisión binaria o múltiple dar origen a 2 o mas microgametos. Un microgametos se fusiona con
un macrogameto para originar un cigoto y dar inicio a un nuevo ciclo. En total el ciclo incluye 3 fases
esquizogónicas, merogonia, gametogonia y esporogonia. Aunque en general solo se reconoce como esquizogonia
la merogonia, es incorrecto ya que todos los procesos dependen de fisión múltiple. Los estadios del ciclo de vida
son haploides excepto por el cigoto.

LABORATORIO N° 1 DIAGNÓSTICO DE MALARIA
Los organismos causantes de la malaria son apicomplexos de amplia distribución en reptiles, aves y mamíferos.
Son intracelulares obligatorios con fases asexuales y sexuales que requieren de un insecto hematófago como
vector en el cual llevan a cabo las fases sexuales. En los vertebrados ocurren fases asexuales y el desarrollo de
estadios sexuales inmaduros que deben pasar al vector para completar el ciclo de vida. La forma más común para
diferenciar las especies es la observación directa de los parásitos mediante procedimientos de tinción.
TOMA DE MUESTRA Y COLORACIÓN PARA MALARIA.

Los procedimientos para el diagnóstico de malaria son variados pero cumplen fines muy específicos. Las pruebas
indirectas (medición de Anticuerpos ), son de amplio uso en estudios epidemiológicos pero tiene poca aplicabilidad
en la determinación de infección activa ya que los niveles de Ac pueden prevalecer por varios meses y nos indican
que el parásito está o estuvo presente por lo cual en la determinación de infección activa no son confiables. Otras
pruebas como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR por sus siglas en inglés) son muy eficientes, tienen
alta sensibilidad pero son costosas y requieren equipos especializados y condiciones de laboratorio no siempre
disponibles de manera especial en zonas rurales. Pruebas directas para determinar la presencia de
deshidrogenasa láctica una panespecífica y otra producida por solo por P. falciparum, tienen buena sensibilidad,
son rápidas no requieren un alto nivel entrenamiento por quien realiza la prueba pero no diferencian infecciones
mixtas, son un poco más costosas que la prueba rutinaria, la gota gruesa que es el estándar de oro en la
evaluación de pruebas diagnósticas. La gota gruesa es una prueba con una sensibilidad de 80-98 %. Esta
sensibilidad se reduce cuando la parasitemia es menor del 1% y está sujeta a la experiencia del lector. Permite la
identificación de infecciones mixtas, es de bajo costo y posible de llevar a cabo aun en condiciones de campo poco
favorables pero requiere un profesional bien capacitado y con buena experiencia en la identificación y morfología
de cada una de las especies de plasmodios. El extendido aunque es mucho menos sensible , permite observar las
características morfológicas del parásito y del eritrocito parasitado lo cual facilita el diagnóstico.
Preparación de las muestras para el diagnóstico rutinario de malaria.
Para hacer una buena preparación se debe disponer de láminas portaobjetos limpias, preferiblemente nuevas y
colóquelas en alcohol de 70% de un día para otro, antes de usarlas.
Se deben hacer dos tipos de preparación:
a. Extendido de sangre periférica
b. Gota gruesa
A. Extendido de sangre periférica: en esta preparación los glóbulos rojos se conservan intactos y se puede
estudiar en detalle la morfología de los parásitos dentro de la célula; como la muestra presenta una sola capa
de células el examen debe ser exhaustivo debido a la poca concentración de parásitos.
B. Gota gruesa: esta preparación implica la destrucción de los glóbulos rojos; se presentan varias capas de
células, lo cual permite una mayor concentración de parásitos y, por consiguiente se requiere menos tiempo
para hacer el diagnóstico.

TÉCNICAS DE COLORACIÓN –GOTA GRUESA
METODO DE WALKER
Procedimiento de coloración para Gota gruesa:
Deje secar las láminas a temperatura ambiente, por lo menos 20 minutos en un lugar protegido de hormiga, mosca
u otro animal.
Sumerja la lámina en azul de metileno fosfatado de 1 a 3 segundos.
Lave la lámina sumergiéndola rápidamente en dos cambios de Buffer fosfato pH 7.0 a 7.2 para eliminar el exceso
del azul de metileno.
Deje secar la lámina
Coloque las láminas con la muestra de sangre hacia abajo en una cubeta de coloración.
Añada la solución diluida de Giemsa (1 gota de Giemsa por cada ml de buffer.
Deje actuar el colorante durante 10 minutos.
Lave la lámina con agua de grifo y deje secar.
Examine la preparación con objetivo de 100X.
TECNICA DE COLORACIÓN - EXTENDIDO

Procedimiento de coloración para extendido:
Deje secar la lámina por 5 a 10 minutos.

Para fijarlos sumerja el extendido en metanol absoluto (100%) de 3 a 5 minutos.
Deje secar
Coloque la lámina con la muestra hacia abajo en la cubeta de coloración.
Añada la solución diluida de Giemsa (2 gotas de Giemsa por cada ml de buffer). Deje actuar el colorante por 20
minutos.
Lave la lámina con agua de chorro, déjela secar .
.
Examen de la lámina
Enfocar con objetivo de 10X. Recorrer la lámina con aceite de inmersión y objetivo de 100X.
Reconocer leucocitos, glóbulos rojos, plaquetas y parásitos.
Colores de los diferentes elementos celulares: glóbulos rojos de color rosado pálido.
Parásitos malárico: núcleo rojo, citoplasma azul pálido, pigmento malárico amarillo-café o negro.
Plaquetas , rosa intenso a violeta.
Leucocitos: núcleo azul intenso a violeta y citoplasma azul claro.
Preguntas
¿Cómo se adquiere una infección malárica?

____________________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________________

¿Cuáles características de la célula hospedera y del parásito debe tener en cuenta para diferenciar las especies de
plasmodios?
____________________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________________
¿Cuáles son las pruebas rutinarias para diagnóstico más usadas en Colombia?
____________________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________________
¿Cuál es la coloración usada para el diagnóstico?
Describa cómo se hacen los cálculos de la parasitemia

TOMA DE MUESTRA PARA EL DIAGNÓSTICO DE MALARIA
Limpie el dedo con una torunda de Haga presión para obtener una gota Limpie la primera gota
algodón humedecida con alcohol de sangre
Obtenga una segunda gota y lleve la Para preparar el extendido coloque Arrastre la sangre sin pasar sobre ella
lámina a la gota otra lámina delante de la gota
El extendido tiene una sola capa de La gota gruesa se hace con un ángulo Gire en espiral del centro hacia afuera
células de otro portaobjetos hasta obtener un círculo de 1 cm

LABORATORIO No. 2 DEMOSTRACIONES DE PLASMODIOS DE IMPORTANCIA MÉDICA
Objetivos:
1. Reconocer las características morfológicas de los plasmodios que afectan al hombre tanto en extendido
como en gota gruesa.
DEMOSTRACIONES
2.1 Esporozoito coloreado

obtenidos al macerar las glándulas salivales de una hembra de Anopheles; observe su forma alargada con
extremos agudos y el núcleo central.
2.2 Esquizonte hepático

Corte de hígado, donde se observa un meronte de Plasmodium dentro del hepatocito, note los
merozoitos y las alteraciones de la célula hospedera.
DEMOSTRACIONES DE Plasmodium vivax EN EXTENDIDO Y GOTA GRUESA

El glóbulo rojo aparece hipertrofiado, pálido, note la forma ameboide del parásito que ocupa gran parte del glóbulo
rojo y las granulaciones de Schüffner.
2.3 Trofozoitos ameboides de P. vivax extendido

2.4 Esquizonte en extendido
2.5 Macrogametocito en extendido
2.6 Microgametocitos en extendido
2.7 Trofozoito ameboide en gota gruesa
2.8 Esquizonte en gota gruesa

2.9 Macrogametocito en gota gruesa
2.10 Microgametocitos en gota gruesa
DEMOSTRACIONES DE Plasmodium falciparum EN EXTENDIDO Y GOTA GRUESA

Observe el tamaño normal del glóbulo rojo note el gránulo de cromatina rosado rodeado de citoplasma azul, la
infección múltiple es frecuente.
2.11 Anillos en extendido
2.12 Esquizonte en extendido

2.13 Macrogametocito en extendido
2.14 Microgametocitos en extendido
2.15 Anillos en gota gruesa
2.16 Esquizonte en gota gruesa
2.17 Macrogametocito en gota gruesa

2.18 Microgametocitos en gota gruesa
DEMOSTRACIONES DE Plasmodium malariae EN EXTENDIDO Y/O GOTA GRUESA

Pueden presentar forma anillada y las clásicas formas en banda, son llamadas así porque atraviesa el glóbulo rojo
de un lado a otro.
2.19 Trofozoitos en extendido y/o gota gruesa
2.20 Esquizonte en extendido y/o gota gruesa
2.21 Macrogametocito en extendido y/o gota gruesa

2.22 Microgametocitos en extendido y/o gota gruesa

LABORATORIO No. 3 DIAGNÓSTICO DE MALARIA
Objetivos
1. Diagnosticar en extendido y gota gruesa no identificadas la o las especies de Plasmodium sp. Usted
recibirá dos láminas ya coloreadas y según la morfología observada usted hará el diagnóstico
correspondiente
Lamina No. 1. Resultado: ______________________________________

Preguntas
Cómo diferencia un trofozoito de un gametocito de Plasmodim vivax
____________________________________________________________________________________________
Que tipo de glóbulos rojos infecta P. vivax
____________________________________________________________________________________________
Que tipo de glóbulos rojos infecta P.falciparum.
____________________________________________________________________________________________
Cuál es la especie más asociada con mortalidad.
____________________________________________________________________________________________

LABORATORIO No. 4 ESTADIOS DIAGNÓSTICOS DE COCCIDIAS
Los organismos que conocemos como coccidias son apicomplexos parásitos de vertebrados e invertebrados, con
ciclos de vida monoxénicos (un solo hospedero), heteroxénicos facultativos (un solo hospedero pero con
hospederos intermediarios facultativos) o heteroxénicos o sea con 2 hospederos obligatorios, uno intermediarios
en el cual ocurren las fases asexuales y el definitivo en el cual se llevan a cabo las fases sexuales con o sin fases
asexuales. Solo una especies monoxénica (Cystoisospora belli) y dos heteroxénicas (Sarcocystis hominis y S.
suihominis) son parásitos exclusivo del hombre, las demás especies son organismos propios de animales
silvestres y/o domésticos que pueden infectar al hombre (zoonosis).
Objetivos:
1. Reconocer los estadios diagnósticos de las coccidias de importancia en salud humana.

2. Procesar y colorear muestras para diagnóstico de coccidias.
DEMOSTRACIÓN DE COCCIDIAS
4.1 Ooquiste de Cystoisospora belli

sin coloración, el ooquiste esporulado es la forma de transmisión de las Coccidias. Haga un esquema de un
ooquiste esporulado e identifique sus estructuras.

coloreado con Ziehl Neelssen
4.3 Ooquiste de Cyclospora cayetanensis

coloreado con Ziehl Neelssen

sin colorear
4.5 Ooquiste de Cryptosporidium sp

Ooquiste en heces humanas coloreadas por el método de Kinyoun con el cual el parásito toma una coloración
rosada o fucsia.
4.6 Taquizoitos de Toxoplasma gondii

Colororeados con Giemsa. Observe en este exudado peritoneal de ratón infectado experimentalmente los
macrófagos en cuyo interior se ven los taquizoitos con estructuras en forma de banano de citoplasma azul y núcleo
rojo.
4.7 Cyclospora cayetanensis en directo (para montar)

COLORACIÓN PARA Cryptosporidium
COLORACION DE KINYOUN
PROCEDIMIENTO:
Con un aplicador o palillo, haga un extendido delgado de materia fecal en una lámina limpia.
Si las heces son duras coloque una gota de solución salina 0,85% sobre la lámina y luego haga el extendido.
Deje secar a temperatura ambiente.
Fije en metanol absoluto durante 3 a 5 minutos. Deje secar a temperatura ambiente.
Agregue carbol fucsina sobre la lámina de tal manera que cubra todo el extendido, deje actuar por 1 minuto.
Lave con agua de grifo.
Decolore con alcohol ácido al 5% durante 30 segundos.
Lave con agua de grifo.
Cubra la lámina con la solución de trabajo del azul de metileno por 1 minuto.
Lave con agua.
Deje secar a temperatura ambiente.
Examine al microscopio con objetivo 100X y aceite de inmersión para buscar los ooquistes, que se tiñen de color
rojo.
COLORACION DE ZIEHL - NEELSSEN
PROCEDIMIENTO:
1. Con las láminas en un soporte de coloración agregue el colorante de carbol fucsina, flamee evitando que el
colorante hierva o se seque. Déjelo actuar durante 5 minutos.
2. Lave con agua de la llave.
3. Enjuague con etanol al 50%, para quitar el exceso de carbol fucsina.
4. Decolore durante 30 segundos con la solución de ácido sulfúrico al 5%.
5. Lave con agua de la llave.
6. Agregue el azul de metileno alcalino, déjelo actuar durante 1 minuto.
7. Llave con agua de la llave y deje secar las láminas a temperatura ambiente.
8. Examine la preparación con lente seco de 40X y de 100X para aceite de inmersión.
Los ooquistes de Cryptosporidium colorean de fucsia y contrastan con el fondo azul. La mayoría presentan
gránulos negros prominentes en su interior. Las levaduras se diferencian por su tono rosado pálido y opaco,
carecen de gránulos y tienen tamaño muy variable.

LABORATORIO NO. 5. DEMOSTRACIONES DE AMEBAS
Objetivos:
1. Reconocer en preparaciones permanentes y frescas las características morfológicas de los estadios

diagnósticos de estos grupos parásitos.
DEMOSTRACIONES DE AMEBAS
5.1 Entamoeba histolytica Trofozoito

Coloreado. Observe en el núcleo, el cariosoma central y la cromatina periférica regular
5.2 Entamoeba histolytica Quiste

note las barras cromatoides de extremos redondeados.
5.3 Entamoeba histolytica Trofozoito

En directo
5.4 Entamoeba histolytica Quiste

En directo

5.5 Entamoeba coli Trofozoito
Note el cariosoma excéntrico y cromatina periférica irregular, las vacuolas alimenticias que contienen
bacterias y otras partículas.
5.6 Entamoeba coli Quiste

Observe el endoplasma mas granular que el de E. histolytica
5.7 Entamoeba coli Trofozoito

En directo
5.8 Entamoeba coli Quiste

En directo

5.9 Iodamoeba butschlii Trofozoito
el núcleo de esta especie es similar al de E. nana note la estructura clara y grande que representa la
vacuola alimenticia que contiene bacterias y otras partículas ingeridas.
5.10 Iodamoeba butschlii Quiste

Observe el espacio claro que aparece y que corresponde a la vacuola de glucógeno, cerca a ésta se encuentra el
núcleo con su típico cariosoma grande
5.11 Iodamoeba butschlii Trofozoito

En directo
5.12 Iodamoeba butschlii Quiste

En directo

5.13 Endolimax nana Trofozoito
Cariosoma grande sin cromatina nuclear periférica
5.14 Endolimax nana Quiste

note los cariosomas relativamente grandes de los núcleos.
5.15 Endolimax nana Trofozoito

En directo
5.16 Endolimax nana Quiste (para montar)

En directo

5.17 Blastocystis hominis en coloración
5.18 Blastocysttis hominis en directo

LABORATORIO NO. 6. DEMOSTRACIONES DE FLAGELADOS
Objetivos:
1. Reconocer en preparaciones permanentes y frescas las características morfológicas de los estadios

diagnósticos de estos grupos parásitos.
6.1 Giardia intestinalis Trofozoito

Coloreado.Observe su contorno piriforme o de lágrima. Ventralmente en su porción anterior se encuentra la
ventosa cóncava, un para de núcleos, axonema y flagelos localizados simétricamente a cada lado del eje central.
6.2 Giardia intestinalis Quiste

Coloreado. Presenta forma ovalada, 2-4 núcleos y un grupo de fibrillas que son los axonemas, de los que se
desarrollan los flagelos después del desenquistamiento. La masa protoplasmatica del quiste generalmente se
retraen y da la impresión de que el quiste tuviera doble membrana.
6.3 Giardia intestinalis Trofozoito

En directo

6.4 Giardia intestinalis Quiste
En directo
6.5 Chilomastix mesnili Trofozoito

Coloreado. Piriforme, éste tiene un extremo posterior agudo y un surco doro-ventral en forma de espiral,
observe el núcleo esférico con cariosoma central situado hacia la parte media del polo anterior, el
citostoma y los flagelos.
.
6.6 Chilomastix mesnili Quiste

Coloreado. Estos tiene forma de pera, comúnmente un solo núcleo y las formas coloreadas muestran al
citostoma o boca que es casi tan grande con el organismo enquistado.
6.7 Chilomastix mesnili Trofozoito

En directo

6.8 Chilomastix mesnili Quiste
En directo
6.9 Trichomonas vaginalis trofozoito

Piriforme de 17-30 micrómetros. Presenta cuatro flagelos y uno den el borde libre de la membrana ondulante la
cual va de 1/3 a 2/3 de largo del cuerpo, en su parte interna presenta un núcleo con gránulos de cromatina y
cariosoma excéntrico.
6.10 Pentatrichomonas hominis
CILIADOS
6.11 Balantidium coli

Trofozoito. Ovalado de 50 a 70 mircrómetros de largo por 40-50 micrómetros, rodeado de cilias. Observe en la
parte anterior una boca o citostoma, en el extremo posterior el citopigio, tiene dos nucleos uno grande arriñonado
llamado macronucleo y uno pequeño redondeado cerca a la concavidad del anterior llamado micronúcleo.

6.12 Balantidium coli
Quiste. Redondeado de 40-60 micrómetros, note la zona de implantación de los cilios inmediatamente después de
la cubierta gemática y el macro núcleo.
Preguntas
Cuales características permiten diferenciar los géneros de amibas que parasitan al hombre?
___________________________________________ _________________________________________
___________________________________________ _________________________________________
___________________________________________ _________________________________________
Realizar un esquema de la estructura de una amiba, señalando sus estructuras principales.

Mencione 3 características morfológicas del trofozoito de Giardia duodenalis
______________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________________
Realice un cuadro comparando las amebas : E. histolytica, Iodamoeba butschlii , E. coli, E. nana en cuanto a las estructuras diferenciales
(nucleos, cariosoma, cromatina, presencia de vacuolas, barras cromatoidales etc.) de quistes y trofozoitos.

LABORATORIO No. 7 CINETOPLASTIDOS
Objetivos:
1. Reconocer los estadios diagnósticos de los cinetoplástidos de importancia médica en Colombia.
DEMOSTRACIONES
7.1 Leishmania sp
corte de bazo en el que se ven amastigotas.
7.2 Impresiones en tejido con amastigotas.
7.3 Lutzomya
vector de Leishmania.
7.4 Trypanosoma cruzi

Epimastigotes en cultivo coloreado con Giemsa. Este estadio ocurre normalmente en el intestino medio del vector.

7.5 Leishmania sp tripomastigotes
7.6 Trypanosoma cruzi

Amastigotas intracelualres en corazón de ratón.
7.7 Trypanosama cruzi

Tripomastigotas en sangre de ratón, note el gran tamaño del cinetoplasto y la forma de C o de S del parásito.
Preguntas
Que estadios se encuentran en Leishmania y donde se localizan?

__________________________________________________________________________________________
Que estadios se encuentran en Trypanosoma cruzi y donde se localizan ?

__________________________________________________________________________________________
Que formas se desarrollan en cultivo?

__________________________________________________________________________________________

LABORATORIO No. 8. EXAMEN DIRECTO Y POR CONCENTRACIÓN PARA EL
DIAGNÓSTICO DE PARÁSITOS INTESTINALES
Objetivos:
1. Aprender los fundamentos del examen directo, el montaje correcto y los tipos de soluciones que debe utilizar.
2. Llevar a cabo procedimientos por concentración por flotación con sulfato de zinc.
Para la práctica el estudiante deberá conocer previamente los fundamentos teóricos de los procedimientos a
realizar.
CONCENTRACION CON SULFATO DE ZINC
1. Preparar una suspensión de materia fecal en aproximadamente 10 partes de agua de grifo.

2. Esta suspensión se centrifuga durante 2 minutos a 2.300 rpm. Se descarta el sobrenadante, se agregan 2
o 3 ml de agua, se rompe el sedimento por agitación y se llena el tubo de agua nuevamente.
3. Repetir el paso anterior máximo 2 veces hasta que el sobrenadante quede claro.
4. Se descarta el último sobrenadante, se agregan 3 o 4 ml de solución de sulfato de zinc de peso específico
1.180, se rompe el sedimento y se agrega más solución hasta 1 cm antes del borde del tubo.
5. Se centrífuga durante 1 o 2 min. a 2.300 RPM.
6. Con un asa bacteriológica estéril se recogen varias muestras de la película que se distribuyen en dos
extremos de un portaobjetos limpio y se adiciona una gota de solución salina 0.85%.
7. Se coloca un cubreobjeto en la preparación y se observa al microscopio.
Preguntas.
Cite dos métodos para concentrar parásitos en materia fecal?

a) ________________________________________
b) ________________________________________
Cual es el fundamento de cada uno?

a) ________________________________________
b) ________________________________________
Que ventajas y desventajas ofrece cada método?.

a) ________________________________________
b) ________________________________________

LABORATORIO No. 9 CLASE DIGENEA
Objetivo
1. Reconocer las características de algunos digeneos y céstodos parásitos del hombre o de animales que
pueden infectar a los humanos mediante preparaciones permanentes de adultos y huevos.
DEMOSTRACIONES
9.1 Fasciola hepatica Adulto

Tal como aparecen en hígado de vacunos infectados y en preparaciones coloreadas. Haga un esquema siguiendo
el dibujo y señale los órganos.
9.2 Fasciola hepatica Huevos
9.3 Fasciola gigantica Adulto

Parasita en el hígado del ganado y ocasionalmente del hombre en el Lejano Oriente.
9.4 Clonorchis sinensis Adulto

Digeneo del hígado, común en humanos del Lejano Oriente.

9.5 Shistosoma mansoni Macho adulto.
Observe el canal ginecóforo.
9.6 Shistosoma mansoni Hembra Adulto.
9.7 S. mansoni Huevos.
9.8 Paragonimus sp Huevos

Preguntas :
Describa las características morfológicas de cada uno de los estadios del ciclo de vida de los tremátodos

LABORATORIO No. 10 CLASE CESTODA
Objetivos:
1. Aprender a distinguir los diferentes Céstodos que parasitan al hombre, tanto en su estadío adulto como en
el estadio larval.
DEMOSTRACIONES ADULTOS
10.1 Taenia saginata

observe las cuatro ventosas que presenta en el escólex.
10.2 Taenia solium

Note la presencia, distribución de los ganchos y ventosas en su escólex.
10.3 Proglótidos inmaduros

Son aquellos que siguen la región del cuello, solo se observan esbozos del aparato reproductor.
10.4 Proglótidos maduros

Estos siguen a los anteriores en los cuales se han desarrollado el aparato reproductor.

10.5 Proglótidos grávidos
Que son los últimos proglótidos del estróbilo. En ambas especies, el poro genital es simple y lateral. Observe las
ramificaciones uterinas, hay unas diez a cada lado en T. solium y en T. saginata más de doce ramificaciones.
10.6 Hymenolepis nana Adulto

No tiene gran importancia clínica excepto en los casos de hiperinfección interna, cuando eclosionan los huevos
dentro del intestino. Observe el escólex con la ventosas y el róstelo con ganchos.
10.7 Dipylidium caninum

Proglotidos: infecta frecuentemente el perro, los casos humanos son pocos, de preferencia en niños. Note el
escólex romboide con cuatro ventosas y el róstelo armado de varias coronas de ganchos, los proglótidos con poros
genitales bilaterales.
10.8 D. caninum. Escólex.

Observe el róstelo.

10.9 D. latum
Proglótidos: observe la ubicación central de los órganos reproductores y el poro genital situado en el centro de la
cara ventral, note que no hay proglótidos grávidos, ya que los huevos son puestos a medida que se producen.
10.10 Echinococcus granulosus Adulto

Observe el escólex con las ventosas, ganchos. Note el número y distribución de los proglótidos.

DEMOSTRACIONES HUEVOS
10.11 Huevos de Taenia sp

Observe la cascara gruesa radiada, de color pardo y el embrión con seis ganchos que se encuentra dentro. Es
imposible diferenciar T. solium de T. saginata por la morfología de los huevos.
10.12 Hymenolepis nana

Observe los filamentos que salen de los polos de la membrana interna. Las membrana son incoloras, muy finas, en
el interior se encuentra la oncosfera con tres pares de ganchos.
10.13 Hymenolepis diminuta

Es de color amarillento con una membrana exterior gruesa, en el interior observe la oncosfera con tres pares de
ganchos.
10.14 D. caninum
Los huevos indiviudalmente tiene morfología igual a los de T. solium y T. saginata y se agrupan en acumulos de 6-
15 dentro de una cápsula ovigera, forma en la cual pueden ser eliminados en las materias fecales.

10.15 D. latum
Forma ligeramente ovalada y con una tapa u opérculo discreto
Preguntas
Como diferencia un proglótido maduro de un proglótido grávido?.

________________________________________________________________________________________
Cuáles son las características de un huevo de Taenia sp?.

________________________________________________________________________________________
Cómo diferencia un huevo de H.nana de un huevo de H. diminuta.?.

________________________________________________________________________________________

LABORATORIO No. 11 CLASE ADENOPHOREA
Objetivos
1. Reconocer los diferentes estadios en el ciclo de vida de los parásitos.
11.1 Trichiuris trichiura Macho

Observe el extremo anterior muy fino donde se localiza el aparato digestivo, el cual se inicia con una boca pequña,
provista de una lanceta diminuta seguida por un esófago tubular no muscular, revestido por una serie de cellas
glandulares o esticocitos. En el extremo posterior y enrollando se encuentra el intestino y los órganos
reproductores, localice las espículas copulatorias.
11.2 Trichiuris trichiura: Hembra

Como en el macho note que a mitad anterior es mucho mas delgada que la posterior, la cual no está enrollada y
contiene los órganos reproductores y el intestino.
11.3 T. trichiura
Huevos sin embrionar, salen al exterior con las materias fecales, son muy característicos y fáciles de identificar, de
color café, membrana y tapones mucoides en los extremos. La cavidad ovular muestra una masa granulosa.

Complete la información de los ciclos de vida, en forma precisa y explicativa.

LABORATORIO No. 12 CLASE SECERNENTEA: ASCARIDOS Y OXIURIDOS
Objetivos

2. Diferenciar los diferentes clases de huevos de Ascaris
12.1 Ascaris lumbricoides. Huevo no fertilizado
12.2 Ascaris lumbricoides. Huevo fertilizado
12.3 Ascaris lumbricoides. Huevo decorticado
12.4 Ascaris lumbicoides Huevo embrionada

12.5 Enterobius vermicularis. Hembra
12.6 Enterobius vermicularis. Macho
12.7 Enterobius vermicularis. Huevos en cinta de Graham
12.8 Enterobius vermicularis. Huevos en materia fecal

Complete la información de los ciclos de vida, en forma precisa y explicativa

Complete la información de los ciclos de vida, en forma precisa y explicativa

Explique la técnica a la que se refiere el dibujo

LABORATORIO No. 13 CLASE SECERNENTEA: STRONGÍLIDOS Y RABDÍTIDOS
Objetivos

2. Diferenciar las diferentes larvas.
DEMOSTRACIONES ADULTOS
13.1 Ancylostoma duodenale. Hembra
13.2 Ancylostoma duodenale. Macho
13.3 Necator americanus. Hembra
13.4 Necator americanus. Macho

13.5 Ancylostoma caninum. Macho
13.6 Huevo de uncinaria
DEMOSTRACIONES DE LARVAS
13.7 Larvas rabditoides de S. stercoralis
13.8 Larvas filariformes de S. stercoralis (para montaje)

Complete el ciclo de vida de forma precisa y explicativa

Para un adecuado diagnóstico microscópico, la muestra debe tomarse a primera hora de la mañana, nada más
levantarse el paciente y antes de que éste se lave, limpie o defeque:

Test de Graham. Fuente: http://www.clinicarotger.es
1º Pegar un fragmento de cinta adhesiva transparente en el extremo de un portaobjetos limpio y doblarla sobre el
mismo, de tal forma que la parte adhesiva quede orientada hacia el exterior.
2º Para tomar la muestra, separar los glúteos para poder visualizar bien la región perianal y pegar o apretar la cinta
adhesiva sobre los márgenes del ano.
3º Pegar la cinta adhesiva a lo largo del portaobjetos. La muestra ya está lista para poder observarla al
microscopio.
Una vez hecha la toma, la persona que la haya realizado debe lavarse adecuadamente las manos para evitar el
contagio, ya que durante el procedimiento pueden quedar huevos adheridos a las mismas.
http://www.telemicroscopia.ehas.org/intestinales-test-de-graham.html
http://ocw.um.es/cc.-de-la-salud/parasitologia-veterinaria-i-nematodos/practicas-1/manual-de-
tecnicas

LABORATORIO No. 14 CLASE SECERNENTEA: FILARIAS
Objetivo:
1. Observar en preparaciones permanentes las características morfológicas de las diferentes especies de

filarias.
DEMOSTRACIONES
MICROFILARIAS CON VAINA
14.1 Wuchereria bancrofti:

Las microfilarias son de periodicidad nocturna, las masas nucleares no llegan hasta el extremo posterior observe la
vaina. Los adultoshabitanlos ganglios linfáticos, la hembra mide 10-10cms de largo y de macho 3-4 centímetros.
14.2 Brugia malayi:

Las microfilarias son de periodicidad nocturna los núcleos llegan al extremo posterior. Presentaunaconstricción
entre dos núcleos terminales. Los adultos se localizan en el sistema linfático. Las hembras miden 5-10 cms de
largo el macho 2 cms.
MICROFILARIAS SIN VAINA
14.3 Mansonella ozzardi:

microfilarias sin periodicidad, la parte posterior se adelgaza hasta formar un filamento que contiene 4-5 núcleos
que no llegan hasta la extremidad posterior. Los parásitosadultos machos miden 3 cms, y las hembras 9cms, viven
en las cavidades abdominal y torácica, se han encontrado en el mesenterio, grasa perivisceral y tejido celular
subcutáneo.

14.4 Onchocerca volvulus:
gusano dentro de un nódulo. Enestapreparacióntenemos gusanos adultos cortados a distintos niveles, estas filarias
se hallan enrolladlas dentro de la matriz fibrosa del nódulo y son finas y largas como sucede con el resto de las
filarias. Observe las características morfológicas que permiten identificar a estos parásitos como filarias: cordones
muy anchos, útero grande y doble e intestino pequeño. Estos gusanos no están todavía maduros, de manera que
no se ven microfilarias completamente desarrolladas. En los habitantes de zonas endémicas de onchocercosis se
pueden observar nódulos subcutáneos en distintas zonas del cuerpo y la cabeza. Estos nódulos generalmente
contienen uno o mas parásitos. La hembra mide 50cms y el macho 5cms.
14.5 O. volvulus:
hembra adulta en el nódulo, observe las microfilarias que hay dentro del útero y las libres en el tejido conectivo del
nódulo.
14.6. Dirofilaria inmitis:

esta filaria es un parasito de perro en todo el mundo y es conocida como gusano de corazón Los adultos viven en
las cavidades del corazón derecho y en la arteria pulmonar causando disnea, insuficiencia cardiaca y a veces
ascitis. El adulto rara vez se ha encontrado en el hombre. Observe en esta preparación de sangre de perro las
microfilarias.
14.7 Filaria de primate.

APÉNDICE (No se realizará en el laboratorio)
PROCEDIMIENTOS DIRECTO PARA DIAGNÓSTICO DE MICROFILARIAS
EXTENDIDO GRUESO (Gota Gruesa):
Se toman dos o cuatro gotas de sangre, se hace un rectángulo de uno por dos centímetros, se deja secar a
temperatura ambiente aproximadamente por dos días. Deshemoglobinizar y fijar
EXTENDIDO DELGADO
Poner una gota de sangre en una lámina y hacer el extendido como en hematología, dejar a temperatura
ambiente y fijar.
DESHEMOGLOBINIZACIÓN DE EXTENDIDO GRUESO
Poner la lámina en solución salina fisiológica durante cuatro minutos enjuagar con agua destilada y dejar secar a
temperatura ambiente.
FIJACIÓN DE EXTENDIDOS DELGADOS Y GRUESO
Después que los extendidos se han secado, meterlos en metanol absoluto durante dos a tres minutos y dejar
secar.
COLORACIÓN DE GIEMSA
Extendidos delgados
a. Fije la película en metanol absoluto aproximadamente por 30 segundos bien sea por inmersión de la lámina o
por goteo del fijador sobre la muestra.
b. Deje secar a temperatura ambiente.
c. Tiña los extendidos durante 20 minutos en una dilución de Giemsa al 1:20 o por 45 minutos en una dilución de
1:50 del colorante.
d. Lave la lámina con agua buferada neutra o con agua de grifo.
e. Deje secar la muestra a temperatura ambiente.
Extendidos gruesos
a. Deje secar la lamina a temperatura ambiente por varias horas o durante la noche. La muestra no requiere
fijación.
b. Tiña la lámina por 45 minutos con solución de Giemsa a una dilución de 1:50.
c. Lave la lámina en agua buferada neutra o con agua de grifo por 5 minutos.
d. Deje secar a temperatura ambiente.

METODO DE KNOTT
1. Recolección de Muestra
a. Colecte exactamente un ml de sangre.

b. Agregue la sangre en un tubo que contenga 9 ml de solución de formalina al 2%. Tape bien y
mezcle la muestra.
c. Asegure la tapa con cinta adhesiva .
d. Almacene las muestras a temperatura ambiente hasta ser procesadas.
2. Procesamiento de la muestra (Knott’s)
a. Coloque la muestra en un tubo cónico y proceda a centrifugar a 1.500 rpm durante 5 a 10

minutos.
b. Descarte el sobrenadante y deje aproximadamente 0.5 ml del preparado.
c. En una lamina coloque dos o tres gotas de la muestra y haga un rectángulo no muy grueso con un
palillo.
d. Observe inmediatamente al microscopio con objetivo de 10X, recorriendo toda la gota. No colocar
laminilla.
e. Informe el resultado como positivo, colocando el número de microfilarias por preparación.
f. No necesita fijación pues la muestra ya está fijada en el formol. Deje secar la gota y coloréela
como un extendido para malaria

Complete el ciclo

Bibliografía
Jorgensen JH, Karon KC, Funke G, Pfaller MA, Landry ML, Ritcher SS, Warnock DW. Manual of clinical
microbiology.11th edition. Washington, D.C.: ASM Press. 2015
Organización Panamericana de la Salud. Diagnóstico de Malaria. Publicación Científica 512.Wasington,DC.:

Organización Panamericana de la Salud,1988.
Bruce- Chwatt,L.J. Esential Malariology. First edition.William Heinemann Medical books Ltd. London. 1980
World Health Organization. Basic malaria microscopy. Part 1. Geneva 1991.

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FACULTAD DE SALUD

Depto de Microbiología/Área parasitología 1

NORMAS DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO

1. La bata de laboratorio es requisito indispensable para el trabajo del laboratorio

USO DEL MICROSCOPIO

1. Movimientos involuntarios pueden desenfocar fácilmente el microscopio por lo que el área

Depto de Microbiología/Área parasitología 2

Depto de Microbiología/Área parasitología 3

Depto de Microbiología/Área parasitología 4

Depto de Microbiología/Área parasitología 5

Depto de Microbiología/Área parasitología 6

Figura 1. Dominios de vida según Carl Woese 1990.

Filum Clase Orden Especies importantes en Otras especies

Retortamonadea Retortamonadida Chilomastix mesnili,Retortamonas

Percolozoa Heterolobosea Schizopyrenida Naegleria fowleri

Euglenozoa Kinetoplastidea Trypanosomatida Leishmania donovani, L infatum, L. aethiopica, L.amazonensis, L

Depto de Microbiología/Área parasitología 8

Filum Clase Orden Especies importantes en Otras especies

Archamoebea Euamoebida Entamoeba histolytica, E. coli, E. Entamoeba gingivalis, Endolimax

Apicomplexa Coccidea Eimeriida Crytosporidium parum, Crytosporidium hominis, C. canis

Haemosporida Plasmodium knowlesi, P.

Ciliophora Litostomatea Trichostomatia Balantidium coli

CUADRO 2 . REINO CHROMISTA (parásitos encontrados en humanos)

Filum Clase Orden Especies importantes en Otras especies

Depto de Microbiología/Área parasitología 9

Secernentea Rhabditida Rhabditoidea Strongyloididae Strongyloides Strongyloides, Procynormis

Spiruroidea Gongylonematidae Gongylonema pulcrum

Metastrongyloidea Metastrongylidae Metastrongylus elongatus

Oxyuroida Oxyuroidea Oxyuridae Enterobius vermicularis E. gregorii

Physalopteroidea Physalopteridae Physaloptera caucasica

Ascarida Ascaridoidea Ascarididae Ascaris lumbricoides Ascaris suum,

Spirurida Dracunculoidea Dracunculidae Dracunculus medinesis

Gnathostomatoidea Gnathostomatidae Gnathostoma G. binucleatum

Depto de Microbiología/Área parasitología 10

Orden Superfamilia Familia Especies importantes Otras especies

Schistosomatoidea Schistosomatidae Schistosoma Schistosoma bovis, S.

Plagiorchiida Gymnophalloidea Gymnophallidae Gymnophalloides seoi

Echinostomatoidea Echinostomatidae Echinostomum equinatum, E.

Opisthorchidae Clonorchis sinensis, Opistorchis guayaquilensis

Depto de Microbiología/Área parasitología 11

Orden Familia Especies importantes en Otras especies

Cyclophyllidea Anoplocephalidae Bertia spp, Bertiella mucronata, B. studeri,

Davaineidae Buginetta alouattae, Raillietina celebensis.

Dipylidiidae Dipylidium caninum

Hymenolepididadae Hymenolepis nana Hymenolepis diminuta

Taenidae Taenia saginata, T. solium, Taenia taeniaeformis, T. multiceps,

CUADRO 6 . REINO ANIMALIA, PHYLUM ACANTHOGNATA. Acantocéfalos encontrados en humanos

Clase Orden Familia Especies importantes Otras especies

Depto de Microbiología/Área parasitología 12

Depto de Microbiología/Área parasitología 13

TOMA DE MUESTRA Y COLORACIÓN PARA MALARIA.

Depto de Microbiología/Área parasitología 14

TECNICA DE COLORACIÓN - EXTENDIDO

Deje secar la lámina por 5 a 10 minutos.

¿Cómo se adquiere una infección malárica?

Depto de Microbiología/Área parasitología 15

Describa cómo se hacen los cálculos de la parasitemia

Depto de Microbiología/Área parasitología 16

Depto de Microbiología/Área parasitología 17

2.1 Esporozoito coloreado

2.2 Esquizonte hepático

DEMOSTRACIONES DE Plasmodium vivax EN EXTENDIDO Y GOTA GRUESA

2.3 Trofozoitos ameboides de P. vivax extendido