ANEXO 2

Curso: Cromatografía
Código: 401542
Nombre de la Tarea: Tarea 2 – Cromatografía líquida y de gases

Temáticas a desarrollar:
- Cromatografía de gases: generalidades, columnas, fase estacionaria
y fase móvil, instrumentación: sistema de inyección y detectores;
elución isocrática y gradiente, factor de capacidad, selectividad,
resolución y aplicaciones.
- Cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC): generalidades,
columnas, fase estacionaria y fase móvil, instrumentación: sistema
de inyección, de bombeo y detectores; adsorción, fase normal y fase
reversa, elución isocrática y gradiente, factor de capacidad,
selectividad, resolución y aplicaciones.

Fecha de desarrollo: 27 de septiembre al 30 de octubre de 2019

Robinson Harvey Trochez Mendoza Estudiante 1

Juan José Vera Agudelo Estudiante 2

Luisa Fernanda Ospina Castaño Estudiante 3

Leidi Johana Murillo Pinillo Estudiante 4

Lina María Acevedo Ríos Estudiante 5

 EJERCICIO 1 – CROMATOGRAMAFÍA DE GASES

Tabla 1. Ejercicio 1.1 – Fórmula y estructura de compuestos (individual)

Muestra Compuest Fórmula Estructur Orden de
Estudiante
o molecular a polaridad

Furfural C5H4O2 3

Piridina C5H5N 2

Robinson
Colombia
Trochez
Ácido
CH3-COOH 4
acético

Furaneol C6H8O3 1

2-
C H OS 2
furfuriltiol 5 6

Juan José
Vera
Agudelo Vietnam
estudiante
2 Guaiacol C7H8O2 3
 Ácido
CH3COOH 1
acético

Ácido
C5H10O2 4
isovalérico

4,5-dimetil-
C5H7NS 3
tiazol

Luisa
Fernanda Ácido
CH3COOH 1
Ospina acético
Turquía
Castaño
estudiante
3 Metional C4 H8 O S 2

Furaneol C 6 H 8 O3 4

4-etil-
C9 H12 O2 3
guayacol

Leidi Ácido H3C ─

1
Johana acético COOH
Murillo
Brasil
Pinillo
estudiante Pirazina C4 H4 N2 2
4

Guaiacol C7 H8 O2 3

2,3-
Lina María Nepal butanedion (CH3CO)2 3
Acevedo a
estudiante
Ácido
5 CH3-COOH 4
acético

Piridina C5H5N 2

Furaneol C 6 H 8 O3 1

Tabla 2. Ejercicio 1.1 – Análisis muestras de café (individual)

Robinson Harvey Trochez Mendoza

Café Primer Segundo Tercer Cuarto

Colombia compuesto compuesto compuesto compuesto

t'R= tR- tM t'R= tR- tM t'R= tR- tM

Tiempo de t'R= tR- tM
retención t'R= 17,5 – t'R= 32,1 – t'R= 49,3 –
t'R= 56,4 – 7,5
corregido 2,1 5,4 9,2
(tR’) = 48,9min
= 15,4min = 26,7min = 40,1min

𝒕𝑹 𝟐 𝒕𝑹 𝟐 𝒕𝑹 𝟐 𝒕𝑹 𝟐
𝑵 = 𝟏𝟔 ( ) 𝑵 = 𝟏𝟔 ( ) 𝑵 = 𝟏𝟔 ( ) 𝑵 = 𝟏𝟔 ( )
Número de 𝒘 𝒘 𝒘 𝒘
platos 17,5 2 32,1 2 49,3 2 56,4 2
= 16 ∗ ( ) = 16 ∗ ( ) = 16 ∗ ( ) = 16 ∗ ( )
teóricos 0,13 0,32 0,54 0,23
(N) = 289940,83 = 161001,56 = 133360,22 = 962105,10

𝑳 𝑳 𝑳 𝑳
𝑯= 𝑯= 𝑯= 𝑯=
𝑵 𝑵 𝑵 𝑵
60 60 60 60
Altura de = = = =
plato (H) 289940,83 161001,56 133360,22 962105,10
= 0,00021𝑚 = 0,00037𝑚 = 0,00045𝑚 = 0,000062𝑚

Juan José Vera Agudelo

 Café Primer Segundo Tercer Cuarto
Vietnam compuesto compuesto compuesto compuesto

TR’ = TR -TM TR’ = TR -TM TR’ = TR -TM TR’ = TR -TM

Tiempo de TR’ = 49,2 - TR’ = 52,4 - TR’ = 37,6 - TR’ = 56,7 -
retención 6,2 12,5 3,4 3,3
corregido
(tR’) TR´= 43 TR´= 39,9 TR´= 34,2 TR´= 53,4

𝑻𝑹 𝟐 𝑻𝑹 𝟐 𝑻𝑹 𝟐 𝑻𝑹 𝟐
𝑵 = 𝟏𝟔 ( ) 𝑵 = 𝟏𝟔 ( ) 𝑵 = 𝟏𝟔 ( ) 𝑵 = 𝟏𝟔 ( )
Número de 𝒘 𝒘 𝒘 𝒘
platos
𝟒𝟗, 𝟐 𝟐 𝟓𝟐, 𝟒 𝟐 𝟑𝟕, 𝟔 𝟐 𝟓𝟔, 𝟕 𝟐
teóricos 𝑵 = 𝟏𝟔 ( ) 𝑵 = 𝟏𝟔 ( ) 𝑵 = 𝟏𝟔 ( ) 𝑵 = 𝟏𝟔 ( )
(N) 𝟔𝟎 𝟔𝟎 𝟔𝟎 𝟔𝟎
N =10,7584 N =12,2003 N =6,2834 N =14,2884
𝑳 𝑳 𝑳 𝑳
𝑯= 𝑯= 𝑯= 𝑯=
𝑵 𝑵 𝑵 𝑵
Altura de 𝟔𝟎 𝟔𝟎 𝟔𝟎 𝟔𝟎
plato (H) 𝑯= 𝑯= 𝑯= 𝑯=
𝟏𝟎, 𝟕𝟓𝟖𝟒 𝟏𝟐, 𝟐𝟎𝟎𝟑 𝟔, 𝟐𝟖𝟑𝟒 𝟏𝟒, 𝟐𝟖𝟖𝟒
H = 5,5770 H = 4,9179 H = 9,5490 H = 4,1992

Luisa Fernanda Ospina Castaño estudiante 3

Café Primer Segundo Tercer Cuarto

Turquía compuesto compuesto compuesto compuesto

t'R= tR- tM t'R= tR- tM

t'R= tR- tM
Tiempo de t'R= tR- tM
t'R= 48,2 – t'R= 49,9 –
retención t'R= 36,4 –
6,4 7,8 t'R= 61,8 – 4,7
corregido 4,1
=41,8min
(tR’) = 42,1min =57,5min
= 32,3min

𝒕𝑹 𝟐 𝒕𝑹 𝟐 𝒕𝑹 𝟐 𝒕𝑹 𝟐
Número de 𝑵 = 𝟏𝟔 ( ) 𝑵 = 𝟏𝟔 ( ) 𝑵 = 𝟏𝟔 ( ) 𝑵 = 𝟏𝟔 ( )
𝒘 𝒘 𝒘 𝒘
platos
teóricos 36,4 2 48,2 2 49,9 2 𝟔𝟏, 𝟖 𝟐
= 16 ∗ ( ) = 16 ∗ ( ) = 16 ∗ ( ) 𝟏𝟔 ∗ ( )
(N) 0,24 0,20 0,19 𝟎, 𝟏𝟐
= 𝟑𝟔𝟖, 𝟎𝟒𝟒, 𝟒𝟒 = 𝟗𝟐𝟗, 𝟐𝟗𝟔 = 𝟏, 𝟏𝟎𝟑, 𝟔𝟎𝟓, 𝟓𝟒𝟎 = 𝟔𝟖, 𝟔𝟔𝟔, 𝟔𝟔𝟔
 𝑳 𝑳 𝑳 𝑳
𝑯= 𝑯= 𝑯= 𝑯=
𝑵 𝑵 𝑵 𝑵
60 60 60 60
Altura de = = = =
plato (H) 𝟑𝟔𝟖, 𝟎𝟒𝟒, 𝟒𝟒 𝟗𝟐𝟗, 𝟐𝟗𝟔 𝟏, 𝟏𝟎𝟑, 𝟔𝟎𝟓, 𝟓𝟒𝟎 𝟔𝟖, 𝟔𝟔𝟔, 𝟔𝟔𝟔
= 0,0000016𝑚 = 0,000064𝑚 = 0,000054𝑚 = 0,00087𝑚

Leidi Johana Murillo Pinillo estudiante 4

Primer Segundo Tercer Cuarto

Café Brasil
compuesto compuesto compuesto compuesto

Tiempo de t'R= tR- tM t'R= tR- tM t'R= tR- tM t'R= tR- tM

retención
53,9 − 1,2 56,1 − 3,5 32,2 − 3,7 62,1 − 2,1
corregido
= 52,7 𝑚𝑖𝑛 = 52,6 𝑚𝑖𝑛 = 28,5 𝑚𝑖𝑛 = 60 𝑚𝑖𝑛
(tR’)

𝒕𝑹 𝟐 𝒕𝑹 𝟐 𝒕𝑹 𝟐 𝒕𝑹 𝟐
Número de 𝑵 = 𝟏𝟔 ( ) 𝑵 = 𝟏𝟔 ( ) 𝑵 = 𝟏𝟔 ( ) 𝑵 = 𝟏𝟔 ( )
𝒘 𝒘 𝒘 𝒘
platos
teóricos 53,9 2 56,1 2 32,2 2 62,1 2
N = 16 ( ) N = 16 ( ) N = 16 ( ) N = 16 ( )
(N) 0,34 0,23 0,27 0,16
= 𝟒𝟎𝟐𝟏𝟏𝟓, 𝟏𝟗 = 𝟗𝟓𝟏𝟖𝟗𝟕, 𝟏𝟔 = 𝟐𝟐𝟕𝟓𝟔𝟒, 𝟑𝟑 = 𝟐𝟒𝟏𝟎𝟐𝟓𝟔, 𝟐𝟓
L L L L
H= H= H= H=
N N N N
Altura de
60 60 60 60
plato (H) = = = =
402115,19 951897,16 227564,33 2410256,25
= 𝟎, 𝟎𝟎𝟎𝟎𝟎𝟏𝟓𝐦 = 𝟎, 𝟎𝟎𝟎𝟎𝟎𝟎𝟔𝟑 𝐦 = 𝟎, 𝟎𝟎𝟎𝟎𝟎𝟐𝟔 𝐦 = 𝟎, 𝟎𝟎𝟎𝟎𝟎𝟎𝟐𝟓 𝐦

Lina María Acevedo estudiante 5

Primer Segundo Tercer Cuarto

Café Nepal
compuesto compuesto compuesto compuesto

t'R= tR- tM
Tiempo de t'R= 49,9 - t'R= 59,3 – t'R= 36,3 –
retención t'R= 47,4 – 2,6
6,0 3,1 2,2
corregido = 44,8
(tR’) =43,9 min = 56,2 = 34,1

Número de
platos
 teóricos 𝟓𝟗, 𝟑 𝟐 𝟑𝟔, 𝟑 𝟐 𝟒𝟕, 𝟒 𝟐
(N) 𝑵 = 𝟏𝟔 ( ) 𝑵 = 𝟏𝟔 ( ) 𝑵 = 𝟏𝟔 ( )
𝟎, 𝟑𝟐 𝟎, 𝟐𝟏 𝟎, 𝟐𝟒
𝟒𝟗, 𝟗 𝟐
𝑵 = 𝟏𝟔 ( ) 𝑵 = 𝟓𝟒𝟗𝟒𝟓𝟏 𝑵 = 𝟒𝟕𝟖𝟎𝟕𝟑 𝑵 = 𝟔𝟐𝟒𝟏𝟎𝟎
𝟎, 𝟐𝟎
𝑵 = 𝟗𝟗𝟔𝟎𝟎𝟒

Altura de
plato (H) 𝟔𝟎 𝟔𝟎 𝟔𝟎 𝟔𝟎
𝑯= 𝑯= 𝑯= 𝑯=
𝟗𝟗𝟔𝟎𝟎𝟒 𝟓𝟒𝟗𝟒𝟓𝟏 𝟒𝟕𝟖𝟎𝟕𝟑 𝟔𝟐𝟒𝟏𝟎𝟎
= 𝟎, 𝟎𝟎𝟎𝟎𝟔𝟎𝟐𝒎 = 𝟎, 𝟎𝟎𝟎𝟏𝟎𝟗𝒎 = 𝟎, 𝟎𝟎𝟎𝟏𝟐𝟓𝒎 = 𝟎, 𝟎𝟎𝟎𝟎𝟗𝟔𝟏 𝒎

Tabla 3. Ejercicio 1.1 - Número de platos teóricos y altura de plato

(individual)
¿Qué relación tiene el número y la altura de platos
Estudiante
teóricos con los resultados obtenidos?

Respuesta:
Entre menor es el número de platos, mayor será la altura.
Entre mayor sea el número de platos teóricos, se logra mejor
separación.
Entre más pequeño sea H, el sistema es más eficiente (mayor
Robinson número de platos por metro).
Harvey
La eficacia de la columna cromatográfica aumenta cuanto
Trochez
mayor es el número de platos y cuanto menor sea la altura de
Mendoza
plato.

Referencias bibliográficas:
- Doria, G. (2016). Introducción general a la
Cromatografía. En Módulo Cromatografía (pp. 26-27).
Bogotá, Colombia. UNAD - Universidad Nacional Abierta y
a Distancia.
-
Juan José Vera Respuesta:
estudiante 2 - Entre mayor sea el número de platos teóricos se logra
mejor separación. En ese orden de ideas de los 4 el
compuesto 4 es el que mayor separación logra y el menor
fue el compuesto 3.
- Entre menos sea la altura de los platos (H) el sistema es
más eficiente. Siendo así el compuesto más eficiente
basado por su altura de platos es el compuesto 4 y el
menos eficientes es el compuesto 3.

Referencias bibliográficas:
- Doria, G. (2016). Introducción general a la Cromatografía. En
Módulo Cromatografía (pp. 26-27). Bogotá, Colombia. UNAD -
Universidad Nacional Abierta y a Distancia.

Respuesta:
Considerando que una columna cromatográfica está constituida
por una serie de capas estrechas, discretas pero contiguas,
denominadas platos teóricos, en los cuales se establece el
equilibrio de distribución de cada soluto entre la fase móvil y la
fase estacionaria se puede definir, los , platos teóricos como la
longitud de una columna en la que el soluto experimenta un
equilibrio completo entre las dos fase, Cuantos más platos
teóricos formen una columna mayor será su eficacia (o lo que es
Luisa lo mismo, cuanto menor sea la altura de plato mayor será la
Fernanda eficacia).Los platos teóricos es una construcción artificial que
Ospina nos permite explicar la forma de los picos y la velocidad de
Castaño desplazamiento a través de la columna. Los picos
estudiante 3 cromatográficos tienen forma de curva, la anchura de cada pico
está directamente relacionada con la varianza o la desviación
estándar. Por lo tanto, la altura de plato teórico H se puede
definir Entre más pequeño sea H, el sistema es más eficiente
(mayor número de platos por metro).

Referencias bibliográficas:
- Doria, G. (2016). Introducción general a la Cromatografía. En
Módulo Cromatografía (pp. 26-27). Bogotá, Colombia. UNAD -
Universidad Nacional Abierta y a Distancia

Respuesta:
 Entre más platos teóricos formen una columna será mayor su
eficacia (o lo que es lo mismo, cuanto menor sea la altura de
plato mayor será la eficacia).
Con esto concluimos que en la muestra que más eficiencia tiene
es en el ácido acético ya que tiene la mayor cantidad de platos
Leidi Johana teóricos y la muestra con menor eficiencia es la del Guaiacol ya
Murillo Pinillo que esta tiene menor platos teóricos que las demás.
estudiante 4

Referencias bibliográficas:
- Doria, G. (2016). Introducción general a la Cromatografía. En
Módulo Cromatografía (pp. 26-27). Bogotá, Colombia. UNAD -
Universidad Nacional Abierta y a Distancia

Respuesta:
Cuantos más platos teóricos formen una columna mayor será su
eficacia (o lo que es lo mismo, cuanto menor sea la altura de
plato mayor será la eficacia).
Según lo anterior y obteniendo los resultados de cada uno de los
compuestos analizados, la 2,3-butanediona, tiene una mayor
Lina María eficacia de separación, debido a su alto número de platos
Acevedo teóricos a comparación de la piridina, que obtuvo un número
estudiante 5 menor de platos teóricos, dando como resultado una altura
mayor y menor eficacia de la columna cromatografíca.

Referencias bibliográficas:
- Doria, G. (2016). Introducción general a la Cromatografía. En
Módulo Cromatografía (pp. 26-27). Bogotá, Colombia. UNAD -
Universidad Nacional Abierta y a Distancia

Tabla 4. Ejercicio 1.2 – Compuestos que se analizan en cromatografía de

gases (individual)
¿Qué tipo de compuestos se pueden analizar en
Estudiante
cromatografía de gases?

Respuesta:
 Compuestos no polares usado para hidrocarburos, aromáticos,
polinucleares, fármacos, esteroides.
Esteres metílicos de ácidos grasos, alcaloides, compuestos
halogenados, Aromáticos, clorados, nitroaromáticos, bencenos
alquilsustituidos. Pesticidas y glicoles
Robinson Ácidos libres, alcoholes, éteres, aceites esenciales,
Harvey
Trochez Ácidos grasos, poliinsaturados, ácidos libres, alcoholes, ácidos
Mendoza de la colofonia.

Referencias bibliográficas:
- Doria, G. (2016). Introducción general a la Cromatografía.
En Módulo Cromatografía (pp. 43 - 45). Bogotá, Colombia.
UNAD - Universidad Nacional Abierta y a Distancia.
-
Respuesta:
No polar usado para hidrocarburos, aromáticos, polinucleares,
fármacos, esteroides, Esteres metílicos de ácidos grasos,
alcaloides, fármacos, compuestos halogenados, fármacos,
esteroides, pesticidas y glicoles, aromáticos, clorados,
Juan José Vera nitroaromáticos, bencenos alquilsustituidos, ácidos libres,
alcoholes, éteres, aceites esenciales, glicoles, ácidos grasos,
estudiante 2
poliinsaturados, ácidos libres, alcoholes, ácidos de la colofonia.

Referencias bibliográficas:
- Doria, G. (2016). Introducción general a la Cromatografía. En
Módulo Cromatografía (pp. 43 - 45). Bogotá, Colombia. UNAD -
Universidad Nacional Abierta y a Distancia.

Respuesta:
 compuestos poco volátiles, generalmente los de peso
molecular superior a 300 u.m.a.
Luisa  compuestos sensibles a una elevación de la temperatura
Fernanda incluso moderada (determinados compuestos de interés
Ospina biológico)
Castaño  compuestos que se encuentran en forma iónica (puesto que
estudiante 3 son en general poco volátiles)
Por esta razón, la cromatografía de gases se emplea cuando los
componentes de la mezcla problema son volátiles o
semivolátiles y térmicamente estables a temperaturas de hasta
 350-400ºC. En cambio, cuando los compuestos a analizar son
poco volátiles y/o termolábiles, la técnica separativa adecuada
suele ser la cromatografía líquida de alta resolución (HPLC).
A menudo la cromatografía de gases se emplea para confirmar
de la presencia o ausencia de un compuesto en una muestra
determinada

Referencias bibliográficas:
- Doria, G. (2016). Introducción general a la Cromatografía. En
Módulo Cromatografía (pp. 43 - 45). Bogotá, Colombia. UNAD -
Universidad Nacional Abierta y a Distancia.
-http://laboratoriotecnicasinstrumentales.es/analisis-
qumicos/cromatografa-de-gases, consultado el 20 de octubre
del 2019

Respuesta:

En la industria farmacéutica se utiliza como una herramienta de

análisis de calidad en búsqueda de impurezas en los lotes de
medicamentos fabricados.

-Ayuda a detectar y cuantificar muestras de drogas, o permite

realizar análisis para comprobar si un atleta estaba dopado.
Leidi Johana
Murillo Pinillo
-Sirve para analizar la cantidad de compuestos halogenados en
estudiante 4
fuentes de agua. Asimismo, de los suelos puede determinarse
su nivel de contaminación por pesticidas.

-Analiza el perfil de ácido graso de muestras de distintos

orígenes, ya sea vegetal o animal.

-Transformando las biomoléculas en derivados volátiles, pueden

ser estudiados por esta técnica. Así, se puede estudiar el
 contenido de alcoholes, grasas, carbohidratos, aminoácidos,
enzimas y ácidos nucleicos.

Referencias bibliográficas:

1. - Day, R., & Underwood, A. (1986). Química Analítica

Cuantitativa. Cromatografía gas-líquido. (Quinta ed.).
PEARSON Prentice Hall.
2. Carey F. (2008). Química Orgánica. (Sexta edición). Mc
Graw Hill, p577-578.

Respuesta:
 compuestos poco volátiles, generalmente los de peso
molecular superior a 300 u.m.a.
 compuestos sensibles a una elevación de la temperatura
incluso moderada (determinados compuestos de interés
biológico)
Lina María  compuestos que se encuentran en forma iónica (puesto que
Acevedo son en general poco volátiles)
estudiante 5

Referencias bibliográficas:
- Doria, G. (2016). Introducción general a la Cromatografía. En
Módulo Cromatografía (pp. 26-27). Bogotá, Colombia. UNAD -
Universidad Nacional Abierta y a Distancia

Tabla 5. Ejercicio 1.2 – Tipos de inyección en cromatografía de gases

(colaborativa)
Tipo de Descripción de Cromatograma Relación con la
inyección la inyección (ejemplo) separación de picos
 Un inyector de Respuesta: Una
división (split) separacion mediante
divide la muestra cromatografia de gases
vaporizada en dos se inyecta una pequeña
partes: una cantidad de la muesra a
minoritaria que se separar en una
transfiere a la corriente de gas inerte a
columna y otra elevada temperatura
mayoritaria que esta corriente de gas a
se expulsa del traviesa una columna
inyector por la cromatografica que
válvula de split. separa los componentes
La inyección en de la mezcla por medio
split evita un mecanismo
sobrecargar la mecanico de particion
Inyección columna con los (cromatografia gas
con división efectos negativos liquido) de adsorcion
de flujo que pueden (cromatografia gas
producirse. Es el solido).
método de
inyección más
usual en el
análisis de
muestras
complejas muy
concentradas
como las usuales
en la industria
petrolífera o en la
industria de los
aceites
esenciales.

La muestra se Respuesta: Los

inyecta en el componentes separados
Inyección inserto y luego emergene de la
sin división pasa colunma a intervlos
de flujo directamente a la discretos y pasaran a
columna sin traves de algun sistema
ningún tipo de
de deteccion adecuado
 división o purga. o bien seran dirigidos
Puesto que no hacia un dispositivo de
hay un divisor se recogida de muestras
evita la
discriminación.

El inserto es un
tubo abierto, con
estrechamiento
en la base o con
doble
estrechamiento
para minimizar el
Flashback.

Este método se
usa en equipos
originalmente
diseñados para
columnas
empacadas.
Requiere el uso
de columnas
capilares de
0.53mm de
Diámetro Interior
(Wide Bore) que
operan con
caudales de
portador
relativamente
altos y permiten
que los vapores
de muestra y
disolvente se
transfieran a la
columna en un
plazo
relativamente
corto.

Referencias bibliográficas:
- Cromlab S.L. Blog de Cromatografía (2015). Técnicas de Inyección en HRGC:
seleccione el Inserto adecuado. Recuperado de http://blog.cromlab.es/tecnicas-
de-inyeccion-en-hrgc-seleccione-el-inserto-adecuado/
Recuperado de
https://www.google.com/search?rlz=1C1SQJL_esCO857CO857&tbm=isch&sxsr
f=ACYBGNQPlnH3u4mLTpsdTDWL5YKY9itkTQ:1571600047894&q=Inyecci%C3
%B3n+con+divisi%C3%B3n+de+flujo+ejemplo+Cromatograf%C3%ADa&chips
=q:inyecci%C3%B3n+con+divisi%C3%B3n+de+flujo+ejemplo+cromatograf%
C3%ADa,online_chips:gas&sa=X&ved=0ahUKEwiDq9W0yqvlAhUv01kKHTG5Db
8Q4lYILCgA&biw=1366&bih=657&dpr=1#imgrc=a_mNVNXoHSkvbM:
Consultado el 20 de octubre del 2019

Tabla 6. Ejercicio 1.2 – Tipos de columna en cromatografía de gases

(colaborativa)

Flujo de la Flujo de Longit Materi Características

Tipos de fase móvil la ud al
columna inyecci
ón

Los En estas 2 a 60 Silice, Las columnas capilares

sistemas de columna m acero son de dos tipos básicos:
introducción s existe inoxida las de pared recubierta
de muestras un ble, (WCOT) y las de soporte
utilizados problem vidrio recubierto (SCOT). Las
para a debido WCOT son simplemente
Capilar o trabajar con
tubular a la tubos capilares donde la
columnas
adsorció pared interna se ha
capilares
están n del recubierto con una
basados analito finísima capa de fase
sobre los sobre la estacionaria. Las
mismos superfici columnas SCOT tienen
principios e de la en su parte interna una
de los sílice fina capa de material
inyectores fundida, absorbente como el
utilizados adsorció empleado en las
para n debida columnas de relleno
columnas a la (tierra de diatomeas)
empaqueta presenci donde se ha adherido la
das por lo
a de fase estacionaria.
que las
grupos
consideraci Las columnas capilares
ones silanol
ofrecen mayor
genérelas (Si-OH),
resolución, rapidez y
sobre ellos los
sensibilidad que las
siguen cuales
columnas
siendo interacci
empaquetadas. En
válidas. onan
general, la efectividad de
La fuertem
diferencia una columna SCOT es
ente
fundamenta menor que la de una
con mol
l entre los columna WCOT.
esculas
sistemas
polares
que utilizan
orgánica
columnas
s. Se
empaqueta
das y los suele
que los solventa
utilizan r este
columnas inconve
capilares niente
radica en la inactiva
cantidad de ndo la
muestra superfici
que estas e por
últimas sililación
pueden
con
separar es
dimetilcl
mucho
menos que orosilan
el primer o
caso por (DMCS).
otra parte la La
columnas adsorció
capilares n debida
son muy a los
afectadas óxidos
 por los metálico
disolventes s se ve
de forma paliada
que los en gran
volúmenes parte
que se por la
pueden
elevada
inyectar en
pureza
ellas son
extremada de la
mente sílice
bajos. emplead
a

La inyeccion Existen 0,5 a 5 se Tienen un diámetro de 2

de muestra algunos m fabrica a 5 mm.
en tipos de n con
columnas El interior se rellena con
inyector tubos
empaqueta un material sólido. El
es que de
das no material de relleno ideal
permite vidrio o
presenta consiste en pequeñas
n utilizar de
problemas partículas, esféricas y
unos de algún
particulares uniformes, con una
este tipo de los metal,
buena resistencia
columnas extremo como
mecánica, para tener
admite s de la cobre,
una máxima superficie
De cantidades columna acero
donde interaccionar la
relleno o de muestra cromato inoxida
fase estacionaria y el
empaque relativamen grafía ble o
analito. Es muy
tadas te elevadas, como alumini
y la frecuente el uso de tierra
cámara o
inyeccion de de diatomeas.
de
unos mezcla,
cuantos
la
microlitros
introduc
de muestra
ción de
no conduce
a una la
merma muestra
apreciable por
de la medio
eficacia de de este
la columna, tipo de
 la mayoria inyector
de los es
cromatograf (inyecci
os ón en
comerciales columna
utilizan ) está
camaras de
libre de
inyeccion
muchos
termostatiz
adas de los
problem
as ,
además
de
ofrecer
adicional
es tales
como
permitir
la
utilizació
n de
tempera
turas
mas
bajas
para la
vaporiza
ción

Referencias bibliográficas:
- Castaños, E., (2015). Lidia con la química. Características de las columnas
cromatográficas en CGL. Recuperado de
https://lidiaconlaquimica.wordpress.com/tag/columnas-capilares/
http://www.mncn.csic.es/docs/repositorio/es_ES/investigacion/cromatografia/c
romatografia_de_gases.pdf, consultado el 20 de octubre del 2019
 Tabla 7. Ejercicio 1.2 – Elución isotérmica (colaborativa)
Casos Elución isotérmica Cromatograma

SI. Efecto de la temperatura sobre

los cromatogramas. a)
Temperatura
Caso 1. programada. b) Isotermo

Componentes
de una mezcla
con puntos de
ebullición
similares

NO.

Cada compuesto tiende a

Caos 2. ser eluido a su temperatura
Componentes optima según el
de una mezcla calentamiento y la velocidad
con puntos de de flujo elegidos
ebullición
diferentes
Fuente:
http://www.cartagena99.com/re
cursos/alumnos/apuntes/13%20
CG%20y%20HPLC.pdf

Referencias bibliográficas:
- Laitinen, H., A., & Harris, W. E., (1982). Análisis químico. Recuperado de
https://books.google.com.co/books?id=VMB2E281nPUC&lpg=PA525&ots=6cYw
2n6SLU&dq=elucion%20isotermica&pg=PA525#v=onepage&q=elucion%20isot
ermica&f=false
- RUA- Universidad de Alicante. Cromatografía de gases. Recuperado de
https://rua.ua.es/dspace/bitstream/10045/8247/4/T3gascromat.pdf

Tabla 8. Ejercicio 1.2 – Detectores (individual)

Tipo de muestra para
Detectores Características
analizar

La espectrometría de Esta metodología es

masas (MS) utiliza el usada ampliamente en
movimiento de iones productos naturales,
en campos eléctricos farmacia y alimentos.
y magnéticos para
clasificarlos de
acuerdo a su relación
Esta técnica está indicada
masa-carga.
para la separación de
De esta manera la
compuestos orgánicos
espectrometría de
volátiles y semivolátiles.
masas es una técnica
Hidrocarburos
analítica
Robinson Poliaromáticos (PAHs),
por medio de la cual
Harvey las sustancias Pesticidas clorados,
Trochez Masas químicas se VOCs, caracterización de
Mendoza identifican materiales orgánicos
estudiante 1 separando los
Iones gaseosos en
campos eléctricos y
magnéticos.
La MS brinda
información
cualitativa y
cuantitativa acerca
de la composición
atómica y molecular
de materiales
inorgánicos y
orgánicos
Referencias bibliográficas:
- Tesis.uson.mx. Cromatografía de gases acoplado a un detector de masas
gc/ms. Recuperado de
http://tesis.uson.mx/digital/tesis/docs/21937/capitulo5.pdf
- UCM. Cromatografía de gases/masas (GC-MS). Recuperado de
https://www.ucm.es › data › cont › docs › 650-2013-12-02-gases masas

Respuesta: Es tal vez Respuesta: Todos los

el más ampliamente compuestos que
utilizado en presenten enlaces C-H.
cromatografía de
gases. Este tipo de
detector es en la
práctica de respuesta
universal, ya que es
selectivo hacia los
compuestos que
presenten enlaces C-
H, por lo que son
muy pocos los
compuestos que no
dan señal en él. El
Juan José gas procedente de la
Ionización de
Vera columna se mezcla
llama
estudiante 2 con hidrógeno y esta
mezcla se quema en
una cámara con
excedente de aire.
Por encima de la
llama, se dispone un
colector cilíndrico
polarizado con el fin
de recoger los iones
generados; sobre
este dispositivo, se
mide la corriente
iónica que se
establece entra la
punta del quemador
y electrodo colector.
Referencias bibliográficas:
http://www.mncn.csic.es/docs/repositorio/es_ES/investigacion/cromatografia/c
romatografia_de_gases.pdf

Respuesta: Respuesta:

Conductividad La conducción térmica se

térmica para referir mide, de acuerdo al
a una propiedad de Sistema Internacional, a
ciertos materiales partir de la relación
capaces de W/(K.m), que es
transmitir el calor, es equivalente en unidades
decir, permitir el a Joules sobre metro por
paso de la energía segundo por Kelvin
cinética de sus (J/m.s.K). Así, una
moléculas a otras conductividad térmica de
sustancias 1 vatio por metro y kelvin
adyacentes. Se trata significa que un Julio (J)
de una magnitud de calor se propaga a
intensiva, inversa a través de un material de
la resistividad superficie de 1m2 y un
térmica, que es, grosor de 1m, en 1
lógicamente, la segundo, cuando la
Conductividad resistencia de ciertos diferencia entre ambas
Luisa térmica materiales a la sustancias sea de 1K.
Fernanda transmisión del calor
Ospina por sus moléculas. El acero, con una
Castaño La explicación de conductividad de 47 a 58
este fenómeno W/(K.m).
radica en que, al
calentarse un El agua, con una
material, sus conductividad
moléculas reciben un de 0,58 W/(K.m).
extra de energía
El alcohol, con una
cinética que
incrementa su conductividad
agitación. Las de 0,16 W/(K.m).
moléculas, El bronce, con una
entonces, son conductividad de 116 a
capaces de compartir
140 W/(K.m).
ese extra de energía
sin ocasionar
movimientos
globales de la
 materia (en eso se La madera, con una
distingue de la conductividad
convección térmica de 0,13 W/(K.m).
de
los líquidos y gases), El titanio, con una
siendo esta conductividad
capacidad muy de 21,9 W/(K.m).
elevada en los
metales y en los El mercurio, con una
cuerpos continuos, conductividad
por lo general, y muy de 83,7 W/(K.m).
baja en los polímeros
y otros materiales
aislantes como la
fibra de vidrio. Así,
la conductividad
térmica de un
material se calcula a
partir de un
coeficiente (referido
como λ) y es distinta
dependiendo de la
naturaleza molecular
del cada material
específico.
Referencias bibliográficas:
 conductividades térmica, Recuperado
de https://concepto.de/conductividad-
termica/#ixzz62wBAlwp3,consultado el 20 de octubre de 2019

Respuesta: Respuesta:
Es un detector es una técnica empleada
termoiónico para analizar el nitrógeno
específico o TSD, es o el fósforo que contienen
Leidi Johana una técnica compuestos orgánicos y
Murillo Pinillo Termoiónico empleada para se emplea con frecuencia
Estudiante 4 analizar el nitrógeno en los mercados
o el fósforo que farmacéuticos,
contienen alimentarios y
compuestos medioambientales.
orgánicos y se
emplea con
frecuencia en los
mercados
farmacéuticos,
alimentarios y
medioambientales.

El NPD es similar a
un detector de
ionización de llama y
utiliza una llama de
hidrógeno/aire a
través de la cual se
pasa la muestra. Sin
embargo, un NPD
utiliza un cordón
alcalino de cloruro de
cesio o de rubidio
calentado por una
bobina sobre la cual
pasa el gas portador
mezclado con el
hidrógeno. El cordón
caliente emite
electrones por
emisiones
termoiónicas que son
recogidas por el
ánodo y proporciona
la corriente de fondo.
Cuando un
componente que
contiene nitrógeno o
fósforo sale de la
columna, los
materiales de
nitrógeno y fósforo
parcialmente
combustionados son
adsorbidos en la
superficie del cordón.
Esto aumenta la
 emisión de
electrones y la
corriente que se
mide entonces.

Referencias bibliográficas:
- Copyrightc1996-2019 Air Products and Chemicals, Inc
http://www.carburos.com/Industries/Analytical-Laboratories/analytical-lab-
applications/product-list/gc-with-nitrogen-phosphorous-detector-gc-npd-
analytical laboratories.aspx?itemId=861F64AABFF94773AEAE196816F59BBD

Respuesta: Respuesta:
Es un tipo Es una técnica empleada
de detector utilizado para analizar compuestos
en cromatografía de halogenados y se utiliza
gases para detectar principalmente en los
trazas de mercados
compuestos medioambiental, forense
químicos en una
y farmacéutico.
muestra.123 Fue
inventado por James Este detector es muy
Lovelock.4567 Su selectivo, y es sensible a
funcionamiento la presencia de moléculas
Lina María
Captura de básico se basa en la con átomos o grupos
Acevedo emisión de una electronegativos
electrones
estudiante 5 partícula β (electrón) como halógenos (cloro, b
por parte de átomos romo, yodo), peróxidos,
como el 63Ni quinonas y grupos nitro.
o tritio adsorbido Otros grupos como
sobre una placa el alcohol, amina e hidroc
de platino o titanio. arburos no dan señal.
Se aplica en la detección
de moléculas que
contienen halógenos,
principalmente cloro,
como
algunos insecticidas o bif
enilos policlorados.
Referencias bibliográficas:

- Air.P.G. GC con detector de captura de electrones (GC-ECD). Recuperado

de http://www.carburos.com/Industries/Analytical-
Laboratories/analytical-lab-applications/product-list/gc-with-electron-
capture-detector-gc-ecd-analytical-
laboratories.aspx?itemId=2ED69212C574443C9354860ABEFCFE2B

EJERCICIO 2 – CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA

Tabla 9. Ejercicio 2.1 - Concentraciones y áreas del analito y del patrón

interno (colaborativo)
Patrón
Áreas y
Muestr
concentraciones 1 2 3 4 5
a
250mg/ 300mg/ 350mg/
200mg/ 400mg/l
l l l
l 450mg/
300mg/ 350mg/ 400mg/
𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑎𝑛𝑎𝑙𝑖𝑡𝑜 250mg/ =0,8888
=0,833 =0,857 =0,875
𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑙𝑎𝑐𝑡𝑜𝑠𝑎 =0,8 mg/l 1 mg/l mg/l
mg/l
mg/l concentr
concent concent concent
concent ación
ración ración ración
ración
1640 1101
390 763 1069 1399
868 893
898 898 878 872
á𝑟𝑒𝑎 𝑎𝑛𝑎𝑙𝑖𝑡𝑜 =1,8894 =1,2329
=0,434 =0,849 =1,217 =1,604
á𝑟𝑒𝑎 𝑙𝑎𝑐𝑡𝑜𝑠𝑎 009 227324
298441 665924 539863 357798
área área
área 3 área 3 área 2 área

Tabla 10. Ejercicio 2.1 - Curva de calibración (colaborativo)

Ecuación de la recta: y = 17,274x - 13,468
Coeficiente de correlación (R2): R² = 0,9619

Tabla 11. Ejercicio 2.1 – Concentración de extracto y del analito

(colaborativo)

Respuesta:

Para calcular la concentración en el extracto de la muestra se

Concentración siguen estos dos pasos:
del extracto
En la ecuación de la recta de calibrado se sustituye “y” por el
área de analito/área de p.i. obtenida en el cromatograma de la
muestra (1101/893 = 1,2329227324) y se despeja “x” que es la
concentración de analito/concentración de p.i. en el extracto de
la muestra:

C analito/C p.i. = x = (1,2329227324 + 13,468) /17,274 = 0,85

mg/L

Respuesta:
Concentración La concentración de analito se obtiene multiplicando el valor
analito calculado para “x” (0,85) por la concentración de p.i. (450
mg/L):

C de analito en el extracto de la muestra = 0,85 * 450 (mg/L) =

382,5 mg/L

Tabla 12. Ejercicio 2.1 - Resultados y coeficiente de correlación (R2)

(individual)
¿Qué relación tienen el valor del coeficiente de corrección
Estudiante
(R2) con los resultados obtenidos?
El R2 es un criterio de valoración de la capacidad de explicación
de los modelos de regresión, y representa el porcentaje de la
varianza justificado por la variable independiente. Se puede
interpretar como el cuadrado del coeficiente de correlación de
Pearson entre las variables dependiente e independiente, o
también como el cuadrado del coeficiente de correlación entre
los valores reales de una variable y sus estimaciones. Si todas
las observaciones están en la línea de regresión, el valor de R2
es 1, y si no hay relación lineal entre las variables dependiente
e independiente, el valor de R2 es 0. El coeficiente R2 es una
medida de la relación lineal entre dos variables. A medida que
su valor es mayor, el ajuste de la recta a los datos es mejor,
puesto que la variación explicada es mayor; así, el desajuste
provocado por la sustitución de los valores observados por los
Nombre predichos es menor.
estudiante 1
Este coeficiente nos informa del grado de relación entre dos
variables. Si la relación es lineal perfecta, r será 1 ó -1. El
coeficiente r será positivo si la relación es positiva (al aumentar
x aumenta y), y r será negativo en el caso contrario (si al
aumentar x, disminuye y). En general, valores (absolutos) de r
> 0,80 se consideran altos.

De acuerdo al resultado obtenido (0,96), hay una correlación

positiva fuerte o alta entre las variables tratadas.

Referencias bibliográficas:
- Dolado, J., (1999). Validez de las Predicciones en la
Estimación de Costes. Recuperado de
 http://www.sc.ehu.es/jiwdocoj/remis/docs/validez/valide
z.htm
- Correlación lineal y regresión. Recuperado de
http://hidrologia.usal.es/practicas/correlacion/Correlacio
n_explicacion.pdf
Respuesta:
Este coeficiente nos informa del grado de relación entre dos
variables. Si la relación es lineal perfecta, r será 1 ó -1. El
coeficiente r será positivo si la relación es positiva (al aumentar
x aumenta y), y r será negativo en el caso contrario (si al
aumentar x, disminuye y). En general, valores (absolutos) de r
Juan José Vera > 0,80 se consideran altos.
estudiante 2
El valor obtenido fue de 0,96 lo que nos indica que fue una
relación lineal perfecta, la relación es alta.

Referencias bibliográficas:
http://hidrologia.usal.es/practicas/correlacion/Correlacion_expl
icacion.pdf
Respuesta: En estadística, el coeficiente de correlación
de Pearson es una medida lineal entre dos variables
aleatorias cuantitativas. A diferencia de la covarianza, la
correlación de Pearson es independiente de la escala de medida
de las variable El valor del índice de correlación varía en el
intervalo [-1,1], indicando el signo el sentido de la relación:

 Si r = 1, existe una correlación positiva perfecta. El índice

indica una dependencia total entre las dos variables
denominada relación directa: cuando una de ellas aumenta,
Luisa
la otra también lo hace en proporción constante.
Fernanda
 Si 0 < r < 1, existe una correlación positiva.
Ospina
Castaño  Si r = 0, no existe relación lineal. Pero esto no
estudiante 3 necesariamente implica que las variables
son independientes: pueden existir todavía relaciones no
lineales entre las dos variables.
 Si -1 < r < 0, existe una correlación negativa.
 Si r = -1, existe una correlación negativa perfecta. El índice
indica una dependencia total entre las dos variables
llamada relación inversa: cuando una de ellas aumenta, la
otra disminuye en proporción constante.

Este coeficiente nos informa del grado de relación entre dos

variables. Si la relación es lineal perfecta, r será 1 ó -1. El
 coeficiente r será positivo si la relación es positiva (al aumentar
x aumenta y), y r será negativo en el caso contrario (si al
aumentar x, disminuye y)

Referencias bibliográficas:
http://www.ics-aragon.com/cursos/salud-
publica/2014/pdf/M2T04.pdf
http://hidrologia.usal.es/practicas/correlacion/Correlacion_expl
icacion.pdf

Respuesta:
El coeficiente de correlación de Pearson, pensado para variables
cuantitativas (escala mínima de intervalo), es un índice que mide
el grado de variación entre distintas variables relacionadas
linealmente. Adviértase que decimos "variables relacionadas
linealmente". Esto significa que puede haber variables
fuertemente relacionadas, pero no de forma lineal, en cuyo caso
no proceder a aplicarse la correlación de Pearson.
En este caso valor obtenido fue de 0,96 lo que nos indica que
Leidi Johana
fue una relación fuerte positiva y esto quiere decir que la relación
Murillo Pinillo
es alta.
estudiante 4

Referencias bibliográficas:
- Achen, C. H. (1982). Interpreting and using regression.
London: Sage.
- Amon, J. (1990). Estadística para psicólogos (1). Estadística
Descriptiva. Madrid: Pirámide. (*)
- Amon, J. (1990). Estadística para psicólogos (2). Probabilidad.
Estadística Inferencial. Madrid: Pirámide
Respuesta:

El coeficiente de correlación de Pearson o r es una prueba

estadística que permite analizar la relación entre dos variables
medidas en un nivel por intervalos o de razón, donde r mide el
Lina María grado de asociación lineal entre dos variables X e Y. La prueba
Acevedo en sí no considera a una como independiente y a otra como
estudiante 5 dependiente, ya que no se trata de una prueba que evalúa
causalidad.
Cuando el coeficiente r de Pearson se eleva al cuadrado, el
resultado indica el porcentaje de la variación de una variable
debido a la variación de la otra y viceversa. Es decir, el
coeficiente de determinación, r al cuadrado o r², es la proporción
 de la variación en Y explicada por X. Puede adoptar cualquier
valor entre 0 y 1, inclusive
Evaluando la intensidad de la relación entre X e Y.0,96 indica
una correlación positiva fuerte.

Referencias bibliográficas:
-Geo. (2015). Cómo se relaciona el Coeficiente de Correlación
de Pearson (r) y el Coeficiente de Determinación r Cuadrado
(r²). Recuperado el 21 de Junio de 2015 de
https://www.gestiondeoperaciones.net/estadistica/como-se-
relaciona-el-coeficiente-de-correlacion-de-pearson-r-y-el-
coeficiente-de-determinacion-r-cuadrado-r%C2%B2/

Tabla 13. Ejercicio 2.1 - Análisis Cromatogramas (individual)

Indique la relación que existe entre las muestras
Estudiante
analizadas con la intensidad de señal de los picos.
La relación de la intensidad de pico de las especies de analito y
los estándares internos se representa entonces en función de la
concentración de analito. La intensidad relativa de los distintos
picos, permite deducir la proporción en que cada componente se
encuentra en la muestra.

Nombre
estudiante 1 Referencias bibliográficas:
- Yagües, G. (2008). Espectrometría. Recuperado de
https://rua.ua.es/dspace/bitstream/10045/8249/4/T5ma
sas.pdf
- Fundamentos de espectrometría de masas. Recuperado de
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/masas_108
32.pdf
Respuesta: La altura del pico es proporcional a la concentración
del componente separado de la muestra en un sistema óptimo.
En la abscisa o eje X, se representa el tiempo de retención de
los componentes de la muestra o mezcla. Es el tiempo que
Juan José Vera
transcurre desde la inyección de la muestra hasta que se
estudiante 2
detiene, siendo es diferente para cada sustancia pura.

Referencias bibliográficas:
- https://www.lifeder.com/cromatograma/
Respuesta: Se representan los resultados de la separación de
Luisa
una mezcla mediante técnicas cromatográficas. En el eje de las
Fernanda
ordenadas se representa el valor medido de alguna propiedad
Ospina
física a partir de la cual se ha detectado la presencia de una
Castaño sustancia, o bien una unidad relativa que la cuantifica
estudiante 3 (igualmente basada en la medición de alguna propiedad) los
compuestos eluidos (que han atravesado la fase estacionaria)
son transportados por la fase móvil a un detector que los registra
en forma de curvas como forma de campana. Dichos señales se
denominan picos y el conjunto de picos y línea base registrada
se denomina cromatograma.

Referencias bibliográficas:
https://glosarios.servidor-alicante.com/quimica/cromatograma
Respuesta:
Es la parte de un cromatograma diferencial que muestra la
respuesta del detector cuando un compuesto es eluido de la
Leidi Johana columna. Dos o más compuestos se pueden eluir como un pico
Murillo Pinillo sin resolver cuando su separación es incompleta.
estudiante 4

Referencias bibliográficas:
-2014 SECyTA, all Rights Reserved Copyright
Respuesta:

El pico es la porción del cromatograma que registra la respuesta

del detector cuando un componente individual eluye de la
columna. El pico puede ser definido por su área, altura y ancho
a la mitad de la altura, o altura y ancho en la línea de base. Si
la separación es incompleta, se puede registrar la elución de dos
o más componentes como un pico no resuelto.
Lina María La línea base del cromatograma corresponde a la señal del
Acevedo detector en ausencia de compuestos eluidos, la aparición de un
estudiante 5 pico representa la alusión de un componente de la muestra, la
separación se completa cuando el cromatograma presenta
tantos picos como compuestos formaban parte de la mezcla
objeto de análisis.

Referencias bibliográficas:
- http://www.anmat.gov.ar/webanmat/mercosur/ACTA01-
14/AGREGADO_XVI/2-
14/uni_XIV/Anexo_2_Cromatograf%C3%ADa_V7.pdf

Tabla 14. Ejercicio 2.2 – Compuestos que se analizan en HPLC (individual)

Estudiante ¿Qué tipo de compuestos se pueden analizar en HPLC?
Respuesta:
Nombre
Hidrocarburos aromáticos policíclicos, Formaldehído y
estudiante 1
acetaldehído, Acrilamida, acrilonitrilo y acroleina por HPLC, N-
 Metil carbamatos. Antibióticos, sedantes esteroides,
analgésicos, vitaminas, proteínas, péptidos, azúcares, lípidos,
nucleótidos, etc.; edulcorantes, antioxidantes, aflatoxinas,
aditivos, colorantes, etc; compuestos aromáticos condensados,
tensoactivos, propulsores, colorantes, etc.

Referencias bibliográficas:
- Métodos de determinación de compuestos orgánicos.
Recuperado de
https://www.juntadeandalucia.es/medioambiente/web/Bl
oques_Tematicos/Estado_Y_Calidad_De_Los_Recursos_N
aturales/Suelo/Contaminacion_pdf/Metodos.pdf
- UNAM. Identificación y cuantificación de sustancias por
HPLC. Recuperado de
https://quimica.unam.mx/investigacion/servicios-para-
la-investigacion/usaii/identificacion-y-cuantificacion-de-
sustancias-por-hplc/

Respuesta: Las áreas de aplicación de esta técnica son diversas

e incluyen: farmacia: antibióticos, sedantes esteroides,
analgésicos, vitaminas, etc.; bioquímica: aminoácidos,
proteínas, péptidos, azúcares, lípidos, nucleótidos,
etc.; alimentos: edulcorantes, antioxidantes, aflatoxinas,
aditivos, colorantes, etc.; productos de la industria química:
compuestos aromáticos condensados, tensoactivos,
Juan José Vera propulsores, colorantes, etc.; contaminantes: fenoles,
estudiante 2 pesticidas, herbicidas, etc.; química forense: drogas, venenos,
narcóticos, etc. y medicina clínica: metabolitos de alimentos o
fármacos (incluyendo drogas), etc.

Referencias bibliográficas:
- https://quimica.unam.mx/investigacion/servicios-para-la-
investigacion/usaii/identificacion-y-cuantificacion-de-
sustancias-por-hplc/
Respuesta: Es un tipo de cromatografía en columna en el que
por acción de una bomba, se hace pasar una mezcla de
compuestos o analitos en un sistema disolvente comúnmente
Luisa
conocido como fase móvil. La fase móvil pasa a través de una
Fernanda
columna cromatográfica, que contiene la fase estacionaria a un
Ospina
flujo especificado. La separación de los compuestos ocurre en
Castaño
base a la interacción de éstos con la fase móvil y la fase
estudiante 3
estacionaria.
FUNDAMENTO La cromatografía líquida (HPLC), es una técnica
utilizada para separar los componentes de una mezcla. Consiste
 en una fase estacionaria no polar (columna) y una fase móvil.
La fase estacionaria es sílica que se ha tratado con RMe2SiCl .
La fase móvil actúa de portador de la muestra. La muestra en
solución es inyectada en la fase móvil. Los componentes de la
solución emigran de acuerdo a las interacciones no-covalentes
de los compuestos con la columna. Estas interacciones químicas,
determinan la separación de los contenidos en la muestra. La
utilización de los diferentes detectores dependerá de la
naturaleza de los compuestos a determinar.
APLICACIONES Esta técnica esta indicada para la separación
de compuestos orgánicos semivólatiles. Hidrocarburos
Poliaromáticos (PAHs), Aminoácidos: OTA, Ácido Fólico,
Herbicidas, Vitaminas, Acido tenuazonico, Formaldehído…etc.
Rango de trabajo para muestras líquidas: µg L-1 - mg L-1 Rango
de trabajo para muestras sólidas: µg Kg-1 - µg g-1

Referencias bibliográficas:
- https://phenomenex.blog/2017/12/18/que-es-la-hplc/
https://www.ucm.es/data/cont/docs/650-2013-12-02-
gases%20l%C3%ADquidos.pdf
Respuesta:
se utilizó inicialmente para separar pigmentos vegetales,
clorofilas y xantofilas, mediante el empleo de un tubo de vidrio
(en vertical) relleno de carbonato cálcico en polvo (fase
estacionaria) y usando éter como eluyente (fase móvil). La
solución recorrió el tubo, y los componentes individuales de la
mezcla migraron hacia abajo con diferentes velocidades; la
columna quedó marcada con bandas horizontales de distintos
colores correspondientes a pigmentos diferentes. El resultado
fue llamado cromatograma, justificando el nombre que se dio a
la técnica: chroma, del griego, que significa «color», y graphein,
Leidi Johana
que significa «escribir». Casi veinte años pasaron sin que esta
Murillo Pinillo
técnica, que prometía simplificar la separación de mezclas
Estudiante 4
complejas, fuera utilizada. En 1931, Kuhn y Lederer utilizaron la
cromatografía líquida para separar muchos productos naturales.
En 1952, Martin y Synge introdujeron la cromatografía de
reparto, empezando a utilizar el concepto de la distribución y
coeficiente de reparto en la separación de mezclas de
aminoácidos, lo que les valió el premio Nobel de Química en
1952. En sus comienzos, la cromatografía líquida utilizaba
columnas de vidrio de 50-500 cm de longitud y 1-5 cm de
diámetro, con rellenos de 150-200 µm para asegurar un caudal
adecuado (del orden de microlitros por minuto). Stahl, en 1956,
interesado en la separación de los componentes de las células,
 diseñó un aparato que aplicaba capas de adsorbente en placas,
llamándolo cromatografía de capa delgada o fina. En la década
de los sesenta, se desarrolló la tecnología que permite utilizar
rellenos con diámetro de partícula de 3-10 µm, que generaban
altas presiones de trabajo. El avance posterior en fabricación de
columnas, rellenos y detectores en continuo permitió el
nacimiento de la cromatografía líquida de alta presión (HPLC:
high-pressure liquid chromatography), luego denominada de
alta resolución (HPLC: high-performance liquid
chromatography), nombre que se propuso para distinguir esta
nueva tecnología de los clásicos métodos de cromatografía
líquida a presión atmosférica, que se siguen utilizando con fines
preparativos. Desde entonces la cromatografía líquida de alta
resolución viene desarrollándose a pasos agigantados, debido
principalmente a su versatilidad, alta sensibilidad, fácil
adaptabilidad, precisión, la posibilidad de utilizar especies no
volátiles o inestables térmicamente, y su gran aplicabilidad a
sustancias de interés para la industria, la investigación y en
general para la sociedad actual. Ejemplos significativos de
aplicaciones de la cromatografía HPLC los constituyen el análisis
de aminoácidos, proteínas, fármacos, biocombustibles, drogas,
hidratos de carbono, grasas, pesticidas, contaminantes
alimenticios, antibióticos, vitaminas o efluentes. En el contexto
del libro Técnicas de análisis y caracterización de materiales la
cromatografía HPLC es una técnica instrumental que puede
utilizarse para, entre otras cosas, analizar determinados
componentes presentes en un material, o medir la actividad
catalítica de un material analizando el consumo de sustratos o
la aparición de los productos de reacción.
Referencias bibliográficas:
- 1. Pavia, D. L. et ál. Introduction to organic laboratory
techniques, Saunders College Publishing, 1999.
- 2. Subra Manian, G. Preparative and process-scale liquid
chromatograph, Ellis Horwood Series in Chemical Engineering,
1991.
- 3. FonG, G. W.; LaM, S. K. HPLC in the pharmaceutical
industry, Marcel Dekker Inc., 1991.
Respuesta:

Lina María La cromatografía líquida de alta resolución (HPLC, por sus

Acevedo siglas en inglés) se utiliza frecuentemente en bioquímica y
estudiante 5 química analítica para separar los componentes de una mezcla
basándose en diferentes tipos de interacciones químicas entre
las sustancias a analizar (contenidas en la fase móvil), y la
 columna cromatográfica (fase estacionaria), mediante el
bombeo de la fase móvil a través de la columna.
utilizado comúnmente para el análisis de compuestos que no
absorben la radiación UV tales como los azúcares, antivirales,
antibióticos, lípidos, fosfolípidos, terpenoides y alcoholes) en el
que se puede usar una amplia gama de columnas
cromatográficas de diversos tipos como son: filtración en gel,
interacción hidrofóbica e intercambio iónico.
Las áreas de aplicación de esta técnica son diversas e
incluyen: farmacia: antibióticos, sedantes esteroides,
analgésicos, vitaminas, etc.; bioquímica: aminoácidos,
proteínas, péptidos, azúcares, lípidos, nucleótidos,
etc.; alimentos: edulcorantes, antioxidantes, aflatoxinas,
aditivos, colorantes, etc.; productos de la industria química:
compuestos aromáticos condensados, tensoactivos,
propulsores, colorantes, etc.; contaminantes: fenoles,
pesticidas, herbicidas, etc.; química forense: drogas, venenos,
narcóticos, etc. y medicina clínica: metabolitos de alimentos o
fármacos (incluyendo drogas), etc.

Referencias bibliográficas:

- Dr. Víctor J.Z. Identificación y cuantificación de sustancias

por HPLC. Recuperado de
https://quimica.unam.mx/investigacion/servicios-para-la-
investigacion/usaii/identificacion-y-cuantificacion-de-
sustancias-por-hplc/

Tabla 15. Ejercicio 2.2 – Elución isocrática y gradiente (colaborativa)

Tipo de Descripción Ejemplo
elución
la composición de la fase
móvil permanece constante Se lleva a cabo con un único
durante la separación. disolvente (o una mezcla de
Cuando, durante toda la disolventes fija).
separación, se utiliza siempre Los compuestos retenidos se
Elución
el mismo solvente, se pueden eluir de la columna por
isocrática
denomina isocrática, sin gradiente de elución o por elución
embargo, es normal realizar isocrática con un cambio de la
un gradiente de composición concentración salina o del pH.
del solvente a lo largo de la
cromatografía para mejorar la
 eficiencia y acortar la
duración del proceso. Estos
gradientes de solvente
también son realizados en
forma automática por las
bombas.

la composición se va
modificando durante la
separación. Para trabajar en En este caso, se van añadiendo
esta modalidad el cantidades crecientes del
cromatógrafo debe disponer disolvente B al disolvente A,
de un sistema de produciendo un gradiente
programación de gradiente, continúo.
que permita la mezcla
reproducible de disolventes
en distintas proporciones
durante la separación
Elución
cromatográfica.
gradiente
Un requisito técnico
importante es que los
disolventes empleados deben
carecer de gases disueltos, ya
que estos pueden provocar
serios problemas por
formación de burbujas. Es
frecuente por ello la
desgasificación de los
disolventes.

Referencias bibliográficas:
- Ujaen. Recuperado de
http://www4.ujaen.es/~mjayora/docencia_archivos/Quimica%20analitica
%20ambiental/Tema6.pdf
- Kaspersky. (2006). Selección y uso de solventes en cromatografía HPLC.
Recuperado el 30 de Agosto de 2006 de
https://www.quiminet.com/articulos/seleccion-y-uso-de-solventes-en-
cromatografia-hplc-14775.htm

Tabla 16. Ejercicio 2.2 – Modo de separación (colaborativo)

¿Qué es fase Ejemplo ¿Qué es fase Ejemplo
normal? reversa?
Respuesta: Muestra: Respuesta: Muestra:
Término que se Apolar Fase Consiste en una Polar Fase
asigna a estacionaria: fase estacionaria estacionaria:
las fases estacio Polar (ciano, apolar y una fase C18, C8,Fnilo
narias de las amino, diol) móvil de polaridad Fase móvil:
técnicas Fase móvil: moderada. H2O,ACN,MeOH,T
cromatográficas n-hexano, etileter, HF
(v. CHCl3
cromatografía) q
ue poseen
polaridad (v.),
esto
es, que retendrá
n
preferentemente
a los eluatos de
naturaleza polar.
Referencias bibliográficas:
- Mncm. Cromatografia liquida de alta eficacia. Recuperado de
http://www.mncn.csic.es/docs/repositorio/es_ES/investigacion/cromatogr
afia/cromatografia_liquida_de_alta_eficacia.pdf

Tabla 17. Ejercicio 2.2 – Detectores (individual)

Tipo de muestra
Detectores Características
para analizar
Técnica de análisis Respuesta:
cualitativo, de amplia estructuras orgánicas
utilización para la
determinación de
estructuras orgánicas,
por si sola o en
combinación con otras
Nombre Espectrometría técnicas de
estudiante 1 de masas espectrofotometría.
Está basada en la
obtención de iones a
partir de moléculas
orgánicas en fase
gaseosa; una vez
obtenidos estos iones,
se separan de acuerdo
 con su masa y su
carga, y finalmente se
detectan por medio de
un dispositivo
adecuado.
Un espectro de masas
será, en consecuencia,
una información
bidimensional que
representa un
parámetro relacionado
con la abundancia de
los diferentes tipos de
iones en función de la
relación masa/carga de
cada uno de ellos.
Referencias bibliográficas:
- Espectrometría de masas. Recuperado de
http://www.mncn.csic.es/docs/repositorio/es_ES/investigacion/cromatografia/e
spectrometria_de_masas.pdf
Respuesta: Cuando se Respuesta:
hace pasar una La mayoría de
radiación de compuestos orgánicos
electromagnética a como: Amina,
través de compuestos Insaturación alifática,
que presentan Insaturación alicíclica,
determinados grupos Benceno, Bifenilo,
funcionales, éstos Quinoleina, Antraceno.
experimentan una
excitación electrónica a
causa de la absorción
Juan José
Absorción de energía, a una
Vera
visible- UV longitud de onda que
estudiante 2
será específica para
cada grupo funcional.
Esta energía, provoca
el paso de un electrón
desde el estado
fundamental hasta un
nivel de energía
superior. La absorción
de energía, se traduce
en una disminución de
la intensidad del haz
 luminosos que se ha
hecho pasar a través
de la muestra,
pudiéndose medir esta
disminución de
intensidad haciendo
incidir el haz sobre una
fotocélula.

Referencias bibliográficas:
http://www.mncn.csic.es/docs/repositorio/es_ES/investigacion/cromatografia/c
romatografia_liquida_de_alta_eficacia.pdf
Respuesta: Respuesta:
La espectroscopia de Es usada en los
fluorescencia, también campos de
llamada fluorimetría es investigación como el
un tipo bioquímico, médico y
de espectroscopia químico, entre otros,
basada en la para el análisis
emisión fluorescente de compuestos
de una muestra. Esto orgánicos. Su uso
involucra el uso de un también ha sido
haz de luz, reportado en la
comúnmente de luz diferenciación de
ultravioleta, que excita tumores malignos y
a los electrones en benignos en la piel. Las
Luisa
ciertas moléculas o técnicas de
Fernanda
átomos y causa la espectroscopia
Ospina Fluorescencia
emisión de, típica pero atómica de
Castaño
no necesariamente, luz fluorescencia son
estudiante 3
visible. El practicadas en otros
equipamiento que mide tipos de análisis, y
la fluorescencia es medición de un
llamado fluorómetro compuesto presente
o fluorímetro. Las en el aire, en el agua o
moléculas tienen varios en otro medio, como
estados referidos a CVAFS que es usado
los niveles de energía. para la detección de
La espectroscopia de metales pesados,
fluorescencia se como el mercurio.
preocupa También puede ser
fundamentalmente de usado para re
estados electrónicos y direccionar fotones.
vibratorios.
 Generalmente las
especies estudiadas
poseen un estado
fundamental
electrónico o estado
estacionario (un bajo
estado electrónico) de
interés, y un estado
electrónico excitado de
una energía superior.

Referencias bibliográficas:
-

Respuesta: Respuesta:
El fenómeno de la El tipo de muestra a
refracción está basado analizar son las
en el cambio de siguientes:
velocidad que La propiedad refractiva
experimenta la de un material es la
radiación propiedad más
electromagnética al importante de
pasar de un medio a cualquier sistema
otro, como óptico que
consecuencia de su usa refracción. Es un
interacción con los índice inverso que
átomos y moléculas del indica el grosor de
Leidi Johana otro medio. Dicho los lentes según un
Índice de
Murillo Pinillo cambio de velocidad se poder dado, y el poder
refracción
estudiante 4 manifiesta en una dispersivo de
variación en la los prismas. También
dirección de es usado en la química
propagación. La para determinar la
medida relativa de la pureza de los reactivos
variación entre dos químicos y para
medios tomando uno la renderización de
fijo como referencia se materiales
le conoce como índice refractantes en
de refracción n y en los gráficos 3D por
general está expresado computadora.
con respecto al aire.
Referencias bibliográficas:
- http://www.geocities.ws/todolostrabajossallo/fico9.pdf

http://educativa.catedu.es/44700165/aula/archivos/repositorio/3000/3236/ht
ml/2
Respuesta: Respuesta:

La espectroscopía FTIR FTIR cubre una amplia

ofrece una amplia gama de aplicaciones
gama de oportunidades químicas,
analíticas en especialmente para
laboratorios polímeros y
académicos, analíticos, compuestos orgánicos
QA / QC y
forenses. Profundamen
te arraigado en todo,
desde la simple
identificación de
compuestos hasta el
proceso y el monitoreo
regulatorio.

FTIR significa
Lina María
transformada de
Acevedo FTIR
Fourier infrarroja, el
estudiante 5
método preferido de
espectroscopía
infrarroja. Cuando la
radiación IR pasa a
través de una muestra,
la muestra absorbe
parte de la radiación y
otra parte la transmite
(se transmite). La
señal resultante en el
detector es un espectro
que representa una
'huella digital'
molecular de la
muestra. La utilidad de
la espectroscopía
infrarroja surge porque
diferentes estructuras
 químicas (moléculas)
producen diferentes
huellas espectrales.

Referencias bibliográficas:
- Michael. B. Conceptos básicos de FTIR. Recuperado de
https://www.thermofisher.com/co/en/home/industrial/spectroscopy-
elemental-isotope-analysis/spectroscopy-elemental-isotope-analysis-
learning-center/molecular-spectroscopy-information/ftir-information/ftir-
basics.html