UNIVERSIDAD NACIONAL DEL

SANTA
FACULTAD DE CIENCIAS
E.A.P. “BIOLOGÍA EN ACUICULTURA”

CURSO: Nutrición y alimentación en acuicultura

TEMA: DETERMINACIÓN DE PROTEÍNA CRUDA
MÉTODO KJELDAHL
GRUPO DE PRÁCTICA: B
ESTUDIANTE: Mary Martinez Luera
CICLO: VII
CÓDIGO: 0201622026

2019
 DETERMINACIÓN DE PROTEÍNA CRUDA MÉTODO KJELDAHL
I. INTRODUCCIÓN
Los nutrientes que son requeridos por los peces y otros organismos acuáticos para su
reproducción, crecimiento, renovación de tejidos, síntesis de hormonas, enzimas y otras
funciones fisiológicas, son similares a los de los animales terrestres; dado que ellos
necesitan proteínas, minerales, vitaminas, factores de crecimiento y fuentes energéticas.
Dichos nutrientes se suministran a través del alimento natural o bien, el artificial
formulado (Lopez Macías, 1999).

La harina de pescado, natural y sostenible, proporciona una fuente concentrada de

proteína de alta calidad y una grasa rica en ácidos grasos omega-3, DHA y EPA. La
proteína en la harina de pescado tiene una alta proporción de aminoácidos esenciales en
una forma altamente digerible, particularmente metionina, cisteína, lisina, treonina y
triptófano. Presentes en la forma natural de péptidos, éstos pueden ser usados con alta
eficiencia para mejorar el equilibrio en conjunto de los aminoácidos esenciales dietéticos.

En 1883 el investigador danés Johann Kjeldahl desarrolló el método más usado en la

actualidad para el análisis de proteínas (método Kjeldahl) mediante la determinación del
nitrógeno orgánico. En esta técnica se digieren las proteínas y otros componentes
orgánicos de los alimentos en una mezcla con ácido sulfúrico en presencia de
catalizadores. El nitrógeno orgánico total se convierte mediante esta digestión en sulfato
de amonio. La mezcla digerida se neutraliza con una base y se destila posteriormente. El
destilado se recoge en una solución de ácido bórico. Los aniones del borato así formado
se titulan con HCl (o H2SO4) estandarizado para determinar el nitrógeno contenido en la
muestra. El resultado del análisis es una buena aproximación del contenido de proteína
cruda del alimento ya que el nitrógeno también proviene de componentes no proteicos
(Santiago F., 2011).

II. OBJETIVOS
 Obtener el porcentaje de proteínas cruda con el método Kjeldahl en alimento
para camarón de río Cryphiops caementarius.
 III. MATERIAL Y MÉTODOS
La práctica se realizó en el Laboratorio de la Escuela de Agroindustria con el equipo
Kjeldahl.
La docente proporcionó con 1 gr. del alimento para camarón de río Cryphiops
caementarius, esta cantidad fue colocada en el matraz Kjeldahl, acto siguiente se agregó:
3.5 gr. de sulfato de potasio, 3.5 gr. de óxido de mercurio y 20 ml. de ácido sulfúrico
concentrado.
Se ubicó al matraz en el digestor en un ángulo inclinado y caliente a ebullición hasta que
la solución se vea de color verde turquesa clara. Se dejó enfriar y se adicionó 50 ml de
agua destilada poco a poco.
Se agregó 60 ml de la solución de hidróxido de sodio al 40% manteniendo inclinado el
matraz.
Se ubicó dicha muestra al equipo destilador, se colectó 150 ml del destilado conteniendo
el amonio en 25 ml de ácido bórico. Este se puso en tono rojizo, al pasar unos minutos a
un tono verde turqueza.
Después de la destilación, se removió el matraz receptor para ser llevado a la titulación
con HCl de 0.2 N, con ayuda de una bureta electrónica de resolución 0.01 ml hasta
colorarse a rojizo. Este dato del gasto es anotado para realizar la siguiente fórmula, hallar
el nitrógeno en la muestra en porcentaje y el porcentaje de la proteína cruda.

Nitrógeno en la muestra (%) = 100[((A × B) /C) × 0.014]

C= Ácido clorhídrico usado en la titulación (ml)

A = Normalidad del ácido estándar
B = Peso de la muestra (gr)

Proteína cruda (%) = Nitrógeno en la muestra *

6.25

Nitrógeno en la muestra = El resultado anterior hallado con la fórmula.

Factor de conversión = 6.25
 IV. RESULTADOS
La muestra del alimento para camarón de río Cryphiops caementarius, se obtuvo 0.008
% de nitrógeno, cuyo dato se utilizó para hallar el porcentaje de la proteína cruda que
sería 0.05 % que equivalente en gr. sería 0.0005 gr. de 1 gr. de dicha muestra.

Nitrógeno en la muestra (%) = 100[((0.2 × 1) /35.20) × 0.014]

Nitrógeno en la muestra (%) = 0.008

Proteína cruda (%) = Nitrógeno en la muestra * 6.25

Proteína cruda (%) = 0.008 * 6.25 = 0.05

En gramos:
Proteína cruda 0.05% en 1gr. de muestra = 0.0005 gr.

100%
Proteína

Otros

Gráfica 1. Demostración de proteína cruda 0.05 en porcentaje al 100% de 1gr. de

alimento para camarón de río Cryphiops caementarius
 V. DISCUSIÓN
Desde hace más de 100 años se está utilizando el método Kjeldahl para la determinación
del nitrógeno en una amplia gama de muestras. La determinación del nitrógeno Kjeldahl
se realiza en alimentos y bebidas, carne, piensos, cereales y forrajes para el cálculo del
contenido en proteína. También se utiliza el método Kjeldahl para la determinación de
nitrógeno en aguas residuales, suelos y otras muestras (PanReac AppliChem, s.f.).
La determinación del porcentaje de proteína en el alimento para camarón de río Cryphiops
caementarius es 0.05.
FUNIBER (2017) presenta un cuadro de valor nutricional de porcentaje, la cual, en una
muestra de 100 gramos tiene 75.90%. Calculando para un gramo de muestra, el porcentaje
sería 0.759% de proteína.
Blas (2003) nos dice que en 100 gramos hay 66.6 %, aplicando la misma metodología
anterior, en un gramo de muestra tiene 0.66%.
Soria A. (2014) plantea que el 25 % es requerido de proteína como mínimo debe ser
incluido en el alimento para camarón de río Cryphiops caementarius en pellets tomando
en cuenta la frecuencia de alimento de 4 veces al día y la cantidad proporcionada por su
tamaño y etapa de vida.
VI. CONCLUSIÓN
El método Kjeldahl nos permite la determinación de proteínas utilizando al nitrógeno. El
porcentaje de proteína cruda del alimento para camarón de río Cryphiops caementarius
es de 0.05. Esto indica que el porcentaje es menor a lo estimado por otros autores, esto
puede inducir que otros insumos adicionales predominan en el preparado del alimento.
Se debe tomar en consideración en aumentar el porcentaje o evitar inducir otros insumos
que no permitan la predominancia de proteína y así el camarón de río tenga una buena
alimentación en el cultivo.
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
 Lopez Macías, J., (1997). Nutrición Acuícola. Universidad de Nariño.
Colombia,211 p.
 Santiago Francisco (2011) Determinación de proteínas por el método Kjeldahl.
Extraído de http://www.grupo-selecta.com/notasdeaplicaciones/analisis-alimentarios-y-
de-aguas-nutritional-and-water-analysis/determinacion-de-proteinas-por-el-metodo-de-
kjeldahl-kjeldahl-method-for-protein-determination/
 PanReac AppliChem. Determinación de Nitrógeno por el Método Kjeldahl, pp 2.
C/ Garraf 2, Polígono Pla de la Bruguera.
 FUNIBER (2017) Base de Datos Internacional de Composición de Alimentos.
Ecuador. Extraído de https://www.composicionnutricional.com/alimentos/HARINA-
DE-PESCADO-5
 Blas et al. (2003) Fundación Española para el Desarrollo de la Nutrición Animal.
Madrid.
 Soria Rojas Abigail (2014) Alimentación en camarones. Extraído de
https://es.slideshare.net/abisoria/alimentacin-del-camaron-29886013
 VIII. ANEXO
Cuestionario:
1.- ¿Cuál es el principio del método Kjeldahl?
Medir el contenido en nitrógeno de una muestra. El contenido en proteína se puede
calcular seguidamente, presuponiendo una proporción entre la proteína y el nitrógeno
para el alimento especifico que está siendo analizado.

2.- ¿La cantidad de proteína en un alimento nos asegura una buena calidad del
mismo?
Claro, nos indica cuanto de proteína nos proporciona y así formen los tejidos, transporten
vitaminas y fortalezcan el sistema inmune.

3.- ¿Porque se señala que los organismos acuáticos requieren mayor cantidad de
proteínas en su dieta?
edad: ya que los peces requieren mayores porcentajes de proteína en sus dietas durante
las diferentes etapas de su desarrollo.
• fase fisiológica: se requiere menos energía en las dietas de mantenimiento que en
aquellas destinadas al crecimiento.
• calidad de la proteína: una proteína que sea deficiente en alguno de los 10 aminoácidos
esenciales para los peces, producirá una menor ganancia en peso con respecto a una
proteína balanceada. O sea, se requerirá mayor cantidad de una proteína de baja calidad
para un máximo crecimiento, en comparación con una proteína de alta calidad.
• fuentes de energía diferentes a la proteína: si la dieta es deficiente en energía, los
animales destinarán parte de la proteína ingerida a cumplir con sus necesidades
energéticas, reduciendo así, la cantidad de proteína disponible para su crecimiento.
• nivel de alimentación: los peces alimentados con un porcentaje inferior a la saciedad,
aprovecharán mejor las dietas que contengan altos porcentajes de proteína.

4.- ¿Por qué en peces la cantidad de energía requerida para sintetizar proteína es
mucho menor en animales de sangre caliente?
Los peces tienen menores necesidades energéticas porque gastan menos energía para
mantener su posición y moverse en un medio acuático que los animales de sangre caliente
terrestres. Además, como excretan la mayor parte de sus residuos nitrogenados como
amoniaco en lugar de ácido úrico (aves) o urea (mamíferos), pierden de este modo menos
energía en el catabolismo de las proteínas y en la excreción de sus residuos. Así el
requerimiento energético de mantención y el incremento calórico son inferiores para los
peces que en los animales terrestres. Algunos ubican la pérdida de energía por incremento
calórico en peces, como equivalente a 5% de la energía metabolizable cifra que puede
elevarse a 30% en mamíferos.