Presentación JEN - Dr. Maccallini

Jornadas de Endocrinología de Zona Norte
Desafíos en el Laboratorio de Endocrinología
Dr. Gustavo Maccallini
21 de Agosto de 2014
Desafíos en el Laboratorio de
Endocrinología
• Evolución de las mediciones hormonales
• Características de los métodos utilizados en

endocrinología
• Interferencias - Limitaciones
• Variabilidad de resultados
Evolución de las Mediciones
Hormonales
• Desarrollo de métodos competitivos
• Desarrollo de métodos no competitivos que utilizan Acs.

Monoclonales. Mejoramiento en especificidad
• Incorporación de señales no radiactivas de alta actividad

específica. Aumento de sensibilidad
• Introducción de sistemas automáticos de procesamiento

Sistemas de Medición
• Marca Radioactiva: RIA/IRMA
• Marca Enzimática: EIA/ELISA
• Marca Fluorescente: FIA/IFMA
• Marca Quimioluminiscente QLIA/ICMA

Métodos de Medición
Hormonas Proteicas: Métodos no competitivos
Hormonas Esteroideas: Métodos competitivos

Endocrinología
• Características de los métodos

Sensibilidad
Especificidad
Diferencia entre métodos
Métodos de Medición de Hormonas
• Sensibilidad: Mínima concentración medible
• Especificidad: Reconocimiento de la molécula a medir.

Ensayos Inmunométricos Sistemas IMA
Fase Ac. Captura TSH Ac. Señal

sólida
Señal
Métodos de Medición de TSH
• 1º Generación : 1 - 2 uUI/ml.
• 2º Generación : 0.1 - 0.2 uUI/ml.
• 3º Generación: 0.01 - 0.02 uUI/ml.

Relación entre TSH y T4L
TSH 1000
mUI/L
100
10
4
Rango de
1.0 Referencia de
TSH
0.4
0.1
0.01
Indetectable
Hipotiroidismo Rango de Referencia de T4L Hipertiroidismo
T4L
0.7 1.8 ng/dl
Spencer, JCEM 70: 453, 1990

Endocrinología

Sensibilidad
Especificidad
Reacción Cruzada en la Medición de
17 OH P4
• 17 OH Pregnenolona Sulfato 2.00 %
• 17 OH Pregnenolona 0.79 %
• Progesterona 0.39 %
• 11 Desoxicortisol 0.28 %
Reacción Cruzada en 17 OH Progesterona en
Recién Nacidos
Extracción con Eter Etílico
17 OH Progesterona 17 OH Progesterona
Suero (ng/ml) Post Ext (ng/ml)
Mayor de 10 2,6
22 3,1
Mayor de 10 2,2
8,0 3,5
Reacción Cruzada en la Medición de
Cortisol
• Aldosterona 0.01 %
• Cortisona 0.6 %
• 11Desoxicortisol 0.25 %
• 21 Desoxicortisona 0.04 %
• Dexametasona 0.53 %
• Prednisolona 46 %
• Prednisona 3.1 %
• Progesterona 0.15 %
Endocrinología

Sensibilidad
Especificidad
Desafíos Técnicos en la Medición de Estradiol
Mujeres que reciben terapia
con gonadotrofinas
(Rep. Asist)Mu
0,1 1 10 100 1000

Log de la Concentración de Estradiol
(pg/ml)
Rosner W, JCEM 2013, doi:10.1210, 1-12


con gonadotrofinas
(Rep. Asist)Mu
Mujeres PremenopáusicasMu
0,1 1 10 100 1000

(pg/ml)
Rosner W, JCEM 2013, doi:10.1210, 1-12


con gonadotrofinas
(Rep. Asist)Mu
Mujeres Postmenopáusicas/
HombresMu
0,1 1 10 100 1000

(pg/ml) Rosner W, JCEM 2013, doi:10.1210, 1-12

con gonadotrofinas
(Rep. Asist)Mu
HombresMu
Niños Prepuberales/Púberesu
0,1 1 10 100 1000


con gonadotrofinas
(Rep. Asist)Mu
Inmunoensayo Directo 1 Gen Mujeres PremenopáusicasMu

LC/MS-MS
Inmun. Directo 2 Gen
MS-MS con HombresMu
Mayor vol .
Inmun. Indir.
Niños Prepuberales/Púberesu
0,1 1 10 100 1000

Endocrinología

Sensibilidad
Especificidad
Evaluación de 16 métodos para la
medición de TSH
Thienpont L, Clin Chem 56:6; 902-911, 2010

Medición de TSH en Suero

sólida
Señal
Los fabricantes desarrollan ensayos con diferentes Acs Monoclonales
La especificidad de los mismos determinan qué isoformas son

detectadas en suero
Preparación internacional (IRP 80/558) obtenida de hipófisis humanas

Thi
Programas de Armonización
Armonización Organización
TSH IFCC
T4 Libre IFCC
T4 Total IFCC
PTH IFCC
Insulina IFCC/ADA
LH IFCC
Hormona de IFCC
Crecimiento
IGF-1 IFCC
Programas de Estandarización
Estandarización Organización
Estradiol Endocrine Society/CDC
Testosterona Endocrine Society/CDC
Vitamina D CDC
Hemoglobina NGSP/IFCC
Glicosilada
Porqué es importante
Estandarizar/Armonizar métodos
• Seguridad del paciente
• Guías Clínicas
• Confianza del paciente
• Registros electrónicos de resultados

Endocrinología

endocrinología
Interferencia Analítica (IFCC)
Error sistemático de la medición, causado

por un componente de la muestra, que
por sí mismo no produce una señal en el
sistema de medición
Tipo de Característica Causas Posibles Formas de Minimizar
Error s la ocurrencia
Componentes normales en Procedimientos

exceso estandarizados para
muestras hemolizadas,
Esporádicos Alteraciones en calidad de lipémicas
proteínas
Conocimiento de
Sustancias que reaccionan características del
Dependientes en forma cruzada ensayo
de muestras de
Endógenos pacientes Anticuerpos anti analitos, Protocolos para evaluar
anti reactivos, isoformas interferencias posibles
atípicas
Protocolos establecidos
Difíciles de Efecto de altas para analitos más
identificar concentraciones vulnerables
Tipo de Características Causas Posibles Formas de
Error Minimizar la
ocurrencia
Asociados a Incorrecta calibración,
cambios en calibración vencida.
Sesgo
Incorrecta reconstitución de
calibradores.
Variación lote a lote de Procedimientos de
reactivos control de calidad
Exógenos
Control de calidad
Imprecisión interno y externo
aumentada Pipeteo incorrecto, falla de
detección de burbujas,
lavado inadecuado
Minimizando el riesgo de interferencia
Puntos clave
• Sustancias presentes en muestras de pacientes pueden
interferir en inmunoensayos. Falsos resultados elevados o
disminuidos
• Interferencias endógenas pueden poner en riesgo el cuidado

del paciente, resultados falsos
a) No son detectados en general por procedimientos de control
de calidad del laboratorio
b) Son reproducibles dentro del sistema de análisis
c) Puede dar resultados posibles
d) Son relativamente raros
Minimizando el riesgo de
interferencia Puntos clave
• La industria diagnóstica ha introducido estrategias
robustas para reducir los interferentes
• Los laboratorios deben incluir a la robustez en la

selección de plataformas analíticas
¿Cuándo sospechamos Interferencia ?
• Cuando existe discordancia entre resultados

de Laboratorio
• Cuando existe discordancia entre resultados y

datos clínicos de los pacientes
Interferencias en los Inmunoensayos
• Reacción cruzada
• Autoanticuerpos
• Anticuerpos Heterófilos/HAMA
• Factor Reumatoideo
• Autoanticuerpos
Interferencias por Auto Anticuerpos
Anticuerpos Anti Hormonas Tiroideas
• La prevalencia en la población general varía en función del

método utilizado para su detección ( Interferencia ~ 2 %)
• Aumenta la prevalencia en enfermedad tiroidea autoinmune
• La frecuencia de detección es mayor para T4 que T3
• La concentración fluctúa en el tiempo
• La interferencia genera resultados falsamente elevados
Després N, Clin Chem 1998; 44: 440-454

• T4 total : 15,7 ug/dl (5,5-12,5) Quimio DPC
• TSH : 2,47 uUI/ml (0,5-5) “ “
• AFM : 1/400 (hasta1/400) Aglutinación

Datos Clínicos
• Mujer. 52 años. Diabética tipo II
• Antecedentes de tratamiento por hipotiroidismo
• Sin tratamiento en los últimos 10 años
• Clínicamente eutiroidea
• Medicación: metformina
• T3 : 124 ng/dl (70-200) Quimio DPC
• T4 total : 14,8 ug/dl (5,5-12,5) “ “
• T4 libre : > 6 ng/dl (0,8-1,9) Análogo 1 paso
• TRH/TSH : 1,9/ 17,2 / 15,2 uUI/ml

• T4 libre (análogo de 1 paso) : > 6 ng/dl (0,8-1,9)
• T4 Libre (eq. de diálisis) : 1,3 ng /dl (0,8-2,7)
• Inmunoprecipitación con PEG-25% : 45 %

(hasta 5%)
• Diagnóstico: Anticuerpos Anti T4

• T4 Libre Centaur : Mayor de 12 ng/dl (Un paso)
• TSH Centaur: 4,52 µUI/ml
• T4 Libre Architect : 1,13 ng /dl (Dos pasos)
• T4 Libre Centaur – 2º Muestra: 9,0 ng/dl

Principio de Medición de T4 L:
Método Análogo Un Paso
Hormona
Tiroidea
Libre
Separación
y Contéo
+
Proteína Transp.
Anticuerpo
Análogo
Policlonal unido a
marcado
fase sólida
Principio: T4L 2 Pasos
Lavado
1° Paso 2° Paso
Interferencias. Anticuerpos Anti Rhutenio?
Instrum. TSH T4 Total Cortisol
Lab # 1 0,56 24,4 30,3

Cobas
Lab # 2 0,48 24,9 28,2
Cobas T4 L: 1,8
Lab # 3 0,57 10,2 17,2
Vitros
Interferencias por Auto Anticuerpos
Medición de Tiroglobulina
• La medición de Tg es usada en el seguimiento de
pacientes tratados por Cáncer diferenciado de tiroides
• La presencia de Anticuerpos Anti Tg (~ 25 %)

interfiere en la medición de Tg, limitando su utilidad en
la evaluación de recurrencia
• Resultados falsamente disminuidos en

inmunométricos)
Pacini F, Eur J Nucl Med Mol Imaging 2002; 29: S492-6 Spencer C, JCEM 2004; 3702-4
TgAb Effects on Serum Tg Measurement
Human
TgAb Tg Tg RIA
METHODS
Bound Tg Free Tg
IMA
METHODS
Serum Tg Correlations by RIA vs IMA Methods
TgAb Negative Sera (n= 211) TgAb Positive Sera (n= 222)
1,000 1,000
46% 25%
100 100
10 10
Tg Tg
IMA 2 2 IMA
ng/ml 1 1 ng/ml
0.5
48% 73% 0.5
Undetectable Undetectable
1 2 10 100 1,000 0.5 1 2 10 100 1,000

Tg RIA (ng/ml) Tg RIA (ng/ml)
Spencer et al. Thyroid 9: 435, 1999
Anticuerpos Anti Tiroglobulina en CDT
Spencer C, JCEM 96:3615-27, 2011

Medición de Anticuerpos Anti
Tiroglobulina
Instrumento Sensib. Valor de

Ref.
Architect 0,3 Hasta 4,1
Cobas 10,0 Hasta 115
Immulite 10,0 Hasta 40

Medición de Tiroglobulina por LC-MS/MS
Kushnir M, Clin Chem 2013; 59:6, 1-9
Kushnir M, Clin Chem 2013; 59:6, 1-9
Interferencias Isoformas Atípicas
Hormonas Proteicas-Ig G
Prolactina - - - - PEG
TSH
PTH
Métodos Utilizados para Prolactina
Reconocimiento de Macroprolactina
• Baja Reactividad
• Mediana Reactividad
• Alta Reactividad
• Autoanticuerpos
Anticuerpos Heterófilos/HAMA
• Son Anticuerpos del isotipo Ig G humanos que

reaccionan contra las Inmunoglobulinas de animal
presentes en los reactivos
• Interfieren en ensayos inmunométricos de diferentes

sustancias
• Frecuencia variable : 0.2 - 1.5 %

Anticuerpos Heterófilos
¿Cómo se originan?
• Son anticuerpos humanos de baja afinidad,
producidos previo a la exposición antigénica
• Son de baja afinidad y reaccionan con los reactivos

de los ensayos
• Ocasionan resultados generalmente elevados en

ensayos inmunométricos
Anticuerpos Heterófilos - HAMA
¿Cómo se originan?
• Anticuerpos humanos anti ratón
• A través de inmunización por exposición con animales
• En pacientes que reciben infusión de Anticuerpos

monoclonales con fines diagnósticos o terapéuticos
Ensayos Inmunométricos Sistemas IMA

sólida
Señal
Ac. Heterófilo
Fase Ac. Captura Ac. Señal

sólida
Señal
Interferencia por Anticuerpos Heterófilos
Estrategias para eliminar la interferencia
Fabricantes :
• Agregado de suero no inmune de origen animal en el

reactivo
• Preparación de Anticuerpos quiméricos humano/animal
En el Laboratorio:
• Preincubación del suero con suero no inmune animal
• Re análisis cambiando marca de reactivo

Interferencia por Anticuerpos
Heterófilos en la medición de TSH
Método 1 Método 2 Método 3
0.81 (<0.1) <0.1 0.08
1.2 (< 0.1) <0.1 0.04
1.8 (0.63) 0.78 0.64
2.4 (< 0.1) < 0.1 0.1
9.2 (1.1) 0.98 2.07(0.63)

Nisbet JA, Clin Chem 1986; 32: 201-2
Interferencia por Anticuerpos Heterófilos en
la medición de TSH Acción de Ig G ratón
Ig G agregada TSH
(ug/l) (mUI/L)
0 8.7
0.61 2.7
1.25 1.6
2.50 0.9
5.0 0.4
20.0 < 0.05
Nisbet JA, Clin Chem 1986; 32: 201-2
• Autoanticuerpos
Factor Reumatoideo
• Son Anticuerpos del isotipo Ig M, con especificidad al
fragmento Fc de Ig G humana
• Exhibe unión no específica a los Acs de los reactivos,

actuando sobre Fc de los mismos
• Alta prevalencia en Artritis Reumatoidea (70 %), y en

otras enfs. Autoinmunes
• La interferencia genera usualmente resultados

falsamente elevados
Métodos para evaluar Interferencias
en el Laboratorio
• Repetir el análisis con un inmunoensayo
alternativo que utilice anticuerpos de diferente
especies
• Realizar la medición antes y después del
agregado de reactivo bloqueante
• Isoformas atípicas (Prolactina), uso de PEG
• Realizar diluciones de la muestra y evaluar
linealidad
Endocrinología

endocrinología
• Interferencias – Limitaciones
Efecto Hook
Situaciones clínicas poco frecuentes
Efecto Hook – Altas
concentraciones
Muy altas concentraciones pueden saturar los reactivos
empleados y arrojar resultados Falsamente disminuidos
en métodos inmunométricos
Estrategias metodológicas de dos pasos pueden reducir

la ocurrencia
Reconocer esta posibilidad, es necesario para poder

realizar diluciones seriadas ante resultados falsamente
bajos
Efecto Hook – Altas concentraciones
Resultados
Falsamente
disminuidos
Condiciones Clínicas Poco Frecuentes
• Alteración en el transporte de Hormonas tiroideas:

Alteraciones Congénitas de TBG
Alteraciones adquiridas de TBG
Hipertiroxinemia Disalbuminémica Familiar
Aumento de Afinidad de Transtiretina
• Cambios en la actividad biológica de TSH

Hipotiroidismo central – Actividad biológica
reducida
TBG Elevada TBG Disminuida Albúmina/TTR
Estrógenos Andrógenos
Esteroides
Sexuales • Embarazo Esteroides anabólicos Embarazo
• Anticonceptivos orales
5 Fluorouracilo Glucocorticoides
Drogas Heroína/Metadona L- Asparaginasa
Clofibrate
Acido Nicotínico
Perfenacina
Hepatitis aguda/crónica Enfermedad grave - NTI

Enfermedad NTI
Insuficiencia suprarrenal Síndrome Nefrótico
Desnutr.
SIDA Desnutrición
Porfiria intermitente aguda Acromegalia
Hipotiroidismo Síndrome de Cushing

Hipertirodismo Afinidad:
Albúmina -FDH
Congénito TTR
Exceso Deficiencia
Bartelena, Horm Res 45: 142 -7, 1996
Déficit completo
Paciente T3 Total T4 Total T4 L TSH TBG
ng/dl ug/dl ng/dl UI/ml mg/l
1 62 2.2 1.2 0.7 1.0
2 50 2.1 1.5 1.7 1.0
3 35 1.1 1.0 1.1 1.0
4 2.5 0.95 1.54 < 1.0

Deficiencia Parcial
Paciente T3 Total T4 Total T4 Libre TSH TBG
ng/dl ug/dl ng/dl UI/ml mg/l
1 66 4.0 1.3 0.87 4.7
2 44 3.4 1.2 4.0 2.6
3 94 3.7 1.0 0.51 3.3
4 39 3.6 0.90 0.80 12.0
5 74 2.6 0.96 2.69 3.6
6 83 3.7 1.20 3.11 3.0
7 4.0 0.85 0.51 7.6
8 89 4.7 0.75 3.72 11.4
9 86 4.4 0.95 1.58 9.7
10 67 4.6 1.2 1.2 6.6

Exceso Congénito
T3 Total T4 Total T4L TSH TBG
Paciente ng/dl ug/dl ng/dl UI/ml mg/l
1 14.0 1.1 3.0 76
2 238 13.6 1.0 11.6 68
3 310 19.5 1.2 3.66 89
4 289 13.6 1.3 4.3 68

Complete Thyroxine-Binding Globulin
deficiency, due to a novel p.A64D mutation,
associated with increased affinity in
Transthyretin (p.A109T mutation) in an
hypothyroid patient
( ITC2010-1135)
Sklate R, Maccallini G, Olcese M, Agüero M,

Sánchez M, González Sarmiento R, Targovnik H,
Niepomniszcze H, Rivolta C
• A 52-year-old man was referred to us for the
management of his hypothyroidism post
thyroidectomy, 30 years earlier.
• He had a sister and nieces who were hypothyroid.
• He was treated with 150 μg/day of L-T4 and was

asymptomatic.
Results with Elecsys and Clinical status
L-T4 150 μg/d
Doses
Clinical Euthyroid
status
TSH (μIU/ml) 0.32
FT4 (ng/dl) 3.21

(nr: 0.8-1.7)
T3 (ng/dl) 66
(nr: 80-200)
L-T4 150 μg/d Stopped
Doses
Clinical Euthyroid Hypothyroid

status
TSH (μIU/ml) 0.32 >100
FT4 (ng/dl) 3.21 <0.1

(nr: 0.8-1.7)
T3 (ng/dl) 66 <20
(nr: 80-200)
L-T4 150 μg/d Stopped 125 μg/d
Doses
Clinical Euthyroid Hypothyroid Euthyroid

status
TSH (μIU/ml) 0.32 >100 3.37
FT4 (ng/dl) 3.21 <0.1 3.05

(nr: 0.8-1.7)
T3 (ng/dl) 66 <20
(nr: 80-200)
L-T4 150 μg/d Stopped 125 μg/d 88 μg/d
Doses
Clinical Euthyroid Hypothyroid Euthyroid Hypothyroid

status
TSH (μIU/ml) 0.32 >100 3.37 43
FT4 (ng/dl) 3.21 <0.1 3.05 1.55

(nr: 0.8-1.7)
T3 (ng/dl) 66 <20
(nr: 80-200)
L-T4 150 μg/d Stopped 125 μg/d 88 μg/d
Doses
Clinical Euthyroid Hypothyroid Euthyroid Hypothyroid

Inappropriate TSH secretion:
status
TSH (μIU/ml) 0.32 >100 3.37 43
Resistance to Thyroid Hormone
or
FT4
TSH(ng/dl)
Secreting 3.21 <0.1
Pituitary Adenoma 3.05 1.55
(nr: 0.8-1.7)
(Normal Pituitary MRI)
T3 (ng/dl) 66 <20 Anti T4-
(nr: 80-200) Antibodies
TBG was < 3 mg/l
(17-27 mg/l)
Patient euthyroid under L-T4 125 μg/d
Discordance between TSH and FT4
One step Two step
Elecsys Immulite Architect
TSH 3.37 3.19
(μIU/ml) FT4
FT4 (ng/dl)3.05 4.36 0.8
(ng/dl) (0.8-1.7) (0.8-1.9) (0.7-1.48)
FT3 1.42
(pg/dl) (1.5-4.1)
Total T4 4.51
(μg/dl) (4.9-11.7)
Total T3 61
(ng/dl)
T4-binding protein
radioelectrophoresis
TTR-bound T4 was
significantly increased: 92.6
μg/dl (nr:48.8–70.4)
TBG-bound T4 was absent
Two abnormalities in binding proteins with

opposite effects
TBG gene
Novel mutation c.251C>A (p.A64D)
Hemizygous
Wild-type allele Mutant allele

GCC GAC
Ala (64) Asp (64)
TTR gene
c.385G>A (p.A109T)
Heterozygous
Wild-type allele Mutant allele

GCC ACC
Ala (109) Thr (109)
Conclusions
The combination of two different alterations in binding
proteins, with opposite effects, was the cause of the
discordance between thyroid function test results and clinical
outcome in a male patient without thyroid gland and a
previous history of hyperthyroidism.
Taking into account that a brother had also no detectable TBG
and a sister had low TBG level, these familiar findings lead us to
diagnose an inherited complete TBG deficiency.
This is the first time that simultaneous mutations in these T4-
binding proteins are reported in the literature. Moreover, one
of them is a novel mutation in the TBG gene producing a lack
of this protein.
Hormona
Tiroidea
Libre
Separación
y Contéo
+
Proteína Transp.
Anticuerpo
Análogo
Policlonal unido a
marcado
fase sólida
Hormona
Tiroidea
Libre
Separación
y Contéo
+
Proteína Transp.
Anticuerpo
Análogo
Policlonal unido a
marcado
fase sólida
Principio de Medición de T4L por
Método de 2 Pasos
Lavado
1 Paso 2 Paso
Principio de Medición de T4L por
Método de 2 Pasos
Lavado
1 Paso 2 Paso
Condiciones Clínicas Poco Frecuentes
• Alteración en el transporte de Hormonas tiroideas:
Alteraciones Congénitas de TBG
Alteraciones adquiridas de TBG
Hipertiroxinemia Disalbuminémica Familiar
Aumento de Afinidad de Transtiretina
• Cambios en la actividad biológica de TSH

Hipotiroidismo central – Actividad biológica
reducida
Endocrinología

endocrinología
• Interferencias – Limitaciones
Composición de un resultado de
laboratorio
Variabilidad Pre-analítica
Valor (estimada como irrelevante)
Resultado de la muestra verdadero
Variabilidad analítica
(imprecisión analítica total)
Bias Analítico
Variabilidad Biológica Intrínseca
(una constante)
VARIABILIDAD TOTAL
Variabilidad Analítica + Bias Analítico = ERROR TOTAL

(imprecisión analítica total)
Tipos de Errores en la Medición
Valor
Verdadero
Incremento en
error aleatorio
Desvío sistemático
Desempeño
analítico estable
Tamaño del error 0 Tamaño del error

CV % Mensual
Di
10
12
14
0
2
4
6
8
c-
05
Ab
r-0
6
Ag
o-
06
Di
c-
0
Nivel 3
Nivel 2
Nivel 1
Ab 6
r-0
7
Ag
o-
07
Di
c-
0
Ab 7
r-0
8
Ag
o-
08
Di
c-
0
Ab 8
r-0
9
Ag
o-
09
Di
c-
0
Ab 9
r-1
0
Ag
o-
10
Di
c-
10
Ab
r-1
1
Ag
o-
11
Di
c-
11
Ab
Req. V.B. Deseable
r-1
2
Control de Calidad Interno para TSH-Imprecisión.
Variabilidad Biológica
Las determinaciones tiroideas tienen estrecha variabilidad
intra-individual con respecto a valores de referencia
TSH T4 Libre Tiroglobulina
Sujetos individuales Sujetos individuales Sujetos individuales
Variabilidad individual (un año)

Jensen CCLM 45:1058, 2007
Andersen JCEM 87:1068, 2002 Valores de Referencia poblacionales
Variabilidad Biológica y Valores de
Referencia
Las determinaciones de la función tiroidea tienen una
Variabilidad intra-individual baja en relación a la
Variabilidad inter-individual
Indice de Individualidad Bajo
Valores de Referencia específicos por paciente

• Reporte de Resultados – Intervalos de Referencia adecuados –
Evaluación inicial
• Para monitoreo de resultados. Cambios y Respuesta a

tratamientos – (Indices de Individualidad bajos)
Mínimo cambio significativo
VRC = 1.96 . √2 . √(CVI 2 + CVA 2)
CvI = Variabilidad biológica Intraindividual

CVA = Variabilidad Analítica
Mínima diferencia entre dos resultados sucesivos en un

individuo que puede ser considerado para reflejar un cambio
real
Informe de Laboratorio - Resultados
Valor de Referencia para el Cambio/ Delta Check
Significancia clínica de cambio en 2 resultados

consecutivos de un individuo, implica tomar
consideraciones tanto de variación fisiológica como
analíticas
• CVI: Coeficiente de variación intra- individual

• CVA: Coeficiente de variación analítico
Informe de Laboratorio - Resultados
Valor de Referencia para el Cambio/ Delta Check
Diferencia entre un resultado de laboratorio actual de

un paciente y el resultado previo que excede un límite
predefinido
• Cambio Significativo *
* Cambio si > VRC = 1.96 . √2 . √(CVI 2 + CVA 2)
*Este resultado difiere significativamente del valor previo
Fraser CG, Crit Rev Clin Lab Sci 1989; 27: 409-37
Desafíos en el Laboratorio Endocrinológico
Tratamiento Resultado
Inapropiado Incorrecto Condiciones Clínicas
Poco Frecuentes
• Cambios en el
transporte de HT.
• Hipot. Central
• Resistencia a HT
Paciente - Médico Laboratorio Interferencias
• Autoanticuerpos
• Alteración Proteínas
• Anticuerpos
Heterófilos/HAMA/FR
Tratamiento Resultado Limitaciones
Apropiado Correcto Efecto Hook
Control a Cargo del Lab
Control Preánalìtico,
Analìtico y Post Analìtico
Muchas gracias
por su atención.

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Jornadas de Endocrinología de Zona Norte

Desafíos en el Laboratorio de Endocrinología

Dr. Gustavo Maccallini

• Características de los métodos utilizados en

• Desarrollo de métodos no competitivos que utilizan Acs.

• Incorporación de señales no radiactivas de alta actividad

• Introducción de sistemas automáticos de procesamiento

• Marca Radioactiva: RIA/IRMA

• Marca Enzimática: EIA/ELISA

• Marca Fluorescente: FIA/IFMA

• Marca Quimioluminiscente QLIA/ICMA

Hormonas Esteroideas: Métodos competitivos

• Características de los métodos

• Sensibilidad: Mínima concentración medible

• Especificidad: Reconocimiento de la molécula a medir.

Fase Ac. Captura TSH Ac. Señal

• 2º Generación : 0.1 - 0.2 uUI/ml.

• 3º Generación: 0.01 - 0.02 uUI/ml.

Hipotiroidismo Rango de Referencia de T4L Hipertiroidismo

Spencer, JCEM 70: 453, 1990

• Características de los métodos

• 17 OH Pregnenolona Sulfato 2.00 %

• Características de los métodos

0,1 1 10 100 1000

Rosner W, JCEM 2013, doi:10.1210, 1-12

Mujeres que reciben terapia

0,1 1 10 100 1000

Rosner W, JCEM 2013, doi:10.1210, 1-12

Mujeres que reciben terapia

0,1 1 10 100 1000

Mujeres que reciben terapia

0,1 1 10 100 1000

Mujeres que reciben terapia

Inmunoensayo Directo 1 Gen Mujeres PremenopáusicasMu

0,1 1 10 100 1000

• Características de los métodos

Thienpont L, Clin Chem 56:6; 902-911, 2010

Fase Ac. Captura TSH Ac. Señal

Los fabricantes desarrollan ensayos con diferentes Acs Monoclonales

La especificidad de los mismos determinan qué isoformas son

Preparación internacional (IRP 80/558) obtenida de hipófisis humanas

Estradiol Endocrine Society/CDC

Testosterona Endocrine Society/CDC

• Seguridad del paciente

• Confianza del paciente

• Registros electrónicos de resultados

• Características de los métodos utilizados en

Error sistemático de la medición, causado

Componentes normales en Procedimientos

• Interferencias endógenas pueden poner en riesgo el cuidado

• Los laboratorios deben incluir a la robustez en la

• Cuando existe discordancia entre resultados

• Cuando existe discordancia entre resultados y

• La prevalencia en la población general varía en función del

• Aumenta la prevalencia en enfermedad tiroidea autoinmune

• La frecuencia de detección es mayor para T4 que T3

• La concentración fluctúa en el tiempo

• La interferencia genera resultados falsamente elevados

Després N, Clin Chem 1998; 44: 440-454

• T4 total : 15,7 ug/dl (5,5-12,5) Quimio DPC

• TSH : 2,47 uUI/ml (0,5-5) “ “

• AFM : 1/400 (hasta1/400) Aglutinación

• Antecedentes de tratamiento por hipotiroidismo

• Sin tratamiento en los últimos 10 años