UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA

FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL

RECUENTO TOTAL DE MICROORGANISMOS EN PLACA PETRI. EXPRESIÓN DE

RESULTADOS. CARACTERIZACIÓN DE COLONIAS. SIEMBRA DE
MICROORGANISMOS DE MEDIO SÓLIDO A LÍQUIDO. COMPORTAMIENTO DE
BACTERIAS EN CALDO BHI Y CALDO NUTRITIVO.

CUARTO LABORATORIO DEL CURSO DE MICROBIOLOGÍA AMBIENTAL – BO-112

JESUS DE LA CRUZ, JEREMIAS– 20171087H

TAIPE ROMERO, BRYAN –
DEL AGUILA CASTRO, ALVARO BENJIN

DOCENTE: MSc. Blgo ALVARO MARTÍN MARTÍNEZ VILA

Lima, Perú
.. de mayo de 2018

1
ÍNDICE
RESUMEN…………………………………………………………………………………………………………………3
INTRODUCCÍON……………………………………………………………………………………………………....4
I. OBJETIVOS……………………………………………………………………………………………………………….5
II. MARCO TEÓRICO…………………………………………………………………………………………………….5
III. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL……………………………………………………………………………7
IV. RESULTADOS……………………………………………………………………………………………………………7
V. DISCUSIÓN DE RESULTADOS……………………………………………………………………………………9
VI. CONCLUSIONES………………………………………………………………………………………………………10
VII. RECOMENDACIONES………………………………………………………………………………………………10
VIII. FUENTES DE INFORMACIÓN……………………………………………………………………………………10
IX. ANEXOS………………………………………………………………………………………………………………….11
X. APÉNDICE……………………………………………………………………………………………………………….12

2
 RESUMEN

Al llevar acabo el cuarto laboratorio de Microbiología Ambiental, este laboratorio consiste

en contar y caracterizar las colonias formadas en las placas Petri, luego sembrarlo de un
medio solido a un medio líquido para así poder analizar el comportamientos en caldo
nutritivo y caldo BHI. Realizamos este laboratorio principalmente para conocer la forma de
cada colonia formada, para así poder identificarlos.
Este laboratorio comenzó contando, utilizando el contador de colonias, para luego anotar
el número de colonias presentes en cada placa. Con ayuda del profesor seleccionamos una
placa la cual usamos para observar las colonias presentes y caracterizarlas utilizando un
cuadro en el cual encontrábamos imágenes las cuales nos permitían comparar nuestras
colonias con estas, luego traspasamos nuestra muestra a un medio líquido; caldo nutritivo
y BHI. Por lo tanto en este laboratorio pudimos identificar de manera satisfactoria las
características de cada colonia formada, de los cuales pudimos observar que la mayoría
eran circulares e irregulares en su forma y planas en su elevación.

3
 INTRODUCCIÓN

Si hablamos de colonias en microbiología no nos referimos a un grupo de personas o

animales, sino a un grupo de seres más pequeños llamados microorganismos. Estos
microorganismos forman colonias las cuales pueden ser observadas por el ojo humano
fácilmente. Estas colonias, pese a que pertenezcan a un mismo organismo, son diferentes
en muchos aspectos: forma, elevación, borde, etc. Para identificar estas diferencias se
utilizan ciertos parámetros, los cuales ya están dados.
Usaremos también el método de estriado en un tubo inclinado el cual se realiza llevando el
agar a punto de ebullición y vertiéndolo en un tubo de ensayo. Antes de que el agar se
enfríe y solidifique, el tubo de ensayo se coloca inclinado sobre un lado. Una vez que el
agar se enfría, el tubo puede volver a colocarse en posición vertical y el agar que se
encuentra en su interior se verá inclinado. La superficie inclinada del agar les da a las
bacterias una mayor superficie donde pueden crecer dentro del tubo de ensayo. Más aún,
los medios de agar inclinado se colocan en tubos que pueden ser tapados, lo que minimiza
la pérdida de agua. Esto es importante debido al alto contenido de humedad de los medios
de agar.

4
 I. OBJETIVOS
 OBJETIVO GENERAL
Realizar el conteo y recuento de colonias de la muestra ambiental.
 OBJETIVOS ESPECÍFICOS
Observar las características de los caldos nutritivos y diferenciarlos.
Identificar y caracterizar los diferentes tipos de colonias de acuerdo a su forma,
superficie, borde, olor, color.

II. MARCO TEÓRICO

MEDIOS DE CULTIVO
 CALDO BHI
Medio de uso general adecuado para el cultivo de una amplia variedad de tipos
de organismos, incluidos las bacterias, levaduras y hongos filamentosos, a
partir de muestras clínicas.
Fórmula (g/l) pH 7,4 ± 0,2
 Cloruro sódico 5,0
 Infusión de cerebro y corazón de (sólidos) 8,0
 Digerido péptico de tejido animal 5,0
 Fosfato disódico de hidrógeno 2,5
 Digerido pancreático de caseína 16,0
 Glucosa 2,0
 Agar 13,5
 CALDO NUTRITIVO
Medio de cultivo utilizado para propósitos generales, para el desarrollo de
microorganismos con escasos requerimientos nutricionales.
Está descripto en muchos procedimientos para el análisis de alimentos, aguas
y otros materiales de importancia sanitaria.
Fórmula (g/l) pH 6,9 ± 0,2
 Pluripeptona 5,0
 Extracto de carne 3,0

5
CARACTERIZACIÓN DE COLONIAS

 Redondeado
 Ondulado
Bordes  Lobulado
 Espiralado
 Filamentoso

 Circular
Forma de la colonia  Puntiforme
 Irregular
 Rizoide
 Fusiforme
 Plana
 Acuminada
Elevación de la colonia  Planoconvexa
 Convexa
 Umbilicada
 Pepilada

 Lisa
Superficie  Rugosa
 Plegada

Consistencia  Cremosa
 Membranosa

CÁLCULO DE LAS ufc/gr Ó ml

1. Factor dilución (FD)
Título de la dilución inicial * títulos diluciones sucesivas
2. Factor decimal de dilución (FDD) = 1/FDD
3. Ufc/g ó ml

6
 N° de colonias significativas en la ultima placa considerada * FDD /
volumen inicial sembrado
III. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
MATERIALES
 Muestras bacterianas en placa Petri
 Asa de siembra
 Pipetas
 Mechero de Bunsen
 Tubos de ensayo con tapa
 Gradilla
 Alcohol
 Algodón
 Hisopo
 Incubadora
METODOLOGÍA
 Sembrar las colonias seleccionadas en caldo BHI
 Realizar toma de muestra dental y manos colocando en el caldo BHI
 En caso de muestra dental, embeber el hisopo en agua peptonada y
pasarlo por la cavidad bucal. Poner el algodón en dicho caldo.
 En caso de mano, tomar la muestra pasando todo el hisopo embebido con
agua peptonada por los pliegues, dorso, uñas, palma de mano del rotulador
y colocar el algodón en el caldo BHI.
 Rotular, incubar
 Observar las características, anotar, cubrir con papel kraft y guardarlo en la
refrigeradora.

IV. RESULTADOS
Características de las placas Petri con muestras de suelo

7
 COLONIAS

CARACTERÍSTICAS 1° 2° 3° 4° 5° 6°

Color Blanquecino Blanquecino Blanquecino Blanquecino Amarillento Blanquecino

Elevación Plana Plana Convexa Plana Umbilicada Plana

Forma Circular Circular Circular Fusiforme Rizoide Circular

Bordes Redondeado Rizoide Redondeado Redondeado Ondulado Redondeado

Observación de las muestras en los tubos de ensayo

Respiración Turbidez

Muestra 1 Aerobio Escasa

Muestra 2 Aerobio Mediana

Muestra 3 Aerobio facultativo Mediana

Muestra 4 Anaerobio Escasa

8
 Muestra 5 Anaerobio Escasa

Muestra 6 Aerobio Escasa

Boca Anaerobio Alta

Mano Aerobio Escasa

V. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Analizando la información recolectada de las muestras. De la segunda tabla de
microorganismos de tierra, mano y boca se debió encontrar en los primero tubos una
mayor cantidad de microorganismos pues esto poseerían un grado de concentración
de muestra mayor a las ultimas (método de dilución).
Se encontraron una abundancia de crecimiento en la muestra de boca a diferencia de
la muestra de mano, esto se debe a que la muestra que tomamos de la mano posee
más tipos de microorganismos que los de la boca pues la mano está expuesta a
diversas superficies lo que genera una variedad de microorganismos que crecerán en
el agar
De la tabla segunda tabla presentada en la que se mostraron el comportamiento de
las bacterias en medio solido encontramos una preponderancia del borde ondulado en
nuestras cepas se podemos inferir entonces que existe una gran cantidad de bacterias
de forma redondeada es probable que se traten de cocos pues estos poseen forma
redondeada este razonamiento se debe a que las formas filamentosas y lobuladas
poseen formas alargadas más propias de microorganismos alargados como bacilos.
En la tercera tabla mostramos el comportamiento de las bacterias en medio liquido
usamos el BHI y el caldo nutritivo en se notó principalmente turbidez con esto es
indicador de crecimiento microbiano también notamos que todos los tubos presentaron
sedimento esto se explica por la deposición de células en el fondo del tubo por efectos
gravitacionales vale recalcar que se re suspende al agitar. Notamos también una
película gruesa en nuestros tubos por lo planteado teóricamente esto se da debido a
que se está formando crecimiento uniforme de los microorganismos.

9
 VI. CONCLUSIÓN
 Se puede concluir que algunas muestras se habrían contaminado a pesar de
trabajar con el mechero al lado, ello evidencia que el laboratorio no es espacio
adecuado para este tipo de siembras debido a que hay presencia de hongos y
levaduras.
 También no hubo una labor minuciosa por parte de los integrantes debido a que
hubo una placa en la cual no se sembró un medio de cultivo.
 Otro punto es que había placas en las cuales no había diferenciación de las
características, ello es por un mal sembrado por estriado, o no hubo correcta
esterilización del asa de siembra.
VII. RECOMENDACIÓN
 Antes de empezar con el laboratorio es recomendable trabajar con los materiales
esterilizados para evitar la contaminación con los microorganismos del aire.
 Un reencuentro mejor es con el contador de colonias ya que con su lupa se puede
visualizar mejor las colonias.
 Al momento de rotular especificar los tipos de concentraciones que se tienen y
colocar bien el papel kraft.

VIII. FUENTES DE INFORMACIÓN

1. http://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_5a2844b49b1c6.p
df
2. https://www.bd.com/resource.aspx?IDX=8800
3. https://microdonto.files.wordpress.com/2009/03/morfologia-de-las-colonias-
bacterianas.pdf

10
IX. ANEXOS
FORMA

ELEVACION

BORDE

11
X. APÉNDICE

12
DIAGRAMA DE FLUJO

13
14