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Los microorganismos presentes en el aire del interior de los edificios (casas, escuelas,
hospitales) pueden proceder del hombre, del aire exterior, polvo, madera, pintura, papel,
humidificadores y otros, y han sido estudiados desde hace tiempo. El grado de
contaminación microbiana en estos ambientes está influenciado por factores tales como
la frecuencia de ventilación, el número de personas presentes en la sala y la naturaleza y
grado de las actividades que realizan los individuos dentro de los locales.
El aire contiene en suspensión diferentes tipos de microorganismos, especialmente
bacterias y hongos. La presencia de uno u otro tipo depende del origen, de la dirección e
intensidad de las corrientes de aire y de la supervivencia del microorganismo. Algunos
microorganismos se encuentran en forma de células vegetativas, pero lo más frecuente
son las formas esporuladas, ya que las esporas son metabólicamente menos activas y
sobreviven mejor en la atmósfera porque soportan la desecación. Las producen hongos,
algas, líquenes, algunos protozoos y algunas bacterias.
La calidad microbiológica del ambiente hace alusión a la cantidad de microorganismos
que están presentes en un área determinada (Gutiérrez de Gamboa, 2008). Los
microorganismos generalmente no están flotando en el aire, sino que se encuentran sobre
partículas inertes, por ejemplo, polvo, gotas de agua, etc. que sirven como medio de
transporte y pueden depositarse sobre las superficies (De la Rosa et al., 2002). Es por ello
que mientras más limpia esté un área menor será el número de microorganismos presentes
en la misma.
La calidad del aire interior está ampliamente considerada como un problema significativo
de salud ambiental y económico. Los indicadores de calidad del aire deben determinar
que el aire interior: a) satisfaga los requerimientos respiratorios; b) prevenga la
acumulación de contaminantes; y c) permita el bienestar (Brown, 1997).
La detección de agentes biológicos está relacionada, a su vez, con dos procesos. El
proceso de toma de muestra y el proceso analítico. Ambos procesos son esenciales, y la
combinación de ambos procesos proporciona resultados analíticos fiables. Los resultados
analíticos, ayudarán a la toma de decisiones por parte de los estudiadores, por lo que es
necesario que las muestras se obtengan de forma correcta.
A consecuencia de la necesidad de mejorar la capacidad de detectar y caracterizar agentes
biológicos altamente patógenos en distintas matrices ambientales, resulta fundamental
desarrollar planes de toma de muestra para este tipo de agentes, que permitan
posteriormente una correcta identificación mediante técnicas en laboratorio.
El presente trabajo de investigación tiene por finalidad realizar la evaluación de la
calidad del aire interior sobre la base de composición fúngica, con el fin de conocer la
situación actual, detectar los posibles problemas existentes y proponer alternativas para
mejorar la calidad de aire y de vida de los estudiantes y trabajadores que se encuentran
expuestos diariamente al aire interno en los diferentes ambientes de la UNAH
REVISION BIBLIOGRAFICA
.objetivo:
caracterizar los microoganismos del aire de los ambientes de la UNAH y así establecer
la posibilidad de riesgo para la salud a la exponen los usuarios por la presencia de estos
microorganismos.
MÉTODOS.
Se tomaron muestras de aire por la técnica de sedimentación, se realizaron recuentos, y
caracterización macroscópica y microscópica de las colonias. Después de aislamientos
selectivos se llevó a cabo identificación por tinción de gram y azul de metileno.
Técnica de sedimentación por gravedad: El método de sedimentación en placa
Petri ha sido el más ampliamente utilizado desde que Frankland y Hart lo
emplearan por primera vez en 1887. Las placas con medio de cultivo estéril,
permanecen abiertas durante determinados períodos de tiempo, permitiendo la
sedimentación de los microorganismos. Este método es sencillo y económico.
Tiene la ventaja de que se pueden identificar de los cultivos los
microorganismos viables, pero su interpretación es difícil porque no pueden
relacionarse con el volumen de aire muestreado. La deposición varía con el
tamaño y forma de los microorganismos, la velocidad y la turbulencia del aire.
El método no es cualitativa ni cuantitativamente exacto y nos detecta
principalmente los microorganismos que más persisten en el aire, no
detectándose, sin embargo, los microorganismos más pequeños.
Técnica de sedimentación por gravedad. Esta técnica utiliza una toma de muestra de
bioaerosoles simple, siendo ampliamente utilizada por primera vez en 1887 por
Frankland y Hart. En esta técnica las placas con medio de cultivo estéril, permanecen
abiertas durante determinados periodo de tiempo, permitiendo la sedimentación de
los microorganismos. Este método es sencillo, económico, y es un procedimiento útil
para estudios iniciales y para la estimación aproximada de la carga microbiológica
tanto desde el punto de vista cuantitativo como cualitativo (González Becerra, 2006).
3.5.2.7. Tinción de Gram Se seleccionó la muestra a identificar para así tomar
una pequeña muestra de la cepa, posteriormente se hizo un frotis fino del
material de estudio fijando así la muestra al calor, flameándola en el mechero a
gas. De manera haciendo que el material no se desprenda durante el lavado
(tinción). Se colocó el frotis en un soporte para tinción y recubrió la superficie
con solución de cristal violeta (2 o 3 gotas) se esperó de 1 - 3 minutos de
exposición al colorante (cristal violeta), se lavó exhaustivamente con agua
destilada, luego se cubrió el frotis con reactivo de lugol (2 o 3 gotas), durante 1 -
3 minutos. Nuevamente se lavó con agua destilada después se impregno la
superficie con 2 o 3 gotas de decolorante alcohol-acetona (haciendo
movimientos de vaivén), esto suele tomar 10 – 5 segundos, posteriormente se
lavó con agua corriente y colocó el frotis nuevamente en el soporte para tinción.
Se cubrió la superficie con la tinción de safranina (2 o 3 gotas) durante 1 minuto.
Se lavó con agua corriente, y se colocó el frotis en posición vertical en el soporte
para tinción, para permitir que el exceso de agua drene y el frotis se seque.
Después se agrega una gota de aceite de inmersión y se observa en el
microscopio a 100X (LÓPEZ, 2004).
Siembra en las placas Petri con medios enriquecedores De los matraces con BHI
y muestras de aire incubados a 37 °C por 48 horas se retiraron mediante un asa
de siembra, un inóculo para luego sembrar en las placas Petri. El método de
siembra se realizó por estrías. Seguidamente 28 las placas Petri ya sembradas se
llevaron a incubación por 48 horas a una temperatura de 37 °C (LÓPEZ, 2004)
Agar glucosa 4% según Sabouraud: 500 mL de agua destilada con 32.5 g del
agar. Todos los matraces se mezclan bien para luego ser llevados a baño maría,
después llevarlos al autoclave para el proceso de esterilización a 15 Lb de
presión por 15 minutos, se deja enfriar hasta 45 ºC para luego proceder a
plaquear (LÓPEZ, 2004).
MATERIALES Y EQUIPOS
Matraces Erlenmeyer, placas petri, tubos de ensayo, algodón, pipetas, jeringas de 60 ml,
pinzas, varillas de vidrio, porta objetos, cubre objetos, mechero de bunsen, mechero de
alcohol, gradillas para tubos de ensayo, asa de siembra, anza micológica, espátulas,
papel mantequilla, guantes quirúrgicos, mascarillas. 3.2.5.
Equipos Autoclave, baño maría, balanza, microscopio, termómetro en forma horizontal,
estufa, contador de colonias, cámara fotográfica.
RESULTADOS.
Se obtuvo mayor recuento de bacterias Gram positivas que de Gram negativas. Se
encontraron bacterias de los géneros Micrococcus, Staphylococcus, Bacillus, Shigella;
las bacterias identificadas no suponen riesgo elevado para la salud de los usuarios sanos,
pero que es necesario implementar medidas para disminuir la carga bacteriana y
disminuir posibles afecciones generales en la salud de sus ocupantes.
DISCUSIÓN
NICOLLE, (2006) menciona que dentro de los géneros bacterianos encontrados en el
aire con frecuencia están Staphylococcus, Streptococcus, Bacillus subtilis, Micrococcus
y Actinomyces de acuerdo a los resultados obtenidos en
…………………………………… se pude confirmar que los géneros más abundantes
son…………………………….
RECOMENDACIONES
1. En los ambientes de estudio se debe realizar una limpieza profunda según que
muestren el nivel de contaminación de acuerdo a la concentración de bacterias y hongos
en el aire
2. Es de suma importancia y prioridad ampliar la investigación con respecto a la
identificación de bacterias y hongos en los ambientes de estudio contra los
microorganismos que son prejuiciosos para la salud humana. Puesto que presentan un
peligro para la salud y es necesario y preciso su identificación para su posterior control.
3. Implementar un plan de mejora continua de acuerdo al protocolo de
descontaminación microbiológica, que considere el aire interior, que constituya un plan
de desinfección a nivel de todo el UNAH.
4. Para prevenir problemas de salud relacionados con enfermedades respiratorias,
gastrointestinales y de tipo alérgico, se debe realizar de manera rutinaria un análisis de
la calidad microbiológica del aire, así como una limpieza periódica de cada área para
evitar los padecimientos asociados con los microorganismos presentes en el ambiente
interno.
REFERENCIAS
Los primeros métodos de muestreo de aire ya fueron recogidos por Miquel y Cambert
(1901) y los desarrollados en el siglo XX fueron revisados por du Buy et al. (1945),
posteriormente por Gregory (1961) y Lynch y Poole (1979). Actualmente, existen una
gran cantidad de métodos e instrumentos para detectar los microbios del aire, de los que
citamos los más útiles y usuales. Las técnicas utilizadas son diversas, de las cuales, la
sedimentación, filtración, el impacto sobre distintas superficies sólidas y el borboteo en
medios líquidos, son las más importantes (Buttner et al., 1997).