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Extracción de las saponinas obtenidas a partir de las hojas de
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Baccharis Emarginata para la elaboración de un champú
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biodegradable
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INGENIERO QUÍMICO
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TRUJILLO – PERÚ
2019
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Extracción de las saponinas obtenidas a partir de las hojas de
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Baccharis Emarginata para la elaboración de un champú
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biodegradable
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INGENIERO QUÍMICO
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TRUJILLO – PERÚ
2019
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EL JURADO CALIFICADOR
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DEDICATORIA
A Dios,
por su infinita bondad y amor en mi existir,
porque conforme a su voluntad estoy
alcanzando este anhelo profesional..
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en todo momento,
por su maravilloso ejemplo
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para hacer de mí una persona de bien.
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AGRADECIMIENTOS
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Al Dr. Guillermo Ruiz Reyes,
por su incansable compromiso con
la investigación científica,
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por compartir toda su experiencia profesional
y acompañarme en este paso decisivo
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en mi vida académica.
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Al Dr. Segundo Miranda Leiva,
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ÍNDICE
DEDICATORIA ................................................................................................................ i
AGRADECIMIENTOS .................................................................................................... ii
ÍNDICE ............................................................................................................................ iii
RESUMEN ...................................................................................................................... vi
ABSTRACT ................................................................................................................... vii
I. INTRODUCCIÓN .................................................................................................. 1
1.1 Realidad problemática ............................................................................................. 1
1.2 Antecedentes ........................................................................................................... 3
1.3 Fundamentación teórica .......................................................................................... 9
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1.3.1 Baccharis Emarginata ...................................................................................... 9
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1.3.2 Saponinas ......................................................................................................... 9
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1.3.3 Champú .......................................................................................................... 15
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1.4 Justificación........................................................................................................... 19
1.5 Problema ............................................................................................................... 19
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1.6 Hipótesis................................................................................................................ 19
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V. CONCLUSIONES ................................................................................................ 56
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ÍNDICE DE IMÁGENES
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Figura 12: Desengrasado y purificado de saponinas a presión reducida. ....................... 32
Figura 13: Aplicación de acetona luego de someter a presion reducida......................... 32
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Figura 14: Cambio de coloración tras aplicación de acetona al extracto purificado ...... 33
Figura 15: Extracto purificado mezclado con piridina y anhídrido acético. ................... 33
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Figura 16: Extracto purificado en reposo en cabina de extracción. ................................ 34
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Figura 17: Extracto purificado con piridina y anhídrido acético, en reflujo. ................. 34
Figura 18: Mezcla de reflujo con agua destilada. ........................................................... 35
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Figura 19: Mezcla sometida a filtro al vacío. ................................................................. 35
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Figura 22: Acetato mezclado con benceno para dilución en la columna. ...................... 37
Figura 23: Elución del acetato mezclado con benceno. .................................................. 37
Figura 24: Elución del acetato con cloroformo. ............................................................. 38
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Figura 27: Reflujo del acetato con cloroformo e hidróxido de potasio al 1%. ............... 39
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ÍNDICE DE TABLAS
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RESUMEN
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calcular el contenido de saponinas presentes en la planta, además por rango de altitudes se
evidenció un alto contenido de saponinas, pues se obtuvo altitudes de 19, 22 y 27
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milímetros (mm). Por medio de las reacciones de coloración se estableció que las saponinas
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presentes en estas hojas fueron las de tipo esteroidal, y el análisis por espectrofotometría
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ultravioleta confirmó que ellas contenían una significativa concentración de saponinas.
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Todos estos resultados permiten elevar a la Lloctara como una fuente natural de saponinas,
cuya capacidad tensoactiva resulta idónea para la elaboración de un champú cuya
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biodegradación de sus residuos de fabricación y uso popular sea más sencilla y amable con
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el medioambiente.
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ABSTRACT
The purpose of this investigation was aimed to the extraction and determination of
saponins by method of foam, Liebermann – Burchard test, Salkowsky test and ultraviolet
spectrophotometry (UV) in the leaves of the plant known in the Peruvian Andes as
Lloctara (baccharis emarginata), due to the fact that qualities of capillary cleaning are
similar to those of the shampoo that are exploited by the locals through domestic use.
Through the experimental Statistical design (Minitab 18) at the preliminary stage, it was
determined the suitable solvent (ethanol at 70%) for the maceration, where the foam
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method was used to calculate the saponins content in the plant; in addition by altitudes
range, showed a high content of saponins, obtained altitudes of 19, 22 and 27 millimeters
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(mm). By means of the reactions of coloring, it was established that the saponins present
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in these sheets were the steroidal-type, and the analysis by UV spectrophotometry
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confirmed that they contained a significant concentration of saponins. All these results
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allow to raise to the Lloctara as a natural source of saponins, whose tensoactive capacity
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I. INTRODUCCIÓN
La sociedad global actual está íntimamente relacionada con los productos químicos
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creciente población sin comprometer la salud del planeta a largo plazo (Doria, 2009).
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es todavía mayor si consideramos que ella es, en numerosos casos, necesaria, urgente e
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imprescindible para la vida cotidiana. Por ejemplo, satisfacer necesidades tan básicas
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como la limpieza y el cuidado personal le han significado durante décadas a la población
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determinado que los surfactantes sintéticos, entre los que se cuenta al referido SLS,
pueden causar hinchazón de los tejidos, eliminar los componentes moleculares solubles
en agua del estrato córneo e inactivar las enzimas, disminuir la función de barrera de la
piel que conduce al secado excesivo, haciendo que la piel se vuelve áspera y pueda
agrietarse. Según Mercola (2015), este SLS ha sido relacionado a las nitrosaminas,
poderosos cancerígenos que ocasionan que el cuerpo absorba nitratos, los cuales también
son cancerígenos reconocidos, además sostiene que poner sustancias químicas en la piel
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o en el cuero cabelludo podría ser peor que consumirlas, porque, cuando se consume algo,
el torrente sanguíneo, sin filtros de ningún tipo, y van directo a los órganos y tienden a
Además, Gunsha (2013, pp. xix - xx) da cuenta de que los emulsionantes químicos
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también resalta el cambio hecho en el anexo II de la directiva que regula los cosméticos,
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año 2015, pues diversos estudios técnicos demostraron que algunos ingredientes utilizados
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en la elaboración de cosméticos eran sustancias carcinógenas, mutágenas o tóxicas para la
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reproducción.
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Resulta alentador saber que los grandes grupos del mundo de la cosmética ya
párr. 1). Uno de los productos capitales de la industria cosmética es el champú, sustancia
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buena recepción por parte del público. Sin embargo, pensando siempre en el mutuo
exhaustiva de otras materias primas que puedan usarse en la elaboración de este producto.
doméstico que la gente del campo hace de una planta de presencia muy común conocida
como “Lloctara” (planta que, según sus características físicas, para la botánica resulta ser
la asterácea Baccharis emarginata). Las hojas de dicha planta son extraídas de sus tallos
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y puestos a hervir sin más componentes que agua, la solución obtenida se deja enfriar y,
tras colarla de las hojas iniciales, se usa para el aseo del cabello. Tal como si fuera un
desarrollan un efecto espumoso y limpiador, lo que hace suponer que las saponinas, que
parte de la composición de dicha planta. Determinar que, en efecto, las saponinas están
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investigación.
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1.2 Antecedentes Q
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La revisión en repositorios físicos y digitales a nivel local, nacional e internacional
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método de Hiai ofrece un alto índice de confiabilidad, además de ser rápido y fácil, por
vegetal), y que la pulpa que contiene a las saponinas se desecha casi en su totalidad, la
extracción de saponinas se presenta como una alternativa interesante, no solo por las
diversas propiedades de interés farmacológico que poseen, sino también por los diversos
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domésticos como las ovejas, cabras y conejos, lo cual permitiría a la par un beneficio
integral del Agave lechuguilla Torrey: la generación de productos con mayor valor
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separar los componentes de dichas saponinas mediante hidrólisis resultando un extracto
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de sapogenina y un hidrolizado de azúcares. Empero, no se logró identificar por HPLC el
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tipo de saponina presente en la especie Cucumis dipsaseus. Se descartó la presencia de
azúcares como la glucosa y fructosa, unidos a la genina de la especie en estudio por ser
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diferentes sus tRS con los del hidrolizado de azúcares. Por último, la concentración de
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que en la mayoría de los extractos manejados durante el ensayo de hemólisis, las mayores
diluciones de los extractos manejados y la del control positivo, cuya concentración fue
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en comparación con otros métodos. Con todo esto, el Agave lechuguilla y la Yucca filifera
se pueden considerar como fuentes potenciales de saponinas, puesto que en los extractos
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y es conveniente realizar la extracción de saponinas ensayando varias mezclas de
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solventes para encontrar la más adecuada en cuanto al rendimiento.
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Rojas y Tapia (2011), en su trabajo de grado “Cuantificación por espectrofotometría
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UV/VIS de las saponinas contenidas en el episperma de la especie Chenopodium quinoa
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tallado del Agave lechuguilla Torrey (guishe) y su aplicación potencial”, corroboró que
se confirma que el guishe puede ser usado como fuente potencial de obtención de
saponinas de tipo esteroidal y que el guishe obtenido del tallado en época de sequía es
mejor por su alto contenido en estos metabolitos; por último, la sapogenina mayoritaria
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cosmético a base de las saponinas del agua del lavado de Quinua (Chenopodium quinoa)
en ERPE”, concluye que las saponinas extraídas del agua de lavado de Chenopodium
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de tuna (opuntia ficus), sábila (aloe vera) y las saponinas de cabuya (agave americana)
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en un shampoo en personas con cabello esponjado”, concluye que, de los tres champús
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preparados con los respectivos mucílagos, es el de sábila el que presentó un mayor
porcentaje de reducción del esponjamiento del cabello (59%), valor que resultó incluso
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superior al obtenido por el champú comercial Anua (56%); por su parte, los champús de
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aplicación; por su parte, los champús de tuna y cabuya tendrán su máximo efecto en la
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saponinas de dos variedades de agave (Sisalana Perrine, Americana L.) con el método de
soxhlet utilizando tres solventes (metanol, etanol y butanol) para la elaboración de jabón
las saponinas de las dos variedades de agave, Sisalana Perrine y Americana L., la
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variedad de agave Sisalana Perrine resultó con mayor presencia de saponinas detectadas
mediante la prueba de espuma; asimismo, el jabón líquido que se elaboró con las
saponinas extraídas de las dos variedades de agave tuvieron una buena aceptación de parte
del consumidor, que fue evaluada por estudiantes y docentes de la carrera de Ingeniería
hojas de la cabuya (furcraea andina) para su posible uso como tensoactivo en detergentes
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ecuatoriano que por décadas ha sido considerado solamente como fuente textil, posee
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saponinas en su composición química, las cuales se las puede emplear como agente
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tensoactivo en formulaciones para detergentes que contribuyan a evitar el daño
demostraron que la hoja de la cabuya contiene como valor máximo 1.52% de contenido
de
saponinas obtenidas de los frutos de Sapindus saponaria L.”, concluye que los crudos de
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por el estudio de las saponinas en distintas partes del mundo, interés que ha permitido,
por un lado, conocer una serie de métodos para su tratamiento y extracción, y, por otro
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(Dongo, 2007) y otro en base a mezclas de sábila, perejil, manzanilla, semilla de linaza,
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Pertenece a la familia de las asteráceas. Posee arbusto erecto con ramas geniculadas
de hasta 80 cm.; hojas alternas, coriáceas, cortamente pecioladas, ovada con el borde algo
angulado, ápice obtuso, base atenuada, glabras por ambas caras, de 2,5 - 3 cm. de largo y
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Hábitat: Matorrales. (Santa Cruz, 2011; pp. 27 – 28).
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1.3.2 Saponinas
Para Wade (2004, pp. 1075 – 1077), las saponinas son metabolitos secundarios que
pertenecen al grupo de los glucósidos, donde se incluyen a las sustancias constituidas por
azúcares en forma de acetales. Contienen un núcleo lipofílico, que puede presentar una
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lipofílico se le denomina “aglicón”, por ser el grupo que está enlazado a un átomo de
y cualquier otro heteroátomo, como nitrógeno. La naturaleza química del aglicón definirá
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fuentes naturales y que forman una espuma jabonosa cuando se agitan en una
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solución formando una especie de detergente. Gracias a sus propiedades
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tensoactivas, las saponinas son excelentes agentes espumantes”.
g.
Méndez (2016, p. 8) afirma que el nombre “saponina” proviene del latín “sapon”,
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que equivale a “jabón”, por la similitud con su estructura; que posee un extremo
de
exactamente definida. No obstante, Kobert (citado Tapia et al., 1979; p. 177) indica que
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animales marinos inferiores del filum Echinodermata, como las estrellas (clase
Siller (2012; pp. 18 - 19), citando a Dewick (2002), Hostettmann y Marston (1995)
y Yang et al. (2006) establece una subdivisión química de las saponinas: saponinas
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de cuatro o cinco anillos, o 30 carbonos con varios oxígenos unidos. Los triterpenos
son ensamblados a partir del isopreno (C5) a través de la vía del mevalonato citosólico
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del dammarano y se subdividen en Pentacíclicas y Tetracíclicas. Las saponinas
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triterpénicas pentacíclicas son más frecuentes y pueden ser derivadas del oleano o
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del ursano. Las saponinas triterpénicas tetracíclicas conservan la estructura básica del
del ácido mevalónico. Este tipo de saponinas se subdividen en dos grupos principales;
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miembros y una cadena lateral en la posición 17. Los derivados del furostanol poseen un
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de allí su nombre.
Fuente: Giraudo et al. (2010).
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1.3.3.3 Obtención de las saponinas.
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Francis, Kerem, Makkar y Becker (2002), así como Dinan, Harmatha y Lafont
g.
(2001) describen una metodología idónea para la extracción de las saponinas. Debido a
In
El procedimiento, por lo general, empieza por la extracción del material, ya sea seco
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posteriormente se realiza una extracción líquido-líquido con n-butanol para obtener las
saponinas (junto con otros componentes polares) y remover azúcares, sales y otros
saponinas con cadenas cortas de azúcares podrán ser extraídas hacia la fase butanólica.
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alta resolución. Una vez que la saponina ha sido purificada, se somete a varios análisis
infrarrojo. La saponina pura también puede ser hidrolizada para verificar la naturaleza de
los azúcares.
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1.3.3.4 Técnicas de estudio de las saponinas.
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tanto para la identificación como para las detecciones cualitativas y cuantificativas de las
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saponinas: Q
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Para la identificación de saponinas, los ensayos: Índice de Hemólisis, Índice de
In
formada por una solución de saponinas mediante agitación. El Índice de Pescado consiste
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reactivos reveladores específicos que forman productos coloreados, con estos se obtiene
Últimamente, los métodos de mayor uso son los basados en Cromatografía de Líquidos
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Por su parte, Usiña (2017, p. 13) sostiene que las reacciones de coloración permiten
triterpenos al dar una coloración verdosa si son saponinas esteroidales o coloración rojiza
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reacción de α naftol indica la presencia de azúcares (lactosa, fructosa, galactosa).
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1.3.3.5 Las saponinas como compuestos bioactivos.
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García - Contreras (2010, pp. 15 – 16) da cuenta de diferentes acciones biológicas
g.
de las saponinas, no solo sobre la planta productora, sino también sobre peces y
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mamíferos:
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Para las plantas, son consideradas como compuestos de defensa, aunque también
Son muy tóxicas para los peces; se ha observado que la principal afectación ocurre
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en el epitelio respiratorio, debido a la capacidad que poseen para alterar las propiedades
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fisicoquímicas de las membranas celulares, así que es común que algunos venenos para
colesterol ocasionando poros del tamaño necesario (aprox. 8 nm) para que escape la
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diluciones de 1:50 000 o superiores. Por ingestión estos compuestos son relativamente
inofensivos para los animales de sangre caliente. Asimismo, tiene importancia como
actividades anticancerígenas.
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utilizados en medicina. Como ejemplo se puede citar a la dioscina, cuyo derivado
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conocido como diosgenina es una excelente materia prima para la fabricación de
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hormonas esteroideas que compite eficazmente con el colesterol y el estigmasterol. Casi
todas las hormonas esteroideas conocidas, incluyendo a la cortisona, han sido sintetizadas
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1.3.3 Champú
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Flick (1969), citado en Samaniego (2015, p. 12), considera que el champú capilar
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espumantes y emulsionantes que van a eliminar la suciedad, como también los residuos
Cosmética, editada en el año 1947, define los champús como preparaciones que producen
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Chávez (2013, pp. 6 - 7) relata que el término y el servicio fue introducido en Gran
Bretaña por Sake Dean Mahomed, migrante de la India, que abrió unos baños conocidos
Brighton, año 1759. Estos baños eran similares a los baños turcos, pero los clientes
eran tan apreciados que Mahomed recibió el alto honor de ser nombrado "Cirujano de
champú" para los reyes Jorge IV y Guillermo IV. Sin embargo, la palabra “champú” tuvo
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su origen en Inglaterra, casi al mismo tiempo que los químicos alemanes descubrían los
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verdaderos detergentes que se convertirían en los modernos champús.
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En los albores del champú moderno, los peluqueros ingleses hervían jabón en agua
y añadían hierbas aromáticas para dar brillo y fragancia al cabello. Kasey Hebert fue el
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primer fabricante conocido de aquel champú, y su origen aún se le atribuye a él. Hebert
de
Dongo (2007, p. 10) sostiene que todo champú necesita de ciertas sustancias base
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y aceites esenciales) para que le den ciertas características especiales. Explorando cada
una, tenemos:
- Los tensoactivos: son los encargados de limpiar el cabello. Los más utilizados
por los laboratorios son el lauril sulfato de sodio, lauril eter sulfato de sodio y el lauril
eter sulfosuccinato de sodio. Este último es el más suave, y por eso es utilizado en los
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los tensoactivos, para evitar la resequedad. Uno de los más usados es el dietanolamina de
ácido graso de coco (DEA cocamida), pero existen otros comunes como la lanolina o la
- El espesante: ayuda a que el champú tenga su consistencia espesa y sea más fácil
de aplicar. El clorato de sodio es uno de los más usados por los laboratorios, pero en
proporciones muy bajas, aunque algunos lo han sustituido por espesantes protectores
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- El ácido: es el elemento encargado de equilibrar el champú, pues el cabello tiene
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un pH levemente ácido (entre 5,5 y 6), pero los tensoactivos son alcalinos (por encima de
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7). Este ácido proviene generalmente de plantas o frutas, que permiten nutrir el cabello a
- Esencias e ingredientes activos: son extractos de flores o plantas, que sirven para
de
Lechuga (2005, pp. 52 - 53) explica que para el caso particular de los tensioactivos
son las bacterias presentes en los diversos medios que reciben las aguas residuales. El
sustancias más simples que pueden llegar a ser utilizadas por las bacterias para su
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sus rutas metabólicas. Es por esta capacidad que las bacterias pueden llegar a vivir y
lauril sulfato de sodio (SLS), un surfactante, detergente y emulsionante que está presente
en casi todos los champús, tratamientos para el cuero cabelludo, tintes para el cabello,
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entre otros productos cosméticos y limpiadores industriales. Van Hamme (2004), citado
m
en Acosta (2010, p. 29), refiere que la concentración del contaminante es un factor
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importante para la degradación, de modo que si el contaminante posee propiedades
tóxicas, entre mayor sea dicha concentración, mayor será la incapacidad del organismo
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concentración de sustancias tóxicas (la que garantizan los tensioactivos naturales), tendrá
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una biodegradación de sus residuos en agua más rápida y menos lesiva para el medio
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ambiente.
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1.4 Justificación
a) Académico:
(Baccharis emarginata), una planta que hasta la fecha solo posee una valoración en
b) Económico:
ica
industrial - comercial, pues la demanda de productos cosméticos biodegradables es
m
cada vez más creciente.
uí
c) Relevancia social: Q
De comprobarse la presencia de las saponinas extraídas de las hojas de esta
g.
In
1.5 Problema
Bi
1.6 Hipótesis
19
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1.7 Objetivos
a) Objetivo General
b) Objetivos específicos
ica
emarginata mediante prueba preliminar: método de espuma.
- Determinar el tipo de saponinas obtenidas de las hojas de Baccharis emarginata
m
mediante reacciones de coloración, pruebas de Liebermann – Burchard y
uí
Salkowski.
-
Q
Indicar la concentración de saponinas obtenidas de las hojas de Baccharis
g.
emarginata mediante espectrofotometría Ultravioleta (UV).
- Evaluar la posible elaboración de un champú biodegradable a partir de las
In
características obtenidas.
ca
te
io
bl
Bi
20
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como “Lloctara”.
ica
- Condensador de bolas.
m
- Embudo Büchner 500 mL.
uí
- Probeta graduada 50, 100, 250 mL.
Q
- Frascos de vidrio de 450 y 250 mL con tapa.
g.
- Termómetro 0- 100°C.
In
- Centrífuga
- Plancha de calentamiento.
- Molino manual.
21
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Reactivos
- Benceno
- Butanol- 1
- Acetona
- Piridina
- Anhídrido Acético
- Cloroformo
ica
- Hidróxido de Potasio 0.1 N
m
- Ácido sulfúrico (c).
uí
Q
g.
2.3 Procedimiento experimental
In
La presente investigación se llevó a cabo en una etapa preliminar y dos etapas más,
de
Variables independientes:
io
• Solventes de extracción.
bl
Bi
• Tiempo de extracción.
22
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Tabla 1:
Diseño operacional para la maceración
ica
72 A 1 72 B 1 72 C 1
72 horas 72 A 2 72 B 2 72 C 2
m
72 A 3 72 B 3 72 C 3
uí
Fuente: Elaboración propia.
Q
g.
Donde:
In
A: Agua destilada
de
1,2 Y 3: repeticiones
te
23
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emarginata.
- Porcentaje de Humedad
- Maceración
- Desengrase
+ Butanol
+ Acetona
ica
+ Piridina y anhídrido acético
m
+ Agua
uí
- Obtención del acetato de saponinas Q
- Percolación
g.
In
+ Benceno
de
+ Cloroformo
seleccionado de la etapa 1.
Bi
a) Indicie de Espuma.
c) Prueba de Salkowsi.
24
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III. RESULTADOS
El trabajo en laboratorio arrojó los siguientes resultados, para cada una de las etapas
propuestas:
Etapa Preliminar:
ica
Tabla 2:
m
Concentraciones (%) calculadas a partir de tiempos y solventes
uí
TIEMPO A B (50%)
Q C (70%)
(horas) agua destilada agua : etanol agua : etanol
g.
0.50 10.84 16.00
In
(Datos en anexo 1)
Fuente: Elaboración propia.
25
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Tabla 3:
Análisis de varianza de los promedios de saponinas
ica
Tabla 4:
m
Prueba de comparaciones múltiples de Tukey en saponinas
uí
Orden
Tiempo Tipo de Significancia
de Media Q
(h) solvente
variación
9 72 C 24.19 ****
g.
8 72 B 18.16 ****
In
6 48 C 16.87 ****
7 24 C 16.00 **** ****
de
2 48 A 6.10 ****
1 24 A 0.93 ****
te
Emarginata.
26
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Se extrajeron las hojas secas a 45° C y se molieron a polvo, esto en una solución de
ica
m
uí
Figura 3: Hojas secas de Lloctara (Baccharis emarginata) a 21.5°C.
Fuente: registro propio.
Q
g.
In
de
ca
te
io
bl
Bi
27
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ica
m
uí
Q
Figura 5: Peso de Polvo de hojas de Lloctara (Baccharis emarginata).
Fuente: registro propio.
g.
In
c) Filtrado de la maceración
de
28
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En una estufa con ventilador a 45° C se colocó la muestra por 48 horas en recipiente
ica
m
uí
Q
g.
Figura 7: Extracto de Baccharis emarginata en estufa a 45°C.
Fuente: registro propio.
In
de
e) Desengrase
ca
liberando purga por dos repeticiones. Se dejó en reposo esta mezcla por 90 minutos para
saponinas sin grasas. Solo se utilizó la última fase, las dos restantes fueron eliminadas.
29
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ica
Figura 8: Mezcla de crudo de saponinas con benceno en embudo de decantación.
Fuente: registro propio.
m
uí
Q
g.
In
de
ca
te
io
f) Dilución de saponinas
separación de 500 mL, hasta la dilución de las saponinas. Solo se utilizó la primera fase
de 152 mL.
30
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ica
Figura 10: Desengrasado de saponinas mezclado con butanol - 1.
Fuente: registro propio.
m
uí
Q
g.
In
de
ca
te
io
bl
Bi
ventilador a 45°C.
31
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ica
Figura 12: Desengrasado y purificado de saponinas a presión reducida.
Fuente: registro propio.
m
uí
h) Dilución con acetona
Q
Una vez evaporado el butanol-1 se diluyó con acetona varias repeticiones (5 veces)
g.
de 15 mL cada repetición hasta la formación de un polvo color café. Esta mezcla se secó
In
32
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ica
Figura 14: Cambio de coloración tras aplicación de acetona.
Fuente: registro propio.
m
uí
i) Dilución con piridina y anhídrido acético
Q
g.
El crudo con acetona se disolvió con 30 mL de piridina y 30 mL de anhídrido
In
33
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ica
Figura 16: Extracto purificado en reposo en cabina de extracción.
Fuente: registro propio.
m
uí
j) Dilución con agua
Q
g.
Después de frío el reflujo, se añadió 500 mL de agua destilada.
In
de
ca
te
io
bl
Bi
34
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ica
m
Figura 18: Mezcla de reflujo con agua destilada.
uí
Fuente: registro propio.
Q
g.
k) Filtro al vacío
In
Se filtró la muestra y siempre lavando con agua lo que quedó en el papel filtrante.
de
El líquido filtrado se descartó. El sólido obtenido en el papel filtro se llevó a secado a 40°
ca
C y se obtuvo 5.8493 g.
te
io
bl
Bi
35
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ica
m
Figura 20: Sólido obtenido de la filtración de la muestra (acetato).
Fuente: registro propio.
uí
Q
l) Dilución con benceno
g.
El acetato se disolvió con 50 mL de benceno y se procedió a empacar una columna
In
Figura 21: Columna empacada de silica 60 (0.063-0.2 mm) poco activa lista para dilución del acetato.
Fuente: registro propio.
36
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ica
m
Figura 22: Acetato mezclado con benceno para dilución en la columna.
uí
Fuente: registro propio.
Q
m) Lavado con benceno y cloroformo
g.
50 mL de cloroformo hasta la última caída. Luego de eluir con benceno y mezclas de este
de
con cloroformo, el acetato salió con el cloroformo y nos dejó 120 mL (muestra con
ca
37
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ica
m
uí
Figura 24: Elución del acetato con cloroformo.
38
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mL (m. benceno, a la que llamé M1) y 43 mL (m. cloroformo, a la que llamé M2).
ica
m
uí
Q
g.
In
Figura 26: Reflujo del acetato con benceno e hidróxido de potasio al 1%.
de
Figura 27: Reflujo del acetato con cloroformo e hidróxido de potasio al 1%.
Fuente: registro propio.
39
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p) Ajuste de pH
entonces se le agregó 6.5 mL de HCl para lograr un pH de 6.56. Así también, para M2 se
ica
m
uí
Q
g.
In
Para M2 se realizó los mismos pasos, 3 extracciones con butanol - 1. Separando las
fases de la parte superior del embudo y almacenando para el posterior secado en la estufa.
40
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ica
m
uí
Q
Figura 29: Mezcla 1 con 50 mL de benceno.
Fuente: registro propio.
g.
In
de
ca
te
io
bl
Bi
41
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ica
Figura 31: Extracto M1 con volúmenes de butanol: 100, 50 y 30 mL.
Fuente: registro propio.
m
uí
Q
g.
In
de
ca
te
io
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ica
Figura 34: M2 tras secado en estufa a 55°C.
Fuente: registro propio.
m
uí
Q
g.
In
de
ca
te
io
bl
Bi
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seleccionado de la etapa 1.
citados por Siller (2012, p. 21), luego de agitar vigorosamente durante 30 s y dejar reposar
ica
por 15 m las mezclas de polvo de hojas de baccharis emarginata con distintos solventes,
m
se obtuvieron los resultados que se muestran en la siguiente tabla:
uí
Q
g.
Tabla 5:
In
TIEMPO
A B (50%) C (70%)
(horas)
ca
44
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medidas de altitud de espuma. Entre todas, la muestra más significativa es la obtenida con
el solvente etanol % v/v (70 mL etanol/30 mL agua): 70%, que generó altitudes de espuma
ica
m
uí
Q
g.
In
de
ca
Figura 36: Ejecución del método de espuma: Lloctara, agua y etanol de 70°, 50°
Fuente: registro propio.
te
io
bl
Bi
45
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gotas de ácido sulfúrico. Como resultado se obtuvo la aparición de una coloración azulada
ica
que pasa a anaranjado para luego volverse verde, lo que dio cuenta de que la reacción es
m
positiva.
uí
Q
g.
In
de
ca
te
io
bl
Bi
46
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b) Prueba de Salkowski
positiva.
ica
m
uí
Q
g.
In
de
tabla:
io
bl
Tabla 6:
Bi
Prueba de Muestras
coloración Exp1 Exp2 Exp3
47
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ica
diseñó una curva estándar, para la que se prepararon por duplicado 7 muestras: 0.1 mg,
m
0.2 mg, 0.3 mg, 0.4 mg, 0.5 mg, 0.6 mg y 0.7 mg, respectivamente, de estándar de
uí
Q
saponinas para ser diluidas con agua ultrapura en fiolas de 10 mL aforadas; la longitud de
onda se determinó con un barrido espectral entre 220 nm y 300 nm, quedando como
g.
In
medida más conveniente para esta prueba: 276 nm (Ver ANEXO 2). Así, la curva de
de
C = kl * A
bl
Bi
Absorbancia (AU)
Concentración mg/mL
48
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concentraciones a: 0.05 mg, 0.1 mg, y 0.3 mg, siempre en fiolas de 10 mL y aforar con
ica
m
uí
Q
g.
Figura 40: Muestras de saponinas para el análisis por espectrofotometría Ultravioleta (UV).
In
continuación:
te
io
Tabla 7:
Cuantificación de saponinas por espectrofotometría ultravioleta (UV)
bl
Bi
49
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ica
m
uí
Q
g.
In
de
ca
te
io
bl
Bi
50
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CARACTERIZACION DE SAPONINA
hojas recolectadas : 3 kg
hojas molidas - polvo: 737.9 gr
Maceración: x 72 H 100 gr polvo + 300 mL etanol 70° (65°C) = 173 mL de extracto / filtro vacio ( 147 gr de gabazo)
concentra.a P. Reduci (estufa) : 45°C x 48 H 173 mL = 48 mL crudo saponina concentr.
Desengrase: 48 mL + 90 mL Benceno = 67 mL libre de grasa
dilución de saponinas : 67 mL + 100 mL Butanol-1 = 152 mL (1° fase)
Llevarlo a P. reducida: 45°C x 24 H Crudo Z (luego de evaporar Butanol-1)
Bi
Purificación:
dilución con acetona: Crudo Z + 75 mL de acetona = polvo café
bl
secado a P. Reducida:
io
= glucósido crudo
dilución : glucósido Crudo + 30 mL piridina + 30 mL Anhidrido Acético ------------------- a reflujo x 2 H
te
Dilución con Agua destilada: muestra reflujo + 500 mL agua destilada
filtro al vacio: dilución con agua dest. ----------------------- solido obtenido en papel filtro + liquido filtrado (descartado)
ca
secado a P. Reduc. del solido: 40°C x 72 H = 5.8493 gramos
dilución con Benceno: 5.8493 gr + 50 mL Benceno ------------------ llevar a una columna empacada para percolación (CROMATOGRAFIA)
adición de benceno por pocos: = 70 mL --------------------- se recuperó 120 mL de percolado acetato de
de
adicion de cloroformo por pocos : lavado = 50 mL --------------------- se recuperó 50 mL de percolado y lavado saponina puro
secado de acetato de saponinas puro:
In
benceno 80°C x 48 Horas = 3.209 gramos
cloroformo 60°C x 24 Horas = 1.2863 gramos
g.
Mezcla con etanol 70° / agua (3:1)
3.209 + 51 mL etanol + 7.7 mL KOH al 1% -----a reflujo x 2 H------- = 58 mL = M1
Q
1.2863 + 34.5 mL etanol + 34.5 mL KOH al 1% -----a reflujo x 2 H------- = 43 mL = M2
ajuste de pH :
uí
M1 51 mL + 42 mL agua + 6.5 HCl = 106.5 mL con pH = 6.56
43 mL + 47 mL agua
m con pH = 6.55
M2 = 90 mL
Extracción con Butanol-1 (3 porciones)
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M1 en un embudo de separación (106.5 mL + 100 mL butanol-1 + 70 mL de agua) = la fase inferior + 50 mL Butanol- 1 lavado = Fase inf. + 30 mL Butanol -1 = 90 mL
ica
M2 en un embudo de separación (90 mL + 100 mL butanol-1 + 60 mL de agua) = la fase inferior + 50 mL Butanol- 1 lavado = Fase inf. + 30 mL Butanol -1 = 65 mL
secado a P. Reducida: 40°C x 72 H
M1 = 90 mL = 2.0006 gramos FINALES = 2.8494 gr.
M2 = 65 mL = 0.8488 gramos FINALES de saponina
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De la etapa preliminar:
uno de los factores y del efecto interactivo. Aquí podemos señalar que tanto el factor
saponina (p<0.05) y lo mismo ocurre con el efecto interactivo entre ambos factores
(F1 * F2) que tiene un efecto significativo sobre el porcentaje de saponina (p>0.05).
ica
Como tanto los factores tiempo y tipo de solvente; así como el efecto interactivo entre
m
factores (F1 * F2) resultaron ser significativos, entonces, existe una diferencia entre
uí
el efecto de sus niveles. Por ello se procedió a determinar cuál es el mejor nivel, para
Q
esto aplicamos la prueba Post ANOVA denominada Comparaciones Múltiples de
g.
Tukey, en la cual se obtuvo los siguientes resultados.
In
los factores del tiempo y tipo de solvente con un nivel de significancia del 95 %.
ca
logró una mayor porcentaje de saponina de 24.19 % y el valor más bajo de 0.93 %
io
obtención propuestas por Domínguez (1979), las cuales 3 kilos de hojas de la Lloctara,
52
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Galindo, Rosales, Murgueitio y Larrahondo (1989), citados por Siller (2012, p. 21)
ica
Entonces, como la muestra más significativa (la obtenida con el solvente etanol %
m
v/v: 70%) generó altitudes de espuma de 19 mm, 27 mm y 22 mm, respectivamente,
uí
Q
permite afirmar que la concentración de saponinas presentes en el extracto de hojas de
g.
Lloctara es alto (contenido alto).
In
de
ambas pruebas, se confirma lo propuesto por Foy, Mac Donald, Cuyos y Dueñas (2005,
te
p. 34) cuando se obtiene una coloración azulada que pasa a anaranjado para luego
io
bl
anaranjada (prueba de Salkowski), es decir, que las saponinas presentes en las muestras
53
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corroborar que esta intersección resulta dentro de la curva de calibración propia y, sobre
ica
m
uí
Q
g.
Absorbancia (AU)
In
concentración mg/mL
Bi
Figura 41: Concentración y absorbancia, tras análisis por espectrofotometría Ultravioleta (UV).
Fuente: elaboración propia.
de buena a alta.
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de sus residuos tanto de fabricación como de uso doméstico sea más sencilla y, por lógica,
ica
m
uí
Q
g.
In
de
ca
te
io
bl
Bi
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V. CONCLUSIONES
ica
2. Mediante el método de la espuma se obtuvieron altitudes de espuma de 19 mm, 22
m
uí
(contenido de nivel alto).
Q
g.
3. Según las reacciones de coloración positivas (Liebermann – Burchard y de
In
biodegradable a partir del producto final de la purificación el cual debe cumplir los
56
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VI. RECOMENDACIONES
ica
solventes tóxicos como el benceno.
m
uí
3. Difundir los resultados de la presente investigación para el aprovechamiento en la
Q
elaboración de champú, así como otros productos cosméticos, que representen
g.
menores impactos negativos para la salud del usuario y del medioambiente.
In
de
ca
te
io
bl
Bi
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ica
Canadian Journal of Chemistry. 51(6), 850. doi: 10.1139/v73-129
m
Castellano, V. y Yugsi, L. (2015). Evaluación de la extracción de saponinas de dos
variedades de agave (Sisalana Perrine, Americana L.) con el método de soxhlet
uí
utilizando tres solventes (metanol, etanol y butanol) para la elaboración de jabón
Q
líquido en los laboratorios académicos de la carrera de Ingeniería Agroindustrial
de la Universidad Técnica de Cotopaxi en el período 2014-2015 (Tesis de
g.
Licenciatura). Universidad Técnica de Cotopaxi. Latacunga- Ecuador.
In
Dinan, L., Harmatha, J. & Lafont, R. (2001). Chromatographic procedures for the
te
Doria, M. (2009). Química verde: un nuevo enfoque para el cuidado del medio ambiente.
Educación Química. 20, 412 – 420. Amsterdam: Elsevier Academic Press.
Foy, E., Mac Donald, D., Cuyos, M. y Dueñas, R. (2005). Extracción, identificación y
evaluación de saponinas en Agaricus bisporus. Biotiempo. Vol. 5, 31 - 36. Lima:
Universidad Ricardo Palma – Facultad de Ciencias Biológicas.
58
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Francis, G., Kerem, Z., Makkar, H. & Becker, K. (2002). The biological action of
saponins in animal systems: a review. British Journal of Nutrition. 88, 587-605.
doi: 10.1079/BJN2002725
ica
Gunsha, L. (2013). Elaboración de un emulsionante cosmético a base de las saponinas
del agua del lavado de Quinua (Chenopodium quinoa) en ERPE (Tesis de
m
Licenciatura). Escuela Superior Politécnica de Chimborazo. Riobamba.
uí
Q
Hernández, R., Lugo, E., Díaz, L. y Villanueva, S. (2005). Extracción y cuantificación
indirecta de las saponinas de Agave Lechuguilla Torrey. e – Gnosis. 3, 1 – 9.
Guadalajara: Universidad de Guadalajara. Recuperado el 05 de mayo 2018 de:
g.
http://www.e-gnosis.udg.mx/index.php/e-gnosis/article/view/45
In
de
Lozano, M., Tícona, E., Carrasco, C., Flores, Y. y Almanza, G. (2012). Cuantificación de
te
Machado, J. (2013). Evaluación del efecto antisponge de los mucílagos de opuntia ficus,
Bi
59
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Navarro, J., Vidales, A., Chávez, V., Ramírez, A. y Cardona, S. (2003). Elaboración de
un shampoo a base de plantas naturales. Conciencia tecnológica. 21, 44 – 47.
Aguascalientes: Instituto tecnológico de Aguascalientes.
ica
contenidas en el fruto de la especie Cucumis dipsaseus por cromatografía de
líquidos de alta resolución (HPLC) (Trabajo de investigación tipo II). Universidad
m
Nacional de Trujillo. Trujillo.
uí
Q
Pérez, J. y Quitián, L. (2009). Evaluación de métodos de extracción de saponinas de los
residuos del beneficio del fique (Tesis de Licenciatura). Universidad Industrial de
Santander. Bucaramanga-Colombia.
g.
In
Santa Cruz, L. (2011). Flora de espermatofitas del distrito de Pulán, Santa Cruz-
Cajamarca (Tesis de Maestría). Universidad Nacional Mayor de San Marcos.
Lima- Perú.
60
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Santa Cruz, L. (11, agosto 2012). Familia Asteraceae - Tribu Astereae. [Entrada de blog].
Recuperado el 12 de mayo 2018 de:
http://plantasdepulan.blogspot.com/2012/08/familia-asteraceae-tribu-astereae.html
Siller, D. (2012). Extracción y purificación de saponinas del residuo del tallado del
Agave lechuguilla Torrey (guishe) y su aplicación potencial (Tesis de
Licenciatura). Universidad Autónoma Agraria Antonio Narro. Saltillo- México.
ica
Swisher, D. (1987). Surfactant biodegradation. Nueva York: Marcel - Dekker Inc.
m
uí
Tapia, M. et al. (1979). La quinua y la kañiwua: cultivos andinos. Bogotá: CIID, Oficina
regional para la América Latina. Q
g.
Universitat Politècnica de València (12 de octubre de 2013). Aplicación de la ley de
In
https://www.youtube.com/watch?v=xJZIOOkvTOo
ca
61
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ica
m
ANEXOS
uí
Q
g.
In
de
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ANEXO 01
Datos para el cálculo de la concentración de saponinas del crudo por medio del
método de espuma
B (50%) C (70%)
A
TIEMPO (agua destilada)
(horas)
altura peso altura peso altura peso
(cm) (gramos) (cm) (gramos) (cm) (gramos)
ica
0.2 0.5001 1 0.5 1.4 0.5001
m
24 0.2 0.5001 1.1 0.5002 1.4 0.5002
uí
0.3 0.5002 1 0.5 1.4 0.5
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ANEXO 02
concentración
# Saponina Estándar Abs<276nm> %Error
mg/mL
ica
1 stsp1-1 0.10000 0.15639 -2.25
m
uí
3 stsp2-1 0.20000 0.29012 5.39
Q
4 stsp2-2 0.20000 0.30235 1.12
g.
1
11 stsp6-1 0.60000 0.92940 -1.31
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ica
m
1
uí
Q
Absorbancia (AU)
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ANEXO 03
ica
Absorbancia (AU)
m
uí
Q
g.
In
Concentración mg/mL
de
ca
saponinas
io
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ANEXO 04
#
Nombre Abs<276nm> Concentration
muestras
1 Lloctara1 0.55505 0.36308
2 Lloctara2 0.54669 0.35761
ica
3 Lloctara3 0.5504 0.36004
m
Se utilizó la curva de calibración de estándar de saponinas para encontrar la
uí
concentración de la saponinas de la Lloctara (Baccharis emarginata).
Q
g.
Espectrofotometría Ultravioleta: espectro de la muestra de Lloctara
(Baccharis emarginata)
In
de
ca
te
Absorbancia (AU)
io
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