UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAEN

TECNOLOGIA MÉDICA

BANCO DE
SANGRE

DOCENTE: Luis Alberto Valdivieso Canova

TEMA: Preparación De Células Control De
Coombs
CURSO: Banco De Sangre
CICLO: VIII
ALUMNA: Campos Neira Lesly Madel
Díaz Correa Yeily
Huamán Urrutia Danny
Quispe Rodas Kely JAÉN - PERU
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I. INTRODUCCIÓN:
PREPARACIÓN DE CÉLULAS CONTROL DE COOMBS:
FUNDAMENTO:
Las células control de Coombs y las células control de Coombs (fuerte) son
células rojas humanas sensibilizadas con IgG Grupo O Rhesus D-positivo, que
han sido sensibilizadas in vitro con diferentes cantidades de anticuerpos anti-D
(IgG). Las células control de Coombs (fuerte) han sido preparadas para producir
una fuerte aglutinación en la presencia de reactivos activos de antiglobulina. Las
células control de Coombs han sido preparadas para producir una aglutinación
menos fuerte en la presencia de reactivos activos de antiglobulina. Las células
control de Coombs moderadamente sensibilizadas con IgG muestran una
indicación más sensible y fiable de la neutralización (parcial) de los reactivos de
antiglobulina. Las células control de Coombs son lavadas y resuspendidas en un
medio conservante especial y pueden ser añadidas directamente a los tubos de
ensayo.
Las células para el control de Coombs (CC) son células rojas humanas del grupo
O Rh positivo recubiertas con anticuerpos de la clase IgG anti D. Se añaden
a cualquier resultado de prueba antiglobulina humana negativa, se centrifuga y
luego se comprueba la aglutinación. El resultado debe ser positivo después
de la adición de las células control de Coombs. Estas células «check» permiten
asegurarse de que el procedimiento se ha realizado correctamente. Si las
células control de Coombs no hacen la reacción positiva, la prueba no es
válida. Dentro de las posibles causas de este resultado podrían citarse el no
haber añadido el suero AHG a los tubos, el lavado inadecuado de las células
o el deterioro del reactivo de AHG, entre otras.3 Es por ello que la
utilización de estas células en las pruebas de laboratorio que empleen el suero
de Coombs como reactivo principal son requeridas en los estándares para
bancos de sangre y servicios de transfusiones de la Asociación Americana de
Bancos de Sangre (AABB), por constituir un sistema de control analítico ante
un resultado negativo de la prueba de antiglobulina humana. A pesar de ello, su
empleo no es universal en nuestro medio debido, fundamentalmente, a la
disponibilidad insuficiente de células comerciales y a la corta durabilidad
(máximo 24 horas) de las células preparadas por el propio laboratorio
El Suero de Coombs, detecta anticuerpos y componentes del complemento
absorbidos en la pared de los eritrocitos manifestándose por medio de una
reacción de aglutinación. Su uso es para pruebas de compatibilidad o pruebas
cruzadas, detección de anticuerpos humanos, pruebas para la variante del
antígeno (Ag) Rho llamado Dhu y pruebas en eritrocitos de cordón umbilical o
pacientes transfundidos.
Anti D (Rho).La Inmunoglobulina humana Anti D (Rho), Es una solución de IgG
obtenida a partir de plasma de donantes, seleccionados con elevados títulos de

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anticuerpos Anti-D. Tiene como acción la de prevenir la producción de

anticuerpos contra los eritrocitos "fatales Rh positivos, Que han pasado de
manera masiva a la circulación materna durante las interrupciones o los partos.
La inmunoglobulina humana anti-D (Rho) se utiliza para prevenir la "Formación
activa de anticuerpos en mujeres Rh negativas por eritrocitos Rh positivos
provenientes del feto, los cuales pueden pasar a la circulación materna durante
el parto, aborto u otros eventos sensibilizantes. Los anticuerpos en embarazos
subsiguientes Rh positivos, pueden producir la enfermedad hemolítica del recién
nacido.
La administración de la inmunoglobulina anti-D no es efectiva desde el momento
en que la madre ha formado anticuerpos Anti-D. La inmunoglobulina Anti-D debe
utilizarse siempre en madres Rh negativas que no tengan anticuerpos anti-D en
su suero que han parido niños Rh positivos. Debe administrarse
intramuscularmente tan pronto sea posible después del parto, en dosis única,
aunque puede requerirse una dosis mayor, en dependencia de la cantidad de
sangramiento trasplacentario. La inmunoglobulina anti-D (Rho) previene la
formación de anticuerpos por una madre Rh negativa contra las células Rh
positivas del feto que pueden pasar a la circulación materna. El objetivo es
proteger a los futuros hijos del peligro de la enfermedad hemolítica del neonato.

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II. OBJETIVOS:

Realizar correctamente la Preparación de Células control de Coombs.

Determinar que el reactivo Ig G Anti-D) está en condiciones adecuadas que
le permiten para dar validez a las Pruebas inmunohematológicas que se
realizan con células Coombs.

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III. MATERIALES:

Tubos de ensayo 13 x 100mm.

Pipeta pasteur
Gradillas
Micropipetas
Punteras

REACTIVOS:

Suero anti D
Solución salina fisiológica
Glóbulos rojos “O” Rh positivo

EQUIPOS:
Centrifuga

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IV. PROCEDIMIENTO:
1. Tomar un volumen de 8 ml de glóbulos rojos “O” Rh positivo.

2. Lavar 4 a 5 veces con SSF.

3. Centrifugar a 3500 rpm por 2 minutos.

4. Eliminar el sobrenadante después de cada lavado con pipeta Pasteur. en el

último lavado eliminar totalmente la SSF.

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5. Preparar la suspensión de G.R. al 50% y de SS.FF al 50%

6. Preparar una solución sensibilizadora: una dilución del suero anti-D al 1/8 en
solución salina.

7. Rotular 8 tubos con ½,1/4,1/8,1/16,1/32,1/64,1/128,1/256.

8. Agregar solución salina 100 ul en cada tubo (8 tubos).

9. Agregar 20 ul de sangre y 100 ul de reactivo anti-D en el primer tubo.

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10. Agregar 100 ul de SS.FF en cada tubo se realiza el lavado correspondiente

y quitar 100 ul de todo el componente y se le agrega al tubo siguiente

11. Mezclar las partes iguales de los G.R. suspendidos en solución salina con el
suero anti-D.

12. Incubar a 37°C por 60 minutos. Mezclar suavemente cada 15 minutos.

13. Lavar los G.R. sensibilizados 4 veces con solución salina. eliminando en cada
lavado el sobrenadante con pipeta Pasteur.

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14. Preparar una suspensión al 5% de los G.R. en solución salina a00 ul y 1 gota
de Coombs.

15. Centrifugar por 15 segundos.

16. Dar lectura: si hubo aglutinación

Reactividad: 3+

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V. INTERPRETACIÓN:

Al validar una Prueba de antiglobulina humana con las células control

Coombs= el resultado obtenido es positivo 3(+)=que indica que el reactivo
está cumpliendo con las funciones descritas por el fabricante

Si el resultado era negativo, la prueba es”no valida” deberá repetirse" un

resultado negativo indica que el reactivo no está cumpliendo con las
funciones descritas por el fabricante y por lo tanto la prueba queda
invalidada"

LECTURA AGLUTINACIÓN:
 4 + Aglutinación total en un solo cúmulo grande en un fondo claro.
 3 + Dos o tres aglutinados grandes en un fondo claro.
 2 + Aglutinados pequeños, de igual tamaño, en un fondo rojo.
 1+ Aglutinados muy pequeños, pero definidos, en un fondo rojo.
 ± Pequeños aglutinados no definidos, que pueden resultar dudosos.
Para los propósitos del estudio, se considera negativo.
 0 Ausencia de aglutinación

RESULTADOS:

Las células rojas preparadas quedaron débilmente sensibilizadas con IgG

al revelar, mediante la prueba de Coombs directa, un grado de aglutinación
3+ sin presentar autoaglutinación, indicando ser funcionalmente adecuadas
para su uso in vitro como control de la prueba de Coombs

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VI. REFERENCIAS:

1. Klein HG, Anstee DJ. Blood grouping techniques. En: Mollison’s Blood
Transfusion in Clinical Medicine. 11th edition. Oxford: Blackwell Publishing;
2006. pp. 299-351.

2. Bencomo Hernández A, Alfonso Valdés ME. Detección de anticuerpos

IgA e IgM en la prueba de antiglobulina (Coombs). Rev.Cub Hematol Inmunol
Hemoter [Internet]. 2010; 26 (4). [citado 5 de diciembre de 2012]. Disponible
en: http: //www.bvs.sld.cu/evistas/hih/vol26_4_10/hih09410.htm.

3. Luberta Lugo A, Leyva Torres JL, Gallardo Rodríguez E. Conservación de

células rojas reactivas en dos soluciones de resuspensión:AS-1 y AS-2.
[Internet]. 2001. [Citado 12 de mayo de 2013]. Disponible en: http:
//bvs.sld.cu/revistas/uni/vol2_1_02/Uni03101.htm.

4. Advancing Transfusion and Cellular Therapies Worldwide. Standards for

blood banks and transfusion services [Internet]. 26th edition.Bethesda: AABB;
2009.

5. Ballester Santovenia JM, Alfonso Valdés ME, Ballester Planes L,

Bencomo Hernández A, Cortina Rosales L, Macías Abraham C et al.
Procedimientos para bancos de sangre y servicios de transfusión. La
Habana: Editorial de Ciencias Médicas; 2009.

6. Franco E. El control de la calidad de los análisis inmunohematológicos en la

región de las Américas. Rev Panam Salud Publica/Pan.Am J Public Health.
2003; 13. Disponible en: http: //www.scielosp.org/pdf/rpsp/v13n2-
3/15736.pdf.

7. Klein HG, Anstee DJ. Immunology of red cells. En: Mollison’s Blood
Transfusion in Clinical Medicine. 11th edition. Oxford: Blackwell.Publishing;
2006. pp 48-113.

8. Villalobos Calero YV. Seminario de prueba de Coombs 2013. SlideShare, Inc

[Internet]. 2013 [citado 17 de diciembre de 2013].Disponible en:
http://www.slideshare.net/rapboy/seminario-de-prueba-de-coombs.

9. (2010, 11). Prácticas De Banco De Sangre.BuenasTareas.com.Recuperado

11, 2010, dehttp://www.Practicas-De-Banco-De-
Sangre/1164478.htmlhttp://www.orbipharma.com.mx/index.php?option=com
_content&view=article&id=62:sueros&catid=34:productos&Itemid=41.

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