TITULACIÓN: GRADO EN INGENIERÍA QUÍMICA INDUSTRIAL

ASIGNATURA: INGENIERÍA BIOQUÍMICA. FEBRERO. Curso 2017/18

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Todas las preguntas tienen el mismo valor.

1. Sobre moléculas biológicas

a. El aspartamo es un edulcorante compuesto por ácido aspártico y fenilalanina. Describa la estructura de
este dipéptido, su reacción de formación, e indique el tipo y las propiedades del enlace. Explique la
estructura de una proteína y el fenómeno de desnaturalización.
b. Describa en detalle la estructura química del ARN indicando los diferentes tipos que hay. Describa como
tiene lugar la replicación del ADN en una célula.

2. Sobre metabolismo celular

a. Explique en detalle las rutas metabólicas que emplea una levadura como Saccharomyces cerevisiae para
metabolizar glucosa en condiciones aerobias y anaerobias. Indique los productos obtenidos en cada caso
y las diferencias en el rendimiento energético entre ambos tipos de metabolismo.
b. Explique como tiene lugar en una mitocondria la síntesis de ATP a partir de una molécula de NADH
procedente del ciclo de Krebs.

3. Sobre enzimas
a. Explique como tiene lugar la catálisis enzimática atendiendo a la teoría del estado de transición. Cierto
investigador se ha olvidado de anotar en su libreta de laboratorio cuál es la concentración de sustrato con
la que cierta enzima transforma 8 µmoles del mismo/min. Sin embargo, en las condiciones en las que
trabaja, conoce sus parámetros cinéticos: KM= 1 mM y Vmax=10 µmoles/min. Con estos datos ¿puede
saber el investigador cuál es la concentración de sustrato con la que obtuvo la velocidad citada?. En caso
afirmativo, determine su valor.
b. Una empresa ha comprado un preparado sólido de la enzima glucosa oxidasa (4 U/mg prot) para oxidar
glucosa y obtener ácido glucónico. Para comprobar si el valor de 4 U/mg prot indicado es correcto se ha
realizado un ensayo de actividad, mezclando 100 ml del sustrato con 5 mg de enzima y utilizando las
condiciones óptimas de pH y temperatura. En dicho ensayo se analizó a diferentes tiempos la
concentración del producto ácido glucónico, obteniéndose los siguientes valores:
Tiempo (min) 0 1 2 3
Ácido glucónico (mM) 0 0,2 0,4 0,6
¿Cuál es la velocidad inicial de reacción? ¿Cuántas unidades de enzima se han determinado en el
ensayo?. ¿Cuál es la actividad específica del preparado (U/mg prot)? ¿Coincide este valor determinado
experimentalmente con el valor indicado?.
Explíquelo numéricamente sabiendo que la U está definida en mol/min.

4. Sobre estequiometría microbiana

a. Las células de Candida utilis convierten glucosa de acuerdo con la siguiente ecuación estequiométrica:
C6H12O6 + 3,94 O2 + 0,33 NH3  1,93 CH1,7O0,46N0,17 + 4,07 CO2 + 4,85 H2O
¿Cuáles son los valores de rendimiento de biomasa por sustrato consumido y el cociente respiratorio?
Imagínese que se pone a cargo de un pequeño biorreactor para el cultivo de la levadura Candida utilis y
que desea producir 120 kg de células en un único lote para inocularlas en un biorreactor a mayor escala.
¿Cuál es la cantidad mínima de glucosa que debe contener el medio de cultivo?. (C:12; N:14, O:16).
b. Represente gráficamente los diferentes tipos de cinética de consumo de sustrato y de obtención de
producto y biomasa que conozca, indicando un producto industrial obtenido por cada tipo de cinética.
5. Sobre diseño de biocatalizadores
a. Describa las etapas a realizar para obtener un microorganismo modificado genéticamente.
b. ¿En qué consiste la inmovilización de un biocatalizador?. ¿Qué ventajas aporta a un proceso
biotecnológico el uso de un biocatalizador inmovilizado?. Enumere las técnicas de inmovilización de
células y enzimas que se emplean a nivel industrial.

6. Sobre biorreactores y obtención de productos biotecnológicos

a) Sistemas de aireación en reactores microbianos de tanque agitado: Describa los métodos de
determinación experimental de KL a, indicando las ecuaciones que se deben utilizar.
b) Haga un esquema de las etapas que sería necesario realizar para purificar una enzima intracelular, que
se obtiene industrialmente utilizando un proceso biotecnológico con una bacteria. Explique en detalle los
métodos y operaciones que emplearía.

PROBLEMAS

7. La compañía EVONIK desea llevar a cabo un proceso para producir a escala industrial el aminoácido L-alanina
con la enzima aminoacilasa inmovilizada en un reactor continuo de flujo pistón (RFP) que utiliza N-acetil-
D,L-alanina como sustrato. La reacción que tiene lugar es:
N-acetil-D,L-alanina (Pm: 159) + H2O  L-alanina (Pm: 89) + Acetilo + N-acetil-D-alanina
La enzima inmovilizada sigue una cinética de Michaelis-Menten con una Km de 20 mM, y tiene una velocidad
máxima de reacción de 0,2 mM/min. Se decide operar el reactor utilizando una corriente de N-acetil-D,L-
alanina de concentración 120 mM, y se considera que la enzima no pierde actividad con el tiempo a la
temperatura de trabajo.
a) Calcular el tiempo de residencia con el que se debe operar el reactor para conseguir una conversión del
85%.
b) ¿Qué cantidad de L-alanina se produciría en un año si se trabajara con un reactor de 3 m3? ¿Qué volumen
de reactor sería necesario para obtener 500 Ton/año de L-alanina?

8. Se desea llevar a cabo un proceso de producción de etanol a escala industrial en un biorreactor en continuo
de tanque agitado de 200 m3, y utilizar sacarosa como sustrato. Inicialmente se obtuvieron los parámetros
cinéticos del modelo de Monod que describe el crecimiento del microorganismo con sacarosa (m= 0,15 h-1, y
Ks = 0,8 g/l), y también se determinó el valor de rendimiento biomasa/sustrato (Yxs = 0,3 g/g). Se propone
trabajar con un caudal de entrada de alimentación de 24 m3/h con una concentración de 120 g/l en sacarosa.
Realizando las ecuaciones de balance de materia correspondientes, calcule las concentraciones de sustrato y
biomasa en estado estacionario. ¿Qué conversión de sustrato se alcanza en estado estacionario?. ¿Qué
productividad en biomasa se obtiene expresada en g/(l h)?. ¿Podría obtener un valor más alto de productividad
en biomasa en este reactor? ¿Qué tendría que hacer? ¿Qué concentración de sustrato y biomasa habría en
el reactor en estado estacionario si se triplica el caudal de alimentación?.