Los procesos tales como borrar meridional, borrar septentrional, borrar
occidental se utilizan para transferir la DNA o las proteínas del ARN sobre una membrana que borra (a menudo después de que electroforesis del gel) pueden ser manchados por etiqueta radioactivo y después ser visualizados.
El primer de estos métodos era el borrar meridional en 1975 por
Edward meridional, y se utiliza para descubrir la serie de los fragmentos de la DNA.
Procedimiento
Hay cuatro pasos dominantes en la técnica el borrar meridional:
En el primer paso, la DNA de la muestra se analiza o se digiere
hacia adentro en pedazos más pequeños usando una enzima de la restricción.
Después de la digestión, los fragmentos de la DNA se separan
usando electroforesis del gel. El gel de la agarosa se utiliza generalmente con este fin. La electroforesis muestra varias bandas que parezcan una mancha debido a la presencia de varios pequeños fragmentos de la restricción en el gel. El alcalino entonces se utiliza para desnaturalizar la DNA en únicos cabos.
Estas bandas entonces se transfieren a la superficie de una
membrana con la ayuda de un gradiente eléctrico que sea normalmente una hoja de papel llamada el papel secante. La configuración de los fragmentos de la DNA en el gel sigue siendo lo mismo después de transferencia al papel secante.
Ahora, una antena compuesta de únicos fragmentos trenzados
de la DNA se introduce en la mancha blanca /negra. Las bases en la antena de la DNA emparejarán con series complementarias de la DNA en el gel para formar la DNA doble-trenzada.
El Dr. Edwin Southern desarrolló una de las primeras técnicas que
borraban llamadas la mancha blanca /negra meridional. Esta técnica descubre series específicas de la DNA y por lo tanto también se llama una mancha blanca /negra de la DNA.
Usos
La mancha blanca /negra meridional encuentra varios usos en el
laboratorio de biología molecular moderno del día. Algunos de los usos dominantes de la mancha blanca /negra meridional son :
identificación de un único gen en un centro común de los
fragmentos de la DNA correspondencia del gen análisis de configuraciones genéticas de la DNA detección de las series específicas de la DNA en un genoma estudio de las supresiones del gen, duplicaciones, y mutaciones que causan diversas enfermedades detección de enfermedades genéticas y de cánceres tales como mutaciones monoclonales de la leucemia y de la célula falciforme descubra la presencia de una familia del gen en un genoma
El borrar septentrional
Esto es una técnica usada para descubrir las moléculas específicas
del ARN presentes dentro de una mezcla del ARN. El borrar septentrional se emplea en el análisis de una muestra del ARN de un tipo o de un tejido de la célula para determinar la expresión del ARN de ciertos genes.
El borrar occidental
El borrar occidental es una técnica para descubrir las moléculas de
proteína específicas dentro de una mezcla de la proteína. Esta mezcla pudo incluir todas las proteínas que se asocian a un cierto tipo o tejido de la célula. La técnica puede ayudar a determinar la talla de una proteína, y cuánto de él se expresa. MATRICES -los microarrays de una dna
es una colección de sitios de la dna montados en una superficie sólida
tal como una diapositiva del microscopio que se pueda utilizar para cuantificar simultáneamente niveles de la expresión de la proteína a través de un gran número de genes. La técnica se puede también utilizar a diversas diversas regiones genomicas del genotipo.
Clasificación
De acuerdo con la manera de la preparación del arsenal, los
microarrays se dividen en tres tipos:
1. El arsenal observado sobre el cristal: las matrices observadas
son matrices hechas en diapositivas de cristal recubiertas polivinílico-lisina del microscopio. Esto ofrece el atascamiento de la DNA de alta densidad usando las espigas ranuradas. 2. matrices Uno mismo-montadas: éstas son matrices de la fibra óptica hechas por la deposición de la DNA sintetizada en pequeñas molduras del poliestireno. Las molduras se depositan en los finales grabados el ácido del arsenal. 3. Matrices sintetizadas "in-situ": estas matrices son hechas por síntesis química en un substrato sólido. En la síntesis química, combinan a los grupos de protección photolabile con fotolitografía para realizar la acción. Estas matrices se utilizan en el análisis de la expresión, genotyping, y ordenando. el borrar meridional se utiliza para descubrir la serie de los fragmentos de la DNA. (v)
El borrar septentrional es una técnica para descubrir las moléculas
de proteína específicas dentro de una mezcla de la proteína.(f)