FITOPATOLOGIA

COL OMBIANA
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 FITOPATOLOGÍA COLOMBIANA
ISSN 0120-0143

VOLUMEN 43 NÚMERO 1 JUNIO DE 2019

CONTENIDO
JUNTA DIRECTIVA ASCOLFI 2017-2019

Principales Suplentes
Presidencia
Página
Mauricio Soto S. Ángela Liliana Rivera C.
Vicepresidencia
Benjamín Pineda L. Adriana Gónzalez A. ESTUDIO EXPLORATORIO DE GEMINIVIRUS EN
Secretaría
Juan Carlos Ángel-S Gloria Patricia Castillo
TOMATE (Solanum lycopersicum L.) EN NARIÑO
Tesorería (COLOMBIA)
Diego Fernando Chávez Mónica Betancourth V.
Vocales
Carlos Betancourth-G., Germán Arteaga, Claudia Salazar
Rodrigo Orlando Campo A Greicy Andrea Sarria
Luz E. Lagos ……… ………………………………………………… 1
Revisoría Fiscal
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Cristian Olaya-Arias HONGOS FITOPATÓGENOS ASOCIADOS A
Revista LAUREL DE CERA (Morella pubescens H&B Willd-Wilbur)
“FITOPATOLOGÍA COLOMBIANA”
ÓRGANO DE DIFUSIÓN DE LA ASOCIACIÓN Clara Elena Yépez-Quiñones, Luis Guillermo Solís-Alcibar
COLOMBIANA DE FITOPATOLOGÍA Y CIENCIAS y Claudia Milena Quiroz-Ojeda..……………………………………… 6
AFINES- ASCOLFI
ISSN 01120-0143
Licencia de Min. Gobierno No 001808, Cali, Apartado Aéreo
5004, Nit. : 891 –301.725-6
Sociedad sin ánimo de lucro, Personería Jurídica 1097 de abril
1º de 1977
EVALUACIÓN DEL USO DE TOMOGRAFÍA DE
Editor IMPEDANCIA ELÉCTRICA PARA DETERMINAR
Benjamín Pineda L, Ing. Agr. M Sc. LA PRESENCIA DE PUDRICIÓN BASAL DE ESTÍPITE
b.pinedalopez@gmail.com
(PBE) EN CULTIVOS DE PALMA DE ACEITE
COMITÉ EDITORIAL
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Elizabeth Álvarez C. Ing. Agr. – Ph D Fitopatología Edwin David Henao-Henao, Mauricio Mosquera-Montoya,
Francisco J. Morales G. Ing. Agr. – Ph D Virología
Jorge I. Victoria K. Ing. Agr. – Ph D Bacteriología Greicy Andrea Sarria-Villa y Francia Elena Varón de Agudelo ..….. 11
Rodrigo O. Campo A. Ing. Agr. – Ph D Fitopatología

Representante de publicidad
Gabriel Robayo V., Ing Agr, M.Art
IDENTIFICACIÓN DE Sclerotinia sclerotiorum COMO
Contacto Revista: Oficina Ascolfi, Km 1 Vía al Penal Granja FITOPATÓGENO DEL FRAILEJÓN Espeletia grandiflora
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del Cauca – Colombia

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Ampelomyces quisqualis PARASITANDO Pseudoidium
Diseño y Diagramación: Benjamín Pineda L
hortensiae EN HORTENSIA (Hydrangea macrophylla)
Portada: Benjamín Pineda L. Síntomas del Virus del mosaico
del Caupí obtenidos post-inoculación mecánica
Benjamín Pineda-López ………………………………………..… 25
Referenciada internacionalmente por el Índice Latinoameri-
cano de Publicaciones Científicas y Tecnológicas (Latindex).
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lombiana&hl=es&as_sdt=0,5

2018, Fitopatología Colombiana /Volumen 42 No 2

 ESTUDIO EXPLORATORIO DE GEMINIVIRUS EN TOMATE
(Solanum lycopersicum L.) EN NARIÑO (COLOMBIA)
Carlos Betancourth-G, Germán Arteaga, Claudia Salazar y Luz E. Lagos

Universidad de Nariño

Dirección de contacto: gespino@udenar.edu.co , claudiasalazarg@yahoo.com , luzestelal@gmail.com , cbet70@yahoo.com

Artículo científico, recibido para publicación junio 2 de 2019. Aceptado Junio 20 de 2109

RESUMEN SUMMARY

El tomate (Solanum lycopersicum L.) es una de las hortalizas de mayor
importancia en Colombia. Esta especie es afectada por diversos virus
que disminuyen la producción y afectan la calidad del fruto. En regio-
nes productoras de Nariño, se vienen presentando síntomas de mosai-
cos, distorsión de hojas y frutos y enanismo de las plantas, e incremen-
tos excesivos en poblaciones de mosca blanca, que hacen pensar en
incidencia de Geminivirus. Con el objetivo de verificar si este tipo de
virus están asociados a dicha patología, el grupo de investigación en
Sanidad Vegetal de la Universidad de Nariño, realizó una investiga-
ción mediante pruebas moleculares de PCR y microscopía electrónica
de transmisión. Además de la identificación de la especie de la mosca
blanca. Se examinaron 300 muestras de hojas, flores, frutos y semi-
llas de plantas enfermas, colectadas en cultivos bajo invernadero en
diferentes municipios. También la observación de cabeza, tórax y
abdomen de especímenes de insectos colectados en cultivos afectados,
siguiendo descriptores taxonómicos de la familia Aleyrodidae. En
ninguno de los casos se logró amplificación de ADN con cebadores
específicos para Geminivirus, ni se observaron partículas típicas de
este género, pero si se revelaron inclusiones citoplasmáticas laminares
similares a las producidas por Potyvirus o Crinivirus y se determinó a
Trialeurodes vaporariorum Westwood, como la especie asociada a
estos cultivos, la cual no está reportada como vector de Geminivirus.
Se requiere continuar con el diagnóstico del disturbio.
Palabras clave: Geminivirus, síntomas, epidemiología, vectores.
Tomato (Solanum lycopersicum L.) is one of the most important vege-
tables in Colombia. This species is affected by diverse viruses that
decrease production and affect the quality of the fruit. In producing
regions of Nariño, symptoms of mosaic viruses, leaf and fruit distor-
tion, plant dwarfism, and excessive increases of whitefly populations
have been presented, that suggest Geminivirus incidence. In order to
verify if this type of virus is associated with this pathology, the re-
search group in Plant Health of the University of Nariño carried out an
investigation using molecular tests of PCR and transmission electron
microscopy. In addition to the identification of the whitefly species,
300 samples of leaves, flowers, fruits and seeds of diseased plants,
were collected and examined in greenhouse crops in different munici-
palities. Also the observation of head, thorax and abdomen of collect-
ed insects in affected cultures, following taxonomic descriptors of the
Aleyrodidae family. In none of the cases DNA amplification was
achieved with specific primers for Geminivirus, nor were typical parti-
cles of this genus observed, but lamellar cytoplasmic inclusions simi-
lar to those produced by Potyvirus or Crinivirus were revealed and
Trialeurodes vaporariorum Westwood was determined as the species
associated with these crops, which is not reported as a Geminivirus
vector. Therefore, it is necessary to continue with the diagnosis of the
disturbance.
Keywords: Geminivirus, symptoms, epidemiology, vectors.
Arteaga, G., Salazar, C., Lagos L. E. and Betancourth, C. 2019. Ex-
ploratory study of Geminivirus in tomato (Solanum lycopersicum L.)
in Nariño (Colombia). Fitopatología Colombiana 42(1):1-5

INTRODUCCIÓN
Desde hace más de dos décadas, el tomate es
considerado la hortaliza más importante en
Colombia, tanto por el área cultivada, como
por su valor en el mercado, además de su
consumo (Vallejo, 1999; MADR, 2015,
Agronet, 2017). En cuanto a los factores
limitantes para su producción, sobresalen los
problemas fitosanitarios, y especialmente los
asociados a virus, puesto que disminuyen
significativamente los rendimientos y son de
difícil manejo (Hull, 2014).
A nivel mundial se han descrito 136 es-
pecies de virus afectando el cultivo de tomate
(Hanssen, et al., 2010), debido principalmen-
te a su alta susceptibilidad a los Begomovi-
rus, aunque también se destacan especies
dentro de los géneros Tospovirus, Potyvirus,
Cucumovirus, Potexvirus, Tobamovirus,
entre otros (Arnaud et al., 2007; Hanssen et
al., 2010; Holguin et al., 2004).
En Colombia, se han identificado virus
pertenecientes a los géneros: Begomovirus,
(Tomato yellow mosaic virus - ToYMV),
Tobamovirus (Tobaco mosaic virus –TMV.
Tomato mosaic virus -ToMV), Cucumovirus
(Cucumber mosaic virus-CMV), Tospovirus
(Tomato spotted wilt virus -TSWV, Impa-
tients necrotic spot virus -INSV), Crinivirus
(Potato yellow vein virus - PYVV), Potyvirus
(Pepper deforming mosaic virus -PepDMV) y
Nepovirus, (Tobacco ringspot virus -TRSV)
(Morales et al., 2002; Tamayo y Jaramillo,
2006; Martínez et al., 2008; Morales et al.,
2009; Vaca et al., 2011 y 2012).
Los Begomovirus poseen partículas iso-
métricas geminadas con genoma de ADN de
cadena sencilla monopartita o bipartita (Padi-
dam et al., 1995; Fauquet et al., 2003; Stan-
ley et al., 2005; Brown, et al., 2015) y trans-
mitidos por moscas blancas de la familia
Aleyrodidae, principalmente por Bemisia
tabaci Gennadius (biotipo A) y B. argentifolii
Bellows y Perring, también conocida como B.
tabaci biotipo B (Perring et al., 1993; Gilber-
tson et al., 2015). Estos causan drásticas
pérdidas en diversos cultivos, especialmente
en tomate, en regiones tropicales y subtropi-
cales de todo el mundo (Zerbini et al, 2017).
Su distribución está directamente relacionada
con la diseminación del vector, que se ali-
menta de más de 500 especies vegetales (Mo-
rales y Anderson, 2001; Rojas et al., 2005).
La mosca blanca es una plaga de gran
importancia económica en Colombia y Cen-
tro América, especies como: Bemisia tabaci
(Gennadius), Bemisia argentifolii Bellows &
Perring, Bemisia tuberculata (Bondar), Tria-
leurodes vaporariorum (Westwood), Trialeu-
rodes variabilis (Quaintance), Trialeurodes
abutiloneus (Haldman), Aleurotrachelus
socialis (Bondar), y Aleurocanthus woglumi

2019- Fitopatología Colombiana /Volumen 43 No 1 1

(Ashby) son consideradas las de mayor im-
pacto (Caballero 1992; Gilbertson et al.,
2015).
El estudio de Morales et al., 2009, sobre
enfermedades virales en tomate en Colom-
bia, revelaron la presencia de Tobacco mo-
saic virus en muestras procedentes de Nariño,
siendo este el único reporte conocido. En
Nariño se vienen presentando síntomas como
enrollamiento de cogollos, detención del
crecimiento, manchas foliares, clorosis y
mosaicos, distorsión del color en frutos, por
mencionar los más conspicuos y un incre-
mento considerable de las poblaciones de
mosca blanca.
La presente investigación tuvo como ob-
jetivo contribuir al conocimiento de enferme-
dades asociadas a virus en el cultivo de toma-
te (Solanum lycopersicum L.) en el departa-
mento de Nariño.
MATERIALES Y MÉTODOS
El presente trabajo de investigación se realizó
en las instalaciones de la Universidad de
Nariño, en el laboratorio de Sanidad Vegetal.
Material vegetal
Se realizaron muestreos en dos zonas produc-
toras de tomate bajo invernadero en Nariño,
incluyendo a los municipios de Guaitarilla y
San Bernardo. Las muestras se tomaron a
partir de plantas sintomáticas y asintomáticas,
basados en los síntomas registrados para
enfermedades asociadas a virus en tomate
(Morales et al., 2009; Vaca et al., 2011 y
2012). El muestreo incluyó la toma de teji-
dos de hojas, flores, semillas y frutos, los
cuales se etiquetaron, se envolvieron en papel
toalla y aluminio y se depositaron en bolsas
plásticas para su transporte hasta los laborato-
rios. El material vegetal se conservó en neve-
ra a 4°C hasta su procesamiento.
Extracción de ácidos nucleicos
Las muestras de tejidos se procesaron si-
guiendo el método de Prince et al. (1993),
tomando 0,4 g de tejido en cada caso, el cual
se congeló y maceró en nitrógeno líquido
usando un mortero y pistilo estériles. Des-
pués del lavado final en etanol, el ácido nu-
cleico extraído se suspendió en 30 a 50 uL de
solución tampón Tris-EDTA (10 mM Tris-
HCl, pH 8.0, y 1 mM EDTA, pH 8.0) y se
almacenó a 4ºC hasta su uso.
Reacción en cadena de la polimerasa
(PCR)
Las pruebas de PCR se llevaron a cabo con el
ADN de las plantas de tomate y se amplifica-
ron usando cebadores específicos para Gemi-
nivirus PAL 1v 1978 y PAR1c496 y
PBL1v2040/ PCRc1, los cuales amplifican un
fragmento de 1200 pb del componente A y
2 2019- Fitopatología Colombiana /Volumen 43 No 1
600 pb del componente B respectivamente.
Las condiciones de termociclado se hicieron
con el protocolo publicado por Rojas et al.
(1993).
Para todas las pruebas de PCR, se preparó
una mezcla de 12,5 μL de go taq master mix
2X Promega, 0,5 μL de cada cebador, 9,5 μL
de agua y 2 μL de cada muestra de ADN,
para un volumen final de 25 μL. El control
positivo correspondió a un clon de Geminivi-
rus cedido por la doctora Diana Fernanda
Vera Raigosa del Laboratorio Nacional de
Diagnóstico Fitosanitario de ICA Tibaitatá.
Los productos de la PCR se observaron
en gel de agarosa al 1,0%, preparados con el
colorante gel red a una concentración 1X y
corridos a 60 voltios aproximadamente por 2
horas.
Microscopia Electrónica
Se utilizó el método de inmersión en resina
para procesar tejido foliar de hojas muy jóve-
nes, procedentes de plantas sintomáticas de
tomate. La fijación se hizo en glutaraldehído
al 2,5% y lavados en buffer salino, se posfija
en tetróxido de osmio al 1%, lavados con
buffer y óxido de propileno. Luego se deshi-
drató en gradiente ascendente de etanol desde
10% hasta 100%, para luego embeber e in-
cluir en resina epóxica. La polimerización se
realizó a 70 °C, y los cortes ultrafinos a 60
nm. Posteriormente, los cortes se contrasta-
ron con acetato de uranilo y citrato de plomo
y se observaron en un microscopio electró-
nico de transmisión Tecnai G2 F20 en la
Universidad de Antioquia.
Colecta e Identificación de especímenes de
mosca blanca
Las colectas se realizaron en los municipios
de Guaitarilla y San Bernardo en Nariño. Los
especímenes fueron capturados directamente
en plantas de tomate bajo invernadero y el
material fue preservado en alcohol al 70%,
hasta su procesamiento. Copia del material
identificado se encuentra en la Universidad
de Nariño (Colombia).
Los especímenes de moscas blancas se
examinaron bajo el estéreo-microscopio en
medio líquido. Posteriormente se realizaron
disecciones de la cabeza, tórax y abdomen,
las cuales se aclararon en una solución de
hidróxido de potasio al 10% v/v a 60°C du-
rante quince minutos. Estas estructuras se
colocaron en montajes para microscopio con
medio Hoyer, con el fin de observar sus ca-
racteres morfológicos diagnósticos. Final-
mente se generaron imágenes de algunos
caracteres morfológicos a nivel de especie.
La determinación taxonómica se realizó con
base en las descripciones y diagnosis pro-
puestas por Calvert et al. (2001); EPPO
(2004) y Carapia y Castillo (2013), en la
Dirección Técnica de Análisis y Diagnóstico
Agrícola del Instituto Colombiano Agrope-
cuario (ICA) Santander.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Descripción de síntomas
En todos los sitios de muestreo y en diferen-
tes variedades de tomate como Platinum,
Monito, Heterey, Cartier, entre otras, se pudo
evidenciar la manifestación de síntomas que
coinciden con los descritos por otros autores
para enfermedades virales en tomate (Tama-
yo y Jaramillo, 2006; Koike et al., 2007;
Martínez et al., 2008; Morales et al., 2009;
Vaca et al., 2011 y 2012), caracterizados
principalmente por plantas poco vigorosas,
con bajo desarrollo, enrollamientos de los
brotes terminales, ampollas, moteados cloró-
ticos y mosaicos. En la mayoría de los casos
las plantas afectadas presentaron baja pro-
ducción de frutos, con distorsión en el color,
malformación severa de las hojas y prolifera-
ción de brotes apicales (Figura 1).
Detección molecular de Geminivirus
A pesar de que los síntomas se asemejan a
patologías causadas por Geminivirus, en las
pruebas moleculares, ninguna de las muestras
de hojas, flores, frutos o semillas tuvieron
amplificación, (Figura 2), lo cual no necesa-
riamente implica que no estén presentes,
puesto que otros autores han manifestado la
dificultad de detección con la utilización de
los iniciadores genéricos y específicos en
PCR directa, esta situación debida a la gran
variabilidad genética y recombinantes que
tienen, y que permiten el surgimiento de
nuevos Geminivirus (Fiallo et al., 2009; Bang
et al., 2014; Reina y Rodríguez, 2018).
Es de anotar que en el estudio de Morales
et al., 2009, tampoco detectaron Geminivirus
en Nariño, pero sí Tobacco mosaic virus
(TMV).
Es importante continuar con los exáme-
nes de detección de Geminivirus en las zonas
productoras de tomate en Nariño con el uso
de técnicas como amplificación por circulo
rodante (RCA) que permite diagnóstico,
clonación y estudios genómicos de Geminivi-
rus (Inoue-Nagata et al., 2004; Haible et al.,
2006).
Microscopia electrónica
El examen de los tejidos preparados para
observación al microscopio electrónico de
transmisión, no permitió confirmar la presen-
cia de partículas virales y cuerpos de inclu-
sión en los tejidos estudiados (Figura 3). Esta
situación no es indicativo de la ausencia de
virus en razón de que para su detección se
requiere una correcta selección de muestras y
la fijación inmediata de los tejidos con glu-
taldehido al 2,5% en tampón de fosfato sódi-
co, situación que no se tuvo en cuenta en la
recolección de muestras, según lo descrito en

Figura 1. Síntomas de epinastias, mosaicos y proliferación de brotes apicales en tomate larga vida de la
variedad Platinum.
materiales y métodos; de otra parte, la con-
centración de virus en los tejidos de las plan-
tas generalmente es baja lo que dificulta su
detección vía microscopía electrónica.
Figura 2. Gel de agarosa al 1%. Carriles 1 al 4 muestras de ADN de tejido de plantas de tomate, M:
marcador de peso molecular de 100 pb (Thermoscientific) +: control positivo, clon de Geminivirus cedido
por el Instituto Colombiano Agropecuario seccional Tibaitatá, -: Control negativo, mix de reacción sin
ADN
Identificación de la especie de mosca blan-
ca
La identificación de la mosca blanca permitió
determinar que la especie asociada a los cul-
tivos de tomate bajo invernadero en Nariño es
Trialeurodes vaporariorum (Westwood), en
la cual se registraron las siguientes caracterís-
ticas (Figuras 4A-D): la parte superior e infe-
rior del ojo compuesto está completamente
dividida en ambos sexos a diferencia de otras
especies que están conectados por uno, dos o
más omatidios (Calvert et al., 2001; EPPO,
2004).
En cuanto a las tibias meso torácicas pre-
senta dos cepillos de tres a cinco espinas, uno
opuesto al otro en la parte media, los cuales
están ausentes en Bemisia tabaci Gennadius.
Las tibias metatorácicas con un cepillo de
cuatro a cinco espinas opuesto a la parte
final del peine de espinas que tampoco están
presentes en B. tabaco (Carapia y Castillo,
2013). Finalmente, los adultos tienen dimen-
siones de 0,75 a 1.1 mm de largo, son de
color amarillo pálido con dos alas completa-
mente blancas (EPPO, 2004; Carapia y Casti-
llo, 2013).
La creciente población de mosca blanca
en las zonas productoras de tomate en Nariño,
se constituye en un riesgo sanitario perma-
nente por su alta capacidad de transmitir
2019- Fitopatología Colombiana /Volumen 43 No 1
Figura 3. Micrografía de tejido foliar de tomate
variedad Platinum. No se observan evidencias de
virus. El cloroplasto presenta la grana, los tilacoi-
des y la lamela en buenas condiciones, así como el
estroma
virus, como ha sido reportado en otros países
anteriormente (Navas et al., 2014). Particu-
larmente, T. vaporariorum que se conoce es
vector de Crinivirus en tomate
(Wintermantel, 2004; Wintermantel y Wisler,
2006; Polston et al., 2014), pero no es trans-
misor de Geminivirus, los cuales tienen como
vector, el complejo Bemisia tabaci (Rojas y
Gilbertson, 2008; Boykin, 2014; Polston et
al., 2014)
En general la especie T. vaporariorum es
predominante en los invernaderos que produ-
cen tomate, así lo demuestran los estudios de
Vargas-Asencio et al. (2013); con seguridad
el ambiente protegido es propicio para su
desarrollo (Wintermantel, 2004; 2010). De
esta manera, resulta lógico pensar que si T.
vaporariorum es la especie asociada al culti-
vo de tomate en los invernaderos estudiados,
eso explica la ausencia de Begomovirus en
las muestras analizadas.
CONCLUSIONES
En esta investigación en los cultivos
estudiados de tomate en Nariño no se
encontraron evidencias de infecciones por
Begomovirus, no obstante la sintomatología
observada. La emergente población de
Trialeurodes vaporariorum, registrada en los
cultivos requiere un seguimiento detallado ,
en razón de que el insecto se registra como
vector de varios virus.
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3

Figura 4. A. Detalle de los dos lóbulos de los ojos compuestos. La flecha indica la zona en la cual se
separan por completo los dos lóbulos. B. Detalle de la parte posterior del abdomen en vista ventral, en la
que se señala la glándula de cemento. C. Detalle de una de las tibias medias en la cual se indica el peine
de setas. D. Detalle de una de las tibias posteriores, en la cual se indica el peine de setas.
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5
 HONGOS FITOPATÓGENOS ASOCIADOS A LAUREL DE CERA
(Morella pubescens H&B Willd-Wilbur)

Clara Elena Yépez-Quiñones1, Luis Guillermo Solís-Alcibar1 y Claudia Milena Quiroz-Ojeda2

1
Ingenieria Agroforestal, 2Fitopatología, Universidad de Nariño Pasto, Colombia

Artículo científico, recibido para publicación junio 2 de 2019. Aceptado junio 20 de 2019

RESUMEN SUMMARY

El laurel de cera (Morella pubescens H&B Willd-Wilbur) es una espe-
cie leñosa de gran importancia ecológica, económica e industrial,
utilizada principalmente para la extracción y comercialización de su
cera. Aun así, el aspecto fitosanitario ha sido poco estudiado, sobre
todo en referencia a las enfermedades que afectan a esta especie. Te-
niendo en cuenta lo anterior, se planteó realizar el aislamiento e identi-
ficación de los hongos fitopatógenos asociados a M. pubescens. Los
aislamientos se obtuvieron de partes enfermas de la planta y de sus
colonias se realizó la identificación y purificación. La patogenicidad se
comprobó aplicando los postulados de Koch y se evaluó características
macroscópicas y microscópicas, severidad de la enfermedad y en se-
milla, porcentaje de infección. Se aislaron e identificaron seis géneros
de hongos asociados a M. pubescens. De estos, Cercospora sp., Pesta-
lotia sp., Alternaría sp. y Fumago sp. en hoja y Trichothecium sp. y
Nigrospora sp. en semilla. La patogenicidad se le comprobó para
Cercospora sp., Alternaría sp., Pestalotia sp., Trichothecium sp. y
Nigrospora sp. En las enfermedades foliares los porcentajes de severi-
dad fueron de 62%, 50% y 39% para Cercospora sp., Alternaria sp. y
Pestalotia sp., respectivamente. Y en semilla, el porcentaje de infec-
ción fue de 90% con Nigrospora sp. y 70% con Trichothecium sp. Se
concluyó que los hongos aislados de M. pubescens si son causantes de
enfermedades en esta especie, con lo que se contribuye a su conoci-
miento fitosanitario.
Palabras claves: etiología, enfermedades, forestal, severidad
The wax laurel (Morella pubescens H&B Willd-Wilbur) is a woody
species of great ecological, economic and industrial importance, based
mainly on the extraction and marketing of its wax. Even so, the phyto-
sanitary aspect has been little studied, especially in reference to the
diseases that affect this species. Considering the above, it was pro-
posed to carry out the isolation and identification of the phytopatho-
genic fungi associated with M. pubescens. The fungal isolates were
obtained from diseased parts of the plant and their colonies were iden-
tified and purified. The pathogenicity was verified applying Koch's
postulates and macroscopic and microscopic features, severity of the
disease were evaluated and in seed, percentage of infection. Six gene-
ra of fungi associated to M. pubescens were isolated and identified. Of
these, Cercospora sp., Pestalotia sp., Alternaria sp. and Fumago sp.
on leaves and Trichothecium sp. and Nigrospora sp. in seeds. The
pathogenicity was showed to Cercospora sp., Alternaria sp., Pestalo-
tia sp., Trichothecium sp. and Nigrospora sp. In foliar diseases the
severity percentages were of 62%, 50% and 39% for Cercospora sp.,
Alternaria sp. and Pestalotia sp., respectively. And in seed, the per-
centage of contamination was of 90% with Nigrospora sp. and 70%
with Trichothecium sp. It was concluded that the fungi isolated of M.
pubescens are the cause of diseases in this species, which contributes
to their phytosanitary knowledge.
Keywords: etiology, diseases, forest, fungi, severity.
Yépez-Q. C. E., Solís-A. L. G. and Quiroz-O. C. M. 2019. Phytopath-
ogenic fungi associated with laurel of wax (Morella pubescens H&B
willd-wilbur. Fitopatología Colombiana 43(1):6-10

INTRODUCCIÓN
El laurel de cera (Morella pubescens H&B
Willd-Wilbur) es una especie leñosa que
crece de manera natural en potreros, taludes
de carretera y cerca a fuentes de agua como
ríos y quebradas (Muñoz, 2004). Según Mu-
ñoz (1994), crece desde el bosque montano
alto hasta el montano bajo, en altitudes com-
prendidas entre 1700 y 2900 m y temperatu-
ras que oscilan entre los 16 y 20 °. Los suelos
más apropiados para su cultivo son los arci-
llosos, arenosos, sin exceso de humedad y
con un subsuelo fácil para el crecimiento de
la raíz (Muñoz, 1994).
En Colombia se encuentra en las tres cor-
dilleras, especialmente en Antioquia, el alti-
plano Cundiboyacense, Cauca y Nariño (Ho-
yos y Cabrera, 1999). Su importancia ecoló-
gica radica en ser una especie óptima para la
protección de cuencas hidrográficas y la
conservación de suelos, además de fijar ni-
trógeno por medio de sus raíces y los frutos
ser alimento de avifauna (Muñoz, 2004).
En Nariño, el laurel de cera es una planta
de especial interés en la zona norte del depar-
tamento, por ser considerada mitigadora de
impactos ambientales, adaptarse a condicio-
nes marginales de suelo y colonizar sustratos
altamente degradados, haciéndola ideal para
ser usada en el control de la erosión (Muñoz,
2004). Así mismo, por ser la utilizada como
ornamental, lindero, barreras rompevientos,
en el proceso de fabricación de panela y su
cera para producción de betún, jabón y barniz
(Muñoz y Luna, 1993; Luna, 2006).
Cabe anotar que los beneficios ecológicos
y el uso industrial del laurel de cera están
bien investigados y documentados, sin em-
bargo, su aspecto fitosanitario ha sido relega-
do y es poca la información reportada. Al
respecto, solo Aguilar y Cueva (2001), en
Ecuador, mencionan que Fusarium sp.,
Pythium sp., Rhizoctonia sp. y Phytophthora
sp. son causantes del mal del talluelo en los
almácigos del laurel, en este caso, indicándo-
se únicamente patógenos de la raíz. Los pató-
genos que afectan a las hojas, tallos y la semi-
lla, aun no se han determinado. Por eso, en
esta investigación se planteó como objetivo
principal, realizar el aislamiento e identifica-
ción de los hongos fitopatógenos asociados al
laurel de cera (Morella pubescens), para
contribuir al conocimiento del estado fitosa-
nitario de esta especie.
MATERIALES Y MÉTODOS
Localización
El muestreo de Morella pubescens se realizó
en Botana , Daza y Obonuco, espacios territo-
riales del municipio de Pasto, localizado a 77º

6 2019- Fitopatología Colombiana /Volumen 43 No 1

16’ 52’’ O y a 1º 12’ 49’’ N (IDEAM, 2001).
El aislamiento, identificación caracterización
y pruebas de patogenicidad se realizaron en la
Universidad de Nariño, localizada en el mu-
nicipio de Pasto, a 2.525 m de altitud y tem-
peratura entre 13 y 18 °C (IDEAM, 2009).
Toma de muestras
En agroecosistemas de regeneración natural y
árboles dispersos con presencia de M. pubes-
cens se trazaron parcelas de 5m2 y en estas se
seleccionaron tres individuos al azar, de don-
de se tomaron hojas, ramas y frutos con sín-
tomas de enfermedad, para su posterior pro-
cesamiento.
Aislamiento, identificación y caracteriza-
ción de los hongos
Para el aislamiento, las muestras se desinfes-
taron con hipoclorito de sodio (NaClO) al 3%
por dos minutos, lavadas dos veces con agua
destilada estéril por dos min, secadas y colo-
cadas en cámara húmeda por 72 h para indu-
cir el desarrollo de los hongos. Posteriormen-
te, se tomaron trozos de tejido de 4 mm2 entre
sano y enfermo, al igual que semilla, se sem-
braron en medio de cultivo agar avena más
laurel (140g de hojas de laurel + 40g de ave-
na + 15g de agar-agar / 1 L de agua destilada)
y se incubaron durante 8-10 días, a 26 ºC,
hasta la formación de colonias fungosas, de
donde se hizo la purificación, transfiriendo
micelio a nuevo medio de cultivo, hasta obte-
ner aislamientos puros de los hongos encon-
trados (Castaño y Del Rio, 1997).
La identificación de se hizo observando
las características microscópicas de los hon-
gos por medio de placas de identificación
realizadas de acuerdo a la metodología de
Castaño y Del Rio, (1997), con lo que se
determinó el género de estos. Para la caracte-
rización macroscópica se consideró aspecto
del micelio (algodonoso, aterciopelado, den-
so, polvoso), forma de la colonia, coloración
y presencia de fructificaciones, además, se
aplicó las claves taxonómicas propuestas por
Barnett y Hunter (1998).
Desarrollo de las pruebas de patogenicidad
Por cada hongo inoculado se utilizaron 20
plántulas de seis meses de edad y 100 semi-
llas de M. pubescens y la misma cantidad
para los testigos. La semilla se obtuvo comer-
cialmente y previo a la inoculación se desin-
fecto y escarificó. Para favorecer la inocula-
ción, plántulas y semillas se mantuvieron por
tres días en ambiente de alta humedad. El
inóculo se preparó mezclando esporas y mi-
celio de cultivos puros de los hongos con 300
mL de agua destilada esterilizada, mas Tween
20 para facilitar la dispersión y conteo de las
esporas. El conteo se efectuó en cámara Neu-
bauer hasta ajustar la concentración de 1x106
esporas/mL de agua (Castaño y Del Rio,
1997; Hartung et al., 1981).
La inoculación se hizo por aspersión,
aplicando directamente el inóculo sobre los
tejidos. En el caso de las hojas, se les hicieron
heridas microscópicas con carborundum para
favorecer la penetración del inóculo. A los
testigos únicamente se les aplico agua desti-
lada esterilizada. El material inoculado se
mantuvo en cámara húmeda durante todo el
periodo de evaluación, en el cual se hicieron
observaciones periódicas para comprobar la
presencia de los signos y síntomas de los
hongos inoculados. Finalmente, a partir del
material inoculado y enfermo se procedió a
reaislar los hongos para verificar los postula-
dos de Koch (Botero, 2001; Bruna y Tobar,
2004).
Variables evaluadas
Severidad: se evaluó en las enfermedades
que afectaron la parte foliar de M. pubescens.
Para medirla se tomó como referencia la
escala propuesta por Jiménez y Gómez
(2009) (Tabla 1) diseñada para patógenos
foliares causantes de manchas necróticas.
El grado porcentual de severidad se obtu-
vo utilizando la fórmula general planteada
por Vanderplank (1963):
Σi
S(%) = N (Vmax) x 100
Dónde:
S = Porcentaje de severidad
Σi = Sumatoria de los grados observados
N = Número de plantas muestreadas
Vmax = Valor máximo de la escala
Porcentaje de semillas infectadas: se regis-
Tabla 1. Escala de severidad para manchas necróticas en hojas.
Grado
0 0 % de afectación en hojas
1 1-10 % de todas las hojas afectadas con síntomas de manchas irregulares necrosadas
2 11- 20 % de todas las hojas afectadas con síntomas de manchas irregulares necrosadas
3 21- 30 % de todas las hojas afectadas con síntomas de manchas irregulares necrosadas
4 31-40 % de todas las hojas afectadas con síntomas de manchas irregulares necrosadas
5 41-100% de todas las hojas afectadas con síntomas de manchas irregulares necrosadas
tró el número de semillas infectadas por cada
hongo inoculado. El porcentaje de infección
se calculó mediante la fórmula:
Semillas infectadas (%) =
Semillas infectadas
X100
Total de semillas inoculdas por patógeno
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Hongos asociados a Morella pubescens
Se aislaron e identificaron seis géneros de
hongos asociados a M. pubescens, cuatro
presentes en la parte foliar: Cercospora sp.,
2019- Fitopatología Colombiana /Volumen 43 No 1
Pestalotia sp., Alternaria sp. y Fumago sp. y
dos en semillas: Trichothecium sp. y Nigros-
pora sp. Los seis se encontraron en todas las
zonas muestreadas. Según Agrios (1997) y
Farfán et al. (2006), estos géneros son reco-
nocidos como hongos fitopatógenos de plan-
tas agrícolas, malezas, plantas ornamentales,
de cultivo, árboles y arbustos.
Caracterización
Cercospora sp. presentó hifas septadas, con
conidios alargados, cilíndricos, filiformes,
septados y conidióforos oscuros en racimos
(Figura 1a). La colonia se desarrolló lenta-
mente, de coloración blanca, siendo el mice-
lio de consistencia algodonosa y desarrollo
abundante. El medio en el que creció se tornó
café oscuro. Según Cabrera et al. (2003) y
Agrios (1997), los conidióforos de Cercospo-
ra sp. son fasciculados, muy largos, oscuros y
tabicados, de crecimiento definido y colora-
ción pardo-grisácea, que se agrupan en raci-
mos y sobresalen de la superficie de la planta
a través de los estomas. Así mismo, Rengifo
y Leguizamón (2002), en estudios con C.
coffeicola, describen la colonia como de
crecimiento micelial abundante, algodonoso y
que la base toma una coloración particular
(negra, vinotinto, verdosa) según el aisla-
miento.
Pestalotia sp., desarrolló conidias septa-
das con 2-3 flagelos en la parte distal y hacia
la base un solo flagelo, con el centro de apa-
riencia oscura y en la parte distal y basal
células claras (Figura 1b). En cultivo, desa-
rrollo un micelio algodonoso hialino, de color
blanco-crema, con crecimiento al ras de la
superficie del medio. Barnett y Hunter
(1998), describen a Pestalotia sp. con coni-
Descripción
dias septadas, con tres flagelos, dispuestas en
acérvulos oscuros y cirros negros. Baltodano
(2009), en un estudio similar, aisló a Pestalo-
tia de Pinus sp., que se caracterizó por tener
conidias con dos a tres septos y tres tres fla-
gelos, como sucede con Pestalotia sp. obteni-
do de M. pubescens. Barnett y Hunter (1998)
y Baltodano (2009), describen el crecimiento
micelial de Pestalotia sp. como de color
blanco, con pústulas negras, que son masas
de conidias que corresponden a los acérvulos
del hongo.
Las conidias de Alternaria sp. observadas
eran fragmosporadas transversal y longitudi-
nalmente, ovoides, de superficie lisa y oscu-
ras (Figura 1c). El micelio septado, algodono-
7
so y de tonalidad gris. Rivas y Mühlhauser
(2014), reportaron que Alternaria spp. tiene
hifas septadas, dematiáceas, con conidióforos
septados de pared lisa o rugosa y conidios
con forma ovoide, septados longitudinalmen-
te y transversalmente; así mismo, describie-
ron colonias planas y algodonosas, de colora-
ción blanca grisácea inicialmente y después
de color café. Características que coincidie-
ron con las descritas en este trabajo para
Alternaria sp.
En Fumago sp. se determinaron conidias
de forma irregular pluriceldadas, con septas
transversales y longitudinales, conidióforos
oscuros pluriceldados y micelio de color
negro (Figura 1d). Según Barnett y Hunter
(1998), Fumago sp. tiene micelio oscuro y
conidióforos variables con un sin número de
células, mientras que las conidias presentan
septas longitudinales, trasversales y frecuen-
temente están formando cadenas. Por su
parte, Chávarry (2013), quien aisló a Fumago
sp. de Caesalpinia spinosa, describió que en
este hongo el micelio está constituido por
filamentos septados de color marrón y los
conidios son multicelulares.
En Trichothecium sp., las conidias eran
granulosas ovoides o elipsoides, hialinas y
uniseptadas de forma transversal y mostraban
una pequeña curvatura donde se insertaban
los conidióforos, que eran largos, visibles y
sin ramificaciones (Figura 1e). El micelio
septado y la colonia de color crema, aparien-
cia polvosa y crecimiento radial. Al respecto,
Moreno y Zambrano (2014) y Germain y
Summerbell (1996), afirmaron que Trichot-
hecium sp. tiene hifas hialinas uniseptadas,
conidióforos y conidias visibles y que las
conidias piriformes, son de dos células con
paredes ligeramente gruesas, de algo colorea-
das a hialinas, además, indicaron que el punto
de unión al conidióforo es prominentemente
truncado y están organizadas en racimos
alargados; así mismo, que las colonias de
Trichothecium sp. son planas, granulosas,
polvosas y de color blanco.
Nigrospora sp., se caracterizó por tener
conidias solitarias, negras, opacas y de aspec-
to globoso y conidióforos blanquecinos (Fi-
gura 1 f). Sáenz y Gutiérrez (2003), reporta-
ron que Nigrospora sp. tiene conidióforos
cortos, con células conidiógenas hialinas,
infladas, solitarias y esféricas, algo deprimi-
das en los polos, de color negro y superficie
lisa. En cuanto a la colonia, inicialmente
presentó tonalidad blanquecina y después, por
la compactación de las conidias y conidiófo-
ros, se oscureció, coincidiendo con lo afirma-
do por Medel et al. (2010), quienes reporta-
ron que el micelio de Nigrospora sp. en prin-
cipio es blanco y después cambia a café o
café obscuro.
Pruebas de patogenicidad
Se demostró la patogenicidad de Cercospora
8 2019- Fitopatología Colombiana /Volumen 43 No 1
Figura 1. Hongos aislados de Morella pubescens. a. Cercospora sp. b. Pestalotia sp. c. Alternaria sp.
d. Fumago sp. e. Trichothecium sp. f. Nigrospora sp.
sp., Pestalotia sp., Alternaria sp., Trichothe-
cium sp. y Nigrospora sp. Las enfermedades
se manifestaron en las hojas y semilla de M.
pubescens y fueron similares en cada caso, a
las observadas en campo. Cercospora sp.
causo lesiones puntiformes marrón oscuro en
las hojas, que después coalescieron formando
lesiones necróticas irregulares en los bordes y
otras circulares, que tanto por el haz como
por el envés, fueron de color marrón claro
brilloso con el centro de color blanco (Figura
2app. Los resultados concordaron con Almo-
dóvar (2008) y Garcés y Mora (2012), quie-
nes afirmaron que Cercospora sp. produce
manchas circulares marrón claro o manchas
cafés rojizas, con halos más oscuros en los
bordes y centros color crema, donde crecen
las estructuras reproductivas del hongo.
Con Pestalotia sp. se observaron lesiones
pequeñas redondeadas color marrón y lesio-
nes necróticas de diferente tamaño en el bor-
de de la hoja, con el centro más claro y alre-
dedor de éste un halo oscuro (Figura 2bpp).
Según Áreas y Gonzales (2008), Pestalotia
sp. causa en Manguifera indica y Terminalia
catapa, pequeñas manchas circulares café
rojizas a marrón. Por su parte, Pareja y Be-
tancourt (2017) reportaron en Quercus hum-
boltii y Cordia alliodora manchas necróticas
irregulares de color café causadas por Pesta-
lotia sp., coincidiendo con las descritas en M.
pubescens.
Alternaria sp. produjo lesiones puntifo-
mes diminutas de color café oscuro, que al
coalescer pasaron a castaño claro, formando
lesiones necróticas circulares dentro de la
lámina foliar y en los bordes, por la haz y por
el envés, que fueron creciendo a medida que
avanzaba en edad (Figura 2cpp). De acuerdo
con Soto (2017), Alternaria sp. afecta princi-
palmente a las hojas, caracterizándose por
producir lesiones necróticas oscuras y anilla-
das, que en los foliolos se ven rodeadas de un
halo clorótico. Por su parte, Morales (2002)
describió manchas foliares necróticas de
color castaño oscuro, de apariencia concéntri-
ca e irregulares, causadas por Alternaria sp.
en Ulmus parvifolia.
Trichothecium sp. cubrió por completo a
la semilla de un micelio blanco y se evidencio
inicios de pudrición (Figura 4dpp). Al respec-
to, Fernández (1974), describió que el tejido
infectado por Trichothecium sp. comienza
por oscurecerse para después desarrollar un
micelio, primeramente blancuzco y que más
tarde se vuelve negro, como sucedido con la
semilla de M. pubescens.
Con Nigrospora sp., el micelio presenta-
ba consistencia algodonosa y de tonalidad
oscura, por lo que la semilla de M. pubescens
también se oscureció debido a la acumulación
de los conidióforos y conidias producidas por
el hongo (Figura 2epp). En cuanto a esto Ma-
rín y Jiménez (1981), afirmaron que las
especies de Nigrospora causan infecciones en
la semilla de diferentes plantas, presentando
manchas necróticas puntuales, de color café.
En este caso, en la semilla de M. pubescens
se evidencio síntomas de infección.
Los síntomas obtenidos en las pruebas de
patogenicidad presentaron características a
los observados en plantas afectadas en condi-
ciones naturales (Figura 2 acn , bcn, ccn, dcn,ecn)
Severidad de las enfermedades ocasiona-
das por los hongos fitopatógenos de M.
pubescens
Se encontró que Cercospora sp. fue el pató-
geno que causó mayor afectación en M. pu-
bescens, con 62% de severidad. A este le
siguieron Alternaria sp. y Pestalotia sp. con
severidades de 50% y 39%, respectivamente.
Las plántulas testigo no presentaron ningún
tipo de síntoma. Por lo tanto, se puede afir-
mar que M. pubescen es más susceptible al
hongo fitopatógeno Cercospora sp. Al res-
pecto Panagiotis et al. (2007), reportaron que
Cercospora sp. se ubica entre los patógenos
 app
bpp
acn bcn
Figura 2. Síntomas obtenidos en las pruebas de patogenicidad (pp) y los observados en condiciones naturales (cn). a Cercospora sp., b Pestalotia sp. c Alternaria
sp. d Trichothecium sp. e Nigrospora sp.
de plantas más frecuentes y destructivos y
que afecta a un amplio rango de hospedantes,
causándoles manchas en hojas y frutos, debi-
do al parecer, a los efectos de la toxina cer-
cosporina que al absorber energía lumínica
reacciona con el oxígeno molecular, causando
peroxidación de lípidos y la ruptura de la
membrana celular, dando lugar a la salida de
nutrientes del interior celular.
Con referencia a Alternaria sp. y Pestalo-
tia sp., Acosta et al. (2009) y Muñoz et al.
(2007), indicaron que estos hongos son fre-
cuentes en especies forestales y que general-
mente se encuentran afectado la parte foliar,
como sucedió con M. pubescens. En Quercus
obtusata se considera a Alternaria tenuissima
como un hongo fitopatógeno de gran impor-
tancia por los daños que causa al follaje (Gar-
cía, 2005) y según Flores et al. (2010), Pesta-
lotia sp. es de los principales patógenos pre-
sentes en plantaciones de Teca (Tectona
grandis), asociado a afectaciones en hojas, en
este caso marchitamiento foliar.
Porcentaje de semillas infectadas
La semilla de M. pubescens inoculada con
Nigrospora sp. presentó el mayor porcentaje
de infección, 90%. Trichothecium sp. contai-
fectó 70% y la semilla de M. pubescens
testigo, no presento ningún tipo de signos
asociados a patógenos. Correa, et al. (2012)
identificaron a Nigrospora sp. como un hon-
go fitopatógeno asociado a semilla de Acacia
mangium, Tectona grandis y Gmelina arbó-
rea, como paso con la semilla de M. pubes-
cens, donde Nigrospora sp. causo su detri-
mento. En referencia a Trichothecium sp.,
Mathur y Singh (1993), afirmaron que este es
un patógeno que puede ser llevado externa-
dpp
cpp
ccn dcn
mente en la semilla, ocasionándole deterioro
y mortandad de plántulas en pre o post-
emergencia. Sánchez (2006), señaló que
Trichothecium roseum es un hongo patógeno
muy común en forestales y que se ha encon-
trado asociado a podredumbre de semillas de
Abies, Betula, Castanea, Fagus, Fraxinus,
Pinus sylvestris y Quercus.
CONCLUSIONES
Se encontraron seis géneros de hongos fitopa-
tógenos asociados a M. pubecens, de estos,
Cercospora sp., Pestalotia sp., Alternaría sp.,
y Fumago sp. en la parte foliar y Trichothe-
cium sp. y Nigrospora sp. en semilla. Cer-
cospora sp., Pestalotia sp., Alternaría sp.,
causaron lesiones necróticas y manchas
foliares y Trichothecium sp. y Nigrospora sp.
deterioro y podredumbre de la semilla. M.
pubescen en su parte foliar fue más suscepti-
ble a Cercospora sp., que a Alternaria sp. y
Pestalotia sp. y Nigrospora sp. fue el hongo
que deterioró en mayor proporción la semilla
de esta especie.
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 EVALUACIÓN DEL USO DE TOMOGRAFÍA DE IMPEDANCIA ELÉCTRICA PARA
DETERMINAR LA PRESENCIA DE PUDRICIÓN BASAL DE ESTÍPITE (PBE)
EN CULTIVOS DE PALMA DE ACEITE

Luis Felipe González-Concha 1, Juan Sebastián Hernández2, Edwin David Henao-Henao1,

Mauricio Mosquera-Montoya2, Greicy Andrea Sarria-Villa1y Francia Elena Varón de Agudelo1

1. Cenipalma, Programa de Plagas y Enfermedades. 2. Cenipalma. Evaluación económica y Biometría.

Autor para correspondencia: gsarria@cenipalma.org

Artículo científico, recibido para publicación Junio 4 de 2019. Aceptado Junio 19 de 2109

RESUMEN SUMMARY

La pudrición basal del estipe (PBE) causada por Ganoderma spp., es
la enfermedad más limitante de la palma del Sudeste Asiático. En
Colombia está creciendo su incidencia en áreas donde ha habido varias
renovaciones de palma de aceite. No existe un método que permita la
detección temprana de la PBE, porque cuando se detectan las estructu-
ras de Ganoderma es demasiado tarde para realizar estrategias de
manejo y evitar su diseminación. El objetivo de esta investigación fue
evaluar eficiencia y rentabilidad del uso de la tomografía de impedan-
cia eléctrica (TIE) para la detección temprana de la PBE. Esta investi-
gación se llevó a cabo en Palmeras de la Costa (El Copey, Cesar). Se
seleccionaron 209 Palmas, 138 aparentemente sanas y 71 con basidio-
carpos de Ganoderma. Las palmas se analizaron mediante tomografía
de impedancia eléctrica. La interpretación de estas imágenes fue reali-
zada según el valor mínimo de resistencia eléctrica (Ω). Los resultados
muestran que las palmas enfermas exhiben valores de resistencia eléc-
trica menores a 40Ω, mientras que en las palmas sanas el promedio fue
62Ω. Se logró diferenciar tres grados de degradación del tejido (1-15Ω
mayor degradación, 16-30Ω, intermedia y 31-40Ω menor degrada-
ción). El análisis de costo-beneficio indica que no es factible utilizar la
tomografía de impedancia eléctrica, ya que los costos de determinar si
una palma está afectada con PBE aumentarían de $117/palma a
$85.308/palma. Este resultado es importante porque los cultivadores
de palma afectados por la PBE tenían inquietudes acerca de la viabili-
dad de la TIE para detección temprana de PBE
.
Palabras clave: Ganoderma, detección temprana de enfermeda-
des, Elaeis guineensis, resistencia eléctrica
.
The Basal Stem Rot (BSR) caused by Ganoderma spp., is the most
important disease at oil palm plantations from Southeast Asia. In Co-
lombia, its incidence is increasing at areas where there have been
renovations of oil palm crops. It does not there is a method that allows
for BSR early detection, so when structures of Ganoderma are detect-
ed, it is too late to implement a strategy for controlling
BSR spread. The main goal of this research was to assess the efficacy
and the cost efficiency by using electrical impedance tomography
(EIT) for BSR early detection. This research was carried out at Palm-
eras de la Costa located at El Copey (Cesar). We selected 209 palms,
from which, 138 palms were apparently healthy and, 71 palms with
basidiocarps of Ganoderma. Those palms were analyzed by means of
using electrical impedance tomography. The interpretation of these
images was performed according to the minimum value of electric
resistance (Ω). Our results show that, diseased palms exhibit electrical
resistance values lower than 40Ω, while healthy palms averaged 62Ω.
It was obtained 3 degradation level (1-15Ω maximum degradation, 16-
30Ω medium and 31-40Ω the lower) The cost efficiency analysis
yields that the use of electrical impedance tomography as an early
detection tool is not feasible since costs of scouting if an oil palm tree
is diseased with BSR would increase from COP117/palm to COP
85,308/palm. This is an important result since Colombian growers
willing to detect BSR at early stages, were wondering if the use of EIT
was cost-efficient.
Key words: Ganoderma, disease early detection, Elaeis guineensis,
electric resistance.
González-C., L. F., Hernández, J. S., Henao-H., E. D., Mosquera-M.,
M., Sarria-V., G. A. and Varón de A. F. E. 2019. Assessment on the
use of electrical impedance tomography in order to determine the
presence of basal stem rot (BSR) in oil palm crops. Fitopatología Co-
lombiana 42:11-19

INTRODUCCIÓN
La Pudrición Basal del Estípite (PBE) es el
problema sanitario más devastador para Ma-
lasia e Indonesia, principales productores de
palma de aceite en el mundo, ya que la en-
fermedad ha ocasionado pérdidas económicas
de hasta 500 millones de dólares al año, debi-
do a la disminución en la productividad del
cultivo, la constante muerte de palmas a
causa de la degradación interna de los tejidos
del estípite y el aumento de los ciclos de
renovación que cada vez son más regulares
en las plantaciones del sudeste asiático
(Ommelna et al., 2012).
A partir de pruebas de patogenicidad,
pruebas moleculares y características morfo-
lógicas la enfermedad ha sido asociada a
diferentes especies del género Ganoderma
ampliamente distribuidas en Malasia e Indo-
nesia (Idris, 2013). Se han identificado cuatro
especies de Ganoderma asociadas a la palma
de aceite; G. boninense, G. zonatum, G. mi-
niatocinctum y G. tornatum, siendo Ganode-
rma boninense la especie más importante
debido a su alto grado de patogenicidad.
2019- Fitopatología Colombiana /Volumen 43 No 1
El hongo tiene la capacidad de degradar
componentes de la pared celular como la
lignina (Paterson, 2007) y está asociado con
la pudrición y degradación de las raíces y la
parte basal del estípite de la palma de aceite
impidiendo el transporte del agua y nutrientes
a la parte superior de la palma; provocando
síntomas tales como la aparición y acumula-
ción de flechas, enruanamiento y secamiento
de las hojas bajeras, clorosis de las hojas del
tercio medio, formación de folíolos delgados
y frágiles, acortamiento de las hojas y retraso
en el crecimiento y desarrollo de la palma. En
11
estados avanzados de la enfermedad se pre-
sentan cráteres, acumulación de raíces adven-
ticias y adicionalmente formación de basidio-
carpos en la base del estípite (Fee, 2011;
Mestizo et al., 2012, 2013). La enfermedad
puede propagarse por contacto directo de
raíces de palmas afectadas y raíces de palmas
sanas y además las basidiosporas podrían
estar implicadas en la dispersión de la enfer-
medad (Pilotti et al., 2002; Rees et al., 2007,
2009, 2012; Mercière et al., 2017).
En Colombia la PBE ha tomado impor-
tancia debido al incremento progresivo de la
incidencia en las zonas palmeras Norte y
Centro, donde algunas observaciones de-
muestran que lotes afectados por la enferme-
dad presentan entre el 4 – 12 % de las palmas
enfermas (Mestizo et al, 2012; Tovar &
Nieto, 1998). Como lo reporta Turner (1981)
la identificación de palmas en estados inicia-
les de la enfermedad es difícil debido al desa-
rrollo y comportamiento de ésta, ya que el
proceso de infección y degradación interna de
los tejidos del estípite puede durar entre dos a
cinco años, tiempo en el cual los síntomas
externos asociados a la enfermedad son visi-
bles y ha ocurrido una degradación avanzada
al interior del estípite, situación que permite
que la enfermedad avance sin que haya una
detección temprana. Por esta razón se han
venido desarrollando diferentes trabajos de
investigación a través de nuevas tecnológicas
que permitan identificar palmas en estados
iniciales de la enfermedad.
Las propiedades eléctricas tales como la
impedancia, la capacitancia, la constante
dieléctrica y el factor de disipación parecen
ser herramientas importantes para la detec-
ción temprana de enfermedades en palma.
Khaled et al., 2018, han comprobado median-
te la técnica de espectroscopia dieléctrica que
la impedancia es una de las mejores propie-
dades eléctricas que se puede usar para esti-
mar la gravedad del daño al interior del estí-
pite en palmas afectadas por la enfermedad,
logrando identificar diferentes grados de
severidad al interior del estípite con porcenta-
jes de exactitud superiores al 80 %.
A través de la metodología de espectros-
copia de infrarrojo medio se ha logrado de-
tectar palmas asintomáticas en estados inicia-
les de la enfermedad por medio de los valores
de absorbancia determinados en hojas de
diferentes palmas, ayudando a identificar la
infección de Ganoderma en varios niveles de
afectación (palmas con grados de afectación
leve, moderado y severo), lo que ha permitido
obtener modelos de precisión con exactitudes
mayores al 90 % (Liaghat et al., 2014). Otra
alternativa estudiada en palma de aceite es la
evaluación de los datos obtenidos a través de
mediciones de reflectancia hiperespectral en
condiciones de campo, permitiendo clasificar
cuatro estados de severidad de la enfermedad
(Lelong et al., 2010).
El sistema de tomografía computarizado
transportable de rayos gamma ha sido eva-
12
luado en una serie de pruebas de campo en
plantaciones de palma de aceite en Malasia
demostrando grandes ventajas para la inspec-
ción in situ de estípites de palmas afectadas,
el scanner móvil produce imágenes tomográ-
ficas de alta calidad que diferencian clara-
mente estípites infectados y sanos, con la
capacidad de determinar con precisión la
magnitud y la ubicación de los daños al inte-
rior; a través de una imagen en sección trans-
versal que es esencialmente un mapa de dis-
tribución de la densidad del estípite
(Abdullah et al., 2013).
La tomografía sónica es otra herramienta
con un alto nivel de precisión diseñada para
evaluar la descomposición y degradación de
los tejidos, esta técnica ha permitido detectar
la localización y el tamaño de áreas relacio-
nadas con imágenes tomográficas que repre-
sentan el estado real de los tejidos evaluados.
Se han identificado estados iniciales de la
enfermedad y diferentes niveles de severidad
al interior del estípite con una precisión del
80% (Idris, 2013; Ishaq et al., 2014). Otras
tecnologías relacionadas con las caracteriza-
ciones de las propiedades de la densidad y
velocidad ultrasónica de los estípites de pal-
mas afectadas han sido evaluadas, estos estu-
dios han demostrado que las densidades dis-
minuyen considerablemente, reduciendo así
la rigidez y estructura de los estípites en las
áreas afectadas por el patógeno (Najmie et
al., 2011).
Por otra parte Bieker and Rust, 2010,
desarrollaron una técnica denominada tomo-
grafía de impedancia eléctrica empleada en
especies forestales que es utilizada en palma
de aceite, la cual consiste en generar impulsos
eléctricos al interior del estípite con el fin de
detectar pudriciones o anormalidades basados
en los valores máximos o mínimos de resis-
tencia eléctrica. Nurnadiah et al., 2014, han
realizado estudios a través de esta metodolo-
gía logrando detectar palmas sanas e infecta-
das por el patógeno, obteniendo lecturas bajas
en valores de resistencia eléctrica en palmas
afectadas en comparación con los valores
altos de resistencia eléctrica obtenidos para
palmas sanas. Igualmente Cenipalma evaluó
la tomografía de impedancia eléctrica en las
Zonas palmeras Centro y Norte del país lo-
grando identificar palmas enfermas, palmas
asintomáticas afectadas por el patógeno y
palmas sanas a través de los valores de resis-
tencia eléctrica máximos y mínimos registra-
dos en las evaluaciones (Arango and
Martínez, 2014). Finalmente a través de re-
cientes estudios la técnica ha sido mejorada
en cuanto al correcto análisis e interpretación
de los tomogramas obtenidos pudiendo iden-
tificar palmas asintomáticas confirmando la
validez y utilidad del equipo para detectar
palmas afectadas por la enfermedad (Arango
et al., 2016).
Por lo anterior, en este trabajo se planteó
la necesidad de evaluar si la tomografía eléc-
trica puede constituirse en una herramienta de
2019- Fitopatología Colombiana /Volumen 43 No 1
detección temprana de la PBE, que permita
llevar a cabo intervenciones más tempranas
con el fin de disminuir las posibles fuentes de
inóculo de la enfermedad, así como la dise-
minación del patógeno en los lotes del culti-
vo.
MATERIALES Y MÉTODOS
Localización
La investigación se realizó en la Zona Norte
palmera de Colombia, en la plantación Pal-
meras de la Costa S.A ubicada el municipio
del Copey – Cesar (10° 6'44.45" N 74°
1'24.93"O), la cual presenta una altitud de 90
msnm, precipitación promedio anual de 900
mm, temperatura promedio de 34 °C y una
Humedad Relativa del 68 %.
Evaluación de palmas a través del tomó-
grafo de impedancia eléctrica
En la evaluación del estado interno de las
palmas se utilizó el tomógrafo de impedancia
eléctrica Oil PalmTronic para determinar los
valores de resistencia eléctrica (Ω) asociados
a tanto a palmas enfermas como a sanas. Se
evaluaron palmas afectadas de diferentes
edades y cultivares, además de las seis pal-
mas circundantes a éstas. Se limpió con ayu-
da de palín la base del estípite a 20 cm de
altura de la superficie del suelo. Cuando la
palma presentaba acumulación de raíces
adventicias la evaluación se realizó a 20 cm
de altura a partir de estas. Luego de tener la
base del estípite completamente limpia, se
procedió a insertar doce puntillas estériles de
acero inoxidable de 3 ½” equidistantes entre
sí y al mismo nivel respecto al diámetro del
estípite el cual fue medido con ayuda de una
cinta métrica. Estas puntillas sirvieron como
receptores de la corriente eléctrica proporcio-
nada por el tomógrafo y fueron conectadas a
los electrodos del equipo. Los electrodos
fueron distribuidos en dirección contraria a
las manecillas del reloj y el primer electrodo
del equipo siempre estuvo direccionado hacia
el norte geográfico.
Posteriormente, se ingresó al equipo la in-
formación respecto a los datos de ubicación
de cada una de las palmas evaluadas (Línea –
Palma), altura a la cual se realizó la medida
(20 cm), número de puntos de medida (co-
rrespondientes a los doce electrodos), diáme-
tro del estípite (cm), distancia entre los pun-
tos y la corriente eléctrica a aplicar (automá-
tica) con la finalidad de activar el sistema
multicanal de medida de la resistencia eléctri-
ca y así capturar la información.
Realizadas las mediciones los datos se
descargaron a través del software Picus Q73
y la distribución espacial de la resistencia
eléctrica al interior del estípite fue calculada
por el equipo, obteniendo zonas con valores
de mayor y menor resistencia eléctrica repre-
sentadas a través de un tomograma de las
secciones transversales de las palmas evalua-
das. El tomograma fue posteriormente trans-
formado en el rango 1 – 95 Ω para obtener
una correlación más precisa respecto al esta-
do real de los tejidos de las áreas afectadas.
Finalmente, las palmas evaluadas fueron
georreferenciadas a través de la herramienta
Cyber Tracker versión 3.418.
Análisis descriptivo de la distribución
espacial de la enfermedad Pudrición Basal
del Estípite (PBE)
Con el polígono de la plantación Palmeras de
la Costa S.A y los puntos georreferenciados
de la enfermedad durante un período de año y
medio (2016 y primer semestre de 2017), se
realizó descripción y análisis de la distribu-
ción espacial de la enfermedad a través de
patrones puntuales, el patrón de la enferme-
dad fue determinado por pruebas estadísticas
gráficas. Finalmente se realizó la estimación
Kernel de la intensidad de la enfermedad la
cual se vio reflejada en un mapa de calor y se
relacionaron espacialmente los valores de
resistencia eléctrica de las palmas evaluadas
afectadas por la PBE en el polígono de la
plantación.
A través de las pruebas estadísticas gráfi-
cas se pudo determinar el patrón de la enfer-
medad en campo, estas pruebas se construye-
ron a través de funciones teóricas simuladas
con base en un patrón de aleatoriedad. Para
este caso se tuvieron tres funciones la Fun-
ción G, la Función F y la Función K, cada
función es independiente y consta de tres
elementos una función teórica calculada bajo
el supuesto de aleatoriedad, unas bandas de
confianza en las cuales se mueve esa función
teórica y una función calculada que se cons-
truye con los datos obtenidos.
La interpretación de las gráficas se realizó
teniendo en cuenta: la Función G, si la fun-
ción calculada está por encima de la función
teórica y de las bandas de confianza se dice
que obedece a un patrón agregado. Para la
Función F si la función calculada está por
debajo de la función teórica y de las bandas
de confianza se dice que la enfermedad pre-
senta un patrón agregado y finalmente para la
Función K si la función calculada se encuen-
tra por arriba de la función teórica y de las
bandas de confianza la enfermedad presenta
un patrón agregado.
Análisis Estadístico
Para la recolección de la información y debi-
do a que se deseaban observar palmas con
presencia de la enfermedad, se realizó un
muestreo de los casos reportados y las palmas
que componen el primer anillo de la palma
con PBE. La variable de interés fue la resis-
tencia eléctrica mínima (Ω). El análisis se
realizó a través del sistema estadístico R, el
cual consistió en usar pruebas de normalidad
para los datos obtenidos de las palmas sanas y
enfermas. Debido a que los resultados de las
pruebas rechazaron la hipótesis de normali-
dad se decidió llevar a cabo el análisis por
medio de pruebas no paramétricas. Dado que
es de gran interés mostrar la dinámica de la
PBE se estimó un mapa de calor basado en la
estimación Kernel de la intensidad de la en-
fermedad y un mapa que relacionó la distri-
bución espacial de los casos de la enfermedad
y los valores de resistencia eléctrica de las
palmas afectadas que fueron evaluadas.
Evaluación de costos del uso del tomógrafo
de impedancia eléctrica como una herra-
mienta de detección temprana para la PBE
Se realizó la estimación del costo de control
en el que incurre la plantación Palmeras de la
Costa S.A., para tratar una de las principales
amenazas sanitarias de su cultivo. El análisis
se realizó en conjunto con el Programa de
Economía Agrícola y se consideraron dos
alternativas para el censo de la enfermedad.
Específicamente, se consideraron el censo
tradicionalmente realizado por la plantación,
en comparación con el uso del tomógrafo
como herramienta para el censo. En lo que
concierne al manejo de la enfermedad, dado
que este no varía en ninguna de las dos alter-
nativas se tuvieron en cuenta los mismos
costos.
Para la estimación de costos se considera-
ron los insumos requeridos, las herramientas
utilizadas, los equipos que intervienen según
su dedicación a la labor y la mano de obra
necesaria para llevarla a cabo.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Evaluación de palmas a través del tomó-
grafo de impedancia eléctrica.
En este estudio se evaluaron en total 209
tomogramas de los cuales 71 correspondieron
a palmas afectadas por la enfermedad y 138 a
palmas sanas, permitiendo así realizar un
análisis descriptivo de los valores de resisten-
cia eléctrica mínima (Ω) y el comportamiento
de esta variable en los dos grupos de palmas
evaluadas. Se determinó un rango de resis-
tencia eléctrica mínima comprendido entre 1
– 40 Ω que permitió identificar palmas que se
encontraban afectadas por la enfermedad,
estos valores se presentaron en áreas específi-
cas de los estípites evaluados indicando la
presencia de tejido enfermo, las palmas sanas
presentaron valores mayores a 40 Ω indican-
do la presencia de tejido sano al interior del
estípite.
Tabla 1. Estadística Descriptiva de los valores de resistencia eléctrica mínima (Ω) de las palmas evaluadas
(sanas y enfermas).
Palmas Sanas
Min 1er Cuartil Mediana Promedio
42,31 53,32 60,80 62,24
Palmas Enfermas
Min 1er Cuartil Mediana
2,08 7,35 9,69
2019- Fitopatología Colombiana /Volumen 43 No 1
En la variable de resistencia eléctrica mí-
nima de las palmas enfermas las medidas de
tendencia central Media (13,65) y Mediana
(9,69) fueron diferentes entre sí, lo que mos-
tró que existía asimetría en la distribución de
los datos; además estos presentaron alto gra-
do de variabilidad basado en su Coeficiente
de Variación (CV = 69,42%). Para las palmas
sanas las medidas de tendencia central Media
(62,24) y Mediana (60,80) fueron semejantes
entre sí en comparación al de las palmas
enfermas, mostrando mayor tendencia de
simetría en la distribución de los datos los
cuales no fueron muy variables (CV =
17,88%) (Tabla, 1). Esto se vio reflejado en
las gráficas de Box Plot en la cual los datos
presentaron distribución más simétrica en
comparación con la gráfica de Box Plot de las
palmas enfermas en donde se observó una
gran fuente de variación en los datos obteni-
dos, además de la presencia de valores atípi-
cos (Figura 1). Con la prueba de normalidad
(Shapirok – Wilk) de los datos obtenidos se
determinó que los valores no obedecían a una
distribución normal en los dos grupos de
palmas evaluados (palmas sanas y palmas
enfermas) en donde el valor p fue menor a
0,05 para los dos casos (Figura 2). La prueba
no paramétrica (Wilcocoxon) demostró que
existe diferencias significativas entre los
valores de la mediana en cuanto a la resisten-
cia eléctrica mínima entre palmas sanas y
enfermas, puesto que el valor p fue menor a
0.05 (Figura 3).
La gran variabilidad en los datos obteni-
dos en las palmas enfermas permitió identifi-
car diferentes grados de degradación relacio-
nados con el daño o afectación al interior del
estípite, obteniendo tres grados de severidad
(Tabla 2). Se encontraron palmas con valores
de resistencia eléctrica mínima entre 1 – 15 Ω
(Fig. 4) que presentaron mayor grado de
degradación al interior del estípite, palmas
con valores de resistencia eléctrica mínima
entre 16 – 30 Ω (Fig. 5) con degradación
intermedia y finalmente palmas entre 31 – 40
Ω (Fig. 6) con degradación menor al interior
del estípite indicando estados iniciales de la
enfermedad.
Para las palmas sanas los valores de resis-
tencia eléctrica mínima fueron superiores a
40 Ω estos representan la presencia de tejido
sano al interior del estípite (Fig. 7). Es impor-
tante mencionar que el mayor grado de de-
gradación hace referencia al grado de des-
composición de los tejidos y no al área afec-
tada. Esta clasificación se logró realizar a
nivel observacional a través de la correlación
3er Cuartil Max Desv.Est CV
69,45 93,27 11,13 17,88%
Promedio 3er Cuartil Max Desv.Est CV
13,65 17,93 48,61 9 69,42%
13
 existente entre los tomogramas obtenidos, el
estado real de los tejidos de las palmas eva-
luadas y los valores de resistencia eléctrica
mínima obtenidos a través de las evaluacio-
nes realizadas con el tomógrafo de impedan-
cia eléctrica.
Tabla 2. Valores de resistencia eléctrica mínima
encontrados en palmas afectadas por PBE, según
grado de severidad.
Rango Grado de No. De palmas
(Ω) Severidad evaluadas
1 – 15 3 50
16 – 30 2 15
31 – 40 1 6

En los tomogramas analizados en el ran-

go 1 – 95 Ω para las palmas enfermas, los
valores de resistencia eléctrica mínima están
representados gráficamente en las áreas en
donde se presentan coloraciones más claras,
Figura 1. Gráficas de Box Plott para los valores de resistencia eléctrica mínima (Ω) de las palmas eva- las tonalidades azul – verde corresponden al
luadas. área de mayor degradación (Figura 4), las
tonalidades amarillo – naranja al área de
degradación intermedia (Figura 5) y las tona-
lidades naranja – rojizas más tenues a las
áreas con estados iniciales de la enfermedad
(Figura 6), comparadas con la tonalidad vino
tinto generalizada y homogénea presente en
los tomogramas de las palmas sanas, donde
los valores de resistencia eléctrica mínima
son mayores a 40 Ω (Figura 7).
Los valores de resistencia eléctrica míni-
ma encontrados concuerdan con los trabajos
realizados por (Nicolotti et al., 2003) en
evaluaciones realizadas con tomografía eléc-
trica en especies vegetales, obteniendo valo-
res de baja resistividad relacionados con alta
humedad en los tejidos afectados, como re-
sultado de la liberación constante de iones
que se da en los procesos de degradación
ocasionados por hongos patógenos.
Nurnadiah et al., 2014, encontraron valores
de resistencia eléctrica entre 0 – 24 Ω en
palmas afectadas por Pudrición basal del
estípite con presencia de basidiocarpos, com-
Figura 2. Prueba de normalidad Shapirok – Wilk para los valores obtenidos de resistencia eléctrica parados con valores mayores a 25 Ω encon-
mínima (Ω) de las palmas evaluadas. trados para palmas sanas. Los bajos valores
de resistencia eléctrica en palmas enfermas se
presentaron debido al aumento de cationes en
los tejidos afectados; es decir hay más iones
libres en los tejidos descompuestos que en los
tejidos sanos disminuyendo así la lectura de
los valores de resistencia eléctrica.
En otras investigaciones realizadas a tra-
vés del uso de tomografía ultrasónica y sóni-
ca se ha encontrado que en palmas afectadas
por Ganoderma boninense la densidad de los
estípites afectados se reduce en un 50% com-
parados con los estípites de palmas sanas, lo
que quiere decir que la velocidad de onda
ultrasónica es menor al interior de los estípi-
tes afectados por el patógeno (Najmie et al.,
2011; Idris, 2013; Ishaq et al., 2014). Otros
tipos de problemas sanitarios han sido estu-
diados en especies forestales a través de dife-
Figura 3. Prueba no paramétrica (Wilcoxon), Valor p = 2,2 x E-16. rentes metodologías basadas en el uso de
tomografías, por ejemplo Lin et al., 2013,
detectaron la descomposición generada por
14 2019- Fitopatología Colombiana /Volumen 43 No 1
2019- Fitopatología Colombiana /Volumen 43 No 1 15
Phellinus noxius en Sterculia foetida median-
te técnicas de evaluación no destructiva como
la tomografía de onda ultrasónica y la resis-
tencia a la penetración de los tejidos obser-
vando valores menores de estas dos propie-
dades comparados con los valores presentes
en árboles sanos. Esta técnica también fue
utilizada por (Juan, 2011) para detectar el
deterioro de los tejidos en la palma real Roys-
tonea regia. De igual manera Lin et al., 2016,
detectaron el área y la ubicación general del
daño generado por termitas en el pino Arau-
caria cunninghamii a través de velocidades
de onda transversales de los tallos de los
pinos, obteniendo menores velocidades de
onda ultrasónica en los pinos afectados por
estos insectos. Figura 8. Análisis del patrón espacial de la Pudrición Basal del Estípite a través de pruebas estadísticas
gráficas
Independientemente del tipo de tomogra-
fía utilizada estas permiten reconstruir a
través de imágenes una sección transversal
mediante mediciones realizadas en la superfi-
cie de un objeto y medir algún tipo de energía
que circule a través del mismo. Diferentes
tipos de energía pueden proporcionar infor-
mación sobre propiedades físicas del objeto
investigado, por ejemplo, las ondas ultrasóni-
cas proporcionan información sobre las pro-
piedades elásticas de la estructura de la made-
ra y los campos eléctricos proporcionan in-
formación sobre la conductividad (contenido
de humedad y concentración iónica) paráme-
tros fisicoquímicos claves para determinar la
descomposición interna en los tallos afecta-
dos por enfermedades en muchas especies
forestales.

Análisis descriptivo de la distribución

espacial de la enfermedad Pudrición basal
del estípite (PBE).

Con los datos de la enfermedad obtenidos se

construyeron pruebas estadísticas gráficas
para determinar el patrón de la enfermedad en
campo (Figura 8), adicionalmente se constru-
yó el mapa de calor en el cual se estimó la
intensidad de la PBE y se construyó un se-
gundo mapa para relacionar espacialmente
los valores de resistencia eléctrica mínima
encontrados en las palmas evaluadas en la
plantación.
Observando los resultados obtenidos en
las estimaciones de las funciones F, G y K
(Figura 9) se puede ver que en los tres casos
el comportamiento del patrón es agregado. Es
decir, cuando una palma es detectada con
pudrición basal de estípite existe un alto
riesgo de que las palmas que la rodean sean
detectadas con PBE más adelante.
La intensidad de la enfermedad es un fac-
tor importante en el desarrollo del análisis
espacial en la plantación, ya que esta se defi-
ne como el número promedio de eventos
(casos de PBE) por unidad de área. Como
resultado en el mapa de calor (Figura 9) se
evidencia que la intensidad de la enfermedad
es mayor en la zona Norte de la plantación y
va disminuyendo paulatinamente hacia el sur,
Figura 9. Izquierda. Estimación Kernel de la intensidad de la Pudrición Basal del Estípite. Derecha.
Mapa de burbujas de la relación espacial de la variable resistencia eléctrica mínima en la plantación
Palmeras de la Costa S.A.
también podemos observar que la intensidad
de la enfermedad no es constante a lo largo
de la plantación lo que indica que no es un
evento aleatorio o un proceso Poisson, sino
un evento que tiene un patrón agregado es
decir de que la presencia de un caso de PBE
atrae más eventos en un área determinada a
través del tiempo. Esto es importante también
ya que en la zona Norte de la plantación se
encuentran los lotes más viejos en donde se
tienen dos etapas o ciclos de renovación
basados en el sistema “underplanting”, donde
existe mayor presión de inóculo, que se con-
firma con el mapa (Figura 9) en el que se
visualizan las palmas en estados más avanza-
dos de la enfermedad. Las palmas de esta
zona presentan valores de resistencia eléctrica
entre 1 – 30 Ω (valores representados por
burbujas o círculos de tamaño pequeño e
intermedio); que corresponden a grados 3 y 2
de severidad, convirtiéndose en un foco que
ha sido probablemente la fuente de disemina-
ción de la enfermedad hacia los lotes más
nuevos ubicados en el centro y sur de la plan-
tación.
Estos resultados concuerdan con estudios
realizados en condiciones de campo en Mala-
sia por Assis et al., 2015, en los cuales se
identificó espacialmente el patrón de la PBE
a través del análisis de patrones puntuales
basados en pruebas estadísticas gráficas,
donde se encontró que la distribución de las
palmas infectadas por la enfermedad en todas
las áreas estudiadas fue agregada indicando
que la propagación puede ocurrir a través del
contacto de raíces infectadas y raíces sanas
como lo sugieren muchos estudios realizados
anteriormente.
Análisis de costos Manejo de la pudrición
basal causada por Ganoderma

16 2019- Fitopatología Colombiana /Volumen 43 No 1


Se determinó que la estrategia actual de ma-
nejo de la Pudrición basal del estípite (PBE)
causada por Ganoderma spp está conformada
por los procesos de censo de plagas y enfer-
medades, planeación de tratamiento de pal-
mas afectadas por PBE y erradicación de
palmas enfermas.
Censo de plagas y enfermedades
Manejo plantación: esta labor es realizada por
doce personas que logran cubrir las 3.200 ha
que conforman la plantación. Los operarios
van revisando las palmas a lomo de mula y
para el caso específico de la PBE, van en
busca de estructuras visibles que evidencian
la presencia del hongo (basidiocarpos). El
rendimiento estimado para los operarios que
realizan el censo sanitario fue de 44 ha al día
y el jornal, incluyendo prestaciones de ley,
tiene un valor de $61.150. En consecuencia,
el costo de censar una hectárea es de $1.390 y
dado que se llevan a cabo 12 censos en el año
(uno por mes), se concluye que el censo anual
por hectárea asciende a $16.680 y por palma
este costo es de $117 al año.
Uso del tomógrafo de impedancia eléctrica
como herramienta para censo
Costo de adquisición del tomógrafo: este
dispositivo se compró en el segundo semestre
de 2012 por un valor de €8.585 (euros), a lo
cual hay que sumarle el valor de impuestos y
nacionalización, que se asumió del 25%. Es
decir, al cambio de 2017, el equipo costaba
cerca de 45 millones de pesos. Se asumió que
el equipo tiene una vida útil de 7 años para el
cálculo del costo fijo del equipo. Asumiendo
que en el año se trabajan 240 días en censo de
plagas y enfermedades (lunes a viernes), se
estima que el costo por día del tomógrafo es
de $26.786. Adicionalmente, en un día se
puede alcanzar a evaluar en promedio 28
palmas con el tomógrafo, lo cual indica que
el costo fijo de evaluar una palma con el
tomógrafo es de $957.
Adicionalmente, se necesitan dos opera-
rios, uno que hace la labor de “descarpetar”
las palmas en las cuales se va a utilizar el
tomógrafo, dispone los clavos en las palmas
que sirven de punto de contacto para los
electrodos del equipo (operario de campo). El
otro operario debe tener nivel educativo de
tecnólogo, porque es el responsable de hacer
las lecturas en el tomógrafo. Para el primero
se establece una remuneración correspondien-
te a un salario mínimo y para el segundo, la
remuneración es equivalente a dos salarios
mínimos. En este sentido, el día de mano de
obra para el censo tendría un costo de
$154.183. Considerando el mismo rendimien-
to de 28 palmas atendidas al día se llega a que
el costo por palma de la mano de obra es de
$5.507.
En síntesis, a las labores que ya lleva a
cabo la plantación para detección y manejo ción a los residuos de palma de una mezcla
de PBE por Ganoderma, se les debería sumar líquida compuesta por Mancozeb (2,5 g/l),
el costo fijo de utilización del tomógrafo Fipronil (1.2 ml/l) y Kasugamicina (1,5 ml/l).
($957/palma) y el de la mano de obra para su Por “desmenuzar la palma” se entiende el
operación ($5.507/palma). Es decir, a cada proceso de retirar los tejidos afectados con el
palma en la que se haga lectura del tomógrafo fin de proceder al flameo de los mismos. El
se le deben sumar $6.463/palma, que con rendimiento de la labor de erradicación es de
administración asciende a $7.109/palma. 2 palmas al día, es decir, una cuadrilla de dos
Dado que este proceso se lleva a cabo doce operarios es capaz de atender dos palmas
veces al año, el costo anual del censo ascien- enfermas por PBE. Al considerar el costo de
de a $85.308/palma. En este orden de ideas, los productos químicos, el combustible y la
el censo anual con tomógrafo ascendería a mano de obra, se llega a un total de
12´199.044/ha, lo cual a todas luces resulta $123.728/día de una cuadrilla dedicada a
inviable. De acuerdo con lo anterior, el tomó- tratar la PBE, equivalente a $61.864 por
grafo de impedancia eléctrica sólo es conce- palma. El costo total de la operación de bús-
bible en la perspectiva del trabajo de la inves- queda de casos de palmas enfermas, trata-
tigación y de diagnóstico, pero no debe con- miento del caso y la planeación de labores
siderarse una herramienta práctica. asciende a $68.179/palma.
Tabla 3. Estimación de costos del uso del tomógrafo de impedancia eléctrica en la plantación Palmeras de
la Costa S.A
Modelo plantación
Censo Fitosanitario
Rendimiento 44 ha/día Jornal $ 61.150
Costo para censar una hectárea $ 1.390
Se realizan 12 censos al año para un costo anual de $ 16.680/ha
Censo Anual por palma: $ 117/palma
Tomógrafo eléctrico
Censo con tomógrafo
Tomógrafo
Precio tomógrafo = $45.000.000
Vida útil = 7 años.
Censos año = 240 días
Costo Tomógrafo por día= $ 26.786/día
Rendimiento de evaluación 28 palmas/día
Costo Fijo de Evaluación = $ 957/palma
Dos operarios (Campo y Tecnólogo)
Costo de mano de obra = $ 154.183/día
Rendimiento de 28 palmas/día
Costo de la mano de obra = $ 5.507/palma
Costo de Evaluación = $ 6.464/palma
Costo por administración (10% del Costo de la evaluación = $ 646/palma)
Costo total una evaluación = $ 7.110/palma
Costo doce evaluaciones por palma al año: $85.308/palma
Costo censo anual de censar con tomógrafo una hectárea: $12´199.044/ha
Manejo
Se necesitan dos operarios.
Costo insumos y mano de obra $123.728/día equivalente a $ 61.864/palma
Costo censo más administración = $ 61.981
Costo por administración (censo + manejo = $ 6.198)
Costo Total = $ 68.179/palma
Planeación de palmas a tratar: en la pla- Teniendo en cuenta los costos de los dos
neación de las actividades participa el perso- escenarios (Tabla 3) se realizó un ejercicio
nal de la plantación que planea las labores y para estimar el costo del escenario hipotético
las supervisa. Son ellos quienes revisan la en el cual una plantación decidiera realizar
información reportada en los censos y asig- censos palma a palma a través del tomógrafo.
nan los operarios encargados de llevar a cabo
las labores de manejo de la enfermedad. Con CONCLUSIONES
el fin de estimar el valor de personal y equi-
pos que participan en la planeación, se asumi- El presente estudio demuestra que el tomó-
rá que su costo es del 10% del costo variable grafo de impedancia eléctrica es una herra-
de la labor. mienta de diagnóstico valiosa para la investi-
gación, que permite identificar palmas afec-
Erradicación de palmas con PBE por Ga- tadas por la Pudrición basal del estípite en
noderma diferentes grados de severidad o degradación
del estípite a través de valores bajos de resis-
Esta labor es realizada por dos operarios y tencia eléctrica comprendidos entre 1 – 40 Ω,
consiste en tumbar las palmas con palín, además de la relación de estos valores con
desmenuzar la palma, flamear los tejidos imágenes tomográficas que permiten diferen-
afectados por el hongo y realizar una aplica- ciar tejidos afectados por la enfermedad y
2019- Fitopatología Colombiana /Volumen 43 No 1 17
tejidos sanos en áreas específicas al interior
del estípite.
La enfermedad se encuentra distribuida
espacialmente en la plantación a través de un
patrón puntual agregado, lo que quiere decir
que la presencia de un caso de la enfermedad
atrae más eventos en un área determinada a
través del tiempo, indicando la presencia de
focos en ciertas áreas de la plantación.
La intensidad de la Pudrición basal del estípi-
te fue mayor en la zona norte de la planta-
ción, donde existe mayor número promedio
de casos por unidad de área, y por ende ma-
yor presión de inóculo, convirtiéndose en
fuente de diseminación de la enfermedad
hacia los demás lotes de la plantación.
Es indispensable continuar trabajando
con nuevas herramientas que permitan reali-
zar un diagnóstico temprano y comprender el
comportamiento epidemiológico de la enfer-
medad a través del desarrollo de trabajos
interdisciplinarios que ayuden a establecer
estrategias de manejo integradas de la enfer-
medad.
En cuanto a la parte económica, el uso del
tomógrafo incrementaría el costo de tratar
una palma en 10,5%.
AGRADECIMIENTOS
Los autores agradecen a Cenipalma, al Fondo
de Fomento Palmero por la financiación de
este trabajo y a la Plantación Palmeras de la
Costa S.A, sus directivas y equipo Técnico
por su apoyo financiero y logístico durante la
realización de este trabajo.
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2019- Fitopatología Colombiana /Volumen 43 No 1 19
 IDENTIFICACIÓN DE Sclerotinia sclerotiorum COMO FITOPATÓGENO DEL FRAILEJÓN
Espeletia grandiflora EN EL PARQUE NACIONAL NATURAL CHINGAZA
Natalia María Corredor-Rodríguez, Lady Shirley Delgadillo-Pulido y Hugo Mauricio Jiménez-Melo

Departamento de Biología, Facultad de Ciencia y Tecnología, Universidad Pedagógica Nacional

Universidad Pedagógica Nacional, Bogotá, D.C., (Colombia)

Dirección de contacto: natico112012@gmail.com shirleydelgadillo71@gmail.com hmjm@yahoo.com

Artículo científico, recibido para publicación mayo 14 de 2019. Aceptado junio 19 de 2019

RESUMEN
En la siguiente investigación se identificó al hongo Sclerotinia sclero-
tiorum como fitopatógeno del frailejón Espeletia grandiflora en el
Parque Nacional Natural Chingaza, el cual produce podredumbre
blanca en sus hojas. Se seleccionó el sendero Piedras Gordas donde se
evidencia frailejones con podredumbre blanca la cual afecta su creci-
miento y desarrollo, ocasionando su posterior muerte. Se realizó el
muestreo en temporada de lluvia, debido a que la humedad permite
que el hongo fitopatógeno tenga mayor infestación y desarrollo en el
área foliar del frailejón. Se realizó una observación y muestreo en tres
parcelas: parte inicial, mitad y final del sendero, se colectaron dos
hojas infectadas por cada parcela estudiada, a las cuales se le calculo el
área foliar afectada y luego fueron llevadas a cámara húmeda para el
posterior aislamiento e identificación del hongo, teniendo en cuenta
sus características morfológicas y la relación fitopatógena que estable-
ce con el frailejón.
SUMMARY
In the following investigation, the micro fungus Sclerotinia scleroti-
orum was identified as a phytopathogenic of the frailejon Espeletia
grandiflora in the Chingaza National Natural Park, which produces
white rot in its leaves. The Piedras Gordas trail was selected where
there are frailejones with white rot which affects their growth and
development, causing their subsequent death. Sampling was carried
out in the rainy season, because the humidity allows the phytopatho-
genic hongo to have more infestation and development in the foliar
area of the frailejon. An observation and sampling was carried out in
three plots: initial part, half and end of the path, two infected leaves
were collected for each plot studied, to which the affected leaf area
was calculated and then taken to a humid chamber for subsequent
isolation and identification of the hongo, taking into account its mor-
phological characteristics and the phytopathogenic relationship estab-
lished with the frailejón.

Palabras claves: Sclerotinia sclerotiorum, podredumbre blanca, Espe- Keywords: Sclerotinia sclerotiorum, white rot, Espeletia grandiflora,
letia grandiflora, Frailejón, Parque Nacional Natural Chingaza Frailejon, Natural National Park Chingaza.

Corredor-R. N. M., Delgadillo-P., L. S. and Jiménez-M., H. 2019.

Identification of Sclerotinia sclerotiorum as phytopathogen of
frailejón Espeletia grandiflora in the national natural park chingaza
Fitopatología Colombiana 42: 20-24

INTRODUCCIÓN
En la actualidad, nuestros ecosistemas
colombianos como los Páramos pese a su
importancia ecológica al almacenar y
proporcionar agua, están siendo afectados por
diferentes aspectos naturales como la
evolución en la misma dinámica del
ecosistema; actividades antrópicas como
pastoreo, explotación de minerales, cultivos
agrícolas, ganadería e incluso el uso
indiscriminado de agua al desviar su cauce,
causando su contaminación o desperdicio, así
como también la presencia de especies
invasoras al ecosistema, quienes usan un
organismo por un tiempo o por todo su ciclo
de vida alterando al Páramo; de acuerdo a
Medina M. p.13. (Citado por CAR, 2018) .
Estos procesos día a día desfavorecen la
existencia del Páramo y hace que los
organismos se adapten en respuesta a las
diferentes situaciones presentadas en el
ecosistema, paralelamente se evidencia el
aprovechamiento de los recursos naturales
para beneficio propio por parte de las
comunidades e individuos aledaños al Páramo
y la ciudadanía en general, quienes no tienen
en cuenta el nivel de impacto al equilibrio del
ecosistema, conllevando a desarticular
relaciones a futuro en el Páramo, por lo tanto
debe ser una necesidad conservarlo.
Así mismo, en la Resolución 1814 de
2015 mediante la delimitación de zonas de
protección y desarrollo de los recursos
naturales se reflexiona sobre la protección de
las zonas de importancia ecológica, al brindar
una salud óptima del ecosistema en su
totalidad, trabajo arduo del Estado, entidades
territoriales y de la comunidad, por tanto las
intervenciones en este medio no deben alterar
el ecosistema, y las investigaciones deben
coadyuvar a su mejora, así como lo afirma :
“el país se compromete a establecer
estrategias de conservación in situ de la
diversidad biológica, (...) En Colombia la
responsabilidad por el manejo de los recursos
naturales recae en todas las autoridades del
Estado, pero también en la comunidad.”
(Ministerio de Ambiente y Desarrollo
sostenible, Resolución 1814 de 2015 p. 1-2),
reafirmando que la responsabilidad por la
conservación de la biodiversidad es de todos
y no de unos pocos individuos.
Por lo tanto, si las personas observan
cambios en los ecosistemas y si pueden
contribuir a su descripción y reporte, sería de
gran importancia para la conservación de los
mismos.
Precisamente el Plan de Manejo del
Parque Nacional Natural Chingaza expuesto
por el Ministerio de ambiente y desarrollo
mediante Parques Nacionales Naturales de
Colombia en la Resolución 0389 del 12 de
septiembre de 2017, adopta el propósito de
conservar, recuperar y controlar la flora y
fauna del área; debido a que los recursos
existentes son invaluables.
En el Parque Nacional Natural Chingaza
los ecosistemas predominantes son Bosques
Alto Andino, Subandinos y Páramos; el clima
oscila entre 4 ° C a 21, 5°C, siendo refugio de
fauna y flora, así mismo, de allí nacen ríos

20 2019- Fitopatología Colombiana /Volumen 43 No 1

como el Guatiquía y Frío, y las abundantes
lluvias crean lagunas como la de Siecha y
Chingaza que se observan en este Parque
Nacional Natural (CAR, 2003). De igual
manera, este Parque es uno de los más
importantes para Bogotá, debido a que desde
el embalse de Chusque se obtiene el 70% del
agua que abastece a los habitantes de la
capital y poblaciones aledañas para el diario
vivir.
El Parque Nacional Natural Chingaza
posee una gran cantidad de fauna como los
patos, gallinetas azules, águilas, cóndores,
chivos, osos de anteojos, venados colorados,
venados cola blanca, dantas, ardillas, zorros,
felinos como el puma y el tigrillo, y muchas
otras; algunas de las cuales se encuentran en
peligro de extinción (Parques Nacionales
Naturales de Colombia, 2019). También se
cuenta con la presencia de microorganismos
como bacterias, microalgas, protozoos,
hongos, entre otros.
Los páramos según Hofstede, Calles,
López, Polanco, Torres, Ulloa, Vásquez y
Cerra (2014) forman una eco-región
neotropical a una gran altura, se encuentran
distribuidos entre de los Andes húmedos
entre Perú, Ecuador, Colombia y Venezuela,
con extensiones hasta Costa Rica y Panamá.
Tienen importancia para millones de personas
y son hábitats en los que se encuentran
especies endémicas, estos ecosistemas son
una fuente de agua.
Colombia tiene presencia de Páramos que
según Andrade, Guzmán, Tosse, Gnecco y
Fajardo (2002), se encuentra en alturas desde
los 2.700 m.s.n.m a 4.000 m.s.n.m ó 5.000
m.s.n.m, se caracteriza por tener vegetación
arbustiva entre los más representativos el
frailejón como lo son del género Espeletia,
Espeletiopsis, Libanothamnus, y Paramiflos,
también se encuentran árnicas, musgos de
pantano y líquenes, que son importantes para
la conservación de la humedad.
El frailejón es una de las plantas más
representativas e importantes de los Páramos,
para el medio ambiente y la conservación de
diferentes especies que establecen relación
con este organismo endémico, se pueden
encontrar en países como Colombia, Perú y
Ecuador, estos organismos tienen la función
de regular el ecosistema donde habitan, al
lograr absorber agua de la neblina presente en
los Páramos y conservarla para su posterior
uso como tiempos de sequías, permitiendo un
continuo flujo de agua que llega a ríos y
quebradas, también es una fuente de alimento
y refugio para insectos, reptiles y aves
(Parques Nacionales Naturales de Colombia,
2019).
Los frailejones como organismos
endémicos, están siendo afectados en su papel
ecológico por un hongo estableciendo una
relación fitopatógena, que altera su
crecimiento y desarrollo, ocasionándole
entorchamiento y necrosis que produce la
muerte prematura de los frailejones a largo
plazo; de modo indirecto consigo un cambio
en el ecosistema ante su mismo equilibrio, se
cuenta con antecedentes que reportan a las
Corporaciones Autónomas Regionales y de
Desarrollo Sostenible CAR (2018) sobre un
hongo que está afectando las hojas de los
frailejones de Parque Nacional Natural
Chingaza señalando que hay un gran
consumo de hoja centrales de las rosetas,
encontrando clorosis en las hojas maduras; en
su identificación se encontró al hongo
Colletotrichum sp.
Por parte de las autoras también se ha
observado una podredumbre blanca
producida por un hongo en las hojas de los
frailejones de la especie Espeletia grandiflora
en el Sendero de Piedras Gordas del Parque
Nacional Natural Chingaza que interrumpen
su ciclo de vida, desarrollo y ocasiona su
muerte prematura. Por lo anterior, el objetivo
principal de esta investigación es identificar a
este hongo fitopatógeno causante de la
podredumbre blanca en las hojas del frailejón
Espeletia grandiflora, y de esta manera
contribuir al reporte de este fitopatógeno que
pueda servir para su control y en un futuro a
la conservación del PNN Chingaza.
MATERIALES Y MÉTODOS
La presente investigación se desarrolló
durante el II semestre 2018 y I semestre del
2019, en la primera fase se realizan
observaciones y selección del área de estudio,
mientras que en la segunda fase después de
obtener el Permiso Ambiental por Parques
Nacionales Naturales de Colombia,
Resolución Número 047 de Abril de 2019, se
adelantaron los respectivos estudios y
colectas con fines de investigación científica.
Área de estudio
La investigación se realizó en el Parque
Nacional Natural Chingaza, se escogió el
Sendero de Piedras Gordas con coordenadas
Latitud: 4°44’12,987’’N - 4°45’9,116’’N;
Longitud: 73°49’54,617’’W - de Petri con el medio de cultivo PDA, se
73°50’32,355’’W, por la alta presencia de
frailejones con podredumbre blanca y se
hacen parcelas de 3m x 5m en tres puntos del
sendero; el primer punto a 3.511 m.s.n.m
(inicio del camino), el segundo punto a 3.559
m.s.n.m (mitad del camino) y el tercer punto
a 3.652 m.s.n.m (final del camino).
Muestreo en campo
De las 5 especies de frailejones que se
encuentran en el PNN Chingaza, se delimita
el problema a una sola especie, Espeletia
grandiflora donde se presenta una mayor
podredumbre blanca en sus hojas, así mismo
teniendo en cuenta la determinación de área
foliar y cantidad afectada por el hongo
(gráficas que se realizan en hojas de papel
milimetrado de la hoja 1 y 2 de cada parcela),
2019- Fitopatología Colombiana /Volumen 43 No 1
se tuvo en cuenta síntomas como
podredumbre blanca, necrosis y
marchitamiento y signos del hongo como lo
es la presencia de apotecios blancos. En
época de lluvia, en los puntos inicial, medio y
final del sendero, a partir de E. grandiflora se
observan hojas infectadas con la
sintomatología ya mencionada, se fotografía,
se calcula el área foliar infectada y se
colectan dos hojas de dos organismos
infectados dentro de cada parcela; tomando
de referencia seis organismos en total, las
hojas colectadas se colocaron en cámara
húmeda por 8 días con alternancia de luz y
oscuridad para estimular el crecimiento del
hongo, y luego se llevaron al Laboratorio de
Biotecnología, del Departamento de Biología
de la Universidad Pedagógica Nacional para
su posterior análisis.
Aislamiento e identificación del patógeno
Las hojas colectadas de E. grandiflora luego
de 8 días en cámara húmeda presenta una
colonización del hongo como una
podredumbre blanca y con producción de
apotecios blancos. Se realizó una siembra
directa a partir de la podredumbre blanca de
la hoja de frailejón mediante un asa, tomando
una parte de la podredumbre y se lleva a cajas
de petri con el medio de cultivo Papa
Dextrosa Agar (PDA).
Paralelamente, se hace una siembra
indirecta, a partir de fragmentos de las hojas
colectadas, colocándolos en hipoclorito de
sodio al 1% por 20 segundos, y luego se
lavaron dos veces con agua destilada estéril,
los fragmentos de las hojas desinfectados se
sembraron en forma triangular en la Caja de
Petri con el medio de cultivo PDA y se
dejaron en incubación a temperatura ambiente
(20 °C) por 7 días.
Por un lado, se describió y midió en
milímetros el apotecio encontrado en las
hojas del frailejón con podredumbre blanca,
por otro lado después de 7 días también se
observó el crecimiento del hongo en las Cajas
describió su colonia, y se reportó su color
anverso y reverso. Después con montajes en
láminas con cinta pegante y azul de lactofenol
se observaron las hifas del hongo en el
microscopio en aumento de 40 x. Para la
identificación del hongo se utilizó la
descripción de Agrios (2015).
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Interacción Frailejón – hongo
En el sendero de Piedras Gordas del Parque
Nacional Natural Chingaza se observó una
gran cantidad de frailejones afectados por la
podredumbre blanca en sus hojas, en los tres
puntos de colecta e investigación se
selecciona el frailejón Espeletia grandiflora
como representativo y se observa la
21
 b

a c

d e

Figura 1. Síntomas y signos de pudrición blanca (Sclerotinia sclerotiorum) afec-

tando frailejón (Espeletia grandiflora):

a. Planta severamente afectada, parte superior de las hojas mostrando crecimiento

algodonoso de color blanco; nótese la deformación de la lámina foliar y la presencia
de puntos blancos en el ápice y borde de algunas hojas, correspondientes a fructifi-
caciones del hongo. En el tercio inferior de la planta se observan las hojas secas de
color marrón con abundantes fructificaciones de color blanco localizadas hacia el
tercio medio y ápice de las hojas afectadas.
b, c, d : Fructificaciones típicas de S. sclerotiorum correspondientes a apotecios de
color blanco, individuales en unos casos y agrupados en otros, creciendo sobre las
lesiones.
e. detalle de un grupo de apotecios producidos sobre una lesión, nótese la forma de
copa de las fructificaciones.
f. Colonia de Sclerotinia sclerotiorum aterciopelada blanca creciendo en medio de
cultivo

interacción del hongo por la presencia de
lesiones algodonosas y necrosis de tejidos
sobre los cuales se observaron apotecios
blancos (Figura 1a, b, c, d, e ) en las dos
22
temporadas, tanto de sequía como lluvia,
donde en temporada de lluvia se evidencia un
mayor desarrollo y proliferación del hongo y
así mismo de la podredumbre blanca.
2019- Fitopatología Colombiana /Volumen 43 No 1
Se logra obtener el tamaño y el porcentaje
del área foliar con podredumbre blanca en el
frailejón, esta determinación del porcentaje
del área foliar infectada por el hongo
posibilita ver la cantidad de afectación que se
encuentra en el follaje; Cabezas, et al, (2009)
afirman que la determinación del área foliar
es importante para analizar diferentes
procesos biológicos, ambientales y fisio-
lógicos, y también para ver el crecimiento y
desarrollo de la planta, viendo la eficiencia
del área foliar al captar luz, hasta llegar a
determinar el daño producido por plagas y
afecciones sobre el follaje; dando una idea de
cómo se encuentra la población de plantas
afectadas, así mismo se observa la afectación
de podredumbre blanca y presencia de
apotecios en el área foliar (Figura 1a, b, c, d,
e).
La determinación del área foliar de E.
grandiflora en las parcelas permitieron
analizar el nivel de afectación que el hongo
ocasiona en sus hojas mediante la producción
de podredumbre blanca, en la parcela del
inicio del camino; la muestra 1 tiene un 50%
y la muestra 2 un 30%, en la parcela 2 de la
mitad del camino la muestra 1 tiene 10% y la
muestra 2 un 30% y la parcela final del
camino, la muestra 1 tiene un 70% y la
muestra 2 un 65%; siendo estas muestras las
de mayor nivel de afectación debido a la alta
concentración de humedad dado por la
cercanía con las dos lagunas de Buitrago,
determinando así que la afectación impide el
crecimiento y desarrollo adecuado de las
plantas y produce un déficit de captación de
agua alterando de esta manera las
interacciones que tiene E. grandiflora en el
ecosistema.
Del mismo modo, la cantidad de
frailejones que se encuentran en las parcelas
es una muestra importante del sendero, ya
que permite ver las diferentes relaciones que
se establece para el buen funcionamiento y
desarrollo de diferentes actividades
biológicas que se realizan en el Páramo,
encontrando esta flora de vital importancia
. apotecios al aire durante un período de 2 a 3
Aislamiento e identificación del hongo
Se observa al hongo que afecta a las hojas del
frailejón Espeletia grandiflora y es causante
de podredumbre blanca a simple vista donde
se logra ver apotecios de color blanco con un
tamaño de 5 a 15 milímetros (mm) de
diámetro (Figura 1b, c, d, e).
De las siembras directas de la
podredumbre blanca en Cajas de Petri con
PDA donde después de 7 días se observa una
colonia aterciopelada blanca en el anverso (
Figura 1f) y en el reverso tiene un color
beige, también de la siembra indirecta de los
fragmentos de hojas se logra observar la
misma colonia aterciopelada blanca, de la
observación en microscopio en aumento 40x
se ve un micelio hialino septado.
Por las anteriores características del
hongo, se logró identificar al hongo como
Sclerotinia sclerotiorum, y se corroboró
bibliográficamente con Agrios (2015) y
Godoy, et al (2017) quienes afirman que la
infección que causa este hongo afecta a las
plantas en todas las etapas de crecimiento,
incluyendo plántulas, plantas maduras y
cosechadas, este hongo afecta a la mayoría de
cultivos anuales, ornamentales, y cultivos de
campo.
El principal síntoma causado por
Sclerotinia sclerotiorum en condiciones
ambientales como lo es una alta humedad es
podredumbre blanca, este hongo también se
conoce bajo el nombre de podredumbre
algodonosa, podredumbre blanda acuosa, y
moho blanco, entre otros. Cuando Sclerotinia
sclerotiorum infecta hojas se da una aparición
en las partes infectadas de un color blanco y
este tiene un crecimiento de micelio
esponjoso blanco que poco después se
desarrolla en podredumbre blanca (Agrios,
2015, Godoy, et al 2017).
Esta infección hace que la planta se
marchite y muera con rapidez, en algunos
casos la infección puede comenzar en una
hoja y luego pasar al tallo, infecta hojas
planas haciendo que vayan muriendo a
medida que el hongo infecta, por lo general
en condiciones húmedas invade a la planta
completamente y hace que se pudra,
produciendo un crecimiento blanco y micelial
en toda la planta (Agrios, 2015, Godoy, et al
2017).
El ciclo de la infección comienza con la
liberación de ascosporas que se encuentran en
el apotecio, estas pueden desplazarse a
grandes distancias y en superficies con una
alta humedad puede proliferar. Por lo general
crece a temperaturas frías de 15 a 21°C, pero
se puede desarrollar a temperaturas de 2 a 32
°C, el hongo causa una podredumbre húmeda
que se extiende con el tiempo en la planta
haciendo que se pudra completamente, el
micelio fúngico blanco generalmente se
pueden ver externamente en la planta. Se
descargan muchas ascosporas de los
semanas las ascosporas son arrastradas por el
aire, llegando a otras de plantas donde
germinan y causan infección (Agrios, 2015,
Godoy, et al 2017).
Por lo anterior, en el caso del Parque
Nacional Natural Chingaza por lo que hay
una alta humedad hace que el hongo
Sclerotinia sclerotiorum se active, y así
mismo por las lluvias y vientos permiten la
dispersión de las ascosporas produciendo el
crecimiento del micelio blanco y algodonoso
sobre la parte foliar del frailejón produciendo
una podredumbre blanca en el frailejón
Espeletia grandiflora.
Se hace alusión a que los frailejones de
los Páramos están siendo afectados por
diferentes perturbaciones que a causa el ser
humano; entre estos se encuentra el cambio
climático, la quema, la ganadería, la
agricultura, y la minería; mientras entre las
amenazas naturales tenemos la herbivoría por
animales de alta montaña e infecciones
causadas por microorganismos fitopatógenos.
2019- Fitopatología Colombiana /Volumen 43 No 1
CONCLUSIONES
Se aisló e identificó al hongo Sclerotinia
sclerotiorum como fitopatógeno del frailejón
Espeletia grandiflora que se encuentra en el
Páramo del Parque Nacional Natural
Chingaza produciendo podredumbre blanca
afectando a la planta limitando su desarrollo
y crecimiento haciendo que esta no capte el
agua adecuadamente y por tal motivo
produzca cambios en el ecosistema a través
del tiempo, por lo tanto sería importante
realizar estudios en la búsqueda de un control
biológico para Sclerotinia sclerotiorum y de
esta manera conservar este ecosistema.
Se da cuenta de la interacción fitopatógena
que establece el frailejón Espeletia
grandiflora y el hongo Sclerotinia
sclerotiorum, donde se ve las afectaciones,
relaciones de los sistemas biológicos e
importancia en el Páramo del Parque
Nacional Natural Chingaza.
AGRADECIMIENTOS
A Parques Nacionales Naturales y Parque
Nacional Natural Chingaza por permitirnos
desarrollar esta investigación, por todas las
atenciones, información y colaboración
brindada, así mismo por el Permiso
Ambiental, y extendemos nuestra gratitud a
Daniela Gómez y Merilyn Caballero por su
constante asesoramiento.
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 Nota Fitopatológica

Ampelomyces quisqualis PARASITANDO Pseudoidium hortensiae EN HORTENSIA

(Hydrangea macrophylla)
Benjamín Pineda-López
Asociación Colombiana de Fitopatología y Ciencias Afines, ASCOLFI
Dirección de Contacto b.pinedalopez@gmail.com
Artículo científico, recibido para publicación el 16/11/2018; aceptado el 31-05-2019

RESUMEN SUMMARY

En los jardines del conjunto residencial Ocales de Niza (N 4° 43´
12,03”; OE 74° 4´ 34,7”) en Bogotá (Cundinamarca, Colombia), se
observó la presencia de una enfermedad que afectaba el follaje de la
plantas de Hortensia (Hydrangea macrophylla). En las hojas afectadas
se observó la presencia de manchas de color gris blanquecino de
aspecto polvoso; sin embargo, observando en detalle los síntomas de la
enfermedad se visualizó diferencias en el follaje, particularmente al
comienzo de la estación lluviosa. Durante el periodo seco, las plantas
afectadas por la cenicilla mostraban en el follaje abundante crecimien-
to fungoso de aspecto pulverulento mientras que al comienzo de la
estación húmeda sobre el follaje se observaba crecimiento fungoso
escaso y apariencia gris oscura de aspecto sucio, particularmente
hacia el borde de las lesiones, indicador de que algo le estaba ocu-
rriendo a la enfermedad. En las muestras estudiadas de las lesiones
observadas al microscopio se encontraron abundantes fructificaciones
globosas a piriformes de color marrón oscuro a marrón claro afectando
las hifas, células basales, los conidióforos y conidias de Pseudoidium
hortensiae ocasionando alteraciones y deformación de las mismas. En
el interior de las hifas fue posible visualizar las estructuras del hiperpa-
rásito como filamentos delgados brillantes, invadiendo las hifas parasi-
tadas. Los conidiomas tipo picnidio de color marrón oscuro a marrón
claro eran globosos, para-piriformes, claviformes y/o alargados o
fusiformes presentaban de tamaño variable: los esféricos entre 40-60
µ, piriformes 30 x70µ a 40x60µ y los alargados a fusiformes o clavi-
formes 30x70µ a 40x100µ, generalmente superficiales, en, sobre o
alrededor de la hifas del patógeno. Los picnidios contenían abundantes
conidias elipsoides a oblongas hialinas o subhialinas, rectas o curvas,
cilíndricas o fusiformes de tamaño aproximado 6x2 μ a 10x2 μ, que
al emerger de los conidiomas aparecían dentro de una masa de aspecto
gelatinoso. El proceso de identificación, mediante consultas bibliográ-
ficas y micrografías, condujo a un hiperparásito que pertenece a la
familia Phaeosphaeriaceae, el Ampelomyces quisqualis, hiperparásito
ecológica y económicamente importante que se distribuye ampliamen-
te en todo el mundo. Se considera como el primer registro de la en-
fermedad en la localidad mencionada.
Palabras claves: cenicilla, plantas ormanentales, Erisifales
In the gardens of the residential complex Ocales de Niza (N 4 ° 43´
12.03 ”; OE 74 ° 4´ 34.7”) in Bogotá (Cundinamarca, Colombia), the
presence of a disease affecting the foliage of Hydrangea plants (Hy-
drangea macrophylla). In the affected leaves the presence of whitish
gray spots of powdery appearance was observed; however, observing
in detail the symptoms of the disease, differences in foliage were
visualized, particularly at the beginning of the rainy season. During the
dry period, the plants affected by the powdery mildew showed on the
foliage abundant fungus growth of dusty appearance while at the
beginning of the wet season on the foliage there was little fungus
growth and dark gray appearance of dirty appearance, particularly
towards the edge of lesions, indicator that something was happening
to the disease. In the samples studied of the lesions observed under the
microscope abundant globose fructifications to dark brown to light
brown piriformis were found affecting the hyphae, basal cells, conidi-
ophores and conidia of Pseudoidium hortensiae causing alterations
and deformation thereof. Inside the hyphae it was possible to visualize
the hyperparasite structures as bright thin filaments, invading parasi-
tized hyphae. The pycnidium conidiomas of dark brown to light brown
color were globose, para-piriform, claviform and / or elongated or
fusiform had a variable size: spherical between 40-60 µ, piriform 30
x70µ to 40x60µ and elongated to fusiform or claviform 30x70µ to
40x100µ, usually superficial, in, on or around the hyphae of the patho-
gen. The pycnidia contained abundant ellipsoid conidia to hyaline or
subhyaline oblong, straight or curved, cylindrical or fusiform, approx-
imately 6x2 μ to 10x2 μ, which, when emerging from the conidia,
appeared within a gelatinous mass. The identification process, through
bibliographic consultations and micrographs, led to a hyperparasite
belonging to the Phaeosphaeriaceae family, the Ampelomyces
quisqualis, an ecologically and economically important hyperparasite
that is widely distributed throughout the world. It is considered as the
first record of the disease in the mentioned location.
Key words: Oidium, ornamental plants, Erysiphales.
Pineda-L, Benjamín.2019. Ampelomyces quisqualis parasiting Pseu-
doidium hortensiae in Hortensia (Hydrangea macrophylla). Fitopato-
logía Colombiana 43(1):25-28

INTRODUCCIÓN fungicidas de síntesis química que resultan una enfermedad que afectaba las hojas del
costosos, generan resistencia y problemas arbusto, particularmente durante el verano.
Las hortensias o Hydrangeas, están entre las
ambientales. No obstante, en la naturaleza Sobre éstas se observó la presencia de man-
plantas ornamentales con flores preferidas en
pueden actuar microorganismos antagónicos chas de color gris blanquecino de aspecto
los jardines y en el mercado internacional de
que suelen contribuir con la reducción de la polvoso; sin embargo, observando en detalle
exportación. Al arbusto lo afectan algunas
severidad de los mildeos polvosos y ser de los síntomas de la enfermedad se notaron
enfermedades como la cenicillas u oidios que
gran utilidad para su manejo biológico (Mo- algunas diferencias en el follaje, particular-
ocasionan daño severo a la planta reduciendo
rataya- Camey, 2013; Gautman y Avasthi, mente al comienzo de la estación lluviosa.
la producción y valor de la ornamental (Álva-
2016, Kiss et al., 2004). Durante el periodo seco, las plantas afec-
rez et al, s.f.; Baysal-Gurel et al, 2016; Li et
En los jardines del conjunto residencial tadas por la cenicilla mostraban en el follaje
al, 2016).
Ocales de Niza (N 4° 43´ 12,03”; OE 74° 4´ abundante crecimiento fungoso de aspecto
Para el control de las cenicillas utilizan
34,7”) sobre plantas de Hortensia, se observó pulverulento (Figura 1a), situación que al

2019- Fitopatología Colombiana /Volumen 43 No 1 25

comienzo de la estación húmeda cambio;
sobre el follaje se observaba crecimiento
fungoso escaso y manchas de apariencia gris
oscura, particularmente hacia el borde de las
lesiones (Figura 1 b, c), indicador de que algo
le estaba ocurriendo a la enfermedad.
PARÁSITO OBSERVADO
Durante las observaciones microscópicas de
preparados de los tejidos afectados, se encon-
tró que, además de las escasas estructuras del
hongo causal del mildeo polvoso Pseudoi-
dium hortensiae, (anamorfo del Erisiphal
Golovinomyces orontii) (Pineda-L, 2015) se
encontró un hongo ocasionado deterioro en
las estructuras del patógeno (Figuras 1 d, e, f,
g, h, i, j).
En las muestras estudiadas se encontraron
abundantes fructificaciones globosas a piri-
formes de color marrón oscuro a marrón claro
afectando las hifas, células basales, los coni-

a b c

e f
d

g h i

j k l
Figura 1. Plantas de Hortensia (Hydrangea macrophylla) afectadas por mildeo polvoso y presencia de Ampelomyces quisqualis parasitando Pseudoidium
hortensiae. a. Planta afectadas por mildeo polvoso, nótese sobre el follaje el abundante crecimiento fungoso de aspecto pulverulento. b. Planta afectada por
mildeo polvoso en donde se observa crecimiento fungoso escaso y apariencia gris oscura de las lesiones. c. Planta afectada por mildeo polvoso mostrando
abundantes lesiones de apariencia gris oscura, indicador de la presencia de A. quiscalis. d. Picnidios de A. quiscalis de una muestra de las lesiones grisosas vistos
al microscopio (escala 100 micras), nótese la escasez de estructuras de P. hortensiae. e. Hifas y conidióforos de P. hortensiae parasitados por A. quiscalis, nótese
la presencia de picnidios fusiformes de color marrón claro en el interior de las hifas. f. Hifas y células basales de P. hortensiae parasitadas, las hifas infectadas
muestran en su interior hifas de A. quiscalis (Puntas de flecha amarillas) y en las células basales picnidios. g, h. Picnidios de A. quiscalis (escala 100 micras) en
hifas y células basales de P. hortensiae. i. j. Aspecto general de las hifas P. hortensiae severamente afectadas por el hiperparásito. k, l. Picnidios de A. quiscalis
mostrando masas de conidias cilíndricas a elipsoides u oblongas, hialinas o subhialinas en una matriz de aspecto gelatinoso (escala 50 micras).(Imagenes BPL)

26 2019- Fitopatología Colombiana /Volumen 43 No 1

dióforos y conidias de P. hortensiae (Figuras
1d, e, f, g, h, i, j, k), presente en los tejidos
de Hydrangea
El hiperparásito detectado se observó
dentro de las hifas y conidióforos de P. hor-
tensiae ocasionando alteraciones y deforma-
ción de las mismas (Figuras 1e, f, g, h, i, j, k)
En el interior de las hifas fue posible vi-
sualizar las estructuras del hiperparásito
como filamentos delgados brillantes (Figura
1e, f, g, h, i), invadiendo las hifas parasitadas.
Los conidiomas tipo picnidio de color
marrón oscuro a marrón claro eran globosos,
para-piriformes, claviformes y/o alargados o
fusiformes (Figura 1d, e, f, g, h, i, j, k, l) de
tamaño variable: los esféricos entre 40-60 µ,
piriformes 30 x70µ a 40x60µ y los alargados
a fusiformes o claviformes 30x70µ a
40x100µ, generalmente superficiales, en,
sobre o alrededor de la hifas del patógeno.
Los picnidios contenían abundantes conidias
elipsoides a oblongas hialinas o subhialinas,
rectas o curvas, cilíndricas o fusiformes de
tamaño aproximado 6x2 μ a 10x2 μ, que al
emerger de los conidiomas aparecían dentro
de una masa de aspecto gelatinoso (Figura 1k,
l). Las observaciones y sus resultados con-
cuerdan con lo registrado en la literatura con
la presencia y modo de acción del hiperpará-
sito (Kiss, 1998; Kiss, 2008)
IDENTIFICACIÓN
El proceso de identificación, mediante con-
sultas bibliográficas y micrografías, condujo
a un hiperparásito que pertenece a la familia
Phaeosphaeriaceae, el Ampelomyces quis-
qualis, hiperparásito ecológica y económi-
camente importante que se distribuye am-
pliamente en todo el mundo (Kiss, 1998;
Kiss, 2008; Moratava-Camey, 2013; Suchar-
zewska et al., 2012; Gautman, y Avasthi,
2016).
A. quisqualis se encuentra naturalmente
presente en todo el mundo en un amplio
rango de hospedantes; se ha considerado
como una sola especie por mucho tiempo,
pero su taxonomía ha sido controversial y
debe revisarse (Kiss, 1998; Angeli et al.,
2011; Angeli, 2013; JGI, s. f).
El hábitat de A quisqualis, está determi-
nado por los huéspedes que afectan las ceni-
cillas y la forma de ataque del micoparásito
es especifico a parásitos biotroficos obligados
del orden Erisiphales. Las cenicillas atacan
256 especies de plantas dentro de 172 géne-
ros en 59 familias y se producen amplia-
mente en el mundo (Moratava-Camey, 2013,
Kiss, 1998) pero la patogenicidad de los
aislamientos de A. quisqualis de diferentes
fuentes es significativamente importante.
A. quisqualis es conocido des de 1852
cuando Cesati lo observó afectando el mil-
deo polvos de la vid (Kiss, 2008), es un Deu-
teromicete, que se encuentra de forma natural
como hiperparásito de las cenicillas, infecta
estableciendo hifas y produciendo picnidios
2019- Fitopatología Colombiana /Volumen 43 No 1
dentro de los órganos de los Erisiphales.
Ampelomyces actúa directamente por in-
vasión y destrucción del citoplasma del hos-
pedante. Ampelomyces mata las hifas parasi-
tadas de los Erisiphales causando una rápida
degeneración del contenido celular ( Kiss,
2008).
La espora de A. quisqualis después de
germinar busca la hifa de oídio, penetra y
avanza en su interior. Posteriormente, A.
quisqualis produce picnidios que contienen
un gel lleno de nuevas esporas y que, con
unas condiciones de humedad favorable,
rompe la corteza que las contiene y disemina
las nuevas esporas para que comience un
nuevo ciclo (Kiss et al., 2004)
A. quisqualis puede parasitar la hifas, co-
nidióforos, conidias y peritecios de los hon-
gos causales de los mildeos polvosos. El
hiperparásito A. quisqualis, los Erisiphales
hospedantes causa de los mildeos polvosos y
las plantas hospedantes constituyen un
sistema típico tripartito de interacción de
hiperparasitismo (planta hospedante-hongo-
hiperparasito) de interés para el manejo de
nefermedades.
Actualmente, el control de hongos del
mildeo polvoso en Hydrangea se enfrenta a
la falta de variedades resistentes y al uso
excesivo de fungicidas, con los consabidos
inconvenientes. Para resolver esta situación,
A. quisqualis, sería el agente de biocontrol s
de Erisiphales a considerar en los programas
de de manejo de mildeos polvosos (Kiss,
2003; Saharan et al., 2013).
A. quisqualis patógeno de hongos fue el
primer fungicida microbial comercialmente
desarrollado y actualmernte el de más amplio
uso en agricultura orgánica y en la conven-
cional. En efecto un producto basado en
conidias de A quisqualis, AQ10 Biofungicide,
se encuentra registrado y comercializado. Se
preparó a partir de un aislamiento del hiper-
patrásito descubierto en una zona árida de
Israel y fue designado a partir de entonces
AQ aislamiento Nº M-10 o AQ10. (Szte-
jnberg, A. 1993, Kiss, 2003).
La eficacia de A. quisqualis es variable y
para el establecimiento del micoparásito es
vital que se encuentren presentes en la plan-
tación algunos oídios, además debe existir un
cultivo de una variedad sensible al ataque de
cenicillas, alta humedad relativa, precipita-
ciones o riegos regulares para la propagación,
así como se hace necesaria más de una apli-
cación del hiperparásito
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