Extracción e identificación de principios activos de drogas vegetales
1.- Extracción e identificación de TANINOS:
Droga vegetal: Corteza de SAUCE
- En tubo de ensayo limpio poner 1-2g de droga vegetal y añadir de 3 a 4 ml
de agua. - Agitar tapando la boca con el dedo (girando por interposición). - Introducir en baño maría con agua hirviendo durante 5 minutos con lo que facilitamos la disolución o extracción de taninos. - Decantar el agua a otro tubo de ensayo limpio (1 ó 2 ml). Aquí tendremos una solución con los principios activos solubles en agua: heterósidos, alcaloides y taninos. - Adicionar arrastrando por la pared del tubo de ensayo unas gotitas de cloruro férrico y si hay taninos se observará un cambio de color oscuro.
2.- Ensayo de saponinas
Droga vegetal: - En tubo de ensayo introducir 1- 2 g de droga y añadir 2 a 3 ml de agua. Agitar enérgicamente y comprobar si se forma espuma.
3.- Ensayo cualitativo de derivados antraquinónicos (Reacción de Borhn
trajer):
Droga vegetal: SEN o RUIBARBO
- Las antraquinonas pueden estar como heterósidos, solubles en agua, que no dan reacción de Borhn trajer (coloración roja al añadir solución de KOH concentrado) o como geninas libres, no solubles en agua. Para separar las geninas hay que romper el enlace glucosídico para lo cual: - En tubo de ensayo limpio añadir 1 “dedito” de droga vegetal. - Añadir 2-3 ml de agua y llevar a baño maría hirviendo durante 10 minutos, con lo que se libera la genina. - Decantamos y sobre la solución añadimos solución de KOH concentrada y si hay geninas dará color rojo ladrillo o rojo oscuro, cuantas más geninas más rojo.
4.- Ensayo de alcaloides
Droga vegetal: PETALOS DE AMAPOLA
- En tubo de ensayo limpio añadir 1 g de la droga vegetal.
- Añadir 1 ó 2 ml de ácido clorhídrico (OJO QUE QUEMA, NO JUEGOS NI MANIPULACIONES INCORRECTAS): Se coge la pipeta de ácidos, se abre la botella, se introduce la pipeta, NO CHUPAR, coger la pipeta POR ARRIBA. Añadir 1 ó 2 dedos y agitar un poco pero sin poner los dedos se agita con pinza y se lleva a baño maría durante 5 minutos - Los alcaloides en forma de sal estarán en la disolución. - Se decanta la solución, se añade agua de yodo y dará un precipitado marrón sucio. Puede dar negativo.
II.- PRÁCTICAS DE MICROSUBLIMACIÓN
Droga vegetal: RUIBARBO
A partir de droga vegetal sólida, calentándola con llama se subliman los
principios activos que pasan a estado vapor, este vapor lo recogemos en otro portaobjetos y observamos al microscopio.
Se coge el porta y se añade una “espatulita” de droga. Se pone el porta en la
gradilla, se acerca llama del mechero a la vez que depositamos otro porta encima. Con la llama de sublima la droga que pasa a vapor y al contacto con el cristal se condensa. Cuando salga un humo blanco apagamos el mechero, esperamos unos segundos y retiramos el portaobjetos de arriba para observarlo al microscopio. Se verán cristales que son típicos. Se puede ver así falsificaciones.
III. ENSAYO CROMATOGRÁFICO DE ANTRAQUINONAS.
Dorga vegetal: SEN
- En tubo de ensayo limpio introducimos droga vegetal (SEN), 1 o 2 g.
- Añadir agua 2-3 ml - Añadir ácido clorhídrico o sulfúrico, unas gotitas PRECAUCION - Levar a baño maría, durante 7 minutos. Con esto hemos roto el enlace glucosídico, liberando las geninas. - Filtrar la solución con embudo y papel y recoger el filtrado en tubo de ensayo que llevamos a ampolla de decantación que tiene que estar cerrada. - Añadimos benceno o tolueno, una cantidad igual a la que tenemos en tubo de ensayo y agitamos farmacéuticamente para evitar la interposición de fases. - Mantener la ampolla de decantación perpendicular hasta separación de fases, en la que se verá de color amarillento la parte del benceno donde estarán las antraquinonas (las geninas). En el agua quedaran los azúcares y heterósidos. - Separar las fases: Primero sale el agua y recogemos la parte bencénica (con las geninas) en tubo de ensayo limpio
- CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA: Con pipeta pasteur ponemos gotitas, en
placas de sílice. Luego os explico como (Hacer con lápiz línea por encima del líquido de la cubeta, depositar gotas pqs una a una y soplando para evaporar hasta que aparece una coloración amarilla). - Depositar la placa en la cubeta con disolventes (Acetato de Etilo 100 ml / Metanol 13,5 ml y H2O 10 ml). Dejar correr la placa. - REVELADO DE LA PLACA: Las placas son de sílece y presentan fluorescencia expuestas a luz ultravioleta. Las manchas que aparecen o se ven con luz UV son debidas a la propiedad inhibidora de fluorescencia. Otra forma de revelar la placa en esprayando con soluciones características. En este caso de KOH (Borhn trajer) y veremos cómo aparecen las manchas coloreadas rojas. Estas manchas si hemos puesto un patrón podemos saber si la droga es de calidad o no, también podemos determinar el rf si no disponemos de patrón. Por último se puede rascar y determinar en un espectrofotómetro UV (Análisis cuantitativo) IV. EXTRACCIÓN DEL ALCALOIDE DE PATATA (SOLANINA)
Esta práctica se puede hacer de 2 en 2 o de 4 en 4.
Para la determinación de solanina que tiene un insecticidas, es un alcaloide y
si ausencia es indicativo de más calidad.
Extracción: Cortar la patata en cuadraditos o láminas que contengan piel y
un poco de pulpa. Colocamos en mortero y cubrimos con ácido acético y agitamos farmacéuticamente en mortero ( de izquierda a derecha).
Acido + base = sal + agua
Obtenemos el acetato de solanina
- Decantamos el acetato y lo llevamos a baño maria 1 o 2 minutos. - Sacamos del baño y neutralizamos con amoniaco hasta pH alcalino (indicador de pH hasta color morado) - Al alcalinizar el alcaloide habrá precipitado. Filtramos y en el filtro quedará la solanina. - Echamos agua de yodo y si aparece color pardo marrón feo es que hay solanina.
V.- EXTRACCIÓN DE CAPSAICINA
Droga vegetal cayena ( me la pedís a mí)
- 1 g de cayena - 1 ml de tolueno - agitar
VI.- PREPARACIÓN DE COLONIA
Por arrrastre de vapor (matricaria, menta y anís).
I.- ENSAYOS COLORIMÉTRICOS
Extracción e identificación de principios activos de drogas vegetales
1.- Extracción e identificación de TANINOS:
- Droga vegetal: Corteza de SAUCE 1 + 3-4 agua + 5’ bm + Cloruro férrico oscuro (cambio de color oscuro).
2.- Ensayo de saponinas
Droga vegetal: + 1 droga + 2-3 agua. Agitar enérgicamente y comprobar si se forma espuma.
3.- Ensayo cualitativo de derivados antraquinónicos (Reacción de Borhn
trajer):
Droga vegetal: SEN o RUIBARBO
- 1 droga vegetal + 2-3 agua + bm 10 minutos, con lo que se libera la
genina. + KOH concentrada: color rojo ladrillo o rojo oscuro, cuantas más geninas más rojo.
4.- Ensayo de alcaloides
Droga vegetal: PETALOS DE AMAPOLA
- 1 droga + 1 ó 2 de ácido clorhídrico + agitar con pinza +bm 5’; decantar +
agua de yodo = dará un precipitado marrón sucio. Puede dar negativo. Si es así me lo comentais y echamos preparado para que salga la reacción.
II.- PRÁCTICAS DE MICROSUBLIMACIÓN
Droga vegetal: RUIBARBO en porta + llama (se recoge en porta) y al microscopio.
III. ENSAYO CROMATOGRÁFICO DE ANTRAQUINONAS.
- Dorga vegetal: SEN 1 o 2 + 2-3 agua + ácido clorhídrico gotitas +7’ bm; se filtra y lleva a ampolla de decantación cerrada + benceno o tolueno, una cantidad igual a la que tenemos en tubo de ensayo + agitación; separación de fases
- CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA
- REVELADO DE LA PLACA
IV. EXTRACCIÓN DEL ALCALOIDE DE PATATA (SOLANINA)
Cortar la patata en cuadraditos o láminas en mortero + ácido acético (cubrir) y agitamos farmacéuticamente en mortero ( de izquierda a derecha); Decantamos el acetato y lo llevamos a baño maria 1 o 2 minutos; Sacamos del baño y neutralizamos con amoniaco hasta pH alcalino (indicador de pH hasta color morado). Al alcalinizar el alcaloide habrá precipitado. Filtramos y en el filtro quedará la solanina. Echamos agua de yodo y si aparece color pardo marrón feo es que hay solanina.
V.- EXTRACCIÓN DE CAPSAICINA
Droga vegetal cayena ( me la pedis a mí) - 1 dedo de cayena - 1 dedo de tolueno - agitar
VI.- PREPARACIÓN DE COLONIA
Por arrrastre de vapor (matricaria, menta y anís).