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MICROSCOPÍA Fecha:

IDENTIFICACIÓN
UNIDAD ACADÉMICA: Facultad de Estudios en Ambientes
Virtuales
UNIDAD DE ESTUDIO: BIOLOGÍA GENERAL
PRACTICA 1: MICROSCOPÍA

OBJETIVOS

1. Reconocer la importancia del uso del microscopio como herramienta básica

en el estudio de la Biología.
2. Identificar y conocer la función de las partes del microscopio y desarrollar
habilidades para el uso correcto del mismo.
3. Conocer los conceptos básicos utilizados en microscopía.

FUNDAMENTOS TEÓRICOS

1. Introducción

El microscopio es un instrumento que permite observar objetos tan pequeños que

no se pueden ver a simple vista. Además, sirve para realizar mediciones, estimar
el tamaño de una población de microorganismos, estudiar estructuras celulares en
general, hacer estudios morfológicos y fisiológicos de células y tejidos.

Uno de los microscopios más utilizados en biología es el microscopio óptico, el

cual contiene una o varias lentes que permiten obtener una imagen aumentada del
objeto, funciona por refracción gracias a los fotones de luz que llegan al objeto y
permiten observar sus características.

La refracción se define como el cambio de dirección que se observa cuando una

onda pasa de un medio material a otro. Únicamente se produce si la onda incide
oblicuamente sobre la superficie de separación de los dos medios. Un ejemplo de

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este fenómeno se ve cuando se sumerge un lápiz en un vaso con agua: el lápiz

parece quebrado (figura 1).

Figura 1. Refracción de la luz

Fuente: recuperado de: https://goo.gl/p82vHC

2. Partes del Microscopio Óptico y sus Funciones

El microscopio óptico está compuesto principalmente por tres partes (ver figura 2):
el sistema óptico, lumínico y mecánico. Y cada uno de estos se compone de otros
elementos como son:

2.1 Sistema óptico: es el conjunto de lentes que se encuentran en el

microscopio y que tienen como función principal ampliar la imagen del
objeto observado.

a. Oculares: están situados en el extremo superior del tubo, cerca del ojo del
observador. Tienen como función multiplicar el aumento logrado por el objetivo,
el aumento que se logra con ellos se representa por un número entero
acompañado de una X. Los aumentos pueden ser de 4X, 6X, 8X, 9X, 10X y
l2X.

b. Objetivos: están ubicados en el extremo inferior del tubo en la pieza llamada

"revólver" y son los que están cerca del objeto que se va a observar. Los

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objetivos pueden ser "secos" o de "inmersión". Los secos, se denominan así

porque para usarlos no es necesario añadir ninguna sustancia entre ellos y la
preparación, sus aumentos pueden ser de 4X, 10X y 40X. Para los húmedos
o de inmersión, es necesario añadir una gota de aceite de cedro entre la
preparación y el objetivo de tal manera que el objetivo entre en contacto con el
aceite ya que este evita que se desvíe la luz y se pierda la refracción, el
aumento suele ser de 100X.

2.2 Sistema de iluminación: está constituido por las partes del microscopio,
cuya función está relacionada con la entrada de luz a través del aparato
que ilumina la preparación. Está compuesto por:

a. Condensador: lente que concentra los rayos luminosos y los dirige hacia
la preparación.
b. Diafragma: regula la cantidad de luz que entra en el condensador.
c. Foco o lámpara: dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

2.3 Sistema mecánico: son las piezas que constituyen el microscopio en las
cuales se encuentran disponibles los lentes y el sistema de iluminación.

a. Tornillo macrométrico: permite realizar movimientos verticales grandes, es

decir mueve el tubo de arriba hacia abajo permitiendo un enfoque rápido, es un
tornillo grande.

b. Tornillo micrométrico: permite realizar movimientos cortos, por lo cual sirve

para afinar y precisar el enfoque, el tornillo es pequeño y se encuentra sobre el
macrométrico.

c. Revólver: estructura circular giratoria donde van enroscados los objetivos.

Permite la colocación en posición correcta del objetivo que se va a usar.

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d. Platina: se utiliza para colocar la preparación u objeto que se va a observar,

puede ser fija o giratoria, tiene un hueco en el centro para dejar pasar los rayos
luminosos.
e. Carro: dispositivo colocado sobre la platina que permite deslizar la
preparación de derecha a izquierda y de atrás hacia delante.
f. Pinzas del portaobjeto: sirven para sostener la preparación.
g. Base o pie: es la estructura que se encuentra en la parte inferior del
microscopio y que le sirve de apoyo sobre una superficie.
h. Brazo: es la parte que une la base con la zona de los oculares. De esta parte
se coge el microscopio para su traslado de un lado a otro.

Figura 2. Microscopio óptico y sus partes

Fuente: https://goo.gl/ajR19Q

3. Conceptos básicos de microscopia

3.1 Poder de resolución

Es la capacidad que posee un instrumento óptico para diferenciar dos puntos que
a simple vista parecen uno solo, debido a la pequeña distancia que hay entre
ellos. El poder de resolución del ojo humano es de 100 micras (µ), el del
microscopio compuesto es de 0.2 µ y el del microscopio electrónico de 0.001 µ. Lo
anterior significa que para que el ojo humano pueda diferenciar claramente dos

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puntos, estos deben estar separados entre sí por una distancia igual o mayor a
100 µ.

3.2 Poder de aumento

Es la capacidad que posee un instrumento óptico para dar una imagen aumentada
de un objeto y depende del tipo y calidad de las lentes utilizadas. Una lente dada
puede dar una imagen mayor o menor dependiendo de la distancia a la cual se
encuentra el objeto. No obstante, hay una distancia óptima entre objeto y lente que
proporciona una imagen nítida.

Así por ejemplo, si un objeto tiene un tamaño de 1 mm y una lente dada origina
una imagen de 10 mm, se dice que el objeto fue aumentado 10 veces, es decir el
poder de aumento de la lente es de 10X, donde X representa el tamaño original
del objeto.
El microscopio que se utiliza consta de 2 lentes (ocular y objetivo), cada una de
ellas con su respectivo poder de aumento. Cuando se observa un objeto a través
del microscopio, su aumento total (At) está dado por el producto del poder de
aumento de cada una de las lentes, o sea, aumento del objetivo (Aob),
multiplicado por el aumento del ocular (Aoc):

At = Aob x Aoc

Siendo X el tamaño real del objeto. Veamos la tabla a continuación:

Tabla 1. Poder de aumento total en el microscopio

Poder de aumento del Poder de aumento del Aumento total

objetivo ocular
10X 10X 100X
60X 20X 1200X

Fuente: elaboración propia

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3.3 Campo visual del microscopio

Es el área circular que se observa al mirar a través del microscopio y varía según
las lentes utilizadas.

MONTAJE

1. Reconocimiento del microscopio

2. Comprensión del poder de resolución y poder de aumento
3. Montaje de muestra de agua de charco

PROCEDIMIENTO

1. Reconocimiento del microscopio

Por grupo de trabajo y con base en la instrucción del docente identifique
cada una de las partes del microscopio.
a. Rote el revólver con los objetivos hasta poner el objetivo de menor
aumento en línea con el tubo. Si es necesario baje la platina para evitar
golpear el objetivo.
b. Cuando ya haya ubicado el objetivo de menor aumento (4X) observe por
el ocular y mueva el diafragma, vea como regula la cantidad de luz que
atraviesa. Ponga una iluminación baja, que no le moleste la vista.

2. Comprensión del poder de resolución y poder de aumento

 Tome un papel delgado impreso con letras y prepare un montaje en
fresco de la siguiente manera:
o Tome una lámina, lávela y desengrásela utilizando un poco de
alcohol. Lave con agua y seque muy bien con un paño limpio o
papel desechable.

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o Coloque el trozo de papel utilizado inicialmente sobre la lámina y

con ayuda de una pipeta Pasteur, coloque una gota de agua
limpia sobre el mismo.
o Coloque una laminilla, dejándola caer en un ángulo de 45º para
que no se formen burbujas.
o Coloque la lámina sobre la platina, ajústela y enfoque utilizando
los diversos objetivos de 4X, 10X y 40X.
o Dibuje lo observado con los objetivos de 4X, 10X y 40X

¿A qué se deben las diferencias observadas en todos los casos?

¿Podría observar separadamente con el microscopio óptico, dos puntos que están
a 10µ entre sí? ¿Y dos puntos que están a 0.1µ? Explique.
Determine el poder de aumento del microscopio, es decir; defina ¿cuántas veces
se aumentó el tamaño de la imagen de la letra cuando utilizó los diferentes
objetivos, teniendo en cuenta que el ocular del microscopio era de 10X?

3. Montaje de muestra de agua de charco

 Tome una lámina y con una pipeta Pasteur coloque una gota pequeña
del agua de charco sobre la lámina.
 Luego con un ángulo de 45º coloque una laminilla dejándola caer
suavemente para evitar la formación de burbujas.
 Enfoque la muestra comenzando con el objetivo de 4X hasta el de 100X.
Debe tener en cuenta que con el objetivo de 100X es necesario aplicar
una gota de aceite de inmersión sobre la preparación.
 Observe y dibuje tres microorganismos que encuentre en la muestra de
agua.

SEGURIDAD EN EL LABORATORIO

Precauciones y Normas para el cuidado del microscopio y del observador

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 Transporte los microscopios con ambas manos, utilizando una para

sujetarlo del brazo y la otra para sostenerlo desde la base.
 Cargue el microscopio siempre de manera vertical para evitar que se caigan
los oculares o cualquier otra pieza.
 Para enfocar un micropreparado comience siempre con el menor aumento.
 Mueva los tornillos o cualquier pieza del microscopio delicadamente.
 Si utiliza el aceite de inmersión para el objetivo de 100X, límpielo al finalizar
utilizando papel de arroz.
 Evite tocar las lentes con los dedos.
 El portaobjetos debe estar siempre seco al ponerlo sobre la platina.
 Cuando finalice su trabajo con el microscopio aíslelo del polvo y del calor
cubriéndolo con una funda.
 Después de finalizada la observación en el microscopio regrese el revolver
hacia el objetivo de menor aumento
 Recuerde que la iluminación baja permite observar más detalles del objeto.
La creencia de que con mayor luz se ve mejor es falsa.
 No olvide dejarlo limpio, apagado y desconectado.
 Mantenga ambos ojos abiertos al momento de observar por el microscopio.
Si usted usa lentes no se los quite para la observación.
Medidas de primeros auxilios: de acuerdo con el procedimiento desarrollado en la
práctica no se genera riesgo alguno.
Medidas contra incendios: no se utiliza material inflamable.
Control de exposición y protección personal: debe utilizar bata de laboratorio.

MANEJO DE RESIDUOS

 En caso de rompimiento de láminas, disponerlas en el guardián para su

disposición final

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RESULTADOS

2. Comprensión del poder de resolución y poder de aumento

Observación de la letra impresa

4X 10X 40X

¿A qué se deben las diferencias observadas en todos los casos?

__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
¿Podría observar separadamente con el microscopio óptico, dos puntos que están
a 10µ entre sí? ¿Y dos puntos que están a 0.1µ? Explique.
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
Determine el poder de aumento del microscopio, es decir; defina ¿cuántas veces
se aumentó el tamaño de la imagen de la letra cuando utilizó los diferentes
objetivos, teniendo en cuenta que el ocular del microscopio era de 10X?

- Objetivo de 4X: _______________________

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- Objetivo de 10X: _______________________

- Objetivo de 40X: _______________________

3. Montaje de muestra de agua de charco

100X

Presente un informe de laboratorio con la siguiente estructura

1. Título del laboratorio

2. Nombre de los integrantes
3. Objetivos
4. Introducción
5. Metodología (elaborar un diagrama de flujo)
6. Resultados
7. Conclusiones (elaborar mínimo 3 conclusiones)

BIBLIOGRAFÍA

 Freeman, S (2009) Biología. Tercera Edición. Editorial Pearson (Texto Guía)

 Campbell, Reece (2007) Biología. 7ma. Ed. Editorial Médica Panamericana.
Online.
 Curtis, Barnes (2006) Invitación a la Biología. Ed. Médica Panamericana, 6ª
edición.
 Mader, S. (2008). Biología. Novena Edición. Biología. McGraw-Hill

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