BIOENSAYOS DE TOXICIDAD AGUDA CON Lactuca sativa

en muestra de agua tomada en la vereda la María

Mora, O 1
1
Estudiante Ingeniería Ambiental. Universidad Nacional Abierta y a Distancia CEAD Yopal e-mail:
morayessica95@gmail.com

RESUMEN

El cromo es un elemento común en la naturaleza, sin embargo, la bioacumulación de este elemento,

especialmente el Cr+6 resulta tóxico, afectando no solamente los ecosistemas, sino también la salud
humana. Este elemento es utilizado en la industria del curtido de pieles, esta industria tiene amplia presencia
en la Vereda La María, en el municipio de Calarcá, Quindío; contaminando el Río Quindío con sus aguas
residuales; por esta razón, se decide realizar un ensayo de toxicidad aguda, con el fin de determinar la
presencia de Cr+6 en el Río Quindío; obteniendo como resultado la inhibición de germinación de las semillas
de Lactuca sativa y la inhibición de la elongación de la radícula en las pocas semillas germinadas.

Palabras clave: Toxicología, ecotoxicidad, metales pesados, contaminación, fuentes hídricas.

ACUTE TOXICITY BIO TESTS WITH Lactuca sativa

ABSTRACT

Chromium is a common element in nature, however, the bioaccumulation of this element, especially Cr + 6 is
toxic, affecting not only ecosystems, but also human health. This element is used in the leather tanning industry,
this industry has a large presence in Vereda La María, in the municipality of Calarcá, Quindío; contaminating
the Quindío River with its wastewater; for this reason, it is decided to conduct an acute toxicity test, in order
to determine the presence of Cr + 6 in the Quindío River; resulting in the inhibition of germination of
the seeds of Lactuca sativa and the inhibition of elongation of the radicle in the few germinated seeds.
Keywords: Toxicology, ecotoxicity, heavy metals, pollution, water sources.

1
1. INTRODUCCIÓN
El cromo es un metal de color blanco plateado, muy
brillante, duro y quebradizo, utilizado
frecuentemente en procesos de curtido de pieles,
entre otras aplicaciones; se encuentra normalmente
en estados de oxidación +2, +2 y +6, siendo este
último uno de los más importante debido a sus
características toxicológicas (Cubreros, Rodríguez,
& Prieto, 2009).
Ilustración 1 Diagrama de rutas del tóxico,
Fuente: autoría propia
Este elemento se encuentra en la naturaleza en
rocas, animales, plantas, suelo y en menor
proporción en los cuerpos de agua y su distribución
depende de las dinámicas y características propias
del cuerpo de agua, su origen y la capacidad de
bioacumulación por la biota (Cubreros, Rodríguez,
& Prieto, 2009), el Cr+3 es insoluble, sin embargo,
en el caso del Cr+6, éste es soluble altamente
soluble y contoamina las fuentes hídricas.
Cuando el Cr+6 contamina los acuiferos, debido a la
descarga de los desechos provenientes de la
industria de las curtiembres, la mayor parte de este
lemento se deposita en el fondo y posteriormente
se diluye, al ser absorvido por los organismos
vivos, este elemento se reduce a Cr+3 y finalmente
Cr+2, causando graves daños en la salud, alterando
el ADN, por lo que es considerado cancerígeno
(Chavez, 2010).
El Cr+6 ingresa al organimos por tres vías:
• Oral: produciendo cuadros
gastrointestinales en forma de vómitos,
dolores abdominales, diarrea y donde se les inyecta oxígeno. Se tiene filtros prensa para
hemorragias intestinales e insuficiencia
renal aguda (Chavez, 2010).
• Respiratoria: Cuando el Cr+6 ingresa por
las vías respiratorias esta causa irritación
del revestimiento interior de la nariz,
2
secreciones nasales y problemas respiratorios
como tos, falta de aliento, respiración jadeante y
asma (Chavez,
2010).
• Cutánea: es causante de alergias y otras
afecciones crónicas como dermatitis e irritaciones.
1.1 Contexto Socieconómico e Histórico-cultural
La industria del cuero es una actividad antigua y tradicional
en el departamento del Quindío que nace a mediados de
los años 70 con el establecimiento de primeras empresas
en el corregimiento la maría en el municipio de Calarcá esta
industria aprovecha al máximo los derivados del cuero,
dando como resultado negativo una serie de desechos que
en años anteriores eran arrojados al rio Quindío causando
daños al ecosistema y a la comunidad residente en el
sector.
Los empresarios entendieron que para poder crecer tenían
que mejoras la calidad de sus productos y disminuir al
máximo el impacto ambiental, para ello se unieron y crearon
la asociación de curtiembre, en el corregimiento la maría.
La asociación nace como una alternativa para trabajar el
tema ambiental de forma conjunta, gracias al apoyo del
gobierno del municipio de Calarcá, la corporación
autónoma regional del Quindío y con recursos propios
logran emprender un proyecto que a mediano y largo plazo
a logrado generar grandes cambios con programas de
descontaminación.
Se inició con el cambio de productos no degradable a
biodegradables, luego con la construcción de tanques
pequeños para tratamientos de agua en cada empresa
posteriormente se canalizaron todas las aguas producidas
individualmente a un solo acueducto industrial que las
trasportara hasta la planta de tratamiento de aguas
residuales, así se redujo notablemente mil toneladas de
contaminantes arrojados a la cuenca hidrográfica del rio
Quindío la idea era lograr un proceso más limpio amigo del
medio ambiente y ser ejemplo a nivel nacional.
En él años 2006 se rediseño la planta de tratamiento de
aguas residuales otra infraestructura funcionando que es el
tanque bioginezador donde se tiene turbinar a aireación
la extracción de lodo, manejo de los lodos y tanques de
sedimentación final, que son depositados en rellenos
sanitarios; con la puesta en funcionamiento de estas
instalaciones se han beneficiado las 20 empresas y la
comunidad ha visto como el rio ha vuelto hacer lo que era
antes, gracias a las convocatorias del destacado fomipyme
por medio de la cual la cámara de comercio debido al
aumento de competitividad de la curtiembre del
sector la maría departamento del Quindío .

Sin embargo, las empresas dedicadas a la industria

del curtido continúan aumentando y algunas no
cuentan con el debido conocimiento y compromiso
con el medio ambiente, por lo que no han identificado
los aspectos e impactos ambientales derivados de
sus actividades, lo que ha generado en la actualidad
que se viertan al río aguas residuales con elementos
dañinos y peligrosos para el medio ambiente que
están afectando los recursos y contaminando el
medio ambiente.
Tomado de (Vargas Doria Medina & Amurrio Derpic, 2017)
Uno de los elementos potencialmente contaminantes
y que más se emplean en la industria del curtido es 1.2.1 Análisis del Cromo en Efluentes
el Cromo, altamente utilizado en el municipio de
Calarcá, Quindío, específicamente en la vereda La Se analizaron muestras en el efluente después de
María en donde se encuentran varias industrias tratamiento realizado a escala de laboratorio, se obtuvieron
dedicadas a esta actividad económica, el Río los siguientes resultados.
Quindío se ha visto afectado por las aguas
residuales generadas en este lugar, afectando
gravemente la calidad del agua del río, del cual
dependen los habitantes del municipio de Armenia,
Montenegro, La Tebaida y Quimbaya (Barrios,
Rodríguez, & Martínez, 2011); entre los
contaminantes más notorios que ha presentado el
Río Quindío, se encuentra el hallazgo de una
cantidad superior a la permitida en la normatividad de
Cr+6 afectando tanto la salud de los habitantes que
dependen de esta fuente hídrica, como al
ecosistema en general (Cronica del Quindio,
2009).

1.2 Estado del Arte

Buscando brindar solución a la problemática de
contaminación generada por las aguas residuales
cargadas de Cromo, investigadores como José L.
Morera proponen un nuevo proceso para llevar a
cabo la curtimbre denominado alto agotamiento del
Cromo, los resultados se presentan a continuación:
En la siguiente tabla se describen el proceso que se
seguirá para el desarrollo del curtido, en donde se
detallan los insumos, el tiempo y condiciones de pH
y temperatura.
Tomado de (Vargas Doria Medina & Amurrio Derpic, 2017)
Se puede concluir a partir de los resultados encontrados
que el curtido convencional genera licores 5 veces más
concentrado con respecto al curtido con alto agotamiento,
y que además el primero que genera 8 veces más efluente.
1.2.2 Ensayos Físicos al Cuero Recurtido
Para realizar estos ensayos se tomó cuero que había
pasado por el proceso de curtido y se realizó un recurtido,
con la intención de determinar la calidad del cuero, con
ensayos específicos que buscaban medir: resistencia a la
rotura, porcentaje de elongación, resistencia al desgarre
simple y doble, rotura y estallido de flor, estos parámetros
se establecen basados en la IUP (International Union
Physical Test)

3

Puede observarse que en proceso convencional se
obtiene valores fuera de la norma para rotura,
porcentaje de elongación desgarre simple y doble,
con el proceso de alto agotamiento por Cromo se
obtienen valores superiores.
De acuerdo a la investigación realizada por (Vargas
Doria Medina & Amurrio Derpic, 2017) se encuentra
que las propiedades del cuero curtido con el proceso
con alto agotamiento empleado produce cueros con
mejores características físicas y químicas, además
se evidencian disminución del volumen de efluente
generado con el proceso con alto agotamiento y la
disminución de la cantidad de Cromo eliminada en el
mismo.
De acuerdo a los resultados de esta investigación,
este nuevo procedimiento de curtido permitiría
generar menores cantidades de Cromo en las aguas
residuales y aporta una mayor calidad al cuero.
1.3. Pregunta de Investigación
A raíz de esta clase de problemas, se plantea la
siguiente pregunta de investigación: ¿Es posible
determinar si actualmente en las aguas del Río
Quindío hay presencia de metales pesados como el
Cr+6, a partir de la puesta en práctica del bioensayo
de fitotoxicidad?
1.4 Justificación del proyecto
El bioensayo permite determinar los efectos
biológicos integrados de múltiples sustancias
tóxicas en el agua en su conjunto, y podría ser una
herramienta poderosa para evaluar la seguridad del
agua recuperada. Aunque los bioensayos han
utilizado modificaciones para describir los efectos
tóxicos del agua recuperada y la efectividad del
tratamiento de las técnicas de recuperación, un
4
solo bioensayo no puede afectar la toxicidad compleja del
agua recuperada y una batería de bioensayos que
implican múltiples efectos biológicos o pruebas in vitro con
mecanismos de toxicidad específicos (Xu, Wei, Wang,
Bai, & Du,
2019).
Una de las aplicaciones más importantes de los
bioensayos es en la evaluación de la contaminación por
sustancias farmacéuticas, especialmente cuando está
relacionada con los antibióticos porque la contaminación
ambiental con antibióticos facilita el desarrollo y la
propagación de la resistencia a los antibióticos entre las
bacterias, incluidos los patógenos (Bielen, y otros, 2017);
Otra aplicación importante de las pruebas de biotoxicidad es
el análisis toxicológico de los venenos, ya que este tipo
de prueba permite determinar la capacidad tóxica de una
sustancia inclusiva si tiene bajas emisiones, como la
presencia de metales pesados en las fuentes hídricas
(Díaz, García, & Riesgo,2019).
En este orden de ideas el desarrollo de este proyecto permite
dimensionar la realidad ambiental de las prácticas
industriales de curtido en la vereda la María en el municipio
de Quindío, para de esta manera aproximarnos al impacto
ambiental que estas actividades están realizando al medio
ambiente, sirviendo como insumo para las autoridades
ambientales y demás miembros de la comunidad académica
y ciudadana, para exigir la práctica de la responsabilidad
social y ambiental por parte de estas empresas que ejercen
la actividad en la zona y el cumplimiento de la normatividad
vigente así como el control de los impactos ambientales
derivados de sus actividades.
1.5 Objetivos
Objetivo General
Identificar si los compuestos procedentes de aguas
residuales que llegan al río Quindío, se encuentran en
concentraciones que afectan el desarrollo del curso normal
del ecosistema
Objetivos Específicos
 Determinar si existe presencia de Cromo en las
aguas del río Quindío.
 Identificar los impactos en la salud de los
habitantes que tienen contacto con las aguas
residuales.
 Formular acciones y recomendaciones para que las
curtimbreras locales utilicen menos Cromo en el
proceso de curtido
 La metodología utilizada se muestra en el siguiente
2. MATERIALES Y METODO diagrama de flujo:

2.1 Marco Geográfico:

Este proyectó fue realizado en la vereda La María,
perteneciente al municipio de Calarcá, Quindío en
límites con el municipio de Armenia, Quindío.

Ilustración 2 Mapa localización del proyecto

En esta zona hay 21 empresas dedicadas a la

curtición de pieles, que pueden afectar el
ecosistema circundante; el cual posee alrededor de
175 familias botánicas y más de 1600 especies de
plantas, así como también una amplia presencia de
fauna silvestre, aves y peces como negrito, lángara,
corroncho, sardinas, entre otros (Barrios,
Rodríguez, & Martínez, 2011).
Metodología:
La prueba empleada corresponde a un Bioensayo de
toxicidad aguda estática a un tiempo de 120 horas,
con el cual se puede evaluar efectos fitotóxicos en
sistemas puros o mezclas compuestas, sobre la
germinación de semillas y en el desarrollo de las
plántulas en el primer ciclo de crecimiento. Se
determina la inhibición en la germinación, elongación
de la radícula y el hipocótilo (Sobrero & Ronco, 2004).
El ensayo de biotoxicidad con lechuga es útil en
muestras de aguas complejas, que pueden ir desde
aguas crudas, hasta aguas residuales domésticas e
industriales. La facilidad para disponer de los
materiales, como las semillas de lechuga, papeles
filtro, solución de agua dura reconstituida, solución de
inhibición total de cloruro de zinc (II) en agua, entre
otros; hacen de esta prueba una alternativa
interesante en pruebas de laboratorio en aulas de
clase, que acompañada de ensayos a La muestra de agua presenta como características
macroinvertebrados y análisis fisicoquímicos, darían
lugar a una determinación objetiva y precisa de la
toxicidad de un efluente en un tiempo determinado.
Fuente: Elaboración propia.
Primero, se evalúa que las semillas utilizadas presenten un
porcentaje de germinación superior al 90%; posteriormente
se realizan de 5 diluciones de la muestra a estudiar, de forma
que se obtengan valores intermedios entre 0 y 100%; en el
caso de las muestras ambientales el factor de dilución se
utiliza es de 0.3 para la preparación de las diluciones.
Luego, se adicionan 4 ml de cada una de las soluciones en
las cajas de Petri y se pone un papel filtro sobre la solución;
se adicionan 20 semillas en cada papel filtro y se tapa la caja
de Petri con plástico.
Finalmente, se reservan las muestras en incubación durante
5 días con una temperatura de
22°C aproximadamente.
3. RESULTADS
La muestra puntual de agua fue tomada en el Río
Quindío, en el sector de La María, en los límites del
municipio de Calarcá y Armenia, Quindío.
Olor: Fuerte y desagradable
Turbiedad: Media
Temperatura: 22.3°C.

5
 Semillas control negativo control positivo muestra duplicado Semillas control negativo control positivo muestra duplicado

1 25 20 16 19 1 18 14 10 8

2 22 19 18 22 2 19 11 9 12

3 20 17 19 17 3 19 11 9 12

4 25 18 20 22 4 26 11 8 10

5 18 21 17 20 5 22 13 10 9

6 17 20 22 18 6 21 14 11 9

7 18 22 23 18 7 22 15 11 9

8 19 21 8 20 18
Ilustración 3 Toma muestra salida de la estación de
9 19
tratamiento de aguas de las Curtiembres, 25
en la zona de 9 20 18

10 la María, Calarcá,
20 Quindío. 19 10 18 17

11 22 18 11 19 16

12 Control control
22 12 16
Muestra Duplicado
positivo negativo
13 21 13 14
Número de
semillas 14 11 19 18 7 7 14 13
germinadas 15 25 15 14
% de
55% 23 90% 35% 35%
Germinación16 16 20

17 25 17 22

18 20 18 18

Promedio 21,1 20 19,3 19,4 Promedio 18,9 14,4 9,7 9,9

Enlongación del hipocótilo

Semillas control negativo control positivo muestra duplicado Semillas control negativo control positivo muestra duplicado

1 25 20 16 19 1 18 14 10 8

2 22 19 18 22 2 19 11 9 12

3 20 17 19 17 3 19 11 9 12

4 25 18 20 22 4 26 11 8 10

5 18 21 17 20 5 22 13 10 9

6 17 20 22 18 6 21 14 11 9

7 18 22 23 18 7 22 15 11 9

8 19 21 8 20 18

9 19 25 9 20 18

10 20 19 10 18 17
4. DISCUSIÓN
11 22 18 11 19 16

12 22 12 16
De acuerdo con los resultados obtenidos en el ensayo se
13 21 13observó que14 el 61,1% de las semillas presentaron una
14 19 14inhibición 13
en la germinación, así mismo, se observó una
15 25 15
inhibición 14
en la elongación del hipocótilo del 8,5% y una
inhibición en la elongación de la radícula del 48,67%.
16 23 16 20

17 25 17
Lo anterior22demuestra que cuando hay presencia de aguas
18 20 contaminadas
18 18 con metales pesadas, se inhibe
Promedio 21,1 20 19,3 19,4 principalmente
Promedio 18,9 la germinación
14,4 de9,7semillas9,9en las zonas más
cercanas del lugar contaminado; lo cual puede ser
corroborado en las diferentes fuentes bibliográficas
Enlongación de la radícula
relacionadas con el tema (Rodríguez, y otros, 2014).

6
En atención a la fase de germinación del
Bioensayo, se presume la existencia de
contaminantes en la muestra de agua
analizada en relación con los datos arrojados
y analizados en el simulador de cálculo con
las fórmulas inmersas en este, de modo que
por ejemplo en las cajas de bioensayo con
disolución C- constituida por Agua potable sin
gas y sin saborizante, NO se generó cambio
significante alguno en su germinación siendo
entonces su porcentaje de germinación al
100%, es decir que presuntamente se podría
decir que el lugar de estudio cuenta con agua
adecuada para riego y sus condiciones
fisicoquímicas permiten un adecuado proceso
de germinación de lechuga.
Así las cosas, según el crecimiento de la
radícula y el Hipocótilo (EH) de la lechuga y
en lo concerniente a la coloración”necresis”,
inclinación y desarrollo, corresponde a una
concentración NOEC, en razón a que es una
de los promedios más altos que no causa un
efecto estadísticamente diferente que el
control negativo a través de la prueba
estadística de hipótesis. Por otra parte, se
podrían decir que los promedios de
elongación de la radícula son simulares a los
resultados de la elongación del hipocotilo, así
las cosas es evidente que la concentración
tóxica máxima aceptable (MATC) se presenta
en suelos mal drenados y que
su carga contaminante del suelo es tan alta
que se podría decir con precisión, que el límite
de confianza del ensayo fue del 95% y
corresponde entonces a La CE50.
Por lo que se recomienda el tomar conciencia
respecto de los acuerdos internacionales en la
materia por ejemplo la Declaración de la
Conferencia de las Naciones Unidas sobre el
Ambiente Humano (1972), la Declaración de
Nairobi (2009), la Declaración de Río de
Janeiro sobre Ambiente y Desarrollo (1992), el
Convenio sobre Diversidad Biológica (1992),
la Convención de Naciones Unidas de Lucha
contra la Desertificación y Sequía (1994), la
Convención de Naciones Unidas para el
7
Cambio Climático (1992) y, la Declaración de
Johannesburgo sobre Desarrollo Sostenible (2002).
PROPUESTA DE RESTAURACIÓN
Las propuestas de restauración para la vereda la María,
corresponde a medidas tendientes a que las empresas
curtimbreras establecidas en el lugar procedan a
implementar planes de manejo ambiental para el control y
seguimientos de los impactos que generan al medio
ambiente, a través de optimización de sus procesos para
disminuir la cantidad de Cromo generada, así como las
aguas residuales y demás químicos y contaminantes
generados en sus actividades.
Por otro lado, una medida que permitiría brindar una
solución eficaz corresponde a la construcción de una planta
de tratamiento de aguas residuales para la zona.
Ficha de monitoreo ambiental
FICHA DE Vereda la María
Indicador experimental Ensayo de inhibición de lactuca sativa.
de comprobación
Calendario de campañas Enero Marzo Junio Septiembre
de comprobación
Descripción de la Busca medir las concentraciones de Cromo en
campaña el cuerpo de agua y determinar si las medidas
tomadas resultan efectivas. Para ellos se
establece un programa de monitoreo, de
parámetro fisicoquímicos de pH, Conductividad
temperatura y biotoxicidad.
Puntos de comprobación Muestreo en puntos aleatorios seleccionados a
través de GPS siempre los mismos
Exigencias técnicas de Calibración adecuada para la obtención de
comprobación parámetros fisicoquímicos
Medidas de urgencia Desarrollo de proyecto de contrucción de
planta de tratamiento de aguas residuales
Fuente: (Borderías Uribeondo & Muguruza Cañas, 2014)
4
5. CONCLUSION
La aplicación de los bioensayos permite la
determinación de la presencia de metales en el
ambiente, para este caso, la detección del Cr+6,
puesto que este metal disminuye la actividad
enzimática y crecimiento general de las plantas,
produciendo daños en la membrana, clorosis y
daños a nivel de la raíz (Beltrán & Gómez, 2015).
Díaz, L., García, A., & Riesgo, J. (2019). Drosophila
Esta situación confirma la razón por la cual se
observó la inhibición de la germinación y la
elongación de la radícula, en los resultados del
bioensayo.
6. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Rodríguez, A., Robles, C., Ruíz, R., López, E.,
Barrios, C., Rodríguez, M., & Martínez, O. (2011).
Formulación plan de manejo subcuenca del
Río Quindío. Armenia: Corporación
Regional Autónoma del Quindío.
Bielen, A., Simatovic, A., Kosic, J., Senta, I., Ahel,
M., Bábic, S., . . . Udikovic, N. (2017).
Cubreros, E., Rodríguez, A., & Prieto, E. (2009).
Niveles de cormo y alteraciones de salud
en una población expuesta a las
actividades de curtiembres en Bogotá,
Colombia. Salud Pública, 11(2), 278-289.
Obtenido de
http://www.scielo.org.co/pdf/rsap/v11n2/v11
n2a12.pdf
bioassays are very sensitive methods to
assess tarantula species venoms. Journal
of pharmacological and toxicological
methods, 56-60.
doi:https://doi.org/10.1016/j.vascn.2019.01.
003
Sedeño, J., & Rodríguez, A. (2014). Índices
de germinación y elongación radical de
Latuca sativa en el biomonitoreo de la
calidad del agua del Río Chaman.
Contaminación Ambiental. Obtenido de
http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=
sci_arttext&pid=S0188-
49992014000300007

Xu, J., Wei, D., Wang, F., Bai, C., & Du, Y. (2019).
Bioassay: a useful tool for evaluating
Negative enviornmental impacts of reclaimed water safety. Journal of
antibiotic-contaminated effluents from Enviornmental Sciences, 165-176.

pharmaceutical industries. Water Research, Obtenido de

79-87. https://doi.org/10.1016/j.jes.2019.08.014
doi:http://dx.doi.org/10.1016/j.watres.2017.0
9.019

Chavez, A. (2010). Descripción de la nocividad del

cromo provenient de la industria curtiembre
y de la posibles formas de removerlo.
Revista de Ingenierías Universidad de
Medellín, 9(17), 41-49. Obtenido de
https://www.redalyc.org/pdf/750/750171640
03.pdf

Cronica del Quindio. (10 de 29 de 2009).

Curtiembres de nuevo a examen por altos
niveles de cromo. La Crónica del Quindío.
Obtenido de
https://www.cronicadelquindio.com/noticia-
completa-titulo-
curtiembres_de_nuevo_a_examen_por_alt
os_niveles_de_cromo -seccion-
Econ%C3%B3micas-nota-5270.htm