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EVALUACIÓN EXPERIMENTAL DE LOS EFECTOS HIPOGLUCEMIANTES DE

UN EXTRACTO A PARTIR DEL ARILO DEL FRUTO DEL ACKEE (BLIGHIA


SÁPIDA)

LUIS FELIPE CASTELLANOS FORERO

UNIVERSIDAD DE SAN BUENAVENTURA


FACULTAD DE INGENIERIA
PROGRAMA DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL
SANTIAGO DE CALI
2010
EVALUACIÓN EXPERIMENTAL DE LOS EFECTOS HIPOGLUCEMIANTES DE
UN EXTRACTO A PARTIR DEL ARILO DEL FRUTO DEL ACKEE (BLIGHIA
SÁPIDA)

LUIS FELIPE CASTELLANOS FORERO

Trabajo de grado para optar al título


De Ingeniero Agroindustrial

Director
GLORIA CARMENZA RODRIGUEZ DE LA PAVA

UNIVERSIDAD DE SAN BUENAVENTURA


FACULTAD DE INGENIERIA
PROGRAMA DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL
SANTIAGO DE CALI
2010
Al todo poderoso por iluminarme,
guiarme y darme la fuerza para salir
adelante con este proyecto.
A mi familia por el apoyo y la
paciencia en todo momento.
A la profesora Gloria Rodríguez y
demás profesores por el incondicional
apoyo.
A mi Isa tú sabes por qué.
Y a todas las personas que de una u
otra manera me apoyaron en la
culminación de este proyecto.

III
AGRADECIMIENTOS

El autor agradece a:

A la profesora Gloria Carmenza Rodríguez de la Pava por su apoyo y


valiosa orientación.

A los profesores del programa de Ingeniería Agroindustrial por sus


aportes hechos al proyecto.

A Lorena Gonzalez Echeverri e Isabela Montes Gonzalez por su


participación en el desarrollo del proyecto.

Al personal del laboratorio de investigaciones y química por su


colaboración y aportes.

Al bioterio de la Universidad del Valle por su aporte en la adquisición y


manejo de los biomodelos.

Al Cementerio Metropolitano del sur por su colaboración en la


adquisición de fruta para la investigación.

IV
TABLA DE CONTENIDO

Agradecimientos IV
Lista de tablas VII
Lista de fotografías VIII
Lista de figuras IX
Introducción X
2. Antecedentes 11
3. Justificación 16
4. Objetivos 18
5. Planteamiento del problema 19
6. Marco teórico 20
6.1. Ackee (Blighia sápida) 20
6.2. Hipoglicinas 23
6.3. Diabetes 24
6.4. Hipoglucemia 26
6.5. Hiperglucemia 27
6.6. Insulina 28
6.7. Técnicas de extracción 28
6.8. Alloxan 33
6.9. Biomodelos 34
7. Metodología 38
7.1. Fases 38
7.1.1. Fase 1 38
7.1.2. Fase 2 40
7.2. Diseño experimental 45
7.3. Análisis de varianza 47
7.4. Análisis de pesos 48
8. Resultados 49
8.1. Extracción 49
8.2. Evaluación del efecto del extracto experimental
en ratones con diabetes inducida 50
8.3. Desarrollo del diseño experimental 60
8.4. Análisis de pesos 61
9. Conclusiones 63
Bibliografía 64
Fuentes y recursos electrónicos 67
Anexos 68
LISTA DE TABLAS

TABLA 1: Recolección de datos (glucosa) 43


TABLA 2: Recolección de datos (peso) 44
TABLA 3: Glucosa sanguínea 45
TABLA 4: Calculo de promedios 46
TABLA 5: Análisis de varianza 47
TABLA 6: Análisis de pesos 48
TABLA 7: Tratamiento # 1; (Variación de glucosa) 50
TABLA 8: Tratamiento # 1; (Variación de peso) 51
TABLA 9: Tratamiento # 2; (Variación de glucosa) 52
TABLA 10: Tratamiento # 2; (Variación de peso) 53
TABLA 11: Tratamiento # 3; (Variación de glucosa) 54
TABLA 12: Tratamiento # 3; (Variación de peso) 55
TABLA 13: Tratamiento # 4; (Variación de glucosa) 56
TABLA 14: Tratamiento # 4; (Variación de peso) 57
TABLA 15: Tratamiento # 5; (Variación de glucosa) 58
TABLA 16: Tratamiento # 5; (Variación de peso) 59
TABLA 17: Análisis de varianza desarrollado 60
TABLA 18: Análisis de pesos 61

VII
LISTA DE FOTOGRAFIAS

FOTO 1: Árbol del Ackee 20


FOTO 2: Diferentes Estados de madurez del Ackee 21
FOTO 3: Fruto del Ackee en estado de madurez optimo para extraccion 39
FOTO 4: Montaje del sistema de extracción 39
FOTO 5: Arilo dentro del equipo de extracción 40
FOTO 6: Acomodación de los biomodelos 41
FOTO 7: Preparación de solución acuosa de glucosa 42
FOTO 8: Suministro de extracto a los biomodelos 43
FOTO 9: Extracto final 49

VIII
LISTA DE FIGURAS

FIGURA 1: Imagen de extractor soxhlet 31


FIGURA 2: Grafico nivel de glucosa vs tiempo; tratamiento # 1 51
FIGURA 3: Grafico nivel de glucosa vs tiempo; tratamiento # 2 53
FIGURA 4: Grafico nivel de glucosa vs tiempo; tratamiento # 3 55
FIGURA 5: Grafico nivel de glucosa vs tiempo; tratamiento # 4 57
FIGURA 6: Grafico nivel de glucosa vs tiempo; tratamiento # 5 59

IX
INTRODUCCIÓN

Este trabajo de investigación pretende dar uso de manera experimental al arilo


de la planta de Ackee (Blighia sapida), la cual se conoce poco en el país,
desaprovechando sus propiedades nutricionales y farmacéuticas.

Esta planta contiene una sustancia denominada hipoglicina A, [ácido L - α-


amino – β - (metilenciclopropil) propionico] se ha determinado que dicha
sustancia tiene propiedades hipoglucemiantes (P.Bell, 2001)

Con el fin de determinar el efecto hipoglucemiante del extracto, Se obtuvo un


extracto crudo a partir del arilo del Ackee, (Blighia sapida) y fue evaluado en
biomodelos Balb C con diabetes inducida, en estos se midieron y analizaron
variables tales como glucosa sanguínea y peso en los animales, estos datos
permitieron concluir la efectividad del extracto como producto hipoglucemiante
y así dejar una puerta abierta a nuevas investigaciones que puedan llegar al
uso del extracto en el control de la diabetes mellitus.

X
2. ANTECEDENTES

La diabetes, llamada comúnmente por la población “padecer de azúcar en la


sangre”, es una enfermedad que se caracteriza porque la persona manifiesta una
elevada concentración de glucosa en la sangre debido a la insuficiencia de
insulina, la falta de niveles adecuados de insulina o ambas, lo que provoca
anormalidades metabólicas en los carbohidratos, lípidos y proteínas.

Esta enfermedad se caracteriza porque quien la padece exhibe frecuentemente


los siguientes síntomas: sensación de sed intensa (polidipsia), sensación de
hambre (polifagia), pérdida de peso, debilidad, nerviosismo y sensación de
malestar; también se debe resaltar que la persona se vuelve más propensa a
desarrollar infecciones; muchas veces puede complicarse con problemas en los
riñones, pérdida de la vista, infartos y falta de circulación en las extremidades, lo
que provoca en ocasiones la gangrena de dedos, pies o piernas completas
(Ramos R. R. 1980).

La diabetes es un problema creciente en todo el mundo. Se han realizado


proyecciones estadísticas sobre el número de individuos diabéticos mayores de 20
años que habrá en el año 2025, encontrándose que en los países desarrollados la
cantidad aumentará de 51 millones a 72 millones, pero en los países en vías de
desarrollo la cifra es más alarmante ya que la cantidad crecerá de 84 millones a
228 millones (OMS.1998)

A pesar de que existe en el mercado un número considerable de medicamentos


para el control de la enfermedad, un amplio sector de la sociedad muchas veces
no puede hacer uso de ellos en virtud de su precaria situación económica,
viéndose así en la necesidad de recurrir a la naturaleza a través del uso de plantas
considerado como una fuente barata o gratuita de medicamentos útiles para tratar
la enfermedad.

11
El estudio de las plantas medicinales es, sin duda alguna, uno de los temas de
mayor importancia para la humanidad. De acuerdo con la Organización Mundial
para la Salud de las Naciones Unidas (2001), más de 3,300 millones de personas
que viven en las naciones en vías de desarrollo utilizan plantas medicinales en
forma regular; por otra parte, más de la mitad de los medicamentos que usa la
medicina moderna proviene de las plantas.

Las plantas medicinales con actividad antidiabética pueden aportar una fuente útil
de nuevos compuestos orales hipoglicemiantes, ya sea como fármacos o como
coadyuvantes de las terapias existentes (OMS.1998). Otra razón importante para
estudiar el uso de tales plantas es validar científicamente su efectividad y
recomendar su uso, lo cual probablemente contribuya a reducir el costo del
cuidado de la salud de los pacientes.

Se sabe que en el mundo hay aproximadamente 343 plantas que han sido
sometidas a experimentos de laboratorio, gracias a lo cual se han podido
demostrar sus efectos hipoglicémicos, es decir, su capacidad de bajar los niveles
de glucosa en la sangre. Se tienen registradas 269 especies de plantas que se
utilizan empíricamente para el control de la diabetes, 80 de las cuales ya se han
estudiado, demostrándose que la mitad de ellas poseen efectos hipoglicémicos.
Las conocidas como tronadora, saúco amarillo (Tecoma stans) y una especie de
nopal (Opuntia streptacantha) son las plantas antidiabéticas más comúnmente
empleadas (Pérez G. S.(1998).

En el caso del nopal (Opuntia ficus indica y Opuntia streptacantha), su actividad


curativa fue establecida administrando sus extractos por vía oral a ratas y
determinando después la concentración de glucosa en el laboratorio (Silvestre
Hernández R y Lizbeth Callejas. 2005)

En algunos estudios hechos para comprobar la actividad de diferentes


concentraciones de un extracto de la albahaca morada (Ocimunsanctum L.) en
biomodelos, se ha observado el efecto hipoglicemiante de esta planta. Los
12
resultados obtenidos demuestran que el diseño experimental es efectivo para
disminuir la glucosa mediante las diferentes dosis estudiadas, lo que permitirá
experimentar con dosis más efectivas en organismos más complejos, y
posteriormente en los humanos (Silvestre Hernández R y Lizbeth Callejas. 2005)

Investigadores turcos del área médica prepararon un cocimiento de las raíces de


Rheum ribes, y administraron oralmente los extractos obtenidos a ratas sanas y
enfermas, volviendo diabéticas a estas últimas tras la administración de un
fármaco. Después, compararon los resultados con la aplicación de otro
medicamento hipoglicémico, hallando que los extractos poseen un efecto que
disminuye la glucosa en la sangre de animales diabéticos, pero no en la de
animales sanos. El experimento demostró también que los extractos de la cocción
de las raíces de las plantas utilizadas son más potentes durante la primera hora
tras la aplicación que en la segunda (Nájera B., A. 1998).

En otro experimento realizado por Ghosh, Sharatchandra y Thokchom 1999, se


comprobó la actividad hipoglicémica de los extractos de Ficus hispidus en ratas
sanas y diabéticas(glicemia en sangre superior a 180mg/ml); estos investigadores
utilizaron además, como en el experimento anterior, un medicamento
hipoglicémico para comparar el efecto del extracto, logrando una reducción
significativa de los niveles de glucosa en la sangre de ambos grupos de ratas; sin
embargo, la reducción de glucosa mediante el extracto fue menor que la obtenida
con el fármaco estándar (Nájera B., A. 1998).

En México también se realizan estudios de este tipo en este país se investigo la


actividad hipoglicémica de los extractos de hierba dorada (Brickellia
veronicaefolia), trompetilla (Bouvardia terniflora) y cuajilote (Parmentiera edulis),
utilizando diferentes sustancias para obtenerlos y empleando tanto ratones
normales como diabéticos (Pérez G.S. 1998).

Los resultados confirmaron la actividad hipoglicemiante de estas plantas, que son


usadas en la medicina tradicional para el tratamiento de la enfermedad.

13
En algunos pueblos de México se han encontrado registros gracias a los cuales se
sabe que los diabéticos utilizan los frutos de la cactácea niguilla –también llamada
lágrimas de San Pedro, racimo de perlas o mano de muerto (Rhipsalis baccifera)
para contrarrestar la enfermedad, pues al no contar con suficientes recursos
económicos ven en esa planta una ayuda para tratar su enfermedad. Por ello, en
algunos estudios preliminares realizados en el Instituto de Investigaciones
Biológicas de la Universidad Veracruzana de dicho país se ha encontrado que los
extractos de dicha planta, administrados por vía intramuscular a ratas hembras de
la línea Wistar, tienen efectos positivos al disminuir la concentración del azúcar en
la sangre de estos roedores; sin embargo, tal como se menciona, son resultados
preliminares, por lo que aún se debe profundizar más en la investigación para
que sus resultados puedan ser más confiables y comience la aplicación de los
mencionados extractos a otras especies de animales, para que más tarde y con
mayor certeza se puedan utilizar en humanos en las dosis adecuadas (Pérez G.S.
1998).

De acuerdo a estudios realizados por NIDDK (NIDDK, National Institute of


Diabetes and Digestive and Kidney Diseases, 1995) Se ha podido determinar que
la planta de Ackee (Blighia sápida) contiene una serie de péptidos con principios
activos denominados hipoglicinas (derivados del ácido aminopropilpropiónico) las
cuales son efectivas como hipoglucemiantes en animales de laboratorio normales
o diabéticos, y también en el hombre donde mejoran el aprovechamiento de
glucosa por los tejidos que inhiben la glucogénesis. La hipoglucemia inducida por
el Ackee (Blighia sápida) produce trastornos caracterizados por un descenso por
debajo de lo normal del nivel de glucosa en la sangre.

Dentro de los actuales usos (cosmetología y consumo en fresco(Hermann Schmidt


– Hebbel,1996) ) que se le dan al fruto exótico del Ackee (Blighia sápida), el cual
es poco explotado a nivel mundial, no se ha encontrado ninguno relacionado con
el manejo de las hipoglicinas contenidas en el mismo, dejando de lado muchos
usos alternativos que la planta puede llegar a brindar, ya que de acuerdo con su

14
composición (ver anexo I) es un fruto que puede generar alternativas viables de
nutrición.( Hollingworth, P. 1997).

A manera de conclusión diré que hay un gran número de plantas candidatas para
el tratamiento de la diabetes; no obstante, muchas de ellas todavía requieren ser
analizadas desde el punto de vista farmacológico y clínico para precisar con mayor
detalle sus mecanismos de acción celular y molecular, así como para purificar los
compuestos responsables de la propiedad hipoglicémica.

15
3. JUSTIFICACION

La diabetes es una enfermedad que se caracteriza por un estado de hiperglicemia


crónica, es decir, una elevación persistente de la glicemia sobre los límites
normales, dicho en términos simples, un alza perseverante del azúcar en la
sangre, esta es una enfermedad multiorgánica ya que puede lesionar casi todos
los órganos. El tratamiento adecuado permite disminuir el número de
complicaciones. Se distinguen dos formas de diabetes mellitus: La tipo I, o
diabetes mellitus insulino-dependiente (DMID), es decir, requiere para su
tratamiento solo y exclusivamente insulina y se presenta en la niñez, por eso
también se le llama diabetes juvenil y abarca el 10% de las diabetes. La tipo II, o
diabetes mellitus no-insulino-dependiente (DMNID), es decir, no requiere
necesariamente insulina para su tratamiento, se presenta en el adulto y abarca el
90% de las diabetes.

El estilo de vida de los últimos decenios ha incrementado el número de personas


con diabetes. Hasta hace dos años había 176 millones de diabéticos en el mundo;
dentro de 25 años habrá tantos diabéticos como pobladores tiene hoy América
Latina (OMS. 1997) Este aumento se debe a varios factores, entre los cuales se
destacan la raza, cambio en los hábitos de vida y el envejecimiento de la
población.

En Colombia actualmente hay alrededor de un millón de diabéticos, y la tendencia


creciente continúa, en el 2030 serán casi 2,5 millones de personas; la población
urbana con diabetes oscila entre 7 y 8%, mientras en las zonas rurales es del 1 al
2%. En cuanto a la edad, el 5% de las personas menores de 30 años presentan
diabetes, y en los mayores de 60 sube a más del 20%. Cerca de un 30 a 50% de
las personas desconoce su problema por meses o años. La diabetes puede
heredarse (existe población infantil con dosis diarias de insulina), pero, sobre todo,
la diabetes puede prevenirse mediante la dieta, el ejercicio, la vigilancia médica y

16
el consumo limitado de calorías (en particular grasas y azúcares refinados)
(Ministerio de la Protección Social, 2007).

Debido a los antecedentes hipoglucemiantes que presentan las hipoglicinas


contenidas en la planta de Ackee, las cuales son eficaces en la reducción de la
glucemia, al inhibir la gluconeogénesis y promover la utilización de la glucosa, se
ha definido un grupo poblacional al cual será dirigido este proyecto, este grupo son
los diabéticos.

La idea de producir una sustancia en pro de la población diabética asociando la


hipoglucemia inducida por el Ackee, con los diabéticos, podría ser de mucha
utilidad para este grupo poblacional, debido a que esta planta contiene una serie
de péptidos denominados hipoglicinas, las cuales son efectivas como
hipoglucemiantes.

Dentro del estado del arte de la planta de Ackee (Blighia sápida), no se tiene
referencia alguna de que ésta haya sido explotada adecuadamente en nuestro
país; es por esto que se quiere plantear la alternativa de un extracto derivado del
arilo del fruto de la planta dirigido a personas con déficit en la asimilación de
carbohidratos, teniendo como principio que ésta contiene una gran cantidad de
sustancias viables para la nutrición humana y el control de enfermedades como la
diabetes.

De esta manera, se estaría utilizando un planta que posee muchas características


alimenticias y medicinales para darle un uso agroindustrial, donde ésta solamente
es utilizada en Colombia ornamentalmente (Duque del James, 2002).

17
4. OBJETIVOS

4.1 OBJETIVO GENERAL

Evaluar experimentalmente el efecto hipoglucemiante del extracto obtenido a partir


del arilo de la planta del Ackee (Blighia sápida)

4.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS

• Obtener un extracto a partir del arilo del Ackee (Blighia sápida).


• Evaluar el efecto hipoglucemiante del extracto en ratones Balb C con
diabetes inducida.

18
5. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

¿Es posible extraer un componente activo del arilo de la planta de Ackee (Blighia
sápida) que pueda lograr una disminución significativa en los niveles de azúcar
en la sangre?

19
6. MARCO TEÓRICO

6.1 ACKEE (Blighia sápida)

El Ackee es una planta originaria de África y de Centro América a la cual solo se le


ha dado un uso artesanal. Es la fruta nacional de Jamaica, traída de África del
Oeste en el siglo XVIII. Es un árbol alto (hasta 12 metros) y frondoso que produce
frutos en racimos ampliamente usados para el consumo humano en estado
maduro. Se encuentra en varios países del mundo y de la Región de las Américas,
donde es conocido bajo diversos nombres, como “Arbre à fricasser” en Haití, “yeux
de crabe” o “ris de veau” en Martinica, “fruto de huevo” en Panamá y Guatemala,
“árbol de seso” en Cuba, “merey del diablo” en Venezuela, “pan y quesito” en
Colombia, o “pera roja” en México (Ver Foto 1). El fruto se produce dos veces al
año, entre enero y marzo y luego entre junio y agosto. La fruta, de color amarillo,
tiene la forma de una cápsula oblonga y contiene tres arilos de color crema. Se
pueden consumir los arilos sin riesgo para la salud cuando la fruta se vuelve roja y
se abre ante la exposición de los rayos del sol ya que estos disminuyen la
concentración de la hipoglicina A (OMS. Boletín Epidemiológico, Vol. 22 Nº 2.
2001)

FOTO 1: Árbol del ackee

Fuente: El autor (2010)

20
De manera común se hierve en agua o leche y se come solo o incluido en platos
de carne o pescado. En algunos países de África, se consume crudo. La fruta del
Ackee no es comestible en su totalidad. Solamente los arilos carnudos alrededor
de las semillas son comestibles mientras que el resto de la fruta y las semillas son
venenosos. La fruta debe ser seleccionada y procesada solamente después de
que se haya abierto naturalmente, y debe ser fresca y no demasiado madura (Ver
Foto 2). La fruta no madura y demasiado madura de Ackee es también venenosa.
(OMS. Boletín Epidemiológico, Vol. 22 Nº 2. 2001)

FOTO 2: Diferentes estados de madurez del Ackee

Fuente: El autor (2010)

Se conoce que la planta de Ackee (Blighia sápida) contiene una serie de péptidos
con principios activos denominados hipoglicinas (derivados del ácido
aminopropilpropiónico) las cuales son efectivas como hipoglucemiantes en
animales de laboratorio sanos o diabéticos, y también en el hombre donde
mejoran el aprovechamiento de glucosa por los tejidos que inhiben la
glucogénesis. La hipoglucemia inducida por el Ackee (Blighia sápida) produce
trastornos caracterizados por un descenso por debajo de lo normal del nivel de
glucosa en la sangre. (Morton J. 1987.)

21
En experimentos de alimentación en la Universidad de Miami, el Dr. Edward
Larson (2001) encontró que la membrana de las frutas abiertas era inofensiva; en
pruebas con conejos estos murieron de inmediato al consumir los arilos sin
madurar; en el mismo ensayo con ratas estas fueron resistentes y tuvieron que
ser alimentadas a la fuerza para producir un envenenamiento fatal. Se ha
encontrado que las ardillas hacen agujeros en los frutos sin abrir en el árbol para
consumir los arilos sin madurar pero dejan intactas las semillas. (Morton J. 1987.)

La intoxicación en los seres humanos se evidencia por vómitos agudos, diarrea


(llamada "enfermedad del vómito" en Jamaica), seguido de somnolencia,
convulsiones, coma y con demasiada frecuencia, la muerte. Debido a los efectos
hipoglucemiantes, la administración de soluciones azucaradas ha sido muy útil.
(Mc Kean, (1977).

OTROS USOS

Fruto: En el oeste de África, los frutos verdes, que producen espuma en el agua,
se utilizan como blanqueador. Las frutas trituradas se utilizan como veneno para
peces. Las semillas, debido a su contenido de aceite, y la corteza por su
contenido de potasio, son quemados y las cenizas utilizadas en la fabricación de
jabón. (Morton J. 1987.)

Flores: En Cuba un extracto de las flores se utiliza como colonia. (Morton J.


1987.)

Madera: Esta es blanca o de color marrón verdoso, de grano grueso e inmune a


las termitas. Se utiliza para la construcción y ha sido recomendado para
traviesas de ferrocarril. También para la fabricación de remos y toneles. (Morton
J. 1987.)

Usos medicinales: En Brasil, pequeñas dosis de un extracto acuoso de la


semilla ha sido administrado para expulsar parásitos. Los cubanos mezclan los
arilos maduros con azúcar y canela como tratamiento para la disentería. En la
22
Costa de Marfil, la corteza se mezcla con especias picantes en un ungüento
aplicado para aliviar el dolor muscular. Las hojas maceradas se aplican en la
frente para el dolor de cabeza. Las hojas, maceradas con sal, se aplican sobre las
úlceras dérmicas. El jugo de las hojas se emplea como gotas para los ojos en la
conjuntivitis. En Colombia, las hojas y la corteza se consideran útiles para los
dolores de estomago. Varias preparaciones se hacen para el tratamiento de la
epilepsia y la fiebre amarilla. (Morton J. 1987.)

6.2 HIPOGLICINAS

La hipoglicina A es una sustancia soluble en agua que induce hipoglucemia


mediante la inhibición de la gluconeogénesis, secundaria a la limitación de
cofactores (CoA y carnitina) esenciales para la oxidación de ácidos grasos de
cadena larga

La hipoglicina es metabolizada por transaminación y descarboxilación oxidativa


para formar ácido metileneciclopropilacético (MCPA). Qué forma luego esteres no
metabolizables con la carnitina y la coenzima A (CoA) tornándolos inútiles
metabólicamente. (RODES, J. 2001). La hipoglicemia se da porque la CoA y la
carnitina son necesarios para la oxidación de ácidos grasos de cadena, un paso
indispensable para la gluconeogénesis. (OMS. Boletín Epidemiológico, Vol. 22 Nº
2. 2001).

Las epidemias mortales de esta intoxicación han sido bien estudiadas en Haití,
África Occidental, y Jamaica. (MARTIN, Thomas C, vol.12. 2002) Estas epidemias
tienden a coincidir con la escasez de alimentos (OMS. Boletín Epidemiológico, Vol.
22 Nº 2. 2001). La enfermedad se caracteriza por una hipoglucemia profunda y
vómitos intratables con la ingesta de la fruta cuando no está madura. Antes del
reconocimiento generalizado de la hipoglucemia producida por esta enfermedad,
la tasa de mortalidad estaba alrededor del 80%.
23
6.2.1 HIPOGLICINAS EN EL ACKEE

En la fruta inmadura de ackee la concentración de hipoglicina A es 20 veces


mayor que en la fruta madura, sin embargo el nivel de concentración de la toxina
baja rápidamente después de su exposición al sol. Las semillas de la fruta
contienen hipoglicina B y siempre son venenosas. El estado nutricional de la
persona que ingiera la fruta viche también parece ser un factor importante de la
intoxicación, ya que pacientes diagnosticados muchas veces presentan
malnutrición crónica y deficiencias de vitaminas. . (RODES, J. 2001).

6.3 DIABETES
La diabetes es un problema por el cual el cuerpo no puede controlar la cantidad de
glucosa (azúcar) en sangre porque el páncreas no produce insulina, no elabora
suficiente insulina, o sus células corporales son resistentes a la acción de la
insulina. Así pues, cuando los niveles de glucosa en sangre se elevan por encima
de 105mg/ml (Rango óptimo de glicemia 70 – 105mg/ml), la glucosa no puede
penetrar en las células corporales y, por lo tanto, éstas se ven despojadas de su
fuente usual de energía. El cuerpo responde intentando eliminar el exceso de
glucosa de la sangre y usando la grasa y las proteínas (del músculo) como fuentes
alternativas de energía. Esto altera algunas de sus funciones corporales y puede
provocar algunos síntomas de la diabetes. (Roca, Alfredo Jácome 2005).

Cuando se tiene unos niveles altos de glucosa en sangre, puede experimentar


síntomas como la producción de grandes cantidades de orina y una sed excesiva.
Esto se debe a que el cuerpo elimina el exceso de glucosa, filtrándola a través de
los riñones, mediante la orina (la sed es resultado de la deshidratación). Además,
como el cuerpo no puede utilizar la glucosa adecuadamente para obtener energía,
la obtiene metabolizando reservas musculares y grasas. Esto puede provocar una
pérdida de peso y, en el caso de una metabolización rápida de la grasa, una
acumulación de sustancias químicas tóxicas en la sangre. . (Roca, Alfredo Jácome
2005).
24
Existen dos tipos de diabetes: la tipo 1 y la tipo 2. La segunda es la más común.
El tipo 1 y el 2 son enfermedades muy distintas entre sí. Existen también otros
tipos de diabetes que afectan a un número muy reducido de personas: la Diabetes
Juvenil de Inicio Tardío (DJIT), la diabetes gestacional, y formas más raras
relacionadas con infecciones, medicaciones y daños o lesiones pancreáticos. .
(Roca, Alfredo Jácome. 2005).
6.3.1 Diabetes Tipo 1
Anteriormente conocida como “diabetes juvenil” o “diabetes insulino-dependiente”,
afecta a menos de 1 de cada 5 personas que padecen diabetes. Generalmente
aparece durante la infancia, la adolescencia o al principio de la edad adulta. Los
pacientes con diabetes de tipo 1, no producen insulina, ya que las células beta del
páncreas han sido destruidas. En la mayoría de los casos, esto es resultado de
una respuesta autoinmunitaria en la que el sistema inmunológico trata, por error, a
las células beta como si fueran cuerpos extraños, y las ataca. Esta respuesta
puede venir desencadenada por una infección vírica. Aunque la diabetes tipo 1
puede desarrollarse de forma súbita, la destrucción de las células beta puede
haberse iniciado meses o años atrás. No será hasta el momento en que las
células beta funcionen a menos de un 10% de su capacidad cuando aparezcan
los síntomas de la diabetes. La diabetes tipo 1 es tratada con insulina,
administrada con inyección. No es posible tomar insulina en tabletas, ya que se
destruiría durante la digestión. (Roca, Alfredo Jácome. 2005).

6.3.2 Diabetes Tipo 2


Anteriormente conocida como “de inicio tardío” o “no insulino-dependiente”, la
diabetes de tipo 2 afecta a 4 de cada 5 personas que padecen diabetes, y tiende a
desarrollarse después de cumplir los 40. La creciente incidencia de la obesidad
asociada con el estilo de vida sedentario occidental puede desencadenar la
diabetes tipo 2. También es cada vez más frecuente que, por esta misma razón,
los niños y adolescentes desarrollen la diabetes tipo 2. (Roca, Alfredo Jácome.
2005).

25
En los pacientes con diabetes tipo 2, el cuerpo produce insulina, pero en
cantidades insuficientes y/o las células corporales son resistentes a la acción de la
insulina. Inicialmente, el páncreas responde a la deficiencia de insulina
produciendo más insulina, pero, con el tiempo, el páncreas no puede estar a la
altura de la demanda por parte del cuerpo: esta es la razón por la que el
tratamiento de la diabetes tipo 2 cambia con el tiempo. Al principio, la pérdida de
peso, la alimentación más sana y la actividad física pueden mantener los niveles
de glucosa en sangre controlados, a veces durante años. Cuando resulte
necesario se le recetarán al paciente, tabletas que incrementarán los niveles de
insulina o modificarán la tasa de metabolización de los carbohidratos durante la
digestión. Eventualmente, es posible que también acabe con inyecciones de
insulina. (Roca, Alfredo Jácome. 2005).

6.4 HIPOGLUCEMIA

La hipoglucemia puede deberse a diversas causas. En personas sanas suele ser


consecuencia de un ayuno muy prolongado debido a que el organismo sigue
utilizando la glucosa una vez que ya no queda glucógeno en el hígado para
producirla. También aparece en casos de trastornos hepáticos y ligada al excesivo
consumo de alcohol. (Cryer PE, Davis SN, Shamoon H. 2003)

En personas que padecen diabetes mellitus es muy habitual. En este caso, suele
deberse a un fallo en la administración de insulina exógena o de medicamento oral
antidiabético. Si se administran cuando no se ha comido lo suficiente, los niveles
de glucosa pueden bajar hasta producir una hipoglucemia severa. En este tipo de
pacientes también se puede producir por un exceso de ejercicio unido a una
escasa ingesta de alimentos ya que la actividad física promueve la utilización de
glucosa por los tejidos. (Cryer PE, Davis SN, Shamoon H. 2003)

En términos generales, la hipoglucemia resulta de 2 factores: un exceso de


insulina activa en el cuerpo y una respuesta fisiológica correctiva que es
26
imperfecta. Normalmente, el glucagon y la adrenalina son dos hormonas
responsables de mantener la glucemia dentro del rango de 70-100 mg/dL. El
cuerpo, al producir el glucagon y la adrenalina, logra corregir cualquier exceso de
insulina (que haga bajar demasiado los niveles glucémicos) y logra avisarnos que
no hay suficiente glucosa circulando para permitir la función normal del cuerpo.
(Cryer PE, Davis SN, Shamoon H. 2003)

6.5 HIPERGLUCEMIA

Un nivel alto de glucosa en sangre recibe el nombre de hiperglucemia. Si los


niveles de glucosa en sangre se elevan por encima de los 7 milimoles por litro
recomendados, pero se encuentran por debajo de los 10milimoles por litro, es
posible que el paciente se encuentre bien. No obstante, por encima de este nivel,
empiezan a aparecer los síntomas de hiperglucemia. Aunque una hiperglucemia
leve y temporal no afectará el cuerpo, unos niveles de glucosa altos durante
meses o años pueden dar lugar a complicaciones a largo plazo propias de la
diabetes. (Cryer PE, Davis SN, Shamoon H. 2008)

Las razones para que se produzca una hiperglucemia incluyen:


• No tomar una cantidad suficiente de medicación para reducir sus niveles de
glucosa en sangre, ya sea porque su dosis en demasiado baja o porque no
ha podido tomarla regularmente.
• Mantenerse menos activo de lo normal.
• Tomar muchos alimentos azucarados.
• Estar enfermo.
Los síntomas de la hiperglucemia incluyen la producción de grandes cantidades
de orina, una sed intensa, fatiga e infecciones (como las aftas y la cistitis). (Cryer
PE, Davis SN, Shamoon H. 2008)

27
6.6 INSULINA

La insulina es una hormona polipeptídica formada por 51 aminoácidos, (Ronald J.


Gillespie; Aurelio Beltrán; David A. Humphreys; N. Colin Baird; Edward A.
Robinson. 1988). Producida y segregada por las células beta de los islotes de
Langerhans del páncreas, en forma de precursor inactivo llamado proinsulina. Ésta
pasa al aparato de Golgi, donde se modifica, eliminando una parte y uniendo los
dos fragmentos restantes mediante puentes disulfuro. La insulina interviene en el
aprovechamiento metabólico de los nutrientes, sobre todo con el anabolismo de
los carbohidratos. Su déficit provoca la diabetes mellitus y su exceso provoca
hiperinsulinismo con hipoglucemia.

Estudios sugieren que la insulina es una alternativa segura, efectiva, bien tolerada
y aceptada para el tratamiento a largo plazo de la diabetes tipo 1 y la diabetes tipo
2, incluso desde el primer día del diagnóstico. (Reuters Health. 2009).

6.7 TECNICAS DE EXTRACCION


La extracción es una de las operaciones unitarias más utilizadas. Se define como
la acción de separar con un líquido una fracción específica de una muestra,
dejando el resto lo más íntegro posible. Se pueden realizar desde los tres estados
de la materia, y se llaman de la siguiente manera:

1) Extracción sólido – líquido


2) extracción líquido – líquido
3) extracción gas – líquido.

La primera es la más utilizada (extracción con equipo Soxhlet). Como ejemplo se


pueden citar todas las obtenciones de principios activos de los tejidos vegetales.
La segunda tiene usos especialmente en química analítica cuando se extrae el
producto de una reacción efectuada en fase líquida con un solvente específico
para separar uno o algunos de los componentes. Por último un ejemplo de la
28
tercera, gas – líquido, que ordinariamente se llama ‘lavado de gases, es el
burbujeo por una fase líquida de un gas que se quiere lavar o purificar. (Carlos
Eduardo Núñez. 2008)

6.7.1 EXTRACCIÓN SOXHLET


La extracción Soxhlet se fundamenta en las siguientes etapas:
1) Adición del solvente en un balón.
2) ebullición del solvente que se evapora hasta un condensador a reflujo.
3) el condensado cae sobre un recipiente que contiene un cartucho poroso con la
muestra en su interior.
4) ascenso del nivel del solvente cubriendo el cartucho hasta un punto en que se
produce el reflujo que vuelve el solvente con el material extraído al balón.
5) Se vuelve a producir este proceso la cantidad de veces necesaria para que la
muestra quede agotada. Lo extraído se va concentrando en el balón del solvente.
(Figura Nº 1) (Extracciones con Soxhlet. Carlos Eduardo Núñez. 2008)

OPERACIÓN DE EXTRACCIÓN
Una vez que el equipo está armado, abierta el agua, cargado el cartucho con
muestra e introducido el solvente, sólo resta encender el calentador y comenzar la
operación (Ver Figura 1) . Llegada la temperatura a la de ebullición del solvente
éste comienza a evaporarse y, luego de que se calienten las paredes del equipo,
comienza a condensar en el refrigerante y a caer en forma de gotas sobre el
cartucho. A medida que el condensado va cayendo sobre el cartucho este
comienza a escurrir por la parte inferior del mismo llenando el recipiente de
extracción hasta que llega al nivel de la bajada del sifón y refluya, con todo el
material disuelto, hacia el balón inferior. El tope del sifón está por encima del
cartucho para asegurar que todas las veces el material a extraer quede embebido
en el solvente. (Carlos Eduardo Núñez. 2008)
Nº 5
Una vez que el sistema está en régimen los reflujos se producen a intervalos
regulares. Los tiempos comunes de cada reflujo están entre 5 y 20 minutos, según
29
la potencia del calentador, el solvente, la temperatura externa, etc. (Carlos
Eduardo Núñez. 2008)

La cantidad de reflujos están estipulados en la norma que se use, pero hay


oportunidades en las que se trabaja en sistemas sobre los que no se posee
información. Para eso es interesante saber con alguna aproximación el
comportamiento general de la extracción que se va a realizar.

CULMINACIÓN DE LA OPERACIÓN:
Una vez que se ha dado por terminada la operación de extracción, es conveniente
esperar un cierto tiempo para que el sistema se enfríe hasta que sea fácil
manipularlo. A continuación no hay que olvidarse de cerrar el agua de
refrigeración para no realizar consumo innecesario. Después se desarma el
equipo y se extrae el cartucho que está saturado de solvente y se coloca en un
sitio aireado o en la campana para que se seque la muestra.
La extracción de la muestra del cartucho húmedo puede ocasionar su deterioro. Si
es necesario se deberá enjuagar el extractor para que quede listo para la próxima
vez. Y con esto se da por terminada la operación de extracción. (Carlos Eduardo
Núñez. 2008)

30
Figura Nº 1: Imagen de extractor soxhlet

Autor: Núñez Eduardo (2008)

Preparación de la muestra. La operación comienza por la preparación de la


muestra. Con frecuencia debe ser dividida en fragmentos de mayor o menor
tamaño. Con la muestra alistada se carga el cartucho de extracción. (Carlos
Eduardo Núñez. 2008)

Cartuchos: Este cartucho consiste en un recipiente cilíndrico con base


semiesférica para que apoye perfectamente en la base del equipo extractor y sea
además más resistente. Una vez cargado el material, operación que se puede
hacer con la mano en caso de hojas, tallos etc., o bien con un embudo, si está
molido, se debe colocar un tapón para evitar que partículas de la muestra impidan
el correcto funcionamiento del proceso.

31
Adición del solvente: La cantidad de solvente debe ser la necesaria para que al
ascender al cartucho y antes de que se haga el reflujo, no quede seco el balón
inferior porque de esa manera, o se seca la muestra y se quema, o cuando caiga
el líquido del reflujo sobre el vidrio recalentado, se puede producir una explosión
de los vapores con el consiguiente riesgo de accidente. Como durante la
operación hay pérdida del solvente por evaporación, y además debe quedar una
cantidad mínima en el balón para que no se concentre el extracto demasiado, hay
que agregar por lo menos una cantidad semejante en exceso. (Carlos Eduardo
Núñez. 2008)

Solventes a utilizar: Se debe de buscar el tipo de solvente adecuado a la


materia prima con la cual se está trabajando de manera que este no afecte las
propiedades del extracto.

Calentamiento: Es corriente utilizar calentadores eléctricos múltiples.


Habitualmente tienen varios puntos. En el primero las resistencias están casi todo
el tiempo apagadas y en el último no cortan nunca el flujo de energía. La práctica
habitual es que al inicio de la operación se pongan en máximo para llevar el
equipo a régimen, para luego ir regulándolo en función de la velocidad de
extracción que requiera la operación. (Carlos Eduardo Núñez. 2008)

Con alguna frecuencia sucede que al comienzo de la evaporación el solvente se


sobrecalienta y posteriormente produce una evaporación explosiva que hace que
gran cantidad de vapores lleguen al refrigerante que no da abasto en la
condensación. Inclusive puede darse que si el equipo no está bien sujeto en los
dos lugares necesarios, es decir en el balón y en el extractor, salte la parte
superior y escapen vapores calientes del solvente, circunstancia que puede ser
peligrosa. (Carlos Eduardo Núñez. 2008)

32
Refrigeración: Las conexiones para la refrigeración, se pueden realizar en serie o
en paralelo. La conexión en serie es más práctica, usa menos manguera y
requiere de una sola válvula y un solo desagüe. Su única limitación es el aumento
de la temperatura del agua de refrigeración a medida que el mismo líquido pasa
de un refrigerante al otro, y un defecto es que el sistema queda como un todo y si
se saca un equipo hay que acomodar las mangueras de nuevo. En el sistema en
paralelo o individual cada equipo tiene su entrada y salida de agua independiente,
por lo que se requerirán más válvulas y más desagües, aunque se puede instalar
un sistema de grifo con varias salidas y un colector de efluentes. El flujo de agua
debe regularse para utilizar solamente lo necesario, dado que el consumo es muy
alto, particularmente en el caso de que se use agua potable. (Carlos Eduardo
Núñez. 2008)

6.8 ALLOXAN
EL Alloxan es un análogo toxico de la glucosa, que destruye selectivamente las
células que producen insulina en el páncreas, de los roedores y muchas otras
especies animales. Esto provoca una diabetes mellitus insulino dependiente
(Alloxana Diabetes) en estos animales con características similares a la diabetes
tipo 1 en humanos. Es selectivamente tóxico para las células beta productoras de
insulina del páncreas, ya que se acumula preferentemente en las células beta a
través de la captación del transportador de glucosa GLUT2. En presencia de
tioles intracelulares, genera especies reactivas de oxígeno (ROS). La acción
tóxica del alloxan es iniciada por radicales libres formados en esta reacción redox.
Un estudio sugiere que el alloxan no causa la diabetes en seres humanos. Otros
estudios muestran cierta correlación entre los niveles plasmáticos de alloxan y la
diabetes tipo 1 en niños. (Lenzen, S. 2008)

El alloxan es un compuesto utilizado como diabetógeno desde 1943. Debido a su


similitud con la glucosa, es capaz de ingresar a la membrana plasmática mediante
el transportador de glucosa GLUT2. El potencial daño provocado por la reducción
de alloxano radica en la generación de O2.- y H2O2 (también HO. en presencia de
33
un catalizador adecuado), y en la capacidad de oxidar grupos tiol, que puede
perturbar a las estructuras biológicas que lo contengan (por ejemplo, el grupo
cisteína de la glucoquinasa). Si bien se ha informado la inestabilidad de las
soluciones acuosas de alloxano y ácidodialúrico, muchos estudios ignoran este
punto en la preparación de los experimentos (MARÍA ESNAOLA. 2008).

Debido a que reduce selectivamente la insulina produciendo las células beta en el


páncreas, el alloxan se utiliza para inducir la diabetes en animales de laboratorio.
Esto ocurre muy probablemente debido a la absorción selectiva de la sustancia
debido a su similitud estructural con la glucosa (Lenzen, S. 2008)

Sin embargo, el alloxan no es tóxico para las células beta en los humanos incluso
en dosis muy altas, probablemente debido a los diferentes mecanismos de
captación de glucosa en humanos y roedores, sin embargo, es tóxico para el
hígado y los riñones en dosis muy altas. (B Tyrberg, Andersson A, L Borg. 2001).

6.9 BIOMODELOS
La utilización de animales en investigación científica, enseñanza y pruebas de
laboratorio, a menudo se separa en usos biomédicos y usos agrícolas, debido a
regulaciones gubernamentales (AWRs. 2003), políticas institucionales, estructura
administrativa, fuentes de financiamiento y metas de los usuarios. Esta separación
ha conducido a un sistema dual con diferentes criterios de evaluación de
protocolos, estándares de alojamiento y cuidado de los animales de una misma
especie, basados en los objetivos de investigación biomédicos o agrícolas que se
persigan (Stricklin y Mench 1994). En algunos estudios esta separación es clara.
Por ejemplo, los modelos animales de enfermedades humanas, trasplante de
órganos y cirugía mayor se consideran usos biomédicos; y los estudios sobre
producción de alimentos y fibra, tales como ensayos de alimentación,
generalmente se consideran usos agrícolas. Sin embargo, a menudo esta
separación no es clara como en el caso de algunos estudios de nutrición y de
enfermedades. (Stricklin y otros 1990).
34
El uso de los animales en investigación científica debe estar sujeto a
consideraciones éticas, sin importar los objetivos científicos del investigador ni las
fuentes de financiamiento (Stricklin y otros 1990). Sin embargo, las diferencias en
las metas de la investigación conducen a diferencias fundamentales entre la
investigación científica biomédica y la agrícola. La investigación agrícola con
frecuencia necesita para alcanzar sus metas que los animales sean manejados
conforme a las prácticas actuales de producción pecuaria (Stricklin y Mench 1994).
Por ejemplo, en la investigación agrícola pueden ser deseables condiciones medio
ambientales naturales, en tanto que en la investigación biomédica puede ser
deseable el control de las condiciones medio ambientales para disminuir al mínimo
la variación (Tillman 1994).

Los sistemas de alojamiento para los animales empleados en investigación


biomédica pueden o no ser diferentes de los usados en investigación agrícola. Los
animales utilizados tanto en investigación biomédica como agrícola pueden
alojarse en jaulas, pesebres, o pastizales (Tillman 1994). Algunos estudios
agrícolas necesitan condiciones uniformes para minimizar la variabilidad medio
ambiental y algunos estudios biomédicos se llevan a cabo en circunstancias de
granjas o al aire libre. Por lo tanto, es el protocolo más que la categoría de
investigación lo que determina las circunstancias (granja o laboratorio). Las
decisiones y la categorización del uso de los animales y la definición de los
estándares para su cuidado y uso deben basarse en las metas del usuario y los
protocolos, lo relacionado al bienestar animal debe hacerlo el bioterio proveedor
del biomodelo. Cualquiera que sea la categoría de la investigación científica, se
espera que la institución vigile la utilización de todos los animales para este fin y
se asegure que tanto el dolor como el estrés que pueda causarse en ellos sean
reducidos al mínimo. (Tillman 1994).

Biomodelos del tipo Ratones


Entre los biomodelos del tipo ratones más utilizados se encuentran:

35
Cepa: C3H/HeNHenn

Característica: Cepa Consanguínea

Una cepa se define como pura cuando se ha acoplado hermano x hermana


durante 20 o más generaciones consecutivas (F20). Todas las crías se remonta a
una pareja reproductora ancestral en la 20 ª generación o posteriores. Estas cepas
puras son por lo tanto isogénicas (genéticamente idénticos).

Cada cepa Consanguínea o Endocriada tiene un genotipo único, y por lo tanto un


fenotipo único. Diferencias fenotípicas entre cepas puras deben tenerse en cuenta
a la hora de diseñar experimentos. Cepas específicas se han desarrollado para
una alta incidencia de tumores, único patrón de comportamiento, respuestas
inmunes específicas, susceptibilidad a enfermedades espontáneas y otras
características. Cepas consanguíneas se han utilizado en investigación del cáncer
durante más de 60 años. Aunque un poco más caros que los animales no
consanguíneos, que tienen propiedades que los hacen útiles y esenciales en
muchos tipos de investigación (LEBi®.UC, 2009).

Cepa: BALB/c

Característica: Cepa Consanguínea

BALB/c es un ratón albino de laboratorio criado a partir del ratón casero de donde
se derivan una serie de subcepas. Actualmente, más de 200 generaciones desde
su origen en Nueva York en 1920 se distribuyen a nivel mundial, y entre las cepas
más utilizadas endocriadas en la experimentación animal.

Ratones BALB/c son útiles para la investigación en cáncer e inmunología. Las


subcepas BALB/c son "especialmente conocida por la producción de
plasmocitomas por inyección de aceite mineral," un proceso importante para la
producción de anticuerpos monoclonales. También se ha reportado que tienen una
"baja incidencia de tumor mamario, pero desarrollan otros tipos de cáncer en edad

36
adulta, con mayor frecuencia neoplasias reticular, tumores de pulmón y tumores
renales. La mayoría de subcepas tienen una "larga vida útil reproductiva”, se
caracterizan por mostrar altos niveles de ansiedad y por ser relativamente
resistentes a la arterosclerosis inducida por dieta, haciendo de ellos un modelo útil
para la investigación cardiovascular. Igualmente son animales de fácil asimilación
del alloxana, sustancia que destruye las células productoras de la insulina, lo que
produce una diabetes inducida, haciendo de esta cepa un modelo útil para
estudios relacionados con deficiencias en la asimilación de carbohidratos
(LEBi®.UC, 2009).

Cepa: Hsd:ICR(CD-1)

Característica: Cepa No Consanguínea

Poblaciones No Consanguíneas o Exocriadas se utilizan con mayor frecuencia en


los proyectos de investigación que requieren animales vigorosos, de precio
económico, pero donde las consideraciones de genotipo específico son de menor
importancia. Se utilizan a menudo en los ensayos biológicos o en estudios
preliminares en los que se perfeccionan las técnicas antes de estudios más
detallados con cepas puras. Estos animales no consanguíneos también son útiles
en estudios donde un mayor peso corporal o un mejor rendimiento de
reproducción son de mayor importancia que un genotipo determinado, o en
cualquier estudio donde la experiencia previa ha demostrado que estos animales
son idóneos (LEBi®.UC, 2009).

37
7. METODOLOGIA
Este proyecto tuvo como objeto de estudio la evaluación experimental de una
sustancia extraída del arilo del fruto de Ackee (Blighia sápida) (mezclada en
diferentes proporciones con agua), materia prima que se encontró en las
instalaciones del Cementerio Metropolitano del Sur en Santiago de Cali, donde
se cuenta con una cosecha anual de más o menos 150kg de fruto por árbol.

Para la obtención del extracto se utilizaron las instalaciones del laboratorio de


Química de la Universidad de San Buenaventura, Seccional Cali, seguidamente se
realizó la mezcla de la sustancia diluida en agua en diferentes proporciones y así
se pasó a evaluar el efecto de la sustancia en ratones balb c con diabetes
inducida por medio del alloxan.

7.1. FASES
A continuación se describen las fases metodológicas desarrolladas.

7.1.1. Fase 1: Extracción. Se realizó en el laboratorio de Química de la


Universidad de San Buenaventura – Cali, donde se utilizo como base el método
soxhlet, utilizando agua como solvente.

PROCEDIMIENTO:
Para iniciar el proceso de extracción, las frutas fueron recolectadas en el
estado de madurez optimo para la extracción (Ver Foto 3)

38
FOTO 3: fruto en estado de madurez optimo para extracción

Fuente: El autor. (2010)

Posteriormente las frutas fueron lavadas con agua potable para eliminar
residuos contaminantes, luego los arilos se separaron de la cascara y de la
semilla manualmente.
Los arilos se cortaron utilizando un cuchillo de acero inoxidable hasta
alcanzar un tamaño aproximado de 1,5 cm. Luego estos fueron pesados.
Esta muestra fue sometida a un proceso de extracción en serie por soxhlet,
utilizando una relación fruta – solvente 1:1. Como refrigerante se utilizó
agua. La extracción se considero completa al terminar el cuarto reflujo, en
un tiempo aproximado de 75 minutos a una temperatura de 108ºC (Ver Foto
4 y 5)

FOTO 4: Montaje del sistema de extraccion

Fuente: El autor.(2010)
39
FOTO 5: Arilo dentro del equipo de extracción

Fuente: El autor.(2010)

El extracto obtenido se almacenó en refrigeración a 4ºC en recipientes de


vidrio de color ámbar.

7.1.2. Fase 2: Evaluación del extracto en ratones con diabetes inducida.


Las propiedades hipoglucemiantes del extracto fueron evaluadas en 20 ratones
Balb c inducidos a diabetes por medio del agente diabetogenico alloxan.
Estos biomodelos fueron divididos en 5 grupos de 4 unidades cada uno, para igual
número de tratamientos, con los cuales se determinaron las variaciones de los
niveles de glucosa y peso durante el periodo experimental. Estos datos fueron
registrados en las tablas 1 y 2.

PROCEDIMIENTO:

Los animales fueron solicitados al bioterio de la Universidad del Valle, Cali;


con previa realización de un curso en manejo de biomodelos y contar con
la autorización de venta y manipulación por parte de un comité de ética de
dicha universidad

40
Se adquirieron 20 biomodelos Balb c, machos, de 4 semanas de nacidos y
con un peso aproximado de 18gr cada uno. Cada biomodelo fue alojado en
una jaula debidamente adecuada (forrada con anjeo metálico de ojo
pequeño # 2) dotada de un bebedero plástico y con cama de cisco de
madera. Ubicadas sobre 5 mesas con 4 jaulas cada una (Ver Foto 6).

FOTO 6: Acomodación de los biomodelos

Fuente: El autor. (2010)

El tiempo de adaptación fue de 1 semana durante la cual se les suministro


agua y un alimento balanceado (Rodentina®) a voluntad. Durante este
periodo recibieron 12 horas de luz y 12 horas de oscuridad, con ventilación
adecuada durante el día y temperatura promedio de 28ºC
Cada dos días se hizo limpieza y desinfección a cada jaula.
Posteriormente fueron inducidos a la diabetes aplicando alloxan por via
intraperitoneal utilizando dosis de 75 mg por cada kilogramo de peso
Una semana después de aplicado el alloxan el agua de bebida fue
sustituida por una solución acuosa de glucosa al 40% (ver foto 7) con el fin
de acelerar el proceso de inducción. Durante este procesoel peso y la
glicemia era medidos día de por medio para esto se utilizaba la dotación
necesaria para el manejo de los biomodelos (guantes de lates, bata de
laboratorio y tapabocas ) y los equipos indispensables para este
procedimiento (glucómetro digital, balanza analítica digital, tirillas reactivas,
bisturí, alcohol y un mechero), la medición se realizaba cortando un
41
pequeño segmento de la cola del ratón con el bisturí, previamente
desinfectado con el alcohol y el mechero, depositando la gota de sangre en
la tirilla reactiva para hacer la lectura del nivel de glucosa simultáneamente
los animales se pesaban y los datos se registraban en las tablas 1 y 2

FOTO 7: Preparación de solución acuosa de glucosa

Fuente: El autor. (2010)


Una vez los valores de glicemia superaron los 200mg/ml los biomodelos se
consideraron diabéticos, la solución de glucosa fue retirada
A partir de este momento se suministro el extracto mezclado con agua (Ver
Foto 8) en diferentes concentraciones como se muestra a continuación:

Tratamiento # 1: T1: (50% extracto del ackee + 50% agua) (diabéticos)


Tratamiento # 2: T2: (30% extracto del ackee + 70% agua) (diabéticos)
Tratamiento # 3: T3: (10% extracto del ackee + 90% agua) (diabéticos)
Tratamiento # 4: T4: ( 5% de insulina + 95% agua) (diabéticos)
Tratamiento # 5: T5: (50% extracto del ackee + 50% agua) (sanos)
Los tratamientos 4 y 5 fueron considerados como tratamientos testigos

42
FOTO 8: Suministro de extracto a los biomodelos

Fuente: El autor. (2010)


Cuando los niveles de glucosa se estabilizaron (semana 10) el suministro
de los 5 tratamientos fue suspendido y nuevamente se suministro agua
potable como bebida por una semana, estos datos de glucosa y peso
fueron registrados (medición 11)
Terminado este proceso los biomodelos fueron sacrificados con una dosis
de 0,4ml de EUTANEX, aplicados intramuscularmente y eliminados como
desechos de riesgo biológico

TABLA 1: Recolección de datos; Tratamiento Nº (Glucosa)


TRAT GLUCOSA

M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 M9 M10 M11
R1 R1M1 R1M2 R1M3 R1M4 R1M5 R1M6 R1M7 R1M8 R1M9 R1M10 R1M11
R2 R2M1 R2M2 R2M3 R2M4 R2M5 R2M6 R2M7 R2M8 R2M9 R2M10 R2M11
R3 R3M1 R3M2 R3M3 R3M4 R3M5 R3M6 R3M7 R3M8 R3M9 R3M10 R3M11
R4 R4M1 R4M2 R4M3 R4M4 R4M5 R4M6 R4M7 R4M8 R4M9 R4M10 R4M11
Fuente: El autor. (2010)

R: Repetición
M: Medición

43
TABLA 2: Recolección de datos; Tratamiento Nº (Peso)
TRAT PESO

M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 M9 M10 M11
R1 R1M1 R1M2 R1M3 R1M4 R1M5 R1M6 R1M7 R1M8 R1M9 R1M10 R1M11
R2 R2M1 R2M2 R2M3 R2M4 R2M5 R2M6 R2M7 R2M8 R2M9 R2M10 R2M11
R3 R3M1 R3M2 R3M3 R3M4 R3M5 R3M6 R3M7 R3M8 R3M9 R3M10 R3M11
R4 R4M1 R4M2 R4M3 R4M4 R4M5 R4M6 R4M7 R4M8 R4M9 R4M10 R4M11
Fuente: El autor. (2010)

R: Repetición
M: Medición

44
7.2 DISEÑO EXPERIMENTAL
El diseño experimental fue completamente al azar con 5 tratamientos y 4
repeticiones. Este diseño tenía como variable de respuesta la glucosa en sangre
su unidad experimental fue un biomodel y el nivel de significancia fue igual a 0,05.
Los tratamientos analizados fueron:

5 tratamientos por 4 Repeticiones cada uno:


T1 – 50% extracto del ackee + 50% agua (diabéticos)
T2 – 30% extracto del ackee + 70% agua (diabéticos)
T3 – 10% extracto del ackee + 90% agua (diabéticos)
T4 – 5% de insulina + 95% agua (diabéticos)
T5 – 50% extracto del ackee + 50% agua (testigo sano)

Los datos recolectados se resumieron en la tabla 3

TABLA 3: Glucosa sanguínea


TRAT GLUCOSA SANGUINEA
R1 R2 R3 R4
T1 T1R1 T1R2 T1R3 T1R4
T2 T2R1 T2R2 T2R3 T2R4
T3 T3R1 T3R2 T3R3 T3R4
T4 T4R1 T4R2 T4R3 T4R4
T5 T5R1 T5R2 T5R3 T5R4
Fuente: El autor. (2010)

El diseño corresponde a:
Yij = µij + Eij + τij
*i: 1, 2, 3, 4, 5 – No. de tratamientos
*j: 1, 2, 3, 4, – No. de repeticiones

45
Las hipótesis planteadas son:
NULA Ho = las medias de los tratamientos son iguales por lo tanto no hay
diferencia entre tratamiento
ALTERNATIVA Ha = las medias de los tratamientos son diferentes por lo
tanto al menos hay diferencia entre dos tratamientos

Ho (nula): µ1 = µ2 = µ3 = µ4 = µ5 = µT
Ha (alternativa): µ1 ≠ µ2 ≠ µ3 ≠ µ4 ≠ µ5 ≠ µT
* µ: medias
*E: errores
*τ: tratamiento

Con los datos consignados en la tabla 4 se calculo la ANOVA

TABLA 4: Calculo de promedios


TRAT OBSERVACIONES TOTAL PROM

1 Y1.1 Y1.2 Y1.3 Y1.4 Y1. 

2 Y2.1 Y2.2 Y2.3 Y2.4 Y2.

3 Y3.1 Y3.2 Y3.3 Y3.4 Y3.


4 Y4.1 Y4.2 Y4.3 Y4.4 Y4.
5 Y5.1 Y5.2 Y5.3 Y5.4 Y5. ȳ5

TOTALES Y..

Fuente: El autor. (2010)

Para lo cual:

4 _ 5 4
Yi .
Yi. Yij Y i. Y .. Yij
j 1 n i 1 j 1

46
_
Y..
Y ..
N
*n: No. de repeticiones
*N: (i X j) tratamientos por repeticiones

7.3 ANÁLISIS DE VARIANZA

Para el cálculo del análisis de varianza se utiliza la tabla 5

TABLA 5: Análisis de varianza


Fuentes de Grados de Suma de Cuadrado Fc
Variación libertad cuadrados medio
t–1 S SCtrat CMtrat
4(Yi . Y ..) 2
Tratamiento i1
GL CMerror

t (r -1) SC tot. – SC trat. SCerror


Error GL

tr–1
5 4
Total (Yij Y ..) 2
i 1 j 1

Fuente: El autor. (2010)

*t: No. De tratamientos


*r: No. De repeticiones

Se realiza la lectura en las tablas (puntos porcentuales de la distribución F) con los


Grados de Libertad de tratamiento y error.
Lectura: F0.05, GL trat., GL E
Ftabla = F0.05, 4, 15

47
Si Fcalculado < Ftabla, se acepta la Ho. Y se concluye que la madia de los tratamientos
son iguales.
O si Fcalculado > Ftabla se rechaza la Ho. Y se concluye que las medias de los
tratamientos difieren

7.4 ANALISIS DE PESOS


Para el análisis de los pesos se utilizó un análisis de promedios, desviación
estándar y desviación relativa (Ver Tabla 6). Ya que estos no variaron muy
notablemente el análisis es más simple

TABLA 6: Análisis de pesos


ANIMAL # Y DESVIACION ESTANDAR DESVIACION RELATIVA
Y1 Y1 n
(Yi Y )2 R
Y
i 1 n

Y2 Y2 n
(Yi Y )2 R
Y
i 1 n

Y3 Y3 n
(Yi Y )2 R
Y
i 1 n

Y4 Y3 n
(Yi Y )2 R
Y
i 1 n

Fuente: El autor. (2010)

48
8. RESULTADOS

8.1 EXTRACCION
Datos obtenidos con respecto a la fruta

Porcentaje promedio de arilo: ---------- (17%)

Porcentaje promedio de cascara: ------ (76%)

Porcentaje promedio de semilla: --------( 7%)

En el momento de la extracción se utilizo una relación 1:1 de agua y de arilo. Al


finalizar el proceso se obtuvo un extracto de color amarillo turbio con un olor
característico propio del fruto (Ver Foto 9)
FOTO 9: Extracto final

Fuente: El autor. 2010


Se puede resumir que:
El agua total para la extracción fue un 50%
El arilo utilizado en la extracción fue un 50%

49
8.2 EVALUACIÓN DEL EFECTO DEL EXTRACTO EXPERIMENTAL EN
RATONES CON DIABETES INDUCIDA

En las tablas 7 al 16 se presentan los datos de azúcar y peso de las 11


mediciones, (semanas) identificándolos por los cinco tratamientos (T1, T2, T3, T4
Y T5) y para cada una de las 4 repeticiones
Cada dato corresponde al promedio de cada semana de cada repetición
(biomodelo)
Para lo cual: B: biomodelo
S: Semana

8.2.1 Tratamiento # 1: Ackee 50% diabéticos

Los datos contenidos en la siguiente tabla (tabla 7) permiten elaborar una grafica,
(figura 2) donde se observa la variación de la glucosa (mg/ml) respecto al tiempo,
(semanas) después de haber suministrado el tratamiento # 1 (50% extracto, 50%
agua) a los biomodelos

TABLA 7: Tratamiento # 1; (Variación de glucosa)


Biomodelo S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11
B.4 200 134 201 158 140 125 105 81 81 80 128
B.7 222 138 152 114 125 110 89 71 68 70 90
B.10 199 162 125 117 140 120 98 78 75 70 145
B.14B 190 120 143 125 98 90 89 77 76 76 125
Fuente: El autor. (2010)

Como se observa en la figura 2 el nivel de glucosa disminuye durante el tiempo de


aplicación del tratamiento # 1, esta disminución corresponde a un 72.13%.
El suministro del tratamiento # 1 fue suspendido en la semana 10, tiempo a partir
del cual se suministro agua como bebida y al final de la semana 11el nivel de
50
glucosa aumento nuevamente en un 76.11% alcanzando un valor promedio de
122mg/ml sin embargo esta última medición registra un valor inferior al inicial
(203mg/ml) lo cual indicó que los biomodelos no estaban en estado diabetico

FIGURA 2: Grafico nivel de glucosa vs tiempo; Tratamiento # 1.

250

200
Nivel de glucosa

Animal # 4
150
Animal # 7
Animal # 10
100
Animal # 14b
50

semana

Fuente: El autor. (2010)

En el tratamiento # 1 la variación de peso en promedio fue mínima (1g) 4% como


se puede observar en la tabla 8, pero luego de la suspensión de suministro del
tratamiento # 1 suben nuevamente (5,8g) 23,7%

TABLA 8: Tratamiento # 1; (Variación de peso)


Biomodelo S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11
B4 41,5 41 40 41,2 41,5 41,6 41,8 42,3 41 39,2 47,2
B7 18,9 18,9 18,8 19 19,1 18,9 19,7 20 19,7 20,1 20,3
B10 20,7 20,6 20,5 20,4 20,8 20,6 21 21,5 21 20,1 26,7
B14B 20,8 21 21 22 21,8 21,1 21 21,4 19,8 18,5 27
Fuente: El autor. (2010)

51
8.2.2 Tratamiento # 2: Ackee 30% diabéticos

Los datos contenidos en la siguiente tabla (tabla 9) permiten elaborar una grafica,
(figura 3) donde se observa la variación de la glucosa (mg/ml) respecto al tiempo,
(semanas) después de haber suministrado el tratamiento # 2 (30% extracto, 70%
agua) a los biomodelos

TABLA 9: Tratamiento # 2; (Variación de glucosa)


Biomodelo S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11
B1 201 150 164 159 139 115 102 88 89 89 129
B3 250 136 178 170 145 135 120 105 107 107 142
B11 205 138 130 104 119 102 98 79 77 76 123
B15B 194 128 129 120 126 120 115 96 85 79 123
Fuente: El autor. (2010)

Como se observa en la figura 3 el nivel de glucosa disminuye durante el tiempo de


aplicación del tratamiento # 2, esta disminución corresponde a un 58.71%.
El suministro del tratamiento # 2 fue suspendido en la semana 10, tiempo a partir
del cual se suministro agua como bebida y al final de la semana 11el nivel de
glucosa aumento nuevamente en un 47.20% alcanzando un valor promedio de
129mg/ml sin embargo esta última medición registra un valor inferior al inicial
(212mg/ml) lo cual indicó que los biomodelos no estaban en estado diabetico

52
FIGURA 3: Grafico nivel de glucosa vs tiempo; Tratamiento # 2.

300

250
Nivel de Glucosa

200 Animal #1
Animal #3
150
animal #11
100 Animal #15b

50

Semana

Fuente: El autor. (2010)

En el tratamiento # 2 la variación de peso en promedio fue mínima (1,1g) 4,04%


como se puede observar en la tabla 10, pero luego de la suspensión de suministro
del tratamiento # 2 suben nuevamente (6,1g) 23,4%

TABLA 10: Tratamiento # 2; (Variación de peso)


Biomodelo S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11
B1 31 31,3 32,7 32,5 32,5 32,2 32 32,3 30 29,1 37,6
B3 34,5 34,3 34,1 34,6 34,8 35 34,9 35,1 33,6 32,8 39,7
B11 20,9 20,7 20,4 20,5 20,7 21,3 21 21,1 21 20,8 25,5
B15B 22,4 22,8 23 22,9 22,5 22,1 21,8 21,6 21,6 21,9 26,2
Fuente: El autor. (2010)

53
8.2.3 Tratamiento # 3: Ackee 10% diabéticos

Los datos contenidos en la siguiente tabla (tabla 11) permiten elaborar una grafica,
(figura 4) donde se observa la variación de la glucosa (mg/ml) respecto al tiempo,
(semanas) después de haber suministrado el tratamiento # 3 (10% extracto, 90%
agua) a los biomodelos

TABLA 11: Tratamiento # 3; (Variación de glucosa)


Biomodelo S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11
B9 198 130 133 129 119 118 120 110 105 97 145
B13ª 190 121 121 113 154 120 103 63 66 67 151
B14ª 196 125 139 130 108 119 111 109 100 99 113
B17 195 130 135 132 127 128 119 110 108 105 125
Fuente: El autor. (2010)

Como se observa en la figura 4 el nivel de glucosa disminuye durante el tiempo de


aplicación del tratamiento # 3, esta disminución corresponde a un 39.95%.
El suministro del tratamiento# 3 fue suspendido en la semana 10, tiempo a partir
del cual se suministro agua como bebida y al final de la semana 11el nivel de
glucosa aumento nuevamente en un 55.51% alcanzando un valor promedio de
133 mg/ml sin embargo esta última medición registra un valor inferior al inicial
(195mg/ml) lo cual indicó que los biomodelos no estaban en estado diabetico

54
FIGURA 4: Grafico nivel de glucosa vs tiempo; Tratamiento # 3.

250

200
Nivel de Glucosa

Animal #9
150
Animal #13a
Animal #14a
100
Animal #17
50

Semana

Fuente: El autor. (2010)

En el tratamiento # 3 la variación de peso en promedio fue mínima (0.5g) 1,8%


como se puede observar en la tabla 12, pero luego de la suspensión de suministro
del tratamiento # 3 suben nuevamente (3,2g) 11,3%

TABLA 12: Tratamiento # 3; (Variación de peso)


Biomodelo S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11
B9 25,5 25 25 25,3 25,2 25,3 25 24,8 27,6 28,6 34,1
B13ª 19,8 19,7 20,2 20,4 20,1 20,6 21 21,2 21 21,7 26,9
B14ª 32,7 33 32,9 33 33,2 33,7 34,5 34,8 33,1 33,9 35,8
B17 33 32,9 33,7 34,5 35,8 33 33,1 33,2 28,6 29 29,5
Fuente: El autor. (2010)

55
8.2.4 Tratamiento # 4: Insulina 5% diabéticos

Los datos contenidos en la siguiente tabla (tabla 13) permiten elaborar una grafica,
(figura 5) donde se observa la variación de la glucosa (mg/ml) respecto al tiempo,
(semanas) después de haber suministrado el tratamiento # 4 (5% insulina, 95%
agua) a los biomodelos

TABLA 13: Tratamiento # 4; (Variación de glucosa)


Biomodelo S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11
B5 200 153 131 131 123 120 125 129 132 135 150
B8 193 140 138 153 120 125 127 130 133 134 148
B16ª 198 150 137 135 130 133 135 138 138 140 157
B18 196 152 140 137 134 132 137 136 135 136 160
Fuente: El autor. (2010)

Como se observa en la figura 5 el nivel de glucosa disminuye durante el tiempo de


aplicación del tratamiento # 4, esta disminución corresponde a un 7.73%.
El suministro del tratamiento# 4 fue suspendido en la semana 10, tiempo a partir
del cual se suministro agua como bebida y al final de la semana 11el nivel de
glucosa aumento nuevamente en un 11.25% alcanzando un valor promedio de
153 mg/ml sin embargo esta última medición registra un valor inferior al inicial
(197mg/ml) lo cual indicó que los biomodelos no estaban en estado diabetico

56
FIGURA 5: Grafico nivel de glucosa vs tiempo; Tratamiento # 4.

250

200
Nivel de Glucosa

Animal #5
150
Animal #8
Animal #16a
100
Animal # 18
50

Semana

Fuente: El autor. (2010)

En el tratamiento # 4 la variación de peso en promedio fue mínima (1.7g) 4,6%


como se puede observar en la tabla 14, pero luego de la suspensión de suministro
del tratamiento # 4 presentan una disminución mínima (1.1g) 2,8%

TABLA 14: Tratamiento # 4; (Variación de peso)


Biomodelo S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11
B5 27 27,3 27,6 27,5 27,7 27,7 28 28,3 28,6 29,1 28,7
B8 45 45,6 45,8 46 46,3 46,8 47,1 47,7 48 48,5 47,7
B16ª 31,8 31,3 31,5 31,4 31,3 31 30,7 30 30,2 30,1 27,8
B18 45 45,8 46 47,1 47,1 47,7 47,5 47,6 48,1 47,8 47
Fuente: El autor. (2010)

57
8.2.5 Tratamiento # 5: Ackee 50% Sanos

Los datos contenidos en la siguiente tabla (tabla 15) permiten elaborar una grafica,
(figura 6) donde se observa la variación de la glucosa (mg/ml) respecto al tiempo,
(semanas) después de haber suministrado el tratamiento # 5 (50% Akcee, 50%
agua) a los biomodelos

TABLA 15: Tratamiento # 5; (Variación de glucosa)


Biomodelo S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11
B6 201 140 143 136 121 110 102 84 81 79 143
B12B 198 124 100 99 146 126 89 75 75 77 121
B13B 205 160 152 130 139 120 97 81 85 92 127
B15ª 200 131 96 146 122 115 105 85 70 77 145
Fuente: El autor. 2010

Como se observa en la figura 6 el nivel de glucosa disminuye durante el tiempo de


aplicación del tratamiento # 5, esta disminución corresponde a un 46.1%.
El suministro del tratamiento# 5 fue suspendido en la semana 10, tiempo a partir
del cual se suministro agua como bebida y al final de la semana 11el nivel de
glucosa aumento nuevamente en un 64.92% alcanzando un valor promedio de
134 mg/ml sin embargo esta última medición registra un valor inferior al inicial
(201mg/ml) lo cual indicó que los biomodelos no estaban en estado diabetico

58
FIGURA 6: Grafico nivel de glucosa vs tiempo; Tratamiento # 5.

250

200
Nivel de Glucosa

Animal #6
150
Animal #12b
Animal #13b
100
Animal #15a
50

Semana

(Fuente: El autor. 2010)

En el tratamiento # 5 la variación de peso en promedio fue mínima (1.1g) 3,4%


como se puede observar en la tabla 16, pero luego de la suspensión de suministro
del tratamiento # suben nuevamente (9,1g) 29,3%

TABLA 16: Tratamiento # 5; (Variación de peso)


Biomodelo S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11
B6 32,4 32,3 32,8 33 32,9 33,3 33,5 33,6 33,8 31,3 39,8
B12B 20,7 21 21,2 21,2 21,4 21,3 21,5 21,8 22,4 20,2 27,7
B13B 35 35,3 35,6 35,8 35,7 36 36,4 36,9 37,1 34,1 45,1
B15A 41,3 41,7 42 42,3 42,5 42,6 42,9 43,2 43,5 39,4 48,7
Fuente: El autor. (2010)

59
8.3 DESARROLLO DISEÑO EXPERIMENTAL

Para el desarrollo del análisis de varianza los cálculos y tablas pueden ser vistos
en la sección de anexos (ver anexo 2)

8.3.1 ANÁLISIS DE VARIANZA

Se halla el F calculado, para esto se usan las formulas de la tabla 5

TABLA 17: Análisis de varianza


Fuentes de Grados de Suma de Cuadrado Fc
Variación libertad cuadrados medio

Tratamiento 4 1494,32 373,58 0,79

Error 15 7054,8 470,32

Total 19 8549,12

Fuente: El autor. (2010)

En tablas de análisis de varianza F para α = 0.05 con 4 grados de libertad en el


numerador y 15 grados de libertad en el denominador se determina:F (0.05; 4; 15)
De esto se obtiene: F (0.05; 4; 15) = 3.05

Entonces teniendo el F de tabla igual a 3.05 y el F calculado igual a 0.79, se


deduce que:

F calculado < F de tabla

60
Para lo cual se acepta la Ho. Y se concluye que las medias de los tratamientos
son iguales, por lo tanto no hay diferencia entre los tratamientos
Lo que nos indica que causa el mismo efecto cualquiera de los 5 tratamientos en
los niveles de azúcar en la sangre, es decir se tiene similar consecuencia al
consumir extracto en cualquiera de sus mezclas que la insulina, esto nos
demuestra la efectividad del extracto al ser comparado con la insulina.

8.4 ANALISIS DE PESOS


En el comportamiento de los pesos se puede deducir según los resultados, que
el peso de los ratones no depende de que consuman o no el extracto. Al variar las
concentraciones de glucosa el peso de cada animal permanece casi que igual.

La desviación estándar de los pesos, como se puede observar en la tabla 18 es


pequeña y la desviación relativa con respecto a la media, es un valor cercano a
cero, (0) lo cual que nos indica que no hubo cambios relevantes con respecto al
peso en relación al consumo de los tratamientos

TABLA 18: Análisis de pesos


ANIMAL # PESO PROMEDIO DESVIACION DESVIACION
_
ESTANDAR RELATIVA
Y
4 41.67 1.93 0.046
7 19.16 0.4 0.021
14ª 33.69 0.93 0.027
5 28.09 0.62 0.022
16ª 30.65 1.07 0.034
Fuente: El autor. (2010)

Teniendo en cuenta que en los humanos es normal que se dé una


disminución de peso debido a la reducción en el consumo de calorías,

61
pasando de 2.000Kcal al día, a 1.300Kcal al día en promedio, se presume
que en esta experimentación no se registro una gran disminución de peso
ya que la dieta de los biomodelos no fue alterada, pero además el extracto
suministrado en la bebida aporta una buena cantidad de nutrientes (ver
Anexo # 1) lo que ayuda a mantener estable el peso en los animales.

62
9. CONCLUSIONES

Con la aplicación de los diferentes tratamientos de extracto mezclado con


agua evaluado en biomodelos diabéticamente inducidos se logro disminuir
los niveles de glucosa en un promedio de 75,4 mg/ml

Las diferentes concentraciones (mezcla de extracto y agua) de los


tratamientos, no mostraron diferencias significativas entre sí en la
disminución del azúcar en la sangre.

La variación promedio del peso de los biomodelos sometidos a los


diferentes tratamientos fue mínima (9,69g), considerando que la dieta no
fue alterada y que además el extracto aportaba nutrientes

El extracto del arilo del ackee (Blighia sápida) demostró tener un gran
potencial para el control de los niveles de azúcar en la sangre Según los
resultados obtenidos en la experimentación.

Observando los diferentes tratamientos se pudo ver como los animales que
recibieron el extracto disminuyeron su glicemia igualmente que el grupo
experimental que no lo recibió, adicionalmente el grupo que consumió
insulina en el agua disminuyo los niveles de azúcar tal y como lo logro los
tratamientos compuestos por el extracto utilizados en los demás animales

63
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www.aoac.org/pubs/JOURNAL/2002/JulAug/Method.Validation.htm
www.aupec.univalle.edu.co/informes/abril98/acki.html
www.buenasalud.com/lib/ShowDoc.cfm?LibDocID=2842&Return.
www.chem.uwimona.edu.jm:1104/lectures/ackee.html
www.diariosalud.com/enfermedades.php?op=contenido&sid=458&npag=3
www.doacs.state.fl.us/~pi/enpp/94-7&8all.htm
www.emedicine.com/ped/byname/toxicity-plants---ackee-fruit.htm.
www.emjamusa.org/fruit.htm
www.icbf.org
www.iqb.es/D_Mellitus/Medicinas/plantas04.htm.
www.itfnet.org/articles.content.fm?ID=100&Channel=Agriculture
www.jamaica-beach-villa.com/ackee.htm
www.monografias.com/cgi-bin/jump.cgi?ID=37819
www.noquartergiven.net/jamaica4.htm
www.recipes.caribseek.com/Caribbean_Food_Encyclopedia/ackee.shtml
www.santetropicale.com/Kiosque/Man/4907.htm
www.tradewindsfruit.com/akee.htm

67
ANEXOS

ANEXO 1.

Composición del Ackee


Valor nutritivo por 100 g de Arilos crudos

Humedad 57.60 g
Proteína 8.75 g
Grasa 18.78 g
Fibra 3.45 g
Carbohidratos 9.55 g
Ceniza 1,87 g
Calcio 83 mg
Fósforo 98 mg
Hierro 5,52 mg
Caroteno --
Tiamina 0,1 mg
Riboflavina 0,18 mg
Niacina 3,74 mg
Ácido asc órbico 65 mg

Fuente: Duque del James, (2002).

68
ANEXO 2.
Para hallar cada fila de la tabla, se calcula el promedio de cada fila de los 5
cuadros de resultados de glucosa de los tratamientos, arrojando la siguiente tabla

TABLA 1: Glucosa sanguínea


TRAT GLUCOSA SANGUINEA
R1 R2 R3 R4
T1 130,3 113,5 120,8 110
T2 129,5 145 113,7 119,5
T3 127,6 115,3 122,6 128,5
T4 139,2 140,6 144,3 145,4
T5 121,8 111,8 126,2 117,5
Fuente: El autor. 2010
_
Para calcular los Y i . se suma cada una de las filas y se divide por 4 que es el
número de repeticiones arrojando la siguiente tabla:

TABLA 2: Calculo de promedios

T OBSERVACIONES TOTAL PROM

1 130,3 113,5 120,8 110 474,6 118,65


2
129,5 145 113,7 119,5 507,7 126,92
3 127,6 115,3 122,6 128,5 494 123,5
4 139,2 140,6 144,3 145,4 569,5 142,37
5 121,8 111,8 126,2 117,5 477,3 119,32
TOTALES 2523,1 126,15

Fuente: El autor. 2010

69
TABLA 4: Calculo de promedios

= 118.65
= 126.92

= 123.50
= 142.37
ȳ 5 = 119.32
_
Y .. = 126.15
Y.. = 2523.1
Fuente: El autor. 2010

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