ANÁLISIS CROMATOGRÁFICO DE 5 AZÚCARES MEDIANTE TLC

I- Método: TLC (Cromatografía en capa delgada)

II- Materiales: III- Reactivos:
- Placa de vidrio  Solventes:
- Cámara cromatográ fica - n-Butanol
- Tubos capilares - Á cido acético
- Encendedor - Agua destilada
- Bagueta  Reveladores:
- Beaker x 250 mL - Vainilla sulfú rica
- Viales - Anisaldehído sulfú rico
- Pipetas - Ftalato á cido de anilonio
- Propipetas - Timol sulfú rico
- Micropipeta  Gel de sílice
- Fiolas x 10 mL  Está ndares:
- Fiola x 50 mL - Arabinosa
- Fiola x 100 mL - Fructuosa
- Placa Petri - Galactosa
- Papel manteca - Glucosa
- Papel toalla - Xilosa
IV- Procedimiento experimental:
1- Preparas los reveladores segú n los procedimientos indicados en el libro “Reactivos de
coloració n para cromatografía en capa fina y en papel”1.
2- Preparar la silica gel en cantidad suficiente para recubrir cada una de las 3 placas de
vidrio, con un espesor entre 0.3 a 0.5 mm2.
3- Preparar las soluciones está ndares de los azú cares: arabinosa, fructuosa, galactosa,
glucosa y xilosa, cada uno al 0.5 % (p/v)3.
4- Preparar el sistema de solventes n-Butanol:Á cido acético:agua (80:20:20) en la cá mara
cromatográ fica, colocar 25 mL.
5- Con ayuda de un encendedor, partir los capilares a la mitad para poder aplicar las
soluciones está ndares en la cromatoplaca.
6- Sembrar, con los capilares anteriormente preparados, los está ndares aplicando 15
puntadas en cada uno.
7- Una vez lista la cromatoplaca con todos los azú cares aplicados, colocar cuidadosamente
la placa en la cá mara cromatográ fica de la manera má s vertical posible.
8- Cubrir la cá mara cromatográ fica y esperar a que la fase mó vil corra a través de la fase
estacionaria hasta llegar al frente del solvente establecido, de 2 a 3 horas
aproximadamente.
9- Una vez la fase mó vil llegue al frente, retirar cuidadosamente la cromatoplaca y rociar
la solució n reveladora, hacer lo mismo con cada una de los reveladores.
10- Colocar la cromatoplaca con el revelador en la estufa a 120 °C x 20 min para vainilla
sulfú rica y timol sulfú rico; y a 105 °C x 15 minutos para Anisaldehído sulfú rico y ftalato
á cido de anilonio4.