2 Modulo Iii

1
MÓDULO III: MÉTODOS

INSTRUMENTALES
Métodos ópticos:
Ultravioleta visible
ANÁLISIS QUÍMICO INSTRUMENTAL
SANDRA LILIANA MOLINA CORREA
UNIVERSIDAD DE LA SABANA
2
REGIÓN DEL ESPECTRO DE RADIACIÓN
ELECTROMAGNÉTICA
• La radiación ultravioleta-visible
abarca la región comprendida
entre 160-780 nm.
• La radiación ultravioleta
abarca entre 160 nm a 400 nm,
región de alta energía, por lo
cual este tipo de radiación
puede generar quemaduras o
lesiones en los ojos
• La radiación visible abarca
entre 400-780 nm, en esta zona
podemos observar el color de
las sustancias.
3
ESPECIES ABSORBENTES
La absorción de radiación ultravioleta o visible por una especie atómica o molecular M

se puede considerar como un proceso de dos etapas, la primera de ellas consiste en
una excitación electrónica como se muestra en la ecuación:
El producto de la reacción entre M y el fotón es una especie excitada electrónica, su

existencia es muy corta y termina en un proceso de relajación
La relajación puede darse bien sea con la conversión de la energía de excitación en

calor; la descomposición de M* (reacción fotoquímica); la reemisión de fluorescencia o
fosforescencia.
4
ESPECIES ABSORBENTES
La absorción de radiación ultravioleta o visible resulta, generalmente, de la

excitación de los electrones de enlace, como consecuencia, los picos de
absorción pueden correlacionarse con los tipos de enlaces de las especies
objeto de estudio.
Existen tres tipos de transiciones electrónicas y a partir de estas se puede
clasificar las especies absorbentes en:
1. Especies absorbentes que contienen electrones π, σ y n
2. Especies absorbentes que contienen electrones d y f
3. Especies absorbentes que contienen electrones de transferencia de carga
5
1. Especies absorbentes que
contienen electrones π, σ y n
 Incluye iones y moléculas orgánicas, así como algunos aniones inorgánicos

 Todos los compuestos orgánicos son capaces de absorber radiación
electromagnética porque contienen electrones de valencia.
 Las moléculas que presentan enlaces sencillos presentan dificultades, ya que
absorben por debajo de 185 nm, donde también absorben los compuestos de la
atmosfera.
 Los estudios de espectrofotometría ultravioleta–visible se realizan por encima de 185
nm, limitándose a especies que presentan cromóforos (especies que presentan
electrones de valencia con energía de excitación relativamente bajas) dentro de su
estructura
6
TIPOS DE • La formación de un enlace

ELECTRONES covalente se da por el
solapamiento de los orbitales
atómicos de los elementos
Enlazantes No enlazantes involucrados, generando dos
orbitales moleculares, el
enlazante y el antienzalante.
Son los que No participan en el • La molécula en su estado basal,

participan en la enlace, están ubica los electrones enlazantes
formación de los alrededor del
enlaces átomo, ej: oxígeno en el orbital enlazante.
7
TRANSICIONES σ→σ*
 Transición de un electrón de un orbital sigma
enlazante a uno no enlazante.
 Es la transición que requiere mayor energía
(por lo tanto, menor longitud de onda
 EJEMPLOS: Metano=125 nm
Etano=135 nm
 No es una transición que ocurra en la región
del ultravioleta útil.
8
TRANSICIONES n→σ*
 Se da en compuestos saturados con
elementos que tienen electrones no
enlazante.
 Las transiciones ocurren a longitudes de
onda comprendidas entre 150-200 nm
 Las absortividades molares son de
magnitud baja e intermedia (100-3000 L/cm
mol
 En presencia de solventes polares como
agua, las longitudes de onda tienden a
desplazarse a unas más cortas
9
TRANSICIONES n→π* y π→π*

 Son las que más se usan para la realización de
métodos espectrofotométricos de UV-Vis
 Producen picos en la región comprendida
entre 200 y 700 nm
 Las absortividades molares para la transición
n→π* son bajas (10-100 L/mol cm),por otro
lado para las transiciones π→π* son altos
(1000-10000 L/mol cm).
 La polaridad del solvente afecta las
transiciones n-pi
10
EJERCICIO 1
Determinar el tipo de transiciones electrónicas que pueden presentar las

siguientes estructuras
11
EJERCICIO 1
Determinar el tipo de transiciones electrónicas que pueden presentar las siguientes

estructuras
δ→ δ* δ→ δ* δ→ δ*
n→ δ* n→ δ* n→ δ*
n→π* π→π* π→π*
π→π*
12
EJERCICIO 1
CAFEÍNA DOPAMINA ENDORFINA

Estimulante del sistema nervioso
Sensación de placer Sensación de calma
central que produce un efecto
temporal de restauración del nivel
de alerta y eliminación de la
somnolencia.
13
contienen electrones d y f
Para un ion metálico libre, los cinco orbitales-d

son de igual energía. En la presencia de un
ligando o molécula de solvente los orbitales-d
pueden separarse en dos o más grupos de
orbitales que difieren en su energía.
Orbitales d, del complejo

Cu(H2O)6+2
14
contienen electrones d y f
LANTANIDOS Y ACTINIDOS: METALES DE TRANSICIÓN

Presentan bandas de PRIMERA Y SEGUNDA
absorción más estrechas y SERIE: Presentan bandas
definidas. La absorción de absorción más anchas.
no se ve afectada por el La absorción se ve
medio afectada por el medio
15
3. Especies absorbentes que contienen
electrones de transferencia de carga
 Transición que ocurre cuando hay una interacción metal-

ligando (complejo)
 La absorción de un fotón genera la formación de especies en
un estado excitado, que pueden describirse en términos de la
transferencia de un electrón desde el metal, M, al ligando L
 La absorción por transferencia de carga, genera una alta

absorbancia, por lo cual es muy importante para métodos
analíticos muy sensibles.
 La transferencia de carga también puede darse desde el
ligando hacia el metal
16
TRANSMITANCIA Y ABSORBANCIA
La atenuación de la radiación electromagnética cuando pasa a través

de una muestra puede describirse cuantitativamente por dos términos:
transmitancia y absorbancia
TRANSMITANCIA: Es la proporción de radiación
electromagnética que pasa a través de la muestra, PT, y la
radiación de la fuente P0
Puede expresarse como porcentaje al multiplicarse por 100%

100% Transmitancia= no absorción
0% Transmitancia= absorción total
Sin embargo, la atenuación de la radiación, no solo puede darse por la

absorción, sino por otros fenómenos ópticos como refracción, por lo
tanto para tener en cuenta solo aquellos que hacen referencia a la
absorción, es necesario usar un blanco
17
TRANSMITANCIA Y ABSORBANCIA
ABSORBANCIA: Es un método alternativo para expresar

cuantitativamente la atenuación de la luz. Es más utilizada que la
transmitancia ya que es directamente proporcional a la concentración,
por lo cual puede obtenerse curvas de calibración lineales.
18
EJERCICIO 2
Una muestra tiene un porcentaje de transmitancia de 50,0%, determinar

la absorbancia de esta muestra (CIFRAS SIGNIFICATIVAS)
19
EJERCICIO 2
Una muestra tiene un porcentaje de transmitancia de 50,0%, determinar

la absorbancia de esta muestra (CIFRAS SIGNIFICATIVAS)
20
ABSORBANCIA Y CONCENTRACIÓN:
LEY DE LAMBERT-BEER
Cuando radiación electromagnética monocromática
pasa a través una capa infinitesimalmente delgada,
de espesor dx, esta experimentará una disminución en
su potencia, dP. La fracción que disminuya la
potencia es proporcional al espesor de la muestra y a
la concentración del analito.
Integrando la ecuación de la izquierda, volviendo la
relación usando una constante de proporcionalidad,
es posible establecer la Ley de Lambert-Beer
21
ABSORBANCIA Y CONCENTRACIÓN:
LEY DE LAMBERT-BEER
El coeficiente de absortividad (a) esta dado para

cualquier unidad de concentración, pero en caso de
que la concentración esté dada en molaridad, nos
referiremos a coeficiente de absortividad molar (ε).
El coeficiente de absortividad o coeficiente de

absortividad molar, indica la probabilidad que un
analito absorba un fotón con una energía dada. Por lo
tanto depende de la longitud de onda de la
radicación electromagnética
22
EJERCICIO 3
Una solución 5.00X10-4 M de una analito es puesta en una

celda de espesor 1,00 cm. Cuando hace la medida a una
longitud de onda de 490 nm, la absorbancia de la solución
es de 0,338. Determinar el valor del coeficiente de
absortividad molar a esta longitud de onda?
23
EJERCICIO 3
Una solución 5.00X10-4 M de una analito es puesta en una

celda de espesor 1,00 cm. Cuando hace la medida a una
longitud de onda de 490 nm, la absorbancia de la solución
es de 0,338. Determinar el valor del coeficiente de
absortividad molar a esta longitud de onda?
24
LIMITACIONES DE LA LEY DE LAMBERT-
BEER
LIMITACIONES PROPIAS DE LA LEY DE BEER
A concentraciones altas (generalmente
0,01 M), la distancia media entre las
moléculas responsables de la absorción
disminuye hasta el punto en que cada
molécula altera la distribución de carga
de las moléculas vecinas. Esta
interacción, a su vez, puede alterar la
capacidad de las moléculas para
absorber la radiación de una Solución diluida Solución concentrada
determinada longitud de onda.
25
BEER
LIMITACIONES PROPIAS DE LA LEY DE BEER
Cambio en el índice de refracción. El
coeficiente de absortividad es función del 𝐴 = ε𝑏𝑐
índice de refracción (η), y algunas soluciones
pueden generar cambios al variar la
concentración. En la mayoría de los casos si
la concentración está por debajo de 0,01 M,
el índice de refracción permanece 𝜀𝜂
prácticamente constante, si llega a existir un 𝐴= 2 2
𝑏𝑐
cambio es necesario hacer una corrección a
(𝜂 + 2)
la Ley de Lambert-Beer
26
BEER
DESVIACIONES QUÍMICAS
Cuando un analito se disocia, se asocia o
reacciona con un disolvente para dar lugar a
un producto con un espectro de absorción
diferente al del analito, se producen
desviaciones de la ley de Beer
EJEMPLO: Indicador ácido-base sin buffer
27
BEER
DESVIACIONES INSTRUMENTALES
LUZ MONOCROMATICA: El cumplimiento estricto de
la Ley de Beer sólo se observa cuando la radiación
es realmente monocromática;
desafortunadamente, en la práctica es raro el uso
de radiación restringida a una sola longitud de
onda debido a que los dispositivos que aíslan
porciones de la señal de salida de una fuente
continua generan una banda de longitudes de
onda más o menos simétrica en torno a la deseada.
Este defecto no es detectable cuando a las
diferentes longitudes de onda el coeficiente de
absortividad molar es el mismo.
LIMITACIONES DE LA LEY DE LAMBERT-BEER
28
LUZ MONOCROMATICA: El cumplimiento estricto de la Ley de Beer sólo se observa
cuando la radiación es realmente monocromática; en la práctica es raro el uso de
radiación restringida a una sola longitud de onda y la fuente continua generan una
banda de longitudes de onda más o menos simétrica en torno a la deseada. Este
defecto no es detectable cuando a las diferentes longitudes de onda el coeficiente de
absortividad molar es el mismo.
29
BEER
RADIACIÓN PARÁSITA: La radiación que emerge
del monocromador suele estar contaminada con
pequeñas cantidades de radiación dispersada o
parásita, la cual alcanza la rendija de salida
como resultado de dispersiones y reflexiones en
varias superficies. La radiación parásita con
frecuencia difiere sustancialmente en su longitud
de onda de la radiación principal y, además,
puede no haber atravesado la muestra.
30
INSTRUMENTACIÓN: (1) fuente
➢ Debe generar un haz de radiación con potencia suficiente para que se detecte y se mida con
facilidad.
➢ La potencia de salida debe ser estable
➢ Para la espectrofotometria ultravioleta-visible las lámparas más usadas son:

Lámpara halogenada de tungsteno. Son ampliamente utilizados en el visible y cerca de la región
espectral ultravioleta (por encima de los 330 nm). Lámpara de deuterio. emiten fuertemente en la
región UV por debajo de los 330 nm. Lámpara de arco xenón. dan un continuo que va desde
menos de 190 nm y por encima de 1000 nm
31
INSTRUMENTACIÓN: (2) celda y
compartimiento
El Compartimiento de Celdas es la parte física del instrumento en la cual se

alojarán las celdas de absorción. Este por lo general es un espacio que
presenta uno o más contenedores de muestra (fijo o automático), y las
aberturas para los lentes ópticos. El compartimiento de muestras por lo
general se encuentra recubierto de una pintura de recubrimiento no volátil,
oscura y de muy baja reflexión, lo cual la hace altamente absorbente a un
amplio rango de radiaciones.
32
INSTRUMENTACIÓN: (2) celda y
compartimiento
Las celdas que se utilizan en el

espectrofotómetro por lo general están
hechas de Vidrio o Cuarzo, pero si la
aplicación requiere rango Visible, y el
solvente es agua, pueden utilizarse celdas
de Plástico descartable. Las dimensiones de
estas celdas varían según la aplicación,
pero las más comunes son las de 1 cm de
paso óptico.
33
INSTRUMENTACIÓN: (3) selectores de
longitud de onda
➢ Se necesita una radiación constituida por un grupo limitado, estrecho y

continuo de longitudes de onda denominado banda.
➢ Una anchura de banda estrecha aumenta la sensibilidad de las medidas

de absorbancia
➢ Se conocen con el nombre de monocromadores.

34
INSTRUMENTACIÓN: (4) detector
Es la parte del instrumento que recibe la intensidad

de radiación monocromática de la muestra, y la
transforma a un valor de señal eléctrica. Esta señal
eléctrica es medida y comparada con respecto a
un valor de referencia (Blanco de control), para
presentar un valor numérico que nosotros podamos
entender. Hay dos tipos de detectores que se utilizan
en espectrofotómetros modernos.
35
INSTRUMENTACIÓN: (4) detector (Tubo
fotomultiplicador)
El tipo de detector más usado es el Tubo Fotomultiplicador. Este
detector utiliza el fenómeno de la “Foto Emisión” para generar un
pequeño flujo de corriente, el cual es amplificado y medido en
forma proporcional a la cantidad de radiación incidente sobre el
detector. Cada fotón que cae sobre el detector incide sobre una
placa que desprende 3 o 5 electrones, los cuales chocan a su vez
sobre otras placas, generando un efecto de cascada.
Un Detector Tubo Fotomultiplicador presenta las siguientes ventajas:

• Alta Sensibilidad en todo el Rango.
• Repetibilidad de la señal.
• Baja Fluctuación de la señal de Absorbancia.
• Deriva mínima
• Bajo Nivel de Ruido.
36
INSTRUMENTACIÓN: (4) detector
(Arreglo de diodos)
Estos detectores emplean un gran número de diodos de
silicio dispuestos lado a lado en un solo chip. Cuando la
radiación UV-VIS cae en el diodo, su conductividad
aumenta significativamente. Este aumento de la
conductividad es proporcional a la intensidad de la
radiación y se puede medir fácilmente.
Dado que un gran número de diodos pueden ser

organizados juntos, la intensidad en un número de
longitudes de onda se puede medir de forma simultánea.
Aunque el arreglo de fotodiodos no es tan sensible como el

tubo fotomultiplicador, la posibilidad de ser capaz de medir
un gran número de longitudes de onda hace que sea un
detector de elección en los instrumentos rápidos modernos.
37
INSTRUMENTACIÓN: (5) procesador de
señal
El procesador de señal es generalmente un dispositivo electrónico que

amplifica la señal eléctrica del detector. Además, puede cambiar la
señal de corriente continua a corriente alterna (o a la inversa),
cambiar la fase de la señal y filtrarla para eliminar los componentes no
deseados. Además, el procesador de señala puede utilizarse para
llevar a cabo operaciones matemáticas en la señal como diferencia,
integrar o convertir a logaritmo.
38
Curva de
calibración
Adición
UN ANALITO
estándar
APLICACIONES Patrón interno

CUANTITATIVAS
Aditividad
MÁS DE UN
ANALITO
Análisis lineal
de múltiples λ
39
Curva de
calibración
Adición
UN ANALITO
estándar

CUANTITATIVAS
Aditividad
MÁS DE UN
ANALITO
Análisis lineal
de múltiples λ
40
APLICACIONES CUANTITATIVAS: un
analito
Calibración: proceso que relaciona la señal analítica medida con la

concentración del analito
MÉTODOS DE CALIBRACIÓN
Curva de Adición Patrón

calibración estándar interno
41
analito


42
analito-Curva de calibración
También conocida como curva patrón o curva

CURVA DE CALIBRACIÓN
3,5
analítica.
3
Para realizar esta curva, se introducen al
SEÑAL ANALITICA
2,5
2 instrumento varios patrones que contiene
1,5 concentraciones exactamente conocidas del
1 analito y se registra la señal instrumental.
0,5
0
0 0,5 1 1,5
Esta señal se corrige con la correspondiente
CONCENTRACIÓN señal obtenida con el blanco (idealmente, este
debe contener todos los componentes de la
muestra, excepto el analito).
43
La curva es útil en la región en la cual
3,5 la respuesta del instrumento ante los
3 cambios de concentración es
SEÑAL ANALITICA
2,5 directamente proporcional.

2
1,5
1
La ecuación de la curva de
0,5 calibración se obtiene por el método
0 de mínimos cuadrados, la cual permite
0 0,5 1 1,5
CONCENTRACIÓN
la determinación de la concentración
de muestras problema
44
El éxito de la curva de calibrado depende

3,5
de la exactitud de la concentración de los
3 patrones y de lo parecido de las matrices.
SEÑAL ANALITICA
2,5
2 En algunas ocasiones la reproducibilidad
1,5 de la matriz no es posible debido a la
1 complejidad de la muestra.
0,5
0
0 0,5 1 1,5
Para minimizar, es necesario la eliminación
CONCENTRACIÓN de algunos posibles interferentes
45
EJERCICIO 4
El hierro forma un complejo con 1,10-fenantrolina, el cual

presenta un máximo de absorción a 510 nm.
Volumen slón
A partir de una solución patrón de 100,0 mg/L de hierro se Absorbancia
patrón (mL)
preparó una curva de calibración tomando un volumen de
dicha solución el cual se llevaba a un balón aforado de 50,0 0 0,006
mL y completando a volumen con agua, obteniéndose los 1,00 0,160
siguientes datos: 2,00 0,313
25,00 mL de una muestra de agua subterránea se colocaron 3,00 0,460
en un matraz de 50,0 mL después de ser tratada para formar 4,00 0,619
el complejo coloreado, al igual que la curva de calibración,
Muestra 0,203
fue aforada. La absorbancia fue de 0,203.
Calcular la concentración de Fe (mg/L) en la muestra de
agua
46
EJERCICIO 4
Volumen slón Concentración del Absorbancia

Absorbancia
patrón (mL) patrón diluida(ppm) corregida
0 0,006 2,00 0,154
1,00 0,160 4,00 0,307
2,00 0,313 6,00 0,454
3,00 0,460 8,00 0,613
4,00 0,619 Muestra 0,197
Muestra 0,203
𝐶1 × 𝑉1 = 𝐶2 × 𝑉2 𝐴𝑏𝑠𝑐𝑜𝑟𝑟. = 𝐴𝑏𝑠𝑚𝑒𝑑. − 𝐴𝑏𝑠𝑏𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜

EJERCICIO 4 47
0,7
0,6 Abs = 0,0762(C) + 0,001

R² = 0,9998
0,5 0,197 = 0,0762(C) + 0,001
Absorbancia
0,4
(C)= 2,57 mg/L
0,3
0,2
C2=(2,57mg/L*50,0mL)/25,00 mL
0,1 C2= 5,14 mg/L

0
0 2 4 6 8 10
Concentración de Fe (ppm)
48
analito


49
APLICACIONES
CUANTITATIVAS: un
analito-Adición estándar
Útil para analizar muestras complejas en
las que la probabilidad de que se
produzcan efectos debidos a la matriz es
considerable.
El método consiste en añadir sobre una
serie de alícuotas, cantidades conocidas
del componente a determinar, y medir la
magnitud de la propiedad analítica de
interés tras las diferentes adiciones.
50
APLICACIONES
CUANTITATIVAS: un
Para llevar a la práctica el método,
usualmente se toman volúmenes iguales de
disolución problema, y se añaden
cantidades conocidas y diferentes de
analito a todas las muestras, excepto a una,
diluyendo todas al mismo volumen.
Seguidamente se obtienen las señales
instrumentales para todas esas disoluciones,
y los resultados se representan como una
curva de calibración.
51
K= constante
V0= volumen inicial
CA= concentración analito
CS= concentración estándar
Vf= volumen final
La señal medida se representa en el eje y, mientras que en el eje x, la escala se

expresa en términos de las cantidades de analito añadidas, ya sea como masa,
volumen o como concentración.
52
EJERCICIO 5
25,0 mL de una muestra de agua subterránea se

colocaron en un matraz de 50,0 mL después de
ser tratada para formar el complejo coloreado Volumen slón
Absorbancia
de Fe con la 1,10-fenantrolina, fue aforada. La patrón (mL)
absorbancia fue de 0,203 0 0,203
En otros matraces iguales fueron colocados 1,00 0,363
25,00 mL de la muestra, el reactivo complejante 2,00 0,516
y respectivamente 1.00, 2.00, y 3.00 mL de 3,00 0,663
solución patrón de Fe de una concentración d
100,0 mg/L.
Calcule la concentración de Fe en la muestra
53
EJERCICIO 5
La señal medida se representa en el eje y, mientras que en el eje x, la escala se

expresa en términos de las cantidades de analito añadidas, ya sea como masa,
volumen o como concentración.
EJERCICIO 5 54
0,700
0,600
0,500
Absorbancia
𝐶𝐴 𝑉0
𝐼𝑛𝑡𝑒𝑟𝑐𝑒𝑝𝑡𝑜 𝑒𝑛 𝑋 = −
0,400 𝐶𝑠
𝐶𝐴 𝑉0
𝐼𝑛𝑡𝑒𝑟𝑐𝑒𝑝𝑡𝑜 𝑒𝑛 𝑋 = −1,346 = −
0,300 𝐶𝑠
𝐶𝐴 = 5,383 𝑚𝑔/𝐿
0,200
Abs = 0,1533(V) + 0,2063
0,100
R² = 0,9996
0,000
0,00 1,00 2,00 3,00 4,00
Volumen estándar (mL)
55
analito


56
analito- Patrón interno
La calibración con estándar o patrón interno se utiliza para compensar

errores aleatorios y sistemáticos como interferencias no espectrales de
componentes de la matriz, fluctuaciones debidas del método y errores
instrumentales
Se selecciona como estándar interno, una sustancia diferente del
analito que presente propiedades similares a las del analito, tal que
ambos sean afectados similarmente durante el análisis. También puede
seleccionarse un componente mayoritario que este presente en la
muestra, y el cual se adiciona a los patrones a elevada concentración
para considerarse constante.
57
analito- Patrón interno
La aplicación de este método consiste en

realizar medidas simultáneas de la
respuesta del instrumento al analito y al
estándar interno. El estándar interno, se
añade en una cantidad conocida y
constante a la muestra, y a los estándares
del analito. En la gráfica de calibrado se
representa la relación Señal analito/Señal
de estándar interno en función de la
concentración del analito en los
estándares. De esta manera la respuesta
del instrumento o la señal analítica es
independiente, de la fluctuación debida
al método de análisis.
58
Curva de
calibración
Adición
UN ANALITO
estándar

CUANTITATIVAS
Aditividad
MÁS DE UN
ANALITO
Análisis lineal
de múltiples λ
59
Curva de
calibración
Adición
UN ANALITO
estándar

CUANTITATIVAS
Aditividad
MÁS DE UN
ANALITO
Análisis lineal
de múltiples λ
[A]=[B] εA>0
εB~0
εB>0
εA~0
60
61
Curva de
calibración
Adición
UN ANALITO
estándar

CUANTITATIVAS
Aditividad
MÁS DE UN
ANALITO
Análisis lineal
de múltiples λ
62
CASO 1. UN ANALITO


[A]=[B] εA>0
εB~0
εB>0
εA~0 63
[X]=[Y]
εX>εY εY>εX
64
Curva de
calibración
Adición
UN ANALITO
estándar

CUANTITATIVAS
Aditividad
MÁS DE UN
ANALITO
Análisis lineal
de múltiples λ
65
ADITIVIDAD
El principio de aditividad en espectrofotometría indica que la

absorbancia total medida de una mezcla a una longitud de onda, es
igual a la suma de las absorbancias de los componentes individuales de
la mezcla y, que el aporte de cada componente a la absorbancia total
es función del valor del coeficiente de absortividad molar de cada
especie absorbente ( y de la concentración) para una longitud de onda
dada.
66
ADITIVIDAD
Para que el método sea lo más preciso y 𝜆1

exacto posible, las dos longitudes de onda
seleccionadas deben cumplir: 𝜆2
Un método para encontrar dichas longitudes de onda, es graficar

εX/εY como función de la longitud de onda.
67
EJERCICIO 6
Las concentraciones de Fe+3 y Cu+2 en una mezcla pueden ser determinadas

por la reacción con el hexacianorutenato (II), Ru(CN)6-4, el cual, forma un
complejo púrpura azul con el Fe+3 (λ1=550 nm), y un complejo verde pálido con
el Cu+2 (λ2=396 nm). Las absortividades molares para los complejos metálicos a
las dos longitudes de onda, se muestran en la tabla de la parte inferior de la
diapositiva. Cuando una muestra que contiene Fe+3 y Cu+2 es analizada en una
celda cuyo espesor es de 1,00 cm, la absorbancia a 550 nm es 0,183, y la
absorbancia en 396 nm es 0,109. Cuales son las concentraciones molares de
Fe+3 y Cu+2 en la muestra
68
EJERCICIO 6
Fe=0,0000180 M
Cu= 0,000126 M
69
EJERCICIO 7
Determinar las absorbancias (en una celda de 1,00 cm) de las

disoluciones no amortiguadas del indicador, que varían en
concentración de 2,00X10-5 M a 16,00X10-5 M. (Ka= 1,42X10-5)
70
EJERCICIO 7
Determinar las absorbancias (en una celda de 1,00 cm) de las

disoluciones no amortiguadas del indicador, que varían en
concentración de 2,00X10-5 M a 16,00X10-5 M. (Ka= 1,42X10-5)
[A]=[B] εA>0
εB~0
εB>0
εA~0 71
[X]=[Y]
εX>εY εY>εX
[C]=[D] εD~εC εC~εD

72
Curva de
calibración
Adición
UN ANALITO
estándar

CUANTITATIVAS
Aditividad
MÁS DE UN
ANALITO
Análisis lineal
de múltiples λ
73
ANÁLISIS DE REGRESIÓN LINEAL A
MULTI-LONGITUDES DE ONDA (MLRA)
Cuando los espectros de los

componentes de la mezcla, se
encuentran solapados, es decir
εX~εY, la aproximación que se
usa para la cuantificación de
una mezcla es el Análisis de
regresión lineal a multi-
longitudes de onda (MLRA)
74
Si Asx y Asy son las absorbancias de soluciones estándar

de los componentes X y Y, y Csx y Csy son
concentraciones conocidas de los componentes X y Y a
cualquier longitud de onda, entonces:
Y tenemos que la absorbancia de la

mezcla, es la suma del aporte de la
absorbancia de cada componente
Sustituyendo, en la ecuación anterior, las

expresiones iniciales, tenemos:
75
DEDUCCIÓN
DE LA
ECUACIÓN
PARA MLRA
76
Por lo tanto, para determinar Cx y Cy, la absorbancia de la mezcla y las

absorbancias de las soluciones estándar son medidas en varias
longitudes de onda. Una gráfica de Am/Asx versus Asy/Asx tendrá una
tendencia lineal.
77
EJERCICIO 8
λ (nm) ACr+3 ACo+2 Amix Determinar la concentración de

375 0,2 0,01 0,53
cromo (III) y cobalto (II) en una
425 0,39 0,07 0,83
mezcla que contiene estos elementos
455 0,20 0,21 0,54
e impurezas inertes. Para solucionar
480 0,12 0,30 0,44
500 0,13 0,38 0,51
este problema se utiliza el método de
530 0,24 0,33 0,70
MLRA. Se prepararon dos soluciones
550 0,32 0,18 0,76 una de cromo (III) 0,0250 M, y la
575 0,39 0,06 0,82 segunda de cobalto (II) 0,0750 M.
600 0,34 0,03 0,70 Dar la respuesta en molaridad.
Asumiendo que 78
x es cromo y y
cobalto
4 4
3,5 3,5
Amix/AsCr
Amix/AsCr.
3 3
2,5 2,5
Amix/AsCr =0,6602(AsCo/AsCr) + 2,005

2 Amix/AsCr = 0,5992(AsCo/AsCr) + 2,1332 2 R² = 0,9999
R² = 0,9188
1,5 1,5
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3
AsCo/AsCr AsCo/AsCr
Asumiendo que 79
x es cobalto y y
cromo
60 25
Amix/AsCo = 2,5115(AsCr/AsCo) - 0,6642 Amix/AsCo = 2,0012(AsCr/AsCo) + 0,6675

50 R² = 0,9815 R² = 1
20
40
15
Amix/AsCo
Amix/AsCo
30
10
20
5
10
0 0
0 5 10 15 20 25 0 2 4 6 8 10 12
AsCr/AsCo AsCr/AsCo
80
EJERCICIO 9
Por cuál casos o casos podría resolver las siguientes mezclas

81
APLICACIONES: MEDIO AMBIENTE
82

83
84
APLICACIONES: CLÍNICAS
85
ESTEQUIOMETRÍA
DE COMPLEJOS
APLICACIONES
CUALITATIVAS
CONSTANTES DE
EQUILIBRIO
86
ESTEQUIOMETRÍA
DE COMPLEJOS
APLICACIONES
CUALITATIVAS
CONSTANTES DE
EQUILIBRIO
87
Método de Job
ESTEQUIOMETRIA Relaciones
DE COMPLEJOS molares
Relación de
pendientes
88
Método de Job
Relación de
pendientes
89
MÉTODO DE JOB
CONDICIONES EXPERIMENTALES
90
MÉTODO DE JOB
UNIDADES DE CONCENTRACIÓN
91
MÉTODO DE JOB
DETERMINACIÓN DE
LA ESTEQUIOMETRÍA
92
MÉTODO DE JOB
CORRECCIÓN DE
LA ABSORBANCIA
Se desea determinar la estequiometria formada
entre el Cu (II) y el EDTA, para tal fin se utiliza el 93
método de Job. Se prepararon dos soluciones, la
primera de cobre, para lo cual se usó 64,8 mg
de sulfato de cobre pentahidratado, los cuales
fueron disueltos en 50,00 ml. La segunda de TAREA MÉTODO DE JOB
EDTA, se usó 94,1 mg de EDTA disodico
dihidratado, los cuales fueron disueltos en 50,00 VOL. VOL.
ABSORBANCIA
mL. Cu (II) (mL) EDTA (mL)
A partir de estas dos soluciones se prepararon 0,00 9,00 0,001
algunas mezclas como lo indica la tabla 1 y la 1,50 7,50 0,081
absorbancia de estás fueron medidas a 750 nm. 3,00 6,00 0,149
A partir de los datos obtenidos, determinar: 4,50 4,50 0,226
a) La relación estequiométrica del complejo 6,00 3,00 0,187
b) Los coeficientes de absortividad molar de: 7,50 1,50 0,143
cobre, EDTA y complejo a 750 nm 9,00 0 0,090
c) Si es necesario, realizar la corrección de Tabla 1. Mezclas preparadas y
absorbancias absorbancias medidas para la
d) (Si hizo lo anterior) Determinar la determinación de la estequiometria por el
estequiometria con las absorbancias método de Job
corregidas.
94
Método de Job
Relación de
pendientes
95
RELACIONES MOLARES
96
Método de Job
Relación de
pendientes
97
RELACIÓN DE PENDIENTES
CONDICIONES 1 CONDICIONES 2
Ligando cambia Metal cambia
Metal constante Ligando constante
98
RELACIÓN DE PENDIENTES
CONDICIONES 1 CONDICIONES 2
Ligando cambia Metal cambia
Metal constante Ligando constante
99
ESTEQUIOMETRÍA
DE COMPLEJOS
APLICACIONES
CUALITATIVAS
CONSTANTES DE
EQUILIBRIO
100
CONSTANTE DE EQUILIBRIO
101
Se realiza medición
en pHmetro
Se realiza medición
en espectrofotómetro
102
Se comporta como una mezcla

103
C, es la concentración inicial, o la
concentración total
Teniendo en cuenta las dos
ecuaciones anteriores, es posible:
Experimento a pH ácido
Haciendo distribución de
términos, y teniendo en cuenta
algunos experimentos paralelos,
se llega a la expresión en rojo
104
Despejando
De manera similar, puede llegarse a una expresión para la otra

especie absorbente
Reemplazando en la
constante de equilibrio, se
llega a la expresión:
La cual puede linealizarse

como:

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1

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