Fernando Bello Muñoz Sección: 5v2

Prevalencia y caracterización genotípica de aislados

de Giardia duodenalis de niños asintomáticos que
asisten a la escuela en Lusaka, Zambia

RESUMEN
Giardia duodenalis es una de las causas más comunes de diarrea en humanos, con
alrededor de 250 a 300 millones de casos por año. Se considera un complejo de especies
que comprende ocho conjuntos genéticos (A a H), siendo los conjuntos A y B las
principales causas de infecciones en humanos. En este estudio llevamos a cabo la
caracterización genotípica de aislamientos de G. duodenalis detectados en niños
asintomáticos escolares de 3 a 16 años de edad. Entre mayo y septiembre de 2017, se
recogieron un total de 329 muestras fecales de niños que asistían a la escuela del
complejo Chawama de la ciudad de Lusaka y se examinaron para detectar Giardia
mediante examen microscópico. Todas las muestras fecales microscópicamente positivas
se analizaron mediante reacción en cadena de polimerasa (PCR) semianidada dirigida al
gen glutamato deshidrogenasa (gdh). El genotipado de los productos de PCR amplificados
se realizó mediante polimorfismo de longitud de fragmento de restricción (RFLP) y análisis
de secuencia de ADN. Microscópicamente, se encontró Giardia en el 10% (33/329) de
muestras fecales. El análisis PCR-RFLP del gen gdh reveló ensamblajes A y B en 27.3%
(9/33) y 72.7% (24/33), respectivamente. Además, el análisis con enzimas de restricción
identificó subconjuntos AII (27.3%, 9/33), BIII (12.1%, 4/33), BIV (51.5%, 17/33) e
infecciones mixtas de BIII y BIV (9.1%, 3/33). El análisis filogenético mostró la agrupación
del 27,6% (8/29) y el 72,4% (21/29) de las secuencias del gen gdh de Zaiar Giardia en
ensamblajes A y B, respectivamente. Este estudio ha revelado la presencia de ambos
conjuntos A y B y que la propagación de G. duodenalis en niños en edad escolar parece ser
principalmente a través de la transmisión antroponótica. Hasta donde sabemos, este es el
primer informe de caracterización genotípica de G. duodenalis identificado en Zambia.

Palabras clave: Giardia duodenalis; Giardiasis; Genotipado; Glutamato deshidrogenasa;

Análisis filogenético; Zambia.

INTRODUCCIÓN
Giardia duodenalis es un parásito protozoario responsable de 250 a 300 millones de
infecciones humanas sintomáticas anualmente, siendo las comunidades menos
desarrolladas las más afectadas (Einarsson et al., 2016). La infección puede manifestarse
como diarrea aguda, que puede volverse crónica si no se trata, y la mayoría de las
infecciones son asintomáticas (Certad et al., 2017). La infección crónica se asocia con
malabsorción, lo que puede conducir a la pérdida de peso y al desgaste en los niños
(Squire y Ryan, 2017). G. duodenalis también se relaciona con deterioro cognitivo en niños
en edad escolar (Berkman et al., 2002). La transmisión del patógeno se produce
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directamente (vía fecal-oral) o indirectamente (a través de alimentos y agua

contaminados), siendo la ruta indirecta la principal vía de transmisión (Thompson, 2000).
G. duodenalis se considera un complejo de especies, con ocho conjuntos genéticos (AH),
cuyo rango de hospedadores varía ampliamente (A y B - Humanos y otros mamíferos, C y
D - Cánidos, E - Animales con pezuñas, F - Gatos, G - Ratas y H - Mamíferos marinos)
(Minetti et al., 2016). Sin embargo, ha habido informes recientes de humanos infectados
con los ensamblajes E y F (Abdel-Moein y Saeed, 2016; Fantinatti et al., 2016; Gelanew et
al., 2007; Zahedi et al., 2017). Los ensamblajes A y B se dividen en subconjuntos (AI, AII,
AIII, AIV, BI, BII, BIII y BIV) (Monis et al., 2003). Los conjuntos de G. duodenalis se pueden
distinguir en base al polimorfismo de un solo nucleótido y / o al análisis genotípico de los
genes ssu - rRNAbeta, (β) -giardin (bg), triosa fosfato isomerasa (tpi) y glutamato
deshidrogenasa (gdh) (Caccio y Ryan) 2008). En África, la prevalencia reportada de
infección por Giardia varía ampliamente posiblemente debido al uso de diferentes
técnicas de diagnóstico, y la mayoría de los estudios se basan en microscopía y serología
(Squire y Ryan, 2017). Algunos estudios moleculares en África han revelado la presencia
de ensamblajes A, B, C, E y F en la población humana (Squire y Ryan, 2017). La
caracterización a nivel de subconjunto ha demostrado la presencia de subconjuntos AI,
AII, BIII, BIV, así como algunos subconjuntos nuevos (Squire y Ryan, 2017). Si bien se ha
informado de la aparición de giardiasis en niños en Zambia (Graczyk et al., 2005; Siwila et
al., 2010; Siwila et al., 2011), no ha habido información sobre los genotipos presentes en
el país. El propósito de este estudio fue determinar la prevalencia de la infección por
Giardia en niños asintomáticos en Lusaka, así como caracterizar genéticamente los
aislamientos que infectan a estos niños. El conocimiento de los genotipos infecciosos
conduciría a una mejor comprensión de la epidemiología de la enfermedad y ayudaría a
diseñar estrategias de control apropiadas.

MATERIAL Y METODOS
Recolección de muestras fecales y examen microscópico
Se realizó un estudio transversal entre mayo y septiembre de 2017, que es la estación seca
cuando el área es más accesible y antes del comienzo de los exámenes nacionales de
séptimo grado (7), durante los cuales un total de 329 asintomáticos. Se tomaron muestras
de niños que asistían a la escuela (146 niños y 183 niñas) de dos escuelas públicas (123) y
dos comunitarias (206) en el complejo Chawama del distrito de Lusaka en Zambia.
Solo los niños que no habían tenido diarrea en el mes anterior a la fecha de recolección de
la muestra fueron considerados en este estudio, mientras que aquellos que habían tenido
al menos unos episodios de diarrea en el mismo período fueron excluidos del estudio.
Chawama es un asentamiento de alta densidad dentro de la ciudad de Lusaka, cuyo origen
es el resultado de un asentamiento no planificado que finalmente fue reconocido
oficialmente como un asentamiento ilegal. Debido a su estado de asentamiento no
planificado, Chawama se caracteriza por un saneamiento inadecuado y un suministro de
agua irregular, y la mayoría de los hogares carecen de ingresos adecuados (Ndhlema,
2000). De cada niño, se recogió una muestra fecal en un recipiente con tapa de rosca de
50 ml y se procesó mediante el método de concentración de formalina / acetato de etilo.
Las muestras fecales recolectadas se mantuvieron a 4 ° C sin preservación hasta su
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procesamiento y examen en el laboratorio. La consistencia fecal se observó cómo acuosa,

blanda, suelta, semiformada o formada. Las muestras fecales se examinaron en busca de
infección parasitaria utilizando frotis húmedos teñidos con yodo de Lugol después de ser
procesados por el método formal de concentración de éter (García, 2007). La intensidad
de la infección se estimó como el número promedio de conteos de quistes por campo de
alta potencia (HPF / X40) del microscopio óptico. La clasificación de la infección por
Giardia se determinó según lo descrito por Almeida et al. (2006) En resumen, aquellos con
1 a 2 quistes se registraron como 1+ (muy bajo), 3 a 10 quistes se registraron como 2+
(bajo), 11 a 30 quistes se registraron como 3+ (medio o moderado),> 30 quistes se
registraron como 4+ (alto).

Extracción de ADN
Todas las muestras fecales que fueron positivas para Giardia mediante examen
microscópico se almacenaron a una temperatura de 2 a 8 ° C antes de la extracción del
ADN. La extracción de ADN genómico se realizó directamente de todas las muestras de
heces positivas utilizando el kit Fecal DNA MiniPrep (Zymo Research, EE. UU.) De acuerdo
con el protocolo del fabricante. Las muestras de ADN extraídas se almacenaron a -20 ° C
para ensayos de PCR y otras aplicaciones descendentes.

Amplificación PCR
La amplificación de la región de 432 pares de bases (pb) del gen gdh se llevó a cabo en un
ensayo de PCR semi-anidado usando cebadores y condiciones específicas descritas por
Read et al. (2004) Brevemente, en la primera reacción, la amplificación se realizó usando
el par de cebadores GDHeF: 5'-TCA ACG TYA AYC GYC GYT TCC GT-3 'y GDHiR: 5'-GTT RTC
CTT GCA CAT CTC C-3'. El producto de PCR de esta reacción se usó en la segunda reacción
con el conjunto de cebadores GDHiF: 5'-CAG TAC AAC TCY GCT CTC GG-3 'y GDHiR: 5'-GTT
RTC CTT GCA CAT CTC C-3'. Después de la electroforesis, el producto de PCR final se
visualizó bajo luz ultravioleta (UV) en gel de agarosa al 1,5% teñido con bromuro de etidio.

Análisis PCR-RFLP
El análisis RFLP se realizó e interpretó según lo descrito por Read et al., (2004). Se
agregaron diez microlitros (10 μL) de producto de PCR a 1 X tampón enzimático y 2 μL (10
U / μL) de BspLI (NIaIV) o 2 μL (10 U / μL) de enzimas RsaI (New England Biolabs, EE. UU.)
Para obtener el resultado final volúmenes de 30 μL y 25 μL, respectivamente.
La mezcla de reacción se incubó durante un período de 16 horas a 37 ° C. La digestión de
la enzima NlaIV se usó para distinguir los ensamblajes A, B, C, D y los subconjuntos AI y AII.
La digestión de la enzima RsaI se utilizó para distinguir los subconjuntos BIII y BIV. Los
fragmentos de restricción se separaron en gel de agarosa al 3% teñido con bromuro de
etidio y se visualizaron bajo luz UV.

Análisis secuencial y filogenético

La purificación de los productos de PCR, secuenciación, ensamblaje de secuencias y
edición se realizó como se describió anteriormente (Simulundu et al., 2018). El primer par
GDHiF / GDHiR se utilizó para la secuenciación. Las secuencias generadas en este estudio
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fueron depositadas en GenBank (LC430549 - LC430577). El análisis filogenético se realizó

en el software MEGA V6.06 utilizando el método de máxima verosimilitud y el modelo
evolutivo Tamura-Nei (Tamura y Nei, 1993; Tamura et al., 2013). La selección del modelo
se realizó utilizando el software MEGA V6.06 (Tamura et al., 2013). La confiabilidad
topológica del árbol filogenético se determinó utilizando el método bootstrap, con 1000
repeticiones.

Análisis de datos
Los datos demográficos (sexo, edad, tipo de escuela) y la presencia de patógenos después
del examen microscópico de heces se recopilaron e ingresaron en una hoja de cálculo de
datos de Excel para cada niño. La edad de los niños osciló entre 3 y 16 años. La edad se
clasificó en tres grupos de 3 a 6 años, de 7 a 9 años y de 10 a 16 años, en línea con la edad
promedio de los niños en preescolar, primaria inferior y primaria superior,
respectivamente. La prevalencia se presentó como porcentaje para todos los niños, así
como para las diferentes categorías (edad, sexo, tipo de escuela). La asociación de la
infección por Giardia como una variable dependiente con factores demográficos como
variables independientes se evaluó mediante la prueba Chi Square de Pearson o la prueba
exacta de Fischer si el número de resultados fue inferior a cinco. Un valor de P inferior a
0,05 (p <0,05) se consideró como el nivel de significación estadística para todas las
pruebas. El análisis de los datos se realizó con Statistix versión 9 (software analítico).

Declaración de ética
El Comité de Ética de Investigación Biomédica de la Universidad de Zambia otorgó la
aprobación ética (número de referencia: 007-06-16). Las muestras fecales se recolectaron
solo después de obtener el consentimiento informado por escrito de los padres y tutores
legales para que los niños participaran en el estudio. El permiso para llevar a cabo el
estudio de varias escuelas se obtuvo del secretario de la Junta de Educación del Distrito de
Lusaka, el Ministerio de Educación General en Zambia y los directores de las respectivas
escuelas.

RESULTADOS
Examen microscópico y genotipado de aislamientos de Giardia mediante análisis PCR-RFLP
Los aislamientos de Giardia se detectaron microscópicamente en 10.0% (33/329) de
muestras fecales recolectadas de niños asintomáticos que asistían a la escuela. Al calificar
el nivel de infección, se encontró que la mayoría de los niños (51.5%; 17/33) tenían niveles
altos de infección (4+), con 21.2% (7/33), 15.2% (5/33) y 12.1% (4/33) con niveles de
infección moderados (3+), bajos (2+) y muy bajos (1+), respectivamente. La prevalencia
entre niñas y niños fue del 12% (22/183) y del 7,5% (11/146), respectivamente. Por grupo
de edad, la prevalencia entre la prueba previa de la revista los niños de 3 a 6 años, los de 7
a 9 años y los de 10 a 16 años fueron 5.6%, 9.5% y 11.2%, respectivamente. Las diferencias
en la prevalencia entre sexos y grupos de edad no fueron estadísticamente significativas
(P> 0.05). Sin embargo, se observó una diferencia estadísticamente significativa (P <0.05)
en la prevalencia de infección entre los niños que asisten a escuelas públicas (15.4%;
19/123) y aquellos que asisten a escuelas comunitarias (6.8%; 14/206). Además, no se
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observó asociación estadísticamente significativa entre el conjunto de Giardia y el sexo o

el grupo de edad (P> 0.05). El fragmento de 432 pb del gen gdh se amplificó con éxito en
las 33 muestras de ADN (Tabla 1). El análisis RFLP del gen gdh reveló el ensamblaje A
(27.3%, 9/33) y B (72.7%, 24/33) (Tabla 1). Además, el análisis con enzimas de restricción
identificó subconjuntos AII (27.3%, 9/33), BIII (12.1%, 4/33), BIV, (51.5%, 17/33) e
infecciones mixtas de BIII y BIV (9.1% , 3/33) (Tabla 1).

Análisis filogenético del gen gdh

De las 33 muestras de ADN, 29 (87,9%) aislamientos fueron secuenciados con éxito (Tabla
1). A nivel de nucleótidos, las secuencias del gen gdh de los aislamientos de G. duodenalis
detectados en Zambia compartían una similitud del 89,8% al 100%, mientras que las
secuencias de aminoácidos predichas mostraban una identidad de secuencia del 97,2% al
100%. Mediante el análisis de la Herramienta de búsqueda de alineación local básica
(BLAST) (https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi), las secuencias de nucleótidos del gen
gdh de G. duodenalis del conjunto A de Zambia (según lo determinado por Las cepas de
análisis RFLP) fueron muy similares (99-100%) para aislar Ad-2 (número de acceso L40510)
aislado de humanos en Australia (Monis et al., 1996). Además, el ensamblaje de Zambia B
gdh secuencias fueron muy similares (99 - 100%) para aislar NLH25 Journal Pre-prueba.
(número de acceso AY826193) encontrado en humanos en los Países Bajos (van der
Giessen et al., 2006). Filogenéticamente, las secuencias del gen gdh de G. duodenalis se
separaron en varios ensamblajes (Fig. 1). El análisis filogenético de los aislamientos
examinados en este estudio reveló que el 27,6% (8/29) se agruparon con aislamientos del
conjunto A, mientras que el 72,4% (21/29) pertenecía al ensamblaje B (Fig. 1).

DISCUSCIÓN
En el presente estudio, informamos una prevalencia del 10% (33/329) en la población de
la muestra, que es menor en comparación con los estudios informados anteriormente en
Zambia. Contrariamente al estudio de Siwila et al. (2010) que se centró en los niños que
viven en un área periurbana y que por Graczky et al. (2005), que se centró en los niños en
un entorno rural, nuestro estudio se centró en los niños en un área urbana y esto podría
explicar las diferencias en la prevalencia informada. Los entornos urbanos tienden a tener
un mejor desarrollo de infraestructura que en los entornos periurbanos y rurales. De
hecho, se ha informado que el nivel de desarrollo de una comunidad y su educación
(especialmente el nivel de educación de las madres) son factores de riesgo en la
epidemiología de la giardiasis (Al-Mekhlafi, 2017; Karan et al., 2012). La mayor prevalencia
observada por Graczky et al. (2005) también podría deberse al hecho de que tomaron
muestras de niños que exhibían síntomas diarreicos, a diferencia de los de nuestro
estudio, considerando que Giardia se considera una causa común de diarrea (Torgerson et
al., 2015). También es posible que la prevalencia reportada en nuestro estudio sea más
baja que las reportadas por Siwila et al. (2010) y Graczyk et al. (2005) debido a la
diferencia en las técnicas utilizadas. Nuestro estudio utilizó microscopía simple, mientras
que los otros dos estudios utilizaron la microscopía de fluorescencia más sensible, por lo
tanto, nuestro estudio podría haber subestimado la prevalencia. La prevalencia general en
nuestro estudio también podría haberse subestimado porque utilizamos una sola muestra
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de heces que se ha informado que tiene una sensibilidad significativamente baja (46%) en
comparación con las 3 muestras de heces recomendadas durante 3-5 días (sensibilidad del
94%) . En este estudio, el muestreo se realizó solo durante la estación seca y esto podría
haber resultado en una subestimación de la prevalencia general de infección en esta
población, ya que previamente se informó que existe una correlación positiva entre las
condiciones climáticas húmedas y una mayor prevalencia de Giardia infección en
poblaciones (Britton et al., 2010; Siwila et al., 2011; Lai et al., 2012). Se postula que el
aumento de la escorrentía durante la temporada de lluvias conduce a una mayor
contaminación de los cuerpos de agua, con el consiguiente aumento de la transmisión de
patógenos a los humanos (Galway et al., 2014). Además, el aumento de la turbidez del
agua durante la temporada de lluvias, debido a la escorrentía, reduce la efectividad del
tratamiento del agua con cloro (Schwart et al., 2000), lo que lleva a una mayor transmisión
de patógenos. Teniendo en cuenta que nuestro sitio de estudio se caracteriza por un
saneamiento y suministro de agua inadecuados, lo que resulta en que muchos hogares
dependen de pozos poco profundos para el agua potable, es posible que haya una mayor
transmisión en la temporada de lluvias que en la estación seca. Por lo tanto, es importante
realizar un estudio similar que cubra la temporada de lluvias para comprender mejor la
epidemiología de la giardiasis en esta comunidad. El hallazgo de Giardia en niños no
diarreicos en nuestro estudio se suma a las observaciones de otros autores de que Giardia
podría ser comensal en niños de entornos de alta prevalencia (Bartelt y Platts-Mills, 2016).
De hecho, algunos estudios han informado una prevalencia comparable en niños
sintomáticos y asintomáticos (Anim-Baidoo et al., 2016; Jerez Puebla et al., 2017). Tales
casos asintomáticos son importantes como posibles fuentes de infección para personas
cercanas y representan un riesgo de infectar a otros niños en áreas como las escuelas
(Oliveira-Arbex et al., 2016). Si bien algunos estudios (Damitie et al., 2018; Julio et al.,
2012) han informado que los niños más pequeños tienen una mayor prevalencia de
infección con Giardia, este no fue el caso en nuestro estudio. De hecho, aunque no es
estadísticamente significativo, observamos un aumento en la prevalencia con el aumento
de la edad. Este hallazgo de mayor prevalencia con el aumento de la edad también se ha
informado en otros estudios (Al - Mekhlafi et al., 2013; Anim - Baidoo et al., 2016).
Contrariamente a los hallazgos de Siwila et al. (2010) que el sexo / género era un factor de
riesgo significativo para la infección por Giardia con más niñas infectadas que niños,
nuestro estudio no encontró una diferencia significativa en las tasas de infección entre los
sexos. Nuestros hallazgos están de acuerdo con los de otros autores (Damitie et al., 2018;
Julio et al., 2012) que no encontraron asociación entre el sexo y la infección por Giardia. Es
posible que el efecto del sexo sobre la infección sea específico del contexto y no sea un
fenómeno general, dada la variación en los informes. Teniendo en cuenta que la mayoría
de las escuelas comunitarias carecen de los servicios básicos, se esperaría que los niños
que asisten a estas escuelas tengan niveles de infección más altos que los que asisten a las
escuelas públicas que tienen mejores servicios. Esto se debe a que la falta de condiciones
sanitarias básicas es uno de los principales factores de riesgo para la infección por Giardia.
Por lo tanto, fue sorprendente que en nuestro estudio, los niños que asistían a escuelas
comunitarias tuvieran niveles de infección significativamente más bajos que los de las
escuelas públicas. La alta prevalencia observada en los niños de las escuelas públicas
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podría explicarse por los altos niveles de inscripción en estas escuelas, lo que supondría
una carga para los servicios disponibles. Esto posiblemente aumentaría el contacto,
reduciría la higiene en el entorno escolar y mejoraría la transmisión. Como tal, la
construcción de más servicios en las escuelas públicas podría ayudar a reducir la
transmisión. Alternativamente, la construcción de más escuelas, a fin de reducir la
población estudiantil por escuela, resultaría en un contacto reducido entre los niños,
aliviaría la carga sobre las comodidades y mejoraría la higiene en las escuelas, reduciendo
así la transmisión de enfermedades. El análisis filogenético, basado en el gen gdh, mostró
que nuestros aislamientos agrupados con aislamientos de ensamblajes A y B (Fig.1) y esto
no es sorprendente teniendo en cuenta que estos ensamblajes son conocidos por infectar
a los humanos (Caccio et al., 2017) . Predominó el ensamblaje B en nuestro estudio (73%)
y esto está de acuerdo con la mayoría de los estudios realizados en todo el mundo (Ryan y
Caccio, 2013). En comparación con otros ensamblajes que se ha informado que son
infecciosos para los humanos, la transmisión del ensamblaje B se ha asociado
principalmente con huéspedes humanos, que sirven como fuente de infección (Sprong et
al., 2009) y esto posiblemente explica su predominio en áreas de higiene y saneamiento
limitados. En nuestro estudio, no encontramos ninguna asociación estadísticamente
significativa entre infectar el conjunto de Giardia y el sexo o el grupo de edad, un hallazgo
que está de acuerdo con otros estudios (Jerez Puebla et al., 2017; Rostaminia et al., 2017).
La caracterización adicional de los aislamientos en nuestro estudio basada en RFLP del gen
gdh mostró la presencia de subconjuntos AII, BIII y BIV. El hallazgo de solo el subconjunto
AII no fue sorprendente teniendo en cuenta que dentro del conjunto A, este subconjunto
particular (AII) se ha identificado principalmente en humanos, mientras que el
subconjunto AI se ha encontrado principalmente en animales (Caccio y Ryan, 2008).
También encontramos subconjuntos BIII y BIV, que también se encuentran normalmente
en humanos (Monis et al., 2003), con algunas infecciones mixtas de subconjuntos BIII y
BIV. Contrariamente a los hallazgos de Sprong et al. (2009) que el subconjunto BIII era más
frecuente en África, el subconjunto BIV era más frecuente en nuestro estudio. La
predominancia del subconjunto BIV en nuestro estudio está de acuerdo con los hallazgos
de estudios en Etiopía (de Lucio et al., 2016), Kenia (Mbae et al., 2016) y Tanzania (Di,
Cristanziano et al., 2014). Las coinfecciones por ensamblaje y subconjunto se han
informado anteriormente en otros estudios (Faria et al., 2016; Gelanew et al., 2007;
Hussein et al., 2017; Mbae et al., 2016), y su aparición ha sido Se supone que se debe a
una infección repetida y acumulativa en un área (Roointan et al., 2013), así como a la
exposición humana a múltiples fuentes de infección (Damitie et al., 2018). Si bien la
tipificación multilocus se recomienda para la caracterización genética (Broglia et al., 2013),
la tipificación de un solo locus utilizando el gen gdh se ha utilizado ampliamente (revisado
por Caccio y Ryan, 2008). La ventaja de la tipificación multilocus es que aumenta las
posibilidades de una amplificación de PCR exitosa ya que puede haber desajustes de
nucleótidos entre los cebadores de PCR y las secuencias genómicas, lo que puede
provocar la no amplificación de algunos aislamientos (Broglia et al., 2013). Sin embargo,
en nuestro estudio, el gen gdh de todas las muestras microscópicamente positivas se
amplificó con éxito. En conclusión, hasta donde sabemos, este es el primer informe de
caracterización genotípica de G. duodenalis que circula en Zambia, que revela la
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circulación de los ensamblajes A y B en niños que van a la escuela en el distrito de Lusaka.

Los conjuntos de predominio AII, BIII y BIV, que se asocian principalmente con infecciones
humanas, sugieren que la transmisión antroponótica desempeña un papel importante en
la epidemiología de la giardiasis dentro de la comunidad estudiada. Como tal, las medidas
de control destinadas a mejorar la higiene en esta comunidad, junto con las campañas
educativas, podrían ayudar mucho a frenar la giardiasis.
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REACTIVOS
1. ¿Qué parásito es el más común de diarrea en humanos? Giardia duodenalis.
2. ¿Cuántos casos que presenta Giardia duodenalis? 250 a 300 millones de casos por
año.
3. ¿Cuántas especies comprende el Giardia duodenalis? Se considera un complejo de
especies que comprende ocho conjuntos genéticos (A hasta la H), siendo los
conjuntos A y B las principales causas de infecciones en humanos.
4. ¿Cuál es la forma más común de presentarse? como diarrea aguda, que puede
volverse crónica si no se trata.
5. ¿Cuál fue el método utilizado para la evaluación de las heces microscópicamente?
La técnica de PCR semianidada dirigida al gen glutamato deshidrogenasa (gdh).
6. ¿Cómo se realizó el genotipado de los productos de PCR? se realizó mediante
polimorfismo de longitud de fragmento de restricción (RFLP) y análisis de
secuencia de ADN.
7. ¿Cuál fue el porcentaje obtenido de heces fecales en cuestión de Giardia?
Microscópicamente, se encontró Giardia en el 10% (33/329) de muestras fecales.
8. ¿Cuáles son las características del Giardia duodenalis? Presenta un tamaño en
torno a 20 μm de longitud y 15 μm de ancho con una morfología piriforme y una
simetría bilateral. Proyectada en un plano se asemeja a una pera. Posee 8 flagelos,
2 anteriores, 2 posteriores, 2 ventrales y 2 caudales, cuya función es la motilidad
celular.
9. ¿Cuáles son los síntomas clínicos de G. duodenalis? Diarrea líquida y con mal olor
que puede alternarse con heces blandas y grasosas, Fatiga o malestar, Cólicos
abdominales e inflamación, Gases o flatulencias, Náuseas, Pérdida de peso.
10. ¿Cuál es la vía de transmisión directa? Vía oral-fecal.
11. ¿Por qué medio se transmite indirectamente? Por alimentos y agua contaminados.
12. ¿Cuáles son los hospedadores de G. duodenalis? Canidos, gatos, ratones y
mamíferos marinos.
13. ¿Cómo se dividen los ensamblajes A y B? Se dividen en subconjuntos: AI, AII, AIII,
AIV, BI, BII, BIII y BIV.
14. ¿Cómo se distinguen los complejos de G. duodenalis? Se pueden distinguir en base
al polimorfismo de un solo nucleótido y / o al análisis genotípico de los genes ssu -
rRNAbeta, (β) -giardin (bg), triosa fosfato isomerasa (tpi) y glutamato
deshidrogenasa (gdh).
15. ¿Qué subconjuntos se presentaron en análisis moleculares en áfrica? La presencia
de ensamblajes A, B, C, E y F en la población en humanos.
Fernando Bello Muñoz Sección: 5v2

16. A grandes rasgos, ¿Cuál es el propósito de este artículo? estudio fue determinar la
prevalencia de la infección por Giardia en niños asintomáticos en Lusaka, así como
caracterizar genéticamente los aislamientos que infectan a estos niños.
17. ¿Dónde se encuentran específicamente este parasito? Los parásitos se encuentran
en lagos y arroyos en las zonas rurales, pero también en suministros de agua
municipales, piscinas, jacuzzis y pozos.
18. ¿Cuándo se produce la infección por este parásito? La infección se produce cuando
consumes accidentalmente los quistes de parásitos.
19. ¿Qué tratamiento o prevención se utiliza ante este parásito? No hay
medicamentos o vacunas que prevengan la infección por giardia. Sin embargo,
mediante la adopción de medidas de sentido común se puede reducir de forma
significativa el riesgo de infectarse o de transmitir la infección a los demás
20. ¿En dondé se localiza este parasito en los huéspedes? Los trofozoítos de la Giardia
se adhieren fuertemente a la mucosa del duodeno y la porción proximal del
yeyuno y se multiplican por fisión binaria. Algunos microorganismos se
transforman en quistes resistentes a las condiciones ambientales, que se
diseminan por la vía fecal-oral.
21. ¿Cuál es el método de diagnostico? Enzimoinmunoensayo para detectar el
antígeno en las heces, Examen microscópico de las heces.
22. ¿En que consta el enzimoinminoensayo? El enzimoinmunoensayo para detectar
antígenos del parásito en las heces es más sensible que el examen microscópico. El
hallazgo de los trofozoítos o los quistes típicos en las heces también confirma el
diagnóstico, pero la excreción de parásitos es intermitente y las concentraciones
excretadas son bajas durante las infecciones crónicas. Por ende, el diagnóstico
microscópico puede requerir varias muestras de materia fecal.
23. ¿Cuál es el medicamento para este parásito? Para la giardiasis sintomática, se puede
utilizar metronidazol, tinidazol, o nitazoxanida.
24. ¿A qué orden pertenece este parásito? Diplomonadida.
25. ¿Cuál es su ciclo biológico? Giardia duodenalis vive en forma de trofozoito en la luz
del intestino delgado (principalmente en el duodeno) adherido a las vellosidades
intestinales por medio de los discos bilobulados. Se alimenta y se reproduce hasta
que el contenido intestinal inicia el proceso de deshidratación, momento en el que
comienza el enquistamiento del trofozoito. Pierde los flagelos, adquiere una
morfología ovalada, se rodea de una pared quística. Los quistes expulsados junto a
las heces ya son infectantes. Cuando dichos quistes son ingeridos por un nuevo
hospedador, llegan al duodeno, donde se disuelve la pared quística, dando así
lugar a un individuo tetranucleado que se divide inmediatamente en dos
trofozoitos binucleados que se anclan al epitelio intestinal, cerrando así su ciclo
vital.