Histología Tema 2

Técnicas Histológicas
1. Conocer las técnicas histológicas
A. Fijación
B. Inclusión
C. Corte
D. Tinción
E. Observación: MO

2. Basofilia y eosinofilia

Práctica 2:
 Identificar estructuras basófilas y
eosinófilas en corte histológico de
mucosa bucal.
 Concepto de Histología
“La histología es la ciencia que se encarga de describir las
células y los tejidos normales, es decir, se encarga de la
anatomía microscópica. También abarca la relación entre la
forma de los tejidos, la función que cumplen y los
mecanismos de regulación y control a los que se
encuentran sometidos”.
Técnicas Histológicas
Técnicas Histológicas
Técnicas Histológicas

Procedimiento quirúrgico
encaminado a obtener
tejido de un organismo
vivo, para su estudio
microscópico con finalidad
diagnostica.
Técnicas Histológicas
A. Fijación
B. Inclusión
C. Corte
D. Tinción
E. Observación
 Técnicas Histológicas
A. Fijación
 Preservar sus características morfológicas y moleculares lo más parecidas
posibles a las que poseía en su estado vivo.
 Impedir procesos degradativos: autolisis por acción de enzimas intracelulares,
es decir, autodigestión.
 Evitar la putrefacción por acción bacteriana.

Métodos físicos -------- Congelamiento

Métodos químicos --------- Inmersión
 Mas usado
 Sumerge la muestra en solución fijadora
 Formaldehído ---- Formol al 10%
Buena preservación del tejido, actúa como
conservante, produce poca retracción tisular, es compatible
con la mayoría de las técnicas y tinciones histológicas
Técnicas Histológicas
B. Inclusión
 Colocar la muestra dentro de un material especial que permita realizar los
cortes
 Con el microscopio óptico se utiliza sobre todo la parafina, y en menor medida
la celoidina, como medio de inclusión
 Como la parafina no es afín al agua debe realizarse el proceso de
deshidratación del tejido con alcohol (metanol) de gradación creciente hasta
alcohol de 100°

 Posteriormente se transfiere el tejido a un líquido que es afín

tanto con el alcohol de 100° como con la parafina,
denominado sustancia intermediaria, como es el benceno,
xileno, etc.
 Por último se pasa el tejido a parafina previamente licuada en
una estufa regulada a la temperatura apropiada para dicho tipo
de parafina. Se dan tres pasos por parafina líquida para
favorecer una completa sustitución del líquido intermediario por
la parafina.
3 a 10 min
 Técnicas Histológicas
C. Corte
Cuando la parafina fundida se ha enfriado y
endurecido se empareja para formar un bloque de
tamaño adecuado. Este bloque, llamado taco, se
coloca entonces en una máquina cortadora
especial, EL MICRÓTOMO, que lo corta en
rebanadas finas con una cuchilla de acero. Luego
los cortes obtenidos se montan sobre portaobjetos
de vidrio a los que antes se les habrá añadido una
pequeña cantidad de albúmina para que sirva de
adhesivo.
 Técnicas Histológicas
D. Tinción
 Cortes en parafina son incoloros y sin contraste.
 La muestra no está lista para su examen bajo el MO.
 Tinción de rutina es H&E.
 Se usa un colorante básico (hematoxilina) y otro ácido
(eosina) para teñir de diferente color a las estructuras ácidas
y básicas de la célula.
 Para colorear o teñir los cortes histológicos la parafina debe
disolverse y extraerse.
 Luego el tejido colocado sobre los portaobjetos se tiñe con
hematoxilina en agua. y después se tiñe con eosina en
alcohol.

Glomérulo de un riñón de mamífero obtenida a partir de una inclusión

en parafina y teñido con hematoxilina-eosina.
Los núcleos/ácidos aparecen de color violáceo (hematoxilina)
El citoplasma/básico de color rosado (eosina).
 Técnicas Histológicas
E. Observación MO
 Un microscopio, sea simple (una sola lente) o compuesto
(lentes múltiples), es un instrumento que
aumenta el tamaño de una imagen y permite ver más
detalles que los que sería posible visualizar a simple
vista.
 El microscopio más sencillo es una lupa o un par de lentes
para leer.
 El poder de resolución del ojo humano, o sea la distancia
que debe haber entre dos objetos para que se
vean separados y no parezcan uno solo (0,2 mm), está
determinado por el espacio que hay entre las células
fotorreceptoras contiguas de la retina.
 La función de un microscopio es ampliar una imagen hasta
un grado en el cual la retina pueda resolver la información
que de otro modo estaría por debajo de su límite de
resolución.
 Técnicas Histológicas
Basofilia y Eosinofilia
Los componentes ácidos aparecen de color violáceo / se tiñen con hematoxilina / Colorante Básico / Basófilos
Los componentes básicos aparecen de color rosado / se tiñen con eosina / Colorante ácido / Eosinófilos
 Técnicas Histológicas
Basofilia y Eosinofilia
Los componentes ácidos aparecen de color violáceo / se tiñen con hematoxilina / Colorante Básico / Basófilos
Los componentes básicos aparecen de color rosado / se tiñen con eosina / Colorante ácido / Eosinófilos
 Técnicas Histológicas
Basofilia y Eosinofilia
Los componentes ácidos aparecen de color violáceo / se tiñen con hematoxilina / Colorante Básico / Basófilos
Los componentes básicos aparecen de color rosado / se tiñen con eosina / Colorante ácido / Eosinófilos

Epitelio Cilíndrico Ps. con Estereocilios

 Técnicas Histológicas
Basofilia y Eosinofilia
Los componentes ácidos aparecen de color violáceo / se tiñen con hematoxilina / Colorante Básico / Basófilos
Los componentes básicos aparecen de color rosado / se tiñen con eosina / Colorante ácido / Eosinófilos

Epitelio Plano E. No Queratinizado

Actividad Práctica 2:
 Dibujar un corte histológico de
mucosa bucal e Identificar
estructuras basófilas y
eosinófilas.