Universidad Nacional Autonoma de Honduras

en el Valle de Sula
Departamento de Química Industrial

Laboratorio de Bioquímica

Trabajo: Resumen de la practica 8

Asignatura: Bioquímica

Código: QI-335

Catedrática: Lic. Alex Mejía

Instructor: Omar Mejía

Estudiante: Tesla Nidani Ruiz Norales

Cuenta: 20142005144

Sección: 1600

Sección de laboratorio: Jueves 1200

Fecha de entrega: 16 de abril del 2020

 Practica No.8
Hidrólisis ácida del almidón y extracción e identificación de las lecitinas y el colesterol a partir de la
yema de huevo de gallina.

CARBOHIDRATOS
Los carbohidratos o glúcidos son biomoléculas compuestas por carbono, hidrógeno y oxígeno, cuyas
principales funciones en los seres vivos son el prestar energía inmediata y estructural. Los carbohidratos
se dividen en monosacáridos (principal fuente de combustible del metabolismo), disacáridos; son
glúcidos formados por dos moléculas de monosacáridos unidos por un enlace glucosidico y, por tanto, al
hidrolizarse producen dos monosacáridos libres, tras una deshidratación que implica la pérdida de un
átomo de hidrógeno de un monosacárido y un grupo hidroxilo del otro monosacárido, con la consecuente
formación de una molécula de H2O. Oligosacáridos; están compuestos por tres a nueve moléculas de
monosacáridos2 que al hidrolizarse se liberan. Se encuentran con frecuencia unidos a proteínas, formando
las glucoproteínas, y polisacáridos; son cadenas, ramificadas o no, de más de diez monosacáridos,
resultan de la condensación de muchas moléculas de monosacáridos con la pérdida de varias moléculas de
agua. Los polisacáridos representan una clase importante de polímeros biológicos y su función en los
organismos vivos está relacionada usualmente con estructura o almacenamiento. Por ejemplo, en el caso
de las plantas, el almidón es la manera en que estos almacenan monosacáridos; es una mezcla de dos
polímeros de glucosa, la amilosa y la amilopectina(ramificada), la proporción entre estos dos
componentes varía según el organismo en el que se encuentre, en el caso de los animales usan el
glucógeno en vez de almidón el cual es estructuralmente similar pero más densamente ramificado. La
celulosa y la quitina son ejemplos de polisacáridos estructurales.
LÍPIDOS
Los lípidos son un conjunto de moléculas orgánicas (la mayoría biomoléculas) compuestas
principalmente por carbono e hidrógeno y en menor medida oxígeno, aunque también pueden contener
fósforo, azufre y nitrógeno. Tienen como característica principal el ser hidrófobas (insolubles en agua) y
solubles en disolventes orgánicos como la bencina, el benceno y el cloroformo. Los lípidos cumplen
funciones diversas en los organismos, entre ellas la de reserva energética (como los triglicéridos), la
estructural (como los fosfolípidos de las bicapas) y la reguladora (como las hormonas esteroides).
Los lípidos son un grupo muy heterogéneo que usualmente se subdivide en dos, atendiendo a que posean
en su composición ácidos grasos (lípidos saponificables) o no los posean (lípidos insaponificables). Los
lípidos generalmente se encuentran enlazados a proteínas y polisacáridos de los tejidos, formando
complejos con diferentes grados de estabilidad, por lo que para poder romper estos complejos se requiere
el empleo de condiciones de extracción capaces de desnaturalizar o separar las proteínas o carbohidratos
asociados con ellos.
LECITINAS
Lecitina es un término genérico para designar a un amplio grupo de lípidos saponificables y con función
de emulgente que se producen de manera natural en tejidos animales y vegetales. Engloba a cualquier
grupo de sustancia grasa (de color amarillo-marronáceas) compuesta de ácido, colina, ácidos grasos,
glicerol, glicolípidos, triglicéridos y fosfolípidos. Para su separación en la solución etérea se utiliza
acetona ya que las lecitinas, cefalinas y esfingolipidos son solubles en éter, etanol o cloroformo, pero
insolubles en acetona y por este motivo precipitan de la solución

COLESTEROL
El colesterol es un esterol (lípido) que se encuentra en los tejidos corporales y en el plasma sanguíneo de
los vertebrados. Se presenta en altas concentraciones en el hígado, médula espinal, páncreas y cerebro. Es
un lípido esteroide, molécula deciclopentanoperhidrofenantreno (o esterano), constituida por cuatro
carboxilos condensados o fundidos, denominados A, B, C y D, que presentan varias sustituciones: Dos
radicales metilo en las posiciones C-10 y C-13, una cadena alifática ramificada de 8 carbonos en la
posición C-17, un grupo hidroxilo en la posición C-3 y na instauración entre los carbonos C-5 y C-6.
Otros lípidos simples se separaran por saponificación con hidróxido de potasio, formando jabones. En la
porción etérea resultante se va a separar el colesterol, ya que este no es material saponificable. Para su
aislamiento se evaporara el éter.

Método de LieberMann-Burchard para determinación de colesterol

Este consiste en un tratamiento del extracto lipídico con hidróxido de potasio para liberar el colesterol de
los complejos lipoprotéicos y saponificar los ésteres de colesterol. Una extracción del colesterol en un
volumen medio de un solvente orgánico (éter de petróleo o cloroformo) después de la dilución de la
solución alcohólica con agua y después la identificación del colesterol por medio de la reacción de color
de Liebermann Burchard. Ésta reacción se realiza en general en un medio ácido fuerte constituido por
ácido sulfúrico, ácido acético y anhídrido acético.

Resumen experimental
Parte A. Obtención e identificación de Lecitina y colesterol a partir de la yema de huevo de gallina
En un beaker previamente pesado se agregó la yema de un huevo crudo e igual se pesó, seguidamente se
le añadió una mezcla etanol-eter cubriendo completamente la yema para luego homogeneizarla con una
varilla de vidrio, así mismo y sin dejar de agitar se le agregó igual cantidad de acetona y seguido de ello,
se dejó reposar. Pasado el tiempo de reposo se prosiguió a filtrar la mezcla sobre un papel previamente
humedecido con etanol y residuo que quedó en el papel filtro fue lavado con alcohol etílico frio. Posterior
a esto, se dejó secar un poco y el residuo fue llevado a la estufa hasta que este se secar. Por otra parte el
filtrado fue evaporado de manera lenta en un baño de vapor y tanto el precipitado del residuo como del
filtrado evaporado, fueron pesados. Al residuo del filtrado evaporado se le añadió hidróxido de sodio
alcohólico y se llevó a baño maría por un tiempo a una determinada temperatura. Una vez enfriado se
agitó luego de habérsele adicionado éter seguido de agua destilada. Como siguiente paso se realizó una
centrifugación a baja velocidad por poco tiempo y finalmente se tomó el sobrenadante y después de que
este se enfriara se le agregó el reactivo de Liebermann-Burchard modificado.

Resultado experimental

Al agregarse la mezcla de etanol-eter a la yema de huevo esta se disolvió

debido a que la yema de huevo forma parte de las lecitinas y estas como tal son
solubles en solventes orgánicos. Y posteriormente al haberse agregado la
acetona se formó un precipitado en la solución resultante debido a que la
lecitina en solución etérea es insoluble en acetona y por ello se dejó reposar
para seguidamente hacerse la filtración lavando el residuo con alcohol en frio
para mantenerse el precipitado(lecitina). El filtrado fue secado para que el
éter se evaporara y una vez evaporado se le agregó KOH alcohólico para
liberar el colesterol del complejo, por lo que además fue llevado a baño maría y
luego de enfriarse y que se le agregara éter con agua destilada ya que el
colesterol se separa en soluciones etéreas, por lo que se realizó una
centrifugación para finalmente agregarse el reactivo de Liebermann-Burchard modificado
y finalmente dio un color azul verdoso como característica del colesterol.
Parte B. Hidrólisis ácida del almidón:
Esta parte se inició con la rotulación de diez tubos de ensayo en una gradilla y
otros diez microtubos de ensayo. Seguidamente se agregó ácido clorhídrico
concentrado a una solución de almidón en un beaker y esta fue agitada. Con
un gotero se tomó un poco de esa solución y se colocó una gota de ella en el
primer microtubo y tres gotas en el primer tubo de la gradilla. La solución
restante del beaker se calentó suavemente hasta ebullición. Posterior a ello, al
primer tubo se le añadió esta vez una gota de yodo. Una vez que empezó a
hervir la solución se anotó ese tiempo y se tomó de esta, otra gota para ser
adicionada a un segundo microtubo y tres gotas en un segundo tubo,
enjuagándose siempre el gotero antes y después de usarse e inmediatamente
a cada microtubo y tubo también se le agregó una gota de solución de yodo.
Ahora unos minutos después de que la solución empezó a hervir, se repitió la
misma operación con la solución de almidón y yodo en un tercer microtubo y
tubo. Así mismo se repitió esta operación cada dos minutos hasta que cambió
el color del complejo yodo-almidón a café y en ese momento se terminó el
calentamiento de la solución. Después de esto, se fue agregado el reactivo de
fehling a todos los tubos y microtubos que contenían la solución y todos estos
fueron sumergidos en un baño maría en ebullición y finalmente pasados unos
minutos fueron sacados para observarse la diferencia de coloraciones que tenía
que mostrarse.

Resultado experimental
Se pudo observar que al agregar ácido clorhídrico a la solución de almidón
esta se disolvió y posterior a ello, al tubo y microtubo que además de
obtener solución de almidón a temperatura ambiente y que luego se le
agregó el yodo, en estos se observó un color azul intenso debido al complejo
yodo-almidón formado. La solución del almidón tomada del beaker hacia un
segundo microtubo y otro segundo tubo cuando este empezó a hervir y que
seguidamente se le añadió yodo, estas mostraron un color azul menos
intenso lo cual se debe a que al aumentarse la temperatura de trabajo el
grado de hidrolisis es cada vez mayor por lo que al finalizamos el
calentamiento cuando obtuvo un color café en la solución después de
hacerse la misma operación repetidas veces. Este color café se debe como
tal a la liberación del yodo del complejo yodo-almidón. Y luego de habérsele
agregado reactivo fehling a cada tuvo y ser calentados, se observó la
formación de un precipitado rojo ladrillo debido a la formación de óxido
cuproso.