1. Un analista inyecta una muestra en una columna ODS (25x0.4 cm).

Luego de tres réplicas de

inyección (20 mL), se percata que la señal instrumental obtenida no corresponde a la
concentración inyectada, siendo significativamente menor. Identifique y explique
sustancialmente, qué inconvenientes se están presentando en la separación. Nota: el
cromatógrafo líquido posee calibración vigente.

1- el solvente extracción para extraer los contaminantes endógenos, ya que, al no escogerse un

buen solvente de extracción este podría interaccionar con mi analito y hacer que se pierda,
obteniendo una reducción significativa de la cuantificación de mi analito

2- acondicionamiento, no se activaron los grupos funcionales de mi cartucho por lo tanto al

momento de cargar la muestra este lograr hizo una quimisocion haciendo que mi analito se
perdiera, por lo tanto no se cuantifico de la mejor mane

3- lavado, porque al modificar el solvente que se utiliza para eliminar todo el contaminante
endógeno persistente este, podría haber interaccionado con el analito y por lo tanto no se
cuantificara de la mejor manera.

4- longitud de onda, si no se tomó la longitud de onda máxima para el analito este puede hacer la
que la concentración no sea cuantificada adecuadamente, y puede salir la señal de mi fase móvil
en vez de mi analito.

5- la FE seleccionada no está teniendo buena afinidad con el analito, porque eso de que la señal es
significativamente menor podría ser que no está reteniendo nada de analito y no se está dando
ese equilibrio analito-FE en la separación-

2. Un comerciante se prepara para exportar tomates, por lo que le solicita evaluar la presencia
de residuos de antibióticos en éstos (<50 ppb). Explique cómo analizaría esta muestra mediante
PLE. Identifique y sustente las variables que optimizaría del método, los criterios para asignar un
valor a cada variable e identifique los puntos específicos del procedimiento que podrían
comprometer la extracción cuantitativa. Susténtelos.

Esta muestra de tomates ya pasada por un previo pretratamiento y tratamiento y esta esté
deshidratada se realiza de la siguiente forma: Es automatizado, El disolvente es bombeado hacia
un recipiente de extracción que contiene la muestra a extraer, esta muestra es calentada y
presurizada. El disolvente presurizado se mantiene en forma líquida a una temperatura por
encima de su punto de ebullición y así se acelera la cinética de disorción del analito de la matriz de
la muestra de tomate.

Las variables a optimizar con esta técnica serian:

Composición del disolvente de extracción

Temperaturas elevadas de (50 -200°C)

Presión de (1500- 3000 psi) para extraer rápidamente analito de sus matrices.

Tiempo de calentamiento (min) corto, esta técnica es más rápida

Tiempo estático (min)

Flush (%)

Tiempo de purga (min)

Numero de ciclos

Volumen de celda, utiliza bajos volúmenes tanto de disolvente como de muestra.

La presión y la temperatura son las variables vulnerables al tratar esta técnica por que al no estar
en el rango de lo requerido puede pasar lo siguiente:

Uno de los puntos que podría comprometer la extracción de este antibiótico es que analito no
puede ser termolábil por que en esta técnica se trabaja con temperaturas elevadas de 50 a 200°C.

sí la muestra contiene grupos fenólicos, no se podría la extracción por esta técnica.

No se puede utilizar solventes volátiles por que va a haber perdida de este.

La muestra tiene estar en lo posible con menor % de humedad por que al estar presente humedad
y utilizar temperatura podría haber una perdida de analito de interés por que este antibiótico
puede ser soluble en agua.

3. Elabore una tabla en la que, frente a cada etapa de la SPE, sustente cómo ésta contribuye a la
pérdida de repetibilidad, exactitud, precisión y selectividad del análisis.

repetibilidad exactitud precisión selectividad

del análisis
Acondicionamiento: si no sé qué Como no es
utiliza un una técnica
disolvente no
adecuando automatizada
que active los y hay mucha
centros manipulación.
activos de la
columna

Carga de muestra Se pierde Se pierde

exactitud si se precisión si se
agrega más cambia la
volumen de concentració
muestra que n de la
sature los muestra
sitios activos, inyectada.
entonces
estos analito
se van a los
desechos
porque el
sistema está
 saturado
Lavado de contaminante Se pierde Si se varia el
precisión al volumen de
momento de extracción se
escoger un va a tener
disolvente que diferentes
se afín con los señales de
contaminantes detención.
mayoritarios
pero que
también ten
afinidad por el
analito de
interés