INFORME N°2

DETERMINACIÓN DE AZÚCARES REDUCTORES POR EL MÉTODO

DNS (Ácido 3,5 - dinitrosalicílico)

AVILEZ PORTACIO JESÚS

BENÍTEZ LOBO JOSÉ

PÁEZ VITAL LUISA FERNANDA

PUENTE HERNÁNDEZ ZILATH

SÁENZ CARDENAS RUGERO

Ph. D. DEIVIS LUJÁN RHENALS

UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA

FACULTAD DE INGENIERÍA

PROGRAMA DE INGENIERÍA DE ALIMENTOS

ASIGNATURA DE BIOTECNOLOGÍA ALIMENTARIA

 2020

1. OBJETIVO

1.1 OBJETIVO GENERAL

 Aplicar una técnica sencilla, rápida y eficaz para determinar azúcares

reductores en caldos y medios de fermentación que permitan conocer los
rendimientos en sustrato y productos durante un bioproceso.

1.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS


 2. INTRODUCCIÓN

Los azúcares reductores provocan la alteración de las proteínas mediante

la reacción de glucosilación no enzimática también denominada reacción de
Maillard o glicación. Esta reacción se produce en varias etapas: las iniciales
son reversibles y se completan en tiempos relativamente cortos, mientras
que las posteriores transcurren más lentamente y son irreversibles. Se
postula que tanto las etapas iniciales como las finales de la glucosilación
están implicadas en los procesos de envejecimiento celular y en el
desarrollo de las complicaciones crónicas de la diabetes.
Los carbohidratos son moléculas formadas por carbono, hidrogeno y
oxígeno. Todos los carbohidratos son azucares pequeños, solubles en agua
(glucosa y fructosa) O bien cadenas, como el almidón y la celulosa, que se
elaboran enlazando subunidades de azúcar. en la naturaleza los
carbohidratos se presentan como monosacáridos, oligosacáridos y
polisacáridos. Los monosacáridos se clasifican en aldosas si tienen un
grupo aldehído y cetosas si tienen un grupo cetona. Todos los
monosacáridos, aldosa o cetosas y la mayoría de los disacáridos son
azucares reductores excepto la sacarosa porque uno de sus dos carbonos
anoméricos no esta
formando enlace glucosídico.
 3. MARCO REFERENCIAL

3.1 DNS (Ácido 3,5 - dinitrosalicílico)

El método DNS es una técnica colorimétrica que emplea un procedimiento

que se basa en una reacción redox que ocurre entre el DNS y los azucares
reductores presentes en la muestra, seguido de la determinación
espectrofotométrica a 540nm de los azucares reductores.

Esta técnica sirve para cuantificar los azucares reductores producidos

durante una fermentación o para cuantificar los productos de una reacción
enzimática. Este método ha sufrido varias modificaciones a través de los
años para adecuarse al análisis de diferentes materiales y su principal
ventaja radica en su alta sensibilidad y productividad debido a que es un
método espectrofotométrico.

El método del DNS no es recomendable utilizarlo para la determinación de

azucares reductores en muestras intensamente coloreadas como mieles y
caldos de fermentación que la contengan. estudios de Otero y
colaboradores muestran dispersión en la determinación de azucares
reductores en mieles por el método del DNS con la modificación de Miller.
 4. CÁLCULOS

Tabla 1. Curva patrón elaborada en diferentes concentraciones con sus

respectivas absorbancias. Resultados de la concentración de glucosa

Tubo mL. de s/n mL. de agua Concentración Absorbancia

estándar destilada final (ppm) (575 nm)
1 0.0 1.0 0 0
2 0.2 0.8 200 0.0723
3 0.4 0.6 400 0.18
4 0.6 0.4 600 0.262
5 0.8 0.2 800 0.381
6 1.0 0.0 1000 0.429
5. ANÁLISIS DE RESULTADOS
 6. CONCLUSIÓN

Durante la realización de la práctica de laboratorio, en donde se estudió el método

de determinación de azucares reductores DNS (Ácido 3,5 - dinitrosalicílico), se
pudo conocer lo tipo de procedimiento utilizado para la determinación de esta.

El procedimiento se realizó para la determinación de azucares con una solución

madre de glucosa por el método DNS. Este procedimiento se llevó a cabo
haciendo unas diluciones.

También se realizó una curva patrón que se elaboro con diferentes

concentraciones de glucosa y se pudo observar que la absorbancia de esta es
directamente proporcional a la concentración de azucares presentes en estas
soluciones, utilizando el método de DNS en una curva patrón de glucosa se
observó que la grafica mostro un R2= xxxxxx
 7. RECOMENDACIONES

 Agitar constantemente los tubos con el vortex.

 Esterilizar previamente el área de trabajo con alcohol y mantener

asepsia con ayuda constante de un mechero.

 Limpiar las pipetas antes de usarlas con otra solución

8. CONSULTA
 9. BIBLIOGRAFÍA
 Audesirk, Audersirk, y Byers, 2003
 Manual de técnicas analiticas, ICIDCA, 1974
 https://www.ecured.cu/Az%C3%BAcares_reductores
 Otero M. A. y colaboradores, limitaciones del método del acido 3,5
DNS mieles finales, revista ICIDCA No 1, xx, 1986.