FORMATO PARA PRACTICAS DE LABORATORIO

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INFORMACIÓN BÁSICA

NOMBRE DE LA PRÁCTICA:
Actividad enzimática de la catalasa y la amilasa PRÁCTICA No.: 5-6
ASIGNATURA: Bioquímica del deporte
TEMA DE LA PRÁCTICA: Actividad Enzimática
LABORATORIO A UTILIZAR: Laboratorio de Química y Bioquímica

TIEMPO: 2 Sesiones (4 Horas) TRABAJO GRUPAL: TRABAJO INDIVIDUAL:

CONTENIDO DE LA GUÍA
COMPETENCIAS DISCIPLINARES.
• Comprueban experimentalmente la actividad enzimática de la catalasa mediante comparaciones, para la
verificación del efecto de la temperatura y el pH sobre la actividad de la enzima.
• Determinan las condiciones de temperatura y pH en las cuales la amilasa salival presenta su mayor actividad
enzimática para la degradación del almidón, comprobando la especificidad de la enzima frente a sustratos
de diferente naturaleza química.
MARCO TEORICO.
1. LAS ENZIMAS
Las enzimas son proteínas especializadas en la catálisis de las reacciones biológicas. Se encuentran entre las
más notables de las biomoléculas conocidas debido a su extraordinaria especificidad y a su poder catalítico,
que es mucho mayor que la de los catalizadores sintéticos. No hacen factibles las reacciones imposibles, sino
que solamente aceleran las que espontáneamente pueden producirse.
Una reacción catalizada por un enzima se caracteriza por (ver figura 1):
• La sustancia sobre la que actúa el enzima se llama sustrato.
• El sustrato se une a una región concreta de la enzima, llamada centro activo.
• Una vez formados los productos el enzima puede comenzar un nuevo ciclo de reacción.

Figura 1. Ciclo de acción enzimática

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1.1. Propiedades de las enzimas

Las propiedades de las enzimas derivan del hecho de ser proteínas y de actuar como catalizadores. Los
factores que influyen de manera más directa sobre la actividad de un enzima son:
PROPIEDADES DE LAS ENZIMAS
pH TEMPERATURA COFACTORES
Las enzimas poseen grupos Las reacciones catalizadas por Los cofactores pueden ser iones
químicos ionizables (carboxilos y enzimas al ser proteínas, a partir inorgánicos, cuando el cofactor es
amino) en las cadenas laterales de de cierta temperatura, se una molécula orgánica se llama
sus aminoácidos. Según el pH del empiezan a desnaturalizar por el coenzima. Cuando los cofactores y
medio, estos grupos pueden tener calor. La temperatura a la cual la las coenzimas se encuentran
carga eléctrica positiva, negativa o actividad catalítica es máxima se unidos covalentemente al enzima
neutra. Habrá un pH en el cual la llama temperatura óptima. se llaman grupos prostéticos. La
conformación será la más forma catalíticamente activa del
adecuada para la actividad enzima, es decir, la enzima unida a
catalítica. Este es el llamado pH su grupo prostético, se llama
óptimo. Desviaciones de pocas holoenzima. La parte proteica de
décimas por encima o por debajo un holoenzima (inactiva) se llama
del pH óptimo pueden afectar apoenzima. (Horton, Moran,
drásticamente su actividad Scrimgeour, Perry, & Raw, 2008).
En la siguiente figura 2 se muestra la clasificación de las enzimas.

Figura 2: Clases de enzimas. Adaptado de KOOLMAN, Color Atlas of Biochemistry, 2nd edition, pág. 59, Thieme Medical
Publishers. 2005.
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2. ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE LA CATALASA: en la siguiente infografía se muestran las principales

características de la catalasa.

INFORAFÍA 1. Características de la catalasa

3. LA AMILASA. En la infografía 2 se describen algunas propiedades de la alfa amilasa

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Infografía 2. Propiedades de la alfa amilasa

3.1. EL ALMIDÓN
En las células vegetales, el almidón existe como mezcla de amilosa y amilopectina y se almacena en los
cloroplastos en granos cuyos diámetros van de 3 a 100 µm. Figura 4.

Figura 4: Estructura del Almidón. Adaptado de KOOLMAN, Color Atlas of Biochemistry, 2nd edition, pág. 43, Thieme Medical
Publishers. 2005.
4. IDENTIFICACIÓN DE ALMIDÓN
La presencia de almidón se reconoce con el reactivo de Lugol (solución de yodo molecular - I2 en yoduro de
potasio - KI).
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En esta prueba, al entrar en contacto el almidón con el Lugol, se produce una coloración azul-violeta que se
debe a que el yodo se introduce entre las espiras de la molécula de almidón. No es, por tanto, una verdadera
reacción química, sino que se forma un compuesto de inclusión que modifica las propiedades físicas de esta
molécula, apareciendo la coloración azul-violeta.
CONSULTA PREVIA
1) Responda las siguientes preguntas:
a) Que es una enzima:

R= Son moléculas orgánicas que actúan de catalizadores de reacciones químicas, es decir aceleran la
velocidad de reacción, son de naturaleza proteica, disminuyen la energía de activación.

b) Que es un catalizador:

R= Es una clase de sustancia que durante la catálisis altera el desarrollo de una reacción, los
catalizadores que incrementan la velocidad reciben el nombre de catalizador positivo.

c) Que es un inhibidor:

R= Es una molécula que se une a una enzima y disminuye su actividad, esta unión puede ser reversible,
la más común en el caso de fármacos o irreversible, que suele ser por xenobióticos de alta capacidad.

2) a. Teniendo en cuenta el siguiente vídeo “Experimento Biología / Química con la Enzima Catalasa.
Generación de Oxígeno” (https://www.youtube.com/watch?v=5_H9rtxUs3Q ) responda las
siguientes preguntas.
• Porque es necesario descomponer el peróxido de hidrogeno en el cuerpo:

R= Es muy toxico en grandes cantidades por esta razón se debe descomponer para que se obtenga
agua y oxigeno

• En cual parte del cuerpo se encuentra en mayor proporción la catalasa:

R= Hígado y riñones

• Experimentalmente como se puede observar la acción de la catalasa:

R= Se observa como se forma espuma, la catalasa se mezcla con el agua oxigenada y crea agua
y oxigeno

b. Realice una infografía en una hora aparte especificando la acción enzimática de la amilasa, y su
importancia en el organismo.

3) Teniendo en cuenta que las dos enzimas que se van a trabajar en el laboratorio, digan el nombre de cada
una, a que clase pertenece y cuál es la reacción que cataliza.
 ENZIMA 1

NOMBRE Amilasa

CLASE DE ENZIMA Hidrolasa

REACCIÓN Hidrolisis de los enlaces 1-4 entre las unidades de glucosa al digerir
el glucógeno y el almidón para formar fragmentos (Dextrina y
maltosa) glucosa libre.
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ENZIMA 2

NOMBRE Catalasa

CLASE DE ENZIMA Oxidoreductasas

REACCIÓN
Descompone el peróxido en agua y oxigeno (Sistema de
defensa celular contras los Ros)

4) Las enzimas son fundamentales para la realización de diferentes procesos biológicos. Consulte un proceso
de su interés que sea de gran importancia y este acorde con su carrera profesional y explique:
Proceso de Interés: R= Glucolisis anaeróbica (respiración celular)

Enzima que participa: R= Hexoquinasa pertenece al grupo del tipo transferasa

Importancia del proceso: R= Nuestros músculos obtienen la energía necesaria para poder generar
movimiento a través de moléculas de ATP que son obtenidas mediante el glucolisis

5) Cite las fuentes consultadas para la preparación de la consulta previa. Use normas APA.
R= Gómez, Gonzales y Tovar. 2013. La alfa amilasa salival una relación con la caries dental y salud en
general. Obtenido de: File: ///c./users/Deisy%20avila/downloads/4561. Article%20text-25272-1-10-
20131029PDF.

RIESGOS Y SEGURIDAD: FRASES H & P, PICTOGRAMAS Y COLECTORES DE DESECHO

Sulfato de Cobre II (En reactivo Hidróxido de Potasio (Presente

de Fehling A y Biuret) en el reactivo de Biuret)
H302-H315-H319-H410 H290- H302- H314
P273-P302+P352 P280-P301+P330+P331
P301+P351+P338 P305+P351+P338

Colector:_________________ Colector:_________________

Peróxido de Hidrógeno Yodo (En reactivo de Lugol)

H202-H315-H318-H335 H332- H312- H400
P302+P352, P305+P351+P338 P273 -P302+P352

Colector:_________________ Colector:_________________

Hidróxido de Sodio (Presente en

el reactivo de Fehling B)
H314-H290
P280 -P301+P330+P331
P305+P351+P338

Colector:_________________
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Frases H
H202: Explosivo: grave peligro de proyección.
H290: Puede ser corrosivo para los metales.
H302: Nocivo en caso de ingestión.
H312: Nocivo en contacto con la piel.
H314: Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares graves.
H315: Provoca irritación cutánea.
H318: Provoca lesiones oculares graves.
H319: Provoca irritación ocular grave.
H335: Puede irritar las vías respiratorias.
H400: Muy toxico para los organismos acuáticos.
H410: Muy toxico para los organismos acuáticos, con efectos nocivos duraderos.
Frases P
P273: Evitar su liberación al medio ambiente.
P280: Llevar guantes/prendas/gafas/mascara de protección.
P301+P330+P331: EN CASO DE INGESTION: Enjuagarse la boca. NO provocar el vómito.
P302+P352: EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con agua y jabón abundantes.
P305+P351+P338: EN CASO DE CONTACTO CON LOS OJOS: Aclarar cuidadosamente con agua durante varios
minutos. Quitar los lentes de contacto, si lleva y resulta fácil. Seguir aclarando.

PALABRAS CLAVE *
Enzima, Actividad enzimática, catalasa, influencia de la temperatura y pH en la acción enzimática, polisacárido,
amilasa, almidón.
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INFORME DE LABORATORIO
ASIGNATURA:
ESTUDIANTES:
▪Miguel Medina Bioquímica
▪Brayan Tovar
GRUPO:
▪Paula Beltrán
▪Gabriela Ángel A9A
▪Diana Valderrama
Lucy Fernandez NOTA:

CARRERA: TRABAJO GRUPAL: TRABAJO INDIVIDUAL:

x

FORMULE TRES HABILIDADES QUE DESEE ADQUIRIR O DESARROLLAR A TRAVÉS DE LA PRÁCTICA

LABORATORIO.
 Entender cómo actúa la temperatura y el pH, sobre la actividad enzimática.
 Identificar la presencia de catalaza en el hígado, corazón de pollo o manzana.
 Determinar las condiciones de temperatura y pH para la amilasa salival.
Elabore un Mapa conceptual del tema a tratar en la Práctica de Laboratorio.
Elaboren un mapa conceptual, recuerde que el mapa conceptual se debe estructurar por medio de conectores, no se
deben poner definiciones y los conceptos se deben organizar jerárquicamente.
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RESULTADOS.

PRIMERA SESIÓN
De acuerdo con las observaciones realizadas diligencie las siguientes tablas, calificando la velocidad de la
reacción en cada uno de los tubos en la escala de 0 a 5, donde 0 es menor actividad y 5 máxima actividad:
Tabla 3. Actividad enzimática según temperatura
Tabla 1. Actividad enzimática en tejidos
TUBO TEJIDO ACTIVIDAD TEMPERATURA °C ACTIVIDAD DE LA CATALASA
DE LA CATALASA 0 4.5
1 Hígado 5 37 4
2 Pollo 2.8 92 3
0
3 Manzana Tabla 4. Actividad enzimática según reúso
Tabla 2. Actividad según pH EXPERIMENTO ACTIVIDAD DE LA CATALASA
pH ACTIVIDAD DE LA CATALASA Sin usar 4
4
5 Reutilizada 5
7 2
10 2
SEGUNDA SESIÓN
Con los resultados obtenidos complete las siguientes tablas teniendo en cuenta escribir observaciones claras y
SIGNO (+) SI HUBO ACTIVIDAD ENZIMÁTICA o SIGNO (–) SI NO HUBO ACTIVIDAD ENZIMÁTICA
Tabla 5. Influencia de la temperatura en la actividad enzimática
INFLUENCIA DE LA TEMPERATURA
TUBO °C RESULTADO + / - OBSERVACIONES
La coloración es oscura lo cual significa que los almidones
todavía están presentes, el sustrato está completo, por tal
1 92 - motivo la enzima fue nula.
Hubo un punto de coloración adecuado, siendo 37° la
2 37 + temperatura más óptima en el trabajo de las enzimas.
Hubo cambio de coloración (amarillo) por tal motivo la
enzima hizo actividad en el sustrato, rompiendo los
3 0 + carbohidratos que estaban unidos

Tabla 6. Influencia del pH en la actividad enzimática

INFLUENCIA DEL pH
TUBO °C RESULTADO + / - OBSERVACIONES
+/- Hubo cambio de coloración, pero se notaron unos
1 4 precipitados de color negro dentro de la sustancia

2 7 + Se obtuvo un cambio de coloración total

3 10 - La coloración fue opaca, con precipitados de color oscuro

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Tabla 7. Especificidad en la actividad enzimática

ESPECIFICIDAD ENZIMÁTICA
TUB ENZIM SUSTRAT RESULTADO
O A O ENSAYO OBSERVACIONES
+/-
La actividad
enzimática es
Amilasa + completa
1 Salival Almidón Lugol

Coloración rojo
ladrillo, dado
Amilasa + por la oxidación
2 Salival Rafinosa Fehling

Coloración
morada
indicando la
presencia de
Amilasa + proteínas
3 Salival Triptosa Biuret

CUESTIONARIO.

PRIMERA SESIÓN
1. A partir de las observaciones obtenidas indique ¿Cómo se evidenció la actividad enzimática de la catalasa?
Justifique su respuesta.

Esta se evidencio por medio de que en la prueba el tejido al entrar en contacto con h2o2 obtuvo una reacción de
efervescencia el cual en unos tejidos fue más fuerte que en otros.
_______________________________________________________________________________________________

2. Con la información obtenida en la práctica complete el siguiente cuadro, recuerde explicar cada una de
las respuestas y compararlas con los procesos biológicos que ocurren en los seres vivos.
Tabla 8. Análisis actividad enzimática
RESULTADO
EXPLICACIÓN
OBTENIDO

Tejido con El hígado al momento de entrar en contacto con H20 se

Hígado
mayor cantidad pudo evidenciar una gran efervescencia lo que nos dice
Efervescencia
de catalasa que este tejido presenta catalasa.

Hubo una reacción completa con esta temperatura y con

Temperatura 37 grados las otras no hubo mucha reacción.
Óptima

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pH Este pH es el mejor para hallar la presencia de catalasa ya
Optimo que ocurre una reacción completa de efervescencia.
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Es reutilizable la
No es reutilizable Se usa especialmente para la descomposición del
catalasa
peróxido de hidrogeno en oxígeno y agua

3. Teniendo en cuenta los usos del agua

oxigenada ¿Qué sucede cuando esta se aplica sobre una herida?

R= Este compuesto es bastante oxidante y capaz de destruir componentes de las células. Pero además el
peróxido de hidrogeno es una sustancia inestable que espontáneamente se descompone en agua y
oxígeno. Durante la reacción de descomposición, el oxígeno gaseoso se escapa en forma de burbujas.

SEGUNDA SESIÓN

4. Teniendo en cuenta los resultados obtenidos para la actividad de la amilasa, indique ¿Cómo visualmente
se evidenció la actividad enzimática de la amilasa salival? Justifique su respuesta
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________
5. Con la información obtenida en la Segunda sesión complete el siguiente cuadro, recuerde Justificar su
respuesta
Tabla 9. Análisis actividad enzimática de la Amilasa Salival
RESULTADO
EXPLICACIÓN
OBTENIDO

Temperatura
óptima

pH
óptimo

Especificidad de
la Amilasa
Salival

6. Teniendo en cuenta la actividad enzimática de la amilasa.

Explique ¿cómo actúa la AMILASA sobre el ALMIDÓN? Explique su respuesta.

La enzima amilasa degrada el almidón para así formar azúcares más simples como la glucosa es decir moléculas
complejas qué pasa a moléculas más simples el almidón es un polisacárido formado por la polimerización de miles de
monómeros de glucosa que forman largas cadenas

Después de los resultados obtenidos para las enzimas CATALASA y AMILASA, indique:

7. ¿Qué les sucede a las enzimas cuando son sometidas a una temperatura de 92°C?
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_Por cada 92° Se incrementa la velocidad de la reacción la cual se va a duplicar las reacciones catalizadas por enzimas
siguen esta ley general sin embargo al ser proteínas a partir de cierta temperatura se empiezan a desnaturalizar por
el color.

¿A condiciones de pH extremas que le sucede a la estructura de la enzima e interacciones Iónicas de la

misma?

En formas iónicas y equilibrios de los aminoácidos de función del PH está localizado en el centro activo determinadas
por encima lo que es posible determinar sus condiciones fisiológicas, dependiendo del PH.

CAUSAS DE ERROR Y ACCIONES PARA OBTENER MEJORES RESULTADOS.

Mencione dos fuentes de error que puede influir al realizar las pruebas de identificación y explique:
Error 1: Temperatura
Explicación: Cada muestra para que reaccione adecuadamente tiene su debida temperatura y tiempo si no lo
está podría no obtenerse el resultado deseado.
Error 2: El pH
Explicación: Las enzimas al ser proteínas son afectadas por el pH dañando su estructura, entonces si no se
colocan las cantidades correctas a cada reacción podría afectar a la enzima.

CONCLUSIONES.

1. En las enzimas presentan cambios en el pH, en la temperatura, presencia de cofactores,

concentración del sustrato que influyen en la reacción para identificar si es optimo por medio
de la catalizacion.

2. Las enzimas tienen intracelulares encargados de la degradación celular obteniendo nutrientes

elementales y también están las enzimas extracelulares que se activan por fuera de la
membrana plasmática cumple proceso metabólico catalítico destinado a la degradación de la
materia en energía química.

3. La temperatura al elevarse la velocidad de reacción aumenta predominando la

desnaturalización con perdida en la capacidad catalica, por tanto, las enzimas muestran una
temperatura optima.
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APLICACIÓN PROFESIONAL DE LA PRÁCTICA REALIZADA.

Expongan en este espacio la relación de las competencias y habilidades desarrolladas con el ejercicio de su futura profesión.

 En el ambiente las enzimas afectan en el pH, y esto influirá en las propiedades de un ecosistema
por que si cambia su pH cambiará la calidad ya sea del agua, el suelo, el aire, etc.
 En la salud las enzimas también son proteínas que afectaran en la velocidad de reacción de
algunos catalizando en necesidad de beneficiar el organismo, por lo cual se debe conocer las
cantidades que debe ter un paciente.

BIBLIOGRAFÍA UTILIZADA. Utilicen las normas APA

Gómez Eduardo. Mecanismo de acción de una coenzima, Hartón, h; R. Marón, Lía., Scrimgeour, k.G,
Perry, M.d. & Raw, J.D (2008). Principios de Bioquímica. México: Pearson education.
ANEXOS.

RÚBRICA DE EVALUACIÓN.
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