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Activación de células T y B
Estructura de los receptores
En un alto porcentaje para que se active una
célula, es necesario que exista un receptor. En
este caso hay un linfocito B y un linfocito T. Aquí
participa una inmunoglobulina (principalmente IgM)
y un TCR (en el caso del linfocito T). Entonces,
para que el receptor active la célula, lo que debe
ocurrir es que inmunológicamente se reconozca un
antígeno, una región de transmembrana y lo más
importante que a nivel intracelular haya secuencias
ITAM.
 ITAM: aminoácidos principalmente
tirosina que se pueden fosforilar.
Un alto porcentaje de receptores para que
traduzcan cuando reconocen algo y envíen la señal
a nivel intracelular, tienen que tener
específicamente un tipo de residuo que se fosforile.
En este caso son aminoácidos ricos en residuos de
tirosina. Al ser de tirosina pueden ser fosforilados
por proteínas tirosina kinasa. Éstas fosforilan abajo
del BCR y del TCR. Si las proteínas están
fosforiladas, significa que la célula está activa.
Activación de LT
El linfocito es restringido a MHC, debe estar TCR
con un antígeno que lo está presentando vía MHC.
Además de éstas existen otras señales de tipo
inespecíficas (CPA, IL-1, IL-6, IFNα) y una señal
accesoria. Todas deben interaccionar para que se
produzca la activación.
Recordar que además de la presentación del
antígeno, debe haber CD4 y CD8 que reconocen
MHC1 y MHC 2. Esta interacción hace que se
produzca un cambio conformacional al interior de la
célula para que así se acerquen las proteínas, se
activen y se fosforilen.
de
Las señales accesorias sirven para que exista
reconocimiento y para también enviar señales a la
célula para que las proteínas que deben estar
cerca se acerquen, se fosforilen y se inicie la
cascada de activación.
Las proteínas que van a participar a nivel
intracelular en el LT (a modo general se puede
extrapolar al LB) son las que van a fosforilar y
transducir la señal (una proteína se une a otra, se
fosforila, luego fosforila a otra y así
sucesivamente). Dentro de estas proteínas existen
2 grandes grupos:
- Tirosina-kinasas (PTKs): son las que
inician la reacción. Éstas son capaces de ir
a fosforilar a una proteína y que comience
la señal. Van a fosforilar residuos de
tirosina.
- Fosforilación de proteínas en cascada:
éstas solamente trabajan en cascada
continuando la vía. Son secundarias.
Tirosina-kinasas
A modo general existen varias familias de tirosina-
kinasas. En ellas se pueden reconocer 3 dominios.
Es una proteína bastante independiente que llega e
inicia la reacción. Es capaz de unirse por medio de
las secuencias de unión, posee un dominio
catalítico para fosforilar y un dominio de regulación
para detener.
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Entonces, se tienen los residuos ITAM y la tirosina-
kinasa, la cual debe poder unirse a través de estos
residuos, debe tener una actividad catalítica.
Cuando ya está unida, fosforila la secuencia ITAM.
Esto no es eterno y por ello debe existir un sitio de
regulación. Para esto está el sitio R para detener.
Proteínas adaptadoras
Son las que van a transmitir la señal. No
poseen dominio catalítico ni dominio de
regulación. Para ser proteínas en cascada
deben tener un lugar donde se puedan
fosforilar, residuos de tirosina o prolina y
dominios para que se puedan unir. Se fosforila
una vez y luego ocurre la fosforilación en
cascada (se van uniendo y fosforilando)
siempre y cuando se tengan los residuos
mencionados.
En el caso de que la proteína que se acerque
sea P56 (una tirosina kinasa), va a fosforilar a
los residuos de CD3.
Cuando se fosforila aumenta la afinidad de
otras proteínas y ahí comienza la cascada.
Ésta comienza con la unión de ZAP-70 quien
se une a las cadenas de CD3 y también se
fosforila. Esto a su vez genera una secuencia
en cascada en donde se acerca otro grupo de
proteínas denominadas LAT y sucede lo
mismo que en el caso anterior, es decir, se van
fosforilando. De todas las proteínas que
participan, la más importante es la activación
de la fosfolipasa c, la cual actúa sobre PIP2
para generar segundos mensajeros (IP3 y
Diacilglicerol). Esto lleva a activar la proteína
kinasa c y deriva aumento de calcio (lo que
quiere decir que la proteína está activada).
Este proceso es homologo para cualquier tipo
de células; la diferencia inmunológica es que
en este caso se produce por el reconocimiento
de un antígeno mediante MHC, CD4 y CD8, lo
cual nos llevó a activar las células con
aumento de calcio.
En paralelo cada una de las proteínas también
activa otras vías. Esto, para activar factores de
transcripción, los cuales van a ir al núcleo a
regular la expresión génica para que ocurran
diversos procesos como por ejemplo cambios
morfológicos, para que se secreten contenidos
para destruir células infectadas, para secretar
citoquinas, para unirse a otras células. En
definitiva, cambia toda la estructura de la
célula tanto funcional como morfológicamente.
El objetivo de que se generen tantas vías es
para potenciar la activación del linfocito.
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El proceso de fosforilación demanda una gran
cantidad de energía.
Se puede medir cualquier proteína para saber
que la célula se activó.
Resumen: señales que se generan en la
membrana o intracelularmente
 Hidrólisis de PIP2 (Fosfatidil inositol
difosfato)
 Aumento de Ca2+ intracitoplasmático
 Fosforilación de proteínas
Entonces, en una célula en reposo, los
factores de transcripción estarán inactivos,
pero si la célula se activa, los factores de
transcripción también lo harán. Para saber si
están activos, existen diferentes marcadores
que bloquean el factor de transcripción para
que no se esté gastando energía. Existen
bastantes factores de transcripción, entre ellos
NF-kappaB, el cual se encuentra bloqueado
por IkappaB. Cuando llegan las señales, van a
fosforilar más específicamente a IkappaB, para
que éste se fragmente.
Entonces si el factor que estaba bloqueando,
se fosforila, se destruye y queda NF-kappaB
activo, ingresando al núcleo y regulando la
expresión.
Todo esto apunta a transcripción de genes.
Es una respuesta muy rápida.
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Clasificación de los genes
 Protooncogenes celulares  (c-fos,
junc, c-myc)
 Genes de Citoquinas  (IL-2, IFN-γ)
asociado a respuesta inflamatoria.
Citoquinas proinflamatorias.
 Genes para receptores citoquinas 
(IL-2R) receptores de citoquinas
proinflamatorias.
Los protooncogenes son genes cuyos
productos promueven el crecimiento y la
división de la célula, aumentan la respuesta
inmune.
En infección bacteriana se activan los
macrófagos, quienes secretan interferón y otra
citoquina. Esto se puede observar porque ya
persona tiene fiebre.
Por ello siempre el proceso inflamatorio se
asocia a una respuesta inmune.
Cuando las personas tienen hipersensibilidad,
el sistema inmune sobrerreacciona y se
producen manchas en la piel o alergias por
contacto a componentes que están en la ropa.
Aquí el sistema inmune se exacerba y genera
una respuesta inflamatoria, por ello la piel
queda con manchas.
Evolución de la respuesta inmune
 Respuesta inmune
o Reconocimiento
o Activación
o Proliferación (clon y células de
memoria)
 Eliminación del Antígeno
 Célula en reposo (la célula debe volver
a un estado basal)
Para que la célula vuelva al estado de reposo
se debe desfosforilar, de modo que cada
proteína vuelva a su estado basal. Quienes
harán esto son las fosfotirosinas fosfatasas.
Son proteínas encargadas de desfosforilar las
proteínas que se fosforilaron y hacer que la
célula vuelva al reposo.
Activación de LT: medición
 Producción de citoquinas: mediante el
sobrenadante medir los niveles de
citoquina. O bien, si hay un paciente con
infección, se mide del plasma. Lo más
clásico es un ELISA.
 Actividad mitótica: es el procedimiento
más complejo. Se realiza mediante
tinción, en donde se ve la actividad
cuando la célula se divide.
 Fosforilación de proteínas: por
western blot.
Activación de LB:
Ocurre algo distinto al LT. Aquí la activación
apunta a otro objetivo por el tipo de célula. Las
proteínas básicamente cuando una célula se
activa, tienen la misma función (proteínas que
fosforilan, tirosina kinasa y una reacción en
cascada). En este caso la finalidad de que se
active LB es que exista una diferenciación a
célula plasmática, ya que ésta es la que
secreta los anticuerpos.
Se tienen LB vírgenes que cuando entran en
contacto con el antígeno se activan, proliferan
y se diferencian a célula plasmática. Como se
mencionó, en proteínas se mantiene el mismo
sistema; fosforilación, cascada, expresión
génica, pero en este caso es para producir la
diferenciación.
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Mecanismo básico de activación de LB
Se tiene un anticuerpo como receptor IgD o
IgM (principalmente IgM), van a reconocer el
antígeno. Existen también otros correceptores
que participan reconociendo el antígeno y esto
va a producir un cambio conformacional, el
cual aumenta la afinidad por la tirosina kinasa
p72 que se une a los residuos para fosforilar,
aumentando la afinidad de un grupo de
proteínas (BLNK), activando la fosfolipasa C,
quien actúa sobre PIP2. Aquí se produce IP3,
Diacilglicerol, activación de proteína kinasa C y
finalmente aumento de calcio.
La fosfolipasa C es la más importante, ya que,
si se produce una mutación en ella, aunque
todo el proceso anterior funcione muy bien, la
fosfolipasa no actuará sobre PIP2 para generar
segundos mensajeros.
En paralelo se generan más vías de activación,
para activar y regular la expresión génica para
que este linfocito virgen reconozca el antígeno
y se diferencie a célula plasmática para
secretar anticuerpos.
Células NK
El NK es un linfocito citotóxico que
principalmente ataca células infectadas con
virus, bacterias y microorganismos en general.
Forma parte de la inmunidad innata y tiene una
citotoxicidad dependiente de Anticuerpos. Esto
ocurre mediante una vía de activación similar
al TCR (la del LT). Las mismas proteínas, las
mismas vías, aumento de calcio. La diferencia
está en cómo se gatilla esta activación. Se
tiene la célula blanco y cuando se secretan
anticuerpos, éstos se unen a esta célula para
destruirla. Aquí se tiene el concepto de
opsonización, cuando una célula tiene unido
un anticuerpo (el anticuerpo se une porque la
consideró una célula extraña). Entonces, la
célula que va a ser destruida está en
circulación, en los tejidos donde hay infección
con este anticuerpo unido para ser destruida.
En ese punto viene el NK, reconoce el
anticuerpo mediante la proteína CD16 en la
región FC del anticuerpo (IgG). A esto se le
llama citotoxicidad dependiente de anticuerpo,
ya que tiene a CD16 quien reconoce el
anticuerpo unido a la célula. Además,
participan una serie de correceptores que
facilitan el reconocimiento.
Señalización de Linfocitos
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Vías de las MAPK Moléculas de adhesión celular

Cuando ocurre una infección el leucocito debe
ir a ese sitio, pero antes debe pasar por varios
procesos para poder llegar al sitio. Primero,
tiene que interaccionar con las células que
están en el endotelio. La célula (linfocito) va
circulando a gran velocidad y cuando va
llegando al lugar comienza a frenarse, se une,
se adhiere muy bien e ingresa al tejido
(proceso de extravasación).

Vía de RAS

Vía de la Calcineurina
Los linfocitos pueden ingresar al tejido en la
parte del endotelio columnar, que son las
vénulas con capilares. La interacción con el
linfocito siempre será de forma ligando-
receptor, entre la proteína del endotelio con el
linfocito y eso produce que éste vaya
reduciendo su velocidad, se una e ingrese.
Entonces las proteínas que participan de este
proceso son las moléculas de adhesión celular
y permiten que el linfocito se una al endotelio e
ingrese al tejido en donde está la infección.
Vía de la PKC Moléculas de adhesión celular
- Familia Selectinas
- Familia Integrinas
- Super familia de las Ig
- Mucinas (geles)
- Cadherinas
Cascada de adhesión leucocitaria
Se describe en 5 etapas:
- Frenado
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- Luego comienza a rodar por el endotelio
y allí viene un proceso de
- Activación para que se expresen
receptores y se una de mejor forma
- Se adhiere firmemente
- Ingreso al tejido para destruir el
patógeno
Las proteínas de adhesión celular están tanto
en el endotelio como en el linfocito. Debe estar
ligando-receptor para que se una.
Las moléculas de adhesión que favorecen el
ingreso del linfocito son:
Trabajan en equipo y van participando unas
primero y después se van uniendo otras. Las
que parten, son las selectinas en las etapas de
frenado y Rolling. Luego participan las
integrinas en la etapa de adhesión firme.
Finalmente, en la etapa de ingreso o
extravasación participan las inmunoglobulinas.
Selectinas
Son monómeros con unidades repetidas y
mientras más de ellas tengan (unidades cortas
de repetición) ricas en cisteína, le va
cambiando el nombre. La que tiene menos
unidades es la L-selectina, luego está la E-
selectina y finalmente la P-selectina (la más
grande). La letra indica la célula en la que se
encuentran. Además de participar aquí, están
presentes en otras células realizando otras
funciones. En este caso nos enfocamos en la
transmigración de leucocitos. Otra parte
importante que tienen es un dominio de tipo
lectina que le da la especificidad para unirse a
su receptor, en este caso, región de unión a
carbohidratos. Se tiene también una región de
transmembrana, una región intracelular,
unidades de transcripciones corta y arriba un
dominio de unión de tipo lectina.
Como se mencionó anteriormente, la letra
inicial de cada selectina indica la célula en
donde predomina:
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Integrinas
Son heterodiméricas de 2 unidades, una alfa y
una beta. Cada integrina tiene una unidad alfa
y una unidad beta. La unión será dependiente
de metales divalentes. Hay 18 subunidades
alfa y 8 subunidades beta que se combinan
para formar 24 tipos distintos de integrina con
diferentes funciones.
Las que están en rojo tienen función
inmunológica.
Las selectinas reconocen a su receptor y se
unen. Esta unión activa al leucocito y ocurre la
adhesión en donde participa la integrina. El
dominio 1 de la integrina es la que interactúa
con el receptor. Si el dominio 1 está hacia
abajo, significa que esa integrina está inactiva.
La activación por fosforilación de algunas
proteínas va a producir un cambio
conformacional en la integrina, en donde el
dominio 1 que estaba hacia abajo, queda hacia
arriba, dejando activa a la integrina.
Se tiene la célula basal, viene una señal que
activa la célula y el dominio se eleva. En ese
momento ocurre la interacción, la cual produce
que la integrina se active completamente.
Entonces, se tienen dos activaciones, una que
se denomina inside out la cual va de adentro
hacia afuera, produce que la integrina se abra
un poco, interactúe con su receptor para que
se active más aún. Esta activación se
denomina outside in, ya que va desde afuera
hacia adentro de la célula.
En resumen, existen 2 procesos de activación:
- Inside out: la primera activación, en
donde se fosforilan proteínas por culpa
de las selectinas. Al interaccionar con el
receptor ocurre otra activación.
Principalmente participa Rap1
- Outside in: es la segunda activación
que ocurre por culpa de la unión con el
receptor que está afuera. Produce la
activación final. Principalmente participa
la proteína Syk que se va a fosforilar
finalmente.
Se mantiene el concepto de fosforilación de
proteínas. Syk es la que permite la extensión
final de la integrina.
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Super familia de las Inmunoglobulinas Cuantificación

Se tiene un monómero con dominios similares Para estudiar cualquier proteína que se está
a las Ig (unidades repetidas que se van expresando a nivel de membrana como las
uniendo por puentes disulfuro y cada unidad moléculas de adhesión, tanto en endotelio
tiene homología con las Ig). Poseen un como en leucocito, se puede hacer mediante
dominio extracelular, uno de transmembrana y citometría de flujo.
uno intracelular. Son secuencias cortas de
La citometría de flujo sirve para estudiar la
aminoácidos que se van uniendo por puentes
expresión de alguna proteína que esté a nivel
disulfuro. Las más importantes son:
de membrana de alguna célula.
 ICAM-1
 VCAM-1
 PECAM-1
Permiten el ingreso (extravasación) a través
del endotelio columnar.

Otra técnica que también se utiliza es ELISA,

en donde estas moléculas de adhesión sufren
ruptura proteolítica, la cual se puede encontrar
en forma soluble.

Las interacciones son entre ligando y receptor.

Son uniones específicas.

Si está soluble, se utiliza ELISA, si está en

membrana, se utiliza citometría de flujo.
Citoquinas
Son proteínas de bajo peso molecular y
solubles. Regulan las interacciones de las
células del sistema inmune. En una muestra de
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plasma o suero se pueden medir los niveles de
cualquier citoquina. Existe una gran cantidad
de kit de ELISA para determinar sus niveles.
Se producen en forma transitoria.
Cada citoquina tiene un receptor
citoquina.
Acción local:
Actividad autocrina: cuando
citoquina es secretada y ella misma
puede actuar sobre la misma célula que
la secretó, potenciando su activación.
Actividad paracrina: se secreta la
citoquina y actúa sobre otra célula
vecina (si es que esa célula posee el
receptor adecuado).
o Actividad endocrina: cuando se
secretan altos niveles
citoquina, van a circulación y
actúan sobre células de otros
órganos.
Las citoquinas son muy potentes. A bajas
concentraciones a nivel picomolares, éstas son
activas. Esto implica que se debe tener un kit
ELISA muy sensible para poder cuantificarlas.
Otras características de las citoquinas:
- Son pleiotrópicas, es decir, actúan
sobre diferentes tipos de células
(siempre y cuando tengan los
receptores para esa citoquina. Por
ejemplo: IL-6  receptor para IL-6).
- Son redundantes, ya que la misma
función la pueden cumplir muchas
citoquinas. Por ejemplo, hay grupos de
citoquinas proinflamatorias y grupos de
citoquinas antiinflamatorias.
para - Pueden desencadenar varias funciones
(dependiendo de la citoquina):
o Inducir la secreción de otra
citoquina.
la o Suprimir la actividad de otras
citoquinas
o Inducir una cascada de
citoquinas
- Pueden actuar en conjunto (sinergia) o
en forma antagónica (compitiendo entre
ellas).
- Pueden inducir la expresión de su
propio receptor para potenciar la
de activación en la misma célula que la
secretó o en otra célula o pueden
inducir la expresión de un receptor para
otra citoquina.
Los receptores son de alta afinidad y
específicos.
Las citoquinas cumplen funciones en distintos
procesos y distintos órganos (Hígado, cerebro,
hueso, endotelio, etc.). Lo mismo ocurre con la
citoquina 1 que con la interleuquina C, las
cuales son importantes proinflamatorias.
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Citoquinas que participan en la inmunidad
innata:
Citoquinas que participan en la inmunidad
adaptativa:
El principal objetivo de la citoquina es activar y
potenciar la respuesta inmune.
En la imagen anterior, se tiene al antígeno y la
respuesta final que se produce, ya sea celular
o humoral, todo va siendo regulado por
citoquinas.
De acuerdo a los niveles de las citoquinas, es
posible determinar la hora de la infección.
Depende del tipo de infección qué citoquinas
aumentan más que otras.
Entonces, son muy importantes en la
respuesta inmune.
Es importante recalcar que realizan sus
funciones a baja concentración.
Quimioquinas
Forman parte de las citoquinas. Son un grupo
de citoquinas quimiotácticas de bajo peso
molecular. Tienen la capacidad de atraer a
otros leucocitos al sitio de infección. Se
agrupan en familias (familia C, CX3C, CC,
CXC), las cuales poseen la nomenclatura ‘C’
de cisteína, ya que son ricas en esta.
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Existen receptores específicos para cada

citoquina o que comparten citoquinas y se
pueden dividir en 5 tipos estructuralmente
diferentes:
- De tipo Ig
- De tipo TNF
- Citoquinas tipo 1
- Citoquinas tipo 2
- De Quimioquinas
La función que deben cumplir para que la
citoquina ejerza su efecto, es que debe existir
una dimerización del receptor (2 receptores
iguales se unen para unir 2 citoquinas iguales).
Esto es muy importante en la activación.
Lo clásico en encontrar al receptor unido a la
membrana, pero en algunos casos pueden
estar solubles. Los receptores de citoquinas se
pueden encontrar de forma soluble por una
mutación en el procesamiento de la proteína o
por alguna ruptura proteolítica, en donde se
desprende el receptor y se puede medir en
circulación.
Los niveles de citoquina solubles en plasma se
pueden medir con ELISA.
Si se quiere medir la expresión del receptor de
citoquina en la membrana de una célula, se
utiliza citometría de flujo.
Si se quiere estudiar los niveles del transcrito
(RNA), se utiliza PCR.
Si se quiere ver la fosforilación de una
proteína, se utiliza western Blot.

La dimerización se produce para activar una

tirosina quinasa JAK (se fosforila). Luego JAK
actúa (fosforila) sobre un factor de
transcripción STAT, el cual al dimerizarse y
activarse ingresa al núcleo a regular la
expresión génica. Entonces se requiere de 2
citoquinas y la dimerización del receptor para
activar la cadena.
Receptores solubles