LABORATORIO BIOLOGIA GENERAL

LABORATORIO N°7: ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

DOCENTE: Claudia Maritza Leyva Duran

GRUPO: AR

INTEGRANTES:
Erick David Díaz Quintana
Andrea Yulieth Trujillo León

UNIVERSIDAD DE PAMPLONA-
SEDE VILLA DEL ROSARIO
INTRODUCCIÓN
Las reacciones químicas que se dan en los seres vivos no podrían tener lugar sin la
presencia de las enzimas. Estas macromoléculas, que son generalmente son proteínas,
catalizan las reacciones químicas necesarias para el metabolismo celular, es decir, aceleran
la velocidad de las reacciones al disminuir la energía de activación. Como catalizadores,
son específicas y solo influenciaran en sustratos específicos, lo cual se debe a su estructura
general; además de poseer otras propiedades como eficiencia de la catálisis, regulación y
reversibilidad.
Uno de los principales estudios que se le realizan en una enzima es medir el efecto en la
velocidad de la reacción cuando se modifican las concentraciones del sustrato y se
mantienen constantes la concentración de enzima. Se evalúa la influencia de la temperatura
en la reacción catalizada por enzimas con la finalidad de determinar los intermediarios en
una reacción y el papel que juegan en la reacción enzimática. También es usual medir la
actividad de la enzima de diferentes tejidos u organismos para entender como las
diferencias en actividad están relacionadas con la función y/o la fisiología del organismo
del que proceden.
Una enzima que se va a estudiar es la catalasa, la cual está presente en los seres vivos,
necesaria para descomponer el peróxido de hidrógeno, que se produce durante el
metabolismo.
OBJETIVOS
1. Evidenciar la presencia de la enzima catalasa en tejidos animales y tejidos
vegetales.
2. Comprobar la acción de la temperatura sobre la actividad de las enzimas.
MARCO TEÓRICO
Las enzimas son moléculas proteicas que catalizan reacciones químicas. Los catalizadores
son sustancias que aceleran reacciones químicas sin alterar la reacción, lo único que hacen
es acelerarla. También son altamente específicos ya que cada uno de ellos induce la
transformación de un solo tipo de sustancia y no de otras que se pueden encontrar en el
medio de reacción.
Factores que afectan a la actividad enzimática
1. Efecto del pH
El pH es uno de los factores que influye en la actividad enzimática, debido a que el pH que
influye en la ionización de los grupos funcionales de los aminoácidos que forman la
proteína enzimática. Cada enzima realiza su acción dentro de un determinado intervalo de
pH, dentro de este intervalo habrá pH mínimo o un pH máximo. En la mayoría de las
enzimas el pH óptimo está próximo a la neutralidad, aunque hay excepciones. La mayoría
de las enzimas presentan un pH óptimo para el cual su actividad es máxima; por encima o
por debajo de ese pH la actividad disminuye bruscamente. Este efecto se debe a que al ser
las enzimas de naturaleza proteica, al igual que las proteínas, se desnaturalizan y pierden su
actividad si el pH varía más allá de unos límites estrechos. En la mayoría de los casos el pH
óptimo está próximo a la neutralidad, pero existen enzimas con pH óptimo muy diverso
según sea el pH del medio en el que actúan. Existen enzimas a los que el pH no afecta.
2. Efecto de la temperatura
La variación de la actividad enzimática con la temperatura es diferente de unas enzimas a
otras en función de la barrera de energía de activación de la reacción catalizada. Sin
embargo, a diferencia de lo que ocurre en otras reacciones químicas, en las reacciones
catalizadas por enzimas se produce un brusco descenso de la actividad cuando se alcanza
una temperatura crítica. Este efecto no es más que un reflejo de la desnaturalización térmica
de la enzima cuando se alcanza dicha temperatura. En general por cada 10°C que aumente
la temperatura la velocidad de la reacción aumenta de 2 a 4 veces, esto se cumple hasta que
la temperatura alcanza su valor máximo donde la actividad es máximo. Esto se debe a que
al aumentar la temperatura aumenta el movimiento de las moléculas. Si la temperatura
aumenta por encima de la temperatura óptima, disminuye e incluso cesa la actividad
enzimática debido a que la enzima se desnaturaliza.
EXPERIMENTO CON LA CATALASA (ENZIMA)
La catalasa es una enzima contenida en los peroxisomas y tiene como función reducir el
peróxido de hidrogeno (o agua oxigenada, cuya fórmula es HO 2) para sintetizarlo en
oxígeno (O2) y agua (H2O), las cuales ya no son tóxicos para la célula.
 1. Existe una proporcionalidad directa entre la temperatura y la velocidad de la acción
enzimática. Como podemos observar la existencia de catalasa en los tejidos
animales, se aprovecha para utilizar el agua oxigenada como desinfectante cuando
se echa sobre una herida. Como se observa en la prueba número uno, hay mayor
presencia de catalasa en el hígado por eso hubo mayor reacción en el tubo.
2. En la prueba número dos hubo una desnaturalización de la catalasa, ya que
químicamente es una proteína, podemos desnaturalizarla al someterla a altas
temperaturas. Al perder la estructura terciaria, perderá también la función y como
consecuencia su función catalítica, por lo que no podrá descomponer el agua
oxigenada y no se observa ningún tipo de reacción. Por encima de esta temperatura,
el aumento de velocidad de la reacción debido a la temperatura es contrarrestado
por la pérdida de actividad catalítica debida a la desnaturalización térmica, y la
actividad enzimática decrece rápidamente hasta anularse.
FUNDAMENTACIÓN
1. Describa el efecto de la temperatura en la acción enzimática.
El aumento de temperatura aceleran las reacciones químicas, por cada 10ºC de incremento
la velocidad de reacción se duplica, se desnaturaliza por altas temperaturas de calor, a
temperaturas altas los puentes de hidrogeno pueden romperse, las reacciones pueden ser
pausadas o frenadas por causa de temperaturas muy bajas.
2. ¿A qué valores de pH y temperatura es estable la actividad enzimática de la
catalasa?
La actividad enzimática de la catalasa funciona a una temperatura óptima de 37 º C con un
pH óptimo para la catalasa humana es de aproximadamente de 7,6 para lograr una
estable acción enzimática.
3. ¿A qué pH teórico es más activa la amilasa?
El pH óptimo de la amilasa salival es de 6.9.
4. ¿Qué diferencia hay entre una coenzima y una apoenzima?
Las coenzimas son moléculas pequeñas que transportan grupos químicos entre
enzimas orgánicas y no proteicas, en cambio las apoenzimas son enzimas de los
componentes químicos que son utilizados para realizar la actividad catalítica.
5. La pepsina es una enzima secretada por el estómago. Discutan el rango de pH en el
cual la enzima se encuentra activa y sugiera lo que probablemente le sucede
estructuralmente a la enzima cuando pasa del estómago al intestino.
El pH en el cual la enzima se encuentra activa es: 2. Esta enzima hace que la proteína
digerida se sintetice dentro entre más pequeño convirtiéndolo en péptidos y con ayuda del
ácido clorhídrico se inicia la hidrolisis de la enzima para activar la pepsina
 6. ¿Qué otros factores, además de la temperatura y el pH influyen en la actividad de
una enzima?
 Efecto de los cofactores sobre la actividad enzimática.
 Efecto de las concentraciones sobre la actividad enzimática.
 Efecto de los inhibidores sobre la actividad enzimática.
 Modulación alostérica de la actividad enzimática.
 Efecto de la modificación covalente sobre la actividad enzimática.
 Activación proteolítica de la actividad enzimática.
 Regulación de la actividad enzimática por medio de isoenzimas.
7. Cite 5 enzimas con los sustratos respectivos sobre las cuales actúa.
Amilasa salival: actúa sobre el almidón Pepsina.
Renina: actúa sobre la caseína.
Lipasa gástrica: Actúa sobre los lípidos.
Tripsina: actúa sobre los polipéptidos.
Lactasa: actúa sobre la lactosa.
CONCLUSIONES
1. Al agregar el agua oxigenada en el hígado y la papa cruda, la catalasa separa el
oxígeno del agua oxigenada, esto se debe a que la catalasa es una enzima capaz de
degradar el agua oxigenada, lo cual evita la creación de agentes de oxigeno muy
reactivos.
2. Cuando la catalasa está en presencia de altas temperaturas no podrá llevar su
función de descomponer el agua oxigenada, esto se observa cuando el hígado y la
papa son sancochadas, debido a que se desnaturalizó en la cocción.
BIBLIOGRAFÍAS
ANÓNIMO (1988): Fehling (Germán). Enciclopedia Universal Ilustrada Europeo-
Americana, 23, 560. Madrid, Espasa-Calpe.
VILLEE, Claude A. Biología. McGraw-Hill. 1988.