Gélose nutritive à 2%

DOMAINE D’UTILISATION

La gélose nutritive à 2% est utilisée dans le cadre de la microbiologie alimentaire pour la culture
d’une grande variété de microorganismes (Salmonella, Pseudomonas, Escherichia coli, Yersinia,
Shigella, etc…..), en vue de la purification nécessaire et préalable aux étapes d’identification
prévues dans les normes spécifiques de recherche et/ou de dénombrement. Elle convient pour les
germes ne présentant pas d’exigences particulières. L’utilisation de ce milieu doit conduire à
l’obtention de colonies bien isolées.

PRINCIPES

Relativement simplifiée, la formulation apporte les éléments nutritifs nécessaires à la croissance

d’une grande variété de germes non exigeants.

PREPARATION

- Mettre en suspension 20,0 g de milieu déshydraté (BK185) dans 1 litre d’eau distillée ou
déminéralisée.
- Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps
nécessaire à sa dissolution.
- Répartir en tubes ou en flacons.
- Stériliser à l’autoclave à 121°C pendant 15 minutes.

NOTA 1 :
Une liquéfaction partielle de l’agar entraînera inévitablement une altération significative de la
consistance du gel du milieu solidifié, après stérilisation et refroidissement.

NOTA 2 :
Avec les tubes du milieu prêt-à-liquéfier BM118 (permettant chacun, de préparer une boîte de Petri
de diamètre 90 mm), faire fondre la gélose pendant le minimum de temps nécessaire à sa
reliquéfaction totale.

MODE D’EMPLOI

- Refroidir et maintenir le milieu à 44-47°C.

- Couler en boîtes de Petri stériles.
- Laisser solidifier sur une surface froide.
- Faire sécher les boîtes à l’étuve, couvercles entrouverts.
- Ensemencer.
- Incuber en respectant le protocole analytique approprié.

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FORMULE-TYPE
(pouvant être ajustée de façon à obtenir des performances optimales)

Pour 1 litre de milieu :

- Tryptone...........................................................................................5,0 g
- Extrait de viande ..............................................................................3,0 g
- Agar agar bactériologique..............................................................12,0 g

pH du milieu prêt-à-l’emploi à 25°C : 7,0 ± 0,2.

CONTRÔLE QUALITE

- Milieu déshydraté : poudre crème, fluide et homogène.

- Milieu préparé : gélose ambrée.
- Réponse culturale typique après 48 heures d’incubation à 37°C :

Croissance
Microorganismes
(méthode qualitative)
Escherichia coli ATCC® 25922 score 2
Salmonella Typhimurium ATCC 14028 score 2
Shigella sonnei ATCC 29930 score 2
Pseudomonas aeruginosa CIP 82.118 score 2

STOCKAGE / CONSERVATION

Milieu déshydraté : 2-30°C.

- La date de péremption est mentionnée sur l’étiquette.
- Milieu préparé en flacons ou en tubes : 6 mois à 2-8°C (à titre indicatif).
- Milieu préparé en boîtes : 1 mois à 2-8°C (à titre indicatif).
Milieu prêt-à-liquéfier en tubes :
- Stocker entre 2 et 25°C, à l’abri de la lumière.
- La date de péremption est mentionnée sur l’étiquette.

PRESENTATION Code

Milieu prêt-à-liquéfier en tubes :

- Coffret de 50 tubes de18 mL BM11808
Milieu déshydraté :
- Flacon de 500 g BK185HA

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REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES

NF EN ISO 16654 (V 08-032). Juillet 2001. Microbiologie des aliments. Méthode horizontale pour la recherche des
Escherichia coli O157.

NF EN ISO 10273 (V 08-027). Décembre 2003. Microbiologie des aliments. Méthode horizontale pour la recherche de
Yersinia enterocolitica présumées pathogènes.

XP CEN ISO/TS 11133-2 (V 08-104-2). Janvier 2004. Microbiologie des aliments. Guide pour la préparation et la
production des milieux de culture. Partie 2 : Guide général pour les essais de performance des milieux de culture.

NF EN ISO 21567 (V 08-411). Mars 2005. Microbiologie des aliments. Méthode horizontale pour la recherche de Shigella
spp.

NF V 04-504. Mars 2006. Microbiologie des aliments. Dénombrement des Pseudomonas spp. dans les viandes et
produits à base de viande et les volailles. Méthode de routine.

NF EN ISO 6579 (V 08-013). Mars 2007. Microbiologie des aliments. Méthode horizontale pour la recherche des
Salmonella spp.

NF U 47-100. Juillet 2007. Méthodes d’analyse en santé animale. Recherche par l’isolement et identification de tout
sérovar ou de sérovar(s) spécifié(s) de salmonelles dans l’environnement des productions animales.

NF U 47-101. Novembre 2007. Méthodes d’analyse en santé animale. Isolement et identification de tout sérovar ou de
sérovar(s) spécifié(s) de salmonelles chez les oiseaux.

NF U 47-102. Janvier 2008. Méthodes d’analyse en santé animale. Isolement et identification de tout sérovar ou de
sérovar(s) spécifié(s) de salmonelles chez les mammifères.

NF EN ISO 6785 (V 04-031). Avril 2008. Lait et produits laitiers. Recherche de Salmonella spp.

NF EN ISO 16266 (T90-419). Août 2008. Qualité de l’eau. Détection et dénombrement de Pseudomonas aeruginosa.
Méthode par filtration sur membrane.

NF ISO 19250 (T 90-435). Octobre 2010. Qualité de l’eau. Recherche de Salmonella spp.

Les mentions portées sur les étiquettes sont prédominantes sur les formules ou les instructions décrites dans ce document.
Les informations et les spécifications contenues dans cette fiche technique ont été établies à la date du 2010-10-13.
Elles sont susceptibles d’être modifiées à tout moment, sans préavis.
Code document : BK185/F/2005-07 : 9.
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