PRUEBAS DE COAGULACION

FLUJOGRAMA SOBRE LAS PRUEBAS DE

COAGULACION: EN LAS ALTERACIONES DE LA
HEMOSTASIA

PROFESOR TITULAR: DRA. ROXANA RIVERA LEAÑOS

ALDO ESCOBAR SANCHEZ R1 PATOLOGIA CLÍNICA

CONTENIDO
PRUEBAS BASICAS DE COAGULACION
ESTUDIO DE FACTOR XIIIa
RECUENTO DE PLAQUETAS
PACIENTES CID
ENSAYOS DE MEZCLAS PARA TP Y TTPa
DISFIBRINOGENEMIAS
MUESTRA HEPRANIZADAS (MANEJO Y PRUEBAS)
SINTESIS Y APLICACIÓN DE PRUEBAS DE COAGULACION
ABORDAJE DIAGNOSTICO DE HEMOFILIAS
PURPURA TROMBOCITOPENICA IDEOPATICA
PRUEBAS PARA RASTREO DE INHIBIDORES
ABORDAJE INICIAL ENF VON WILLEBRAND
PRUEBAS CONFIRMATORIAS ENF VON WILLEBRAND
VARIANTE NORMANDÍA DE LA ENFERMEDAD DE VON WILLEBRAND

FUNDAMENTO:
PROLONGACION
Trombocitopenia,
enfermedad de von Willebrand,
trombastenia de Glanzmann, síndrome
de Bernard-Soulier, enfermedad del
pool de almacenamiento
VARIABLE POR DROGAS : ASA,
antiinflamatorios no esteroides,
allopurinol, ácido
aminocaproico, ampicilina,
asparaginasa, azlocilina,
carbenicilina,
cefoperazona,diltiazem.
TIEMPO DE SANGRADO
ACORTAMIENTO
Hiperlipoproteinemia, diabetes
mellitus, ateroesclerosis
La incisión se debe realizar en
dirección paralela a la longitud
del brazo.
Los cortes perpendiculares
sangran más tiempo.
El tiempo de sangrado es el tiempo que
tarda en dejar de sangrar un corte
estándar de la piel de determinada
profundidad y longitud.
VALORES DE REFERENCIA
El rango normal en adultos es hasta
ocho minutos pero puede variar de
acuerdo con el método que se
utilice.
Repetir los resultados anormales.
 Tiempo de protrombina
(TP)

Establece la ef cacia global de la vía

extrínseca. Es sensible
FUNDAMENTO: a los cambios de los factores V, VII y X
y, en menor medida, del factor II
(protrombina).

PROLONGACION ACORTAMIENTO VALORES DE REFERENCIA

consecuencia de un
Ante la presencia de una deficiencia tratamiento con recombinante El rango normal en adultos es hasta
leve de factores II, V, VII o X, el nivel VIIa o por activación del factor VII ocho minutos pero puede variar de
de prolongación puede ser mínimo nativo, acuerdo con el método que se utilice
Tiempo de tromboplastina
parcial activada (TTPA

La sangre completa para la consiste

determinación del TP puede Los TP que se determinan con reactivosen un análisis no específco de la vía
Determinados reactivos del TP pueden
intrínseca.
que contienen factor tisular Si se mide junto conpor
verse afectados e TP normal,
la presencia de
permanecer estable durante al menos
FUNDAMENTO:
24 horas, en función del reactivo resulta
humano pueden diferir de aquellos la prueba de rastreo más útil para
anticoagulantes lúpicos o anticuerpos
empleado obtenidos con reactivos quedetectar
contienen.la def ciencia de los factores
antifosfolípidos, y ciertosVIII,
tiposIX,
de
anticuerpos
XI y XII. poco comunes pueden
prolongar el TP sin prolongar el TTPA.
 PROLONGACION
SOSPECHA DE LUPUS

Cualquier def ciencia que

involucre a las vías Segunda prueba de TTPA
comunes (def ciencias de empleando un reactivo
factores V, X, II y, en como Actin FS, que tiene
menor medida, de una concentración de
fibrinógeno) fosfolípidos muy alta

MENOS COMUNES: defciencia de

precalicreína (PKK) o de PROBABLE AUSENCIA DE
cininógeno de alto peso molecular ANTICOAGULANTE LUPICO
(KAPM)

Más del 50% la diferencia existente

entre los tiempos de coagulación del
plasma normal y el plasma de prueba,
indica la deficiencia de un factor
Segundo TTPA

NO CORRGIE

Presencia de un inhibidor, posiblemente de PROBABILIDAD DE

uno de los factores de la coagulación del
sistema, o del tipo no específ co, como el Anticoagulante
anticoagulante lúpico
lúpico

Segundo TTPA
normal

TIEMPO DE
TROMBINA
 Muestra la reacción que se
FUNDAMENTO: produce entre la trombina y
el fibrinógeno.

PROLONGACION UTILIDAD CLINICA VALORES DE REFERENCIA

Presencia de heparina y de Evaluación de la etapa de

sustancias similares a la heparina,
en presencia de otros inhibidores,
como por ejemplo, los PDF y
disfbrinogenemia
fibrinoformación. Solución de trombina que induce
Factor XIII
Monitoreo de la terapia a la coagulación del plasma
trombolítica. normal en
Sinonimia: factor estabilizador
Monitoreo de la terapia con alrededor de 15 segundos.
heparina.
de la fibrina. Fibrinoligasa
Diagnóstico de hiperfibrinólisis

En cada grupo de prueba deberá

incluirse un control de un pool de
OBSERVACIONES: La concentraciónLa cantidad de
FUNDAMENTO: En la fase de incorporación,plasma
el FXIIIanormal.
del plasma
de trombina usada debe ser
sustrato tal que
BAPA incorporado es de prueba incorpora el sustrato 5-aminopentil
dé un tiempo de coagulación de biotina amido (5 biotinamidopentylamin o BAPA)
proporcional a la actividad del
alrededor de 15 segundos con el al sustrato FXIII fibrinógeno que recubre la placa
factor
pool de plasma XIII de la muestra de
normal en presencia de calcio.
(de control) prueba.

AUMENTADO ACORTAMIENTO VALORES DE REFERENCIA

Prueba de solubilidad en urea

5M o acidomonocloroacético al 1
Enfermedades hepáticas
Infarto agudo de miocardio, %: la prueba se considera normal
severas, CID, leucemias y otras
coagulación intravascular cuando el coágulo no se
neoplasias.
diseminada, infarto cerebral. solubiliza en 24 horas.
Púrpura de Schönlein-Henoch.

Diarrea hemorrágica en
OBSERVACIONEs: siempre enfermedad de Crohn a
deberá integrar otras pruebas Electroinmunodifusión:
disminución adquirida de factor subunidades a y b: 50-150%
de coagulación XIII.
 SOSPECHA
CLINICA DE CID
RECUENTO DE
PLAQUETAS

La sangre se mezcla con un diluyente que

DIMERO - D hemoliza los glóbulos rojos

se coloca en un hemocitómetro y luego se cuentan

FUNDAMENTO:
plaquetas en el microscopio, usando contraste de fas
es posible.

Es el principal producto de la
degradacion de la fibrina y es
FUNDAMENTO:
generado en el paso final de la
formacion del trombo

AUMENTO DISMINUCION VALORES DE REFERENCIA

AUMENTADO ACORTAMIENTO VALORES DE REFERENCIA

SECUNDARIO: ESPLENECTOMIA, CANCER, CAUSAS HEREDITATIAS 150.000 a 450.000 plaquetas/µL, puede
PROCESO INFLAMATORIO. ser un poco más bajo Eje. Embarazo

ADQUIRIDAS:
Cáncer colorrectal, tumores TROMBOCITOPENIA POR
CONSUMO, ALCOHOLICA.
ginecológicos malignos, trombosis ASA, ,factorVIIa, pravastatina, inferior a 100
Contar unang/ml.. 
cantidad sufIciente de cél
venosa profunda, CID, cirrosis simvastatina, ácido para reducir el margen de error qu
hepática, TEP, trombosis
PRIMARIAS: ENF MIELOPROLIFERATIVAS; arterial,
Ensayos de tranexámico,
mezcla para warfarin
una puede producir una distribución d
SX MIELODISPLASICO
mujeres con pre-eclampsia. células aleatoria.
investigación exhaustiva de los
TP y TTPA anormales.

FUENTES DE ERROR EN EL RECUENTO DE Al verificar otra vez la correcta Valores superiores a 500
CÉLULAS distribución de las células en la cámara.
Evaluar de una activación ng/ml sugieren fuertemente
fibrinólitica en los pacientes CID
sometidos a

cirugía cardíaca con Contar

Plasma al menos
que 100 resultados
presenten células anormales en las
circulación extracorpórea,
FUNDAMENTO: pruebas
la cantidad dede rastreo,
células quees
sedecir TPen
cuenta y TTPA, pueden
 determinar la causa de la anomalía mediante
ensayos de mezcla (o de corrección)

CORRECCION NO CORRIGE
tipos de plasma utilizados

corrige mediante Se repiten con mezclas

el añadido de PLASMA, es muy de igual volumen (a las que se Plasma normal
probable que ese reactivo denomina 50:50 ) de plasma de Plasma envejecido
contenga la sustancia defIciente prueba y aditivo. Plasma adsorbido
en la muestra de prueba.

PRESENCIA DE UN INHIBIDOR plasma defIciente en factor VIII

plasma def ciente en factor IX

TIEMPO DE
SOSPECHA DE MUESTRA
REPTILASA
HEPARINIZADA

El reptilasa es un veneno de serpiente.

Consiste en una enzima similar a la No es inhibido por la
trombina que actúa directamente sobre el antitrombina, de manera que no se
fibrinógeno transformándolo en fibrina ve afectado por la presencia de
heparina

TIEMPO REPTILASA NORMAL-

PROLONGACION UTILIDAD CLINICA
T.TROMBINA PROLONGADO

Hipofibrinogenemia verifIcar si el alargamiento del

o afibrinogenemia Probable presencia de heparina tiempo de trombina es provocado
PACIENTE CON ECMO por la presencia de heparina en la
muestra
 OBSERVACIONES:
estar dentro de los tres segundos
del tiempo de control. El tiempo de
control debe informarse junto con
el tiempo del paciente.
De existir disf brinogenemia, el
El tiempo de control debe estar
tiempo
entre los 15 y los 18 segundos (si es
de reptilasa puede resultar más
menor,
sensible (es decir, más prolongado)
ajustarlo diluyendo más el reactivo
que el
reptilasa con el tampón de Owren)
tiempo de trombina.

SOSPECHA DE MUESTRA
HEPARINIZADA

T. de trombina en presencia
de sulfato de
protamina.

.Las formas mayores de heparina,

que prologan el T. de trombina,
pueden ser neutralizadas con el
FUNDAMENTO: agregado de sulfato de protamina
(SP).

PROLONGACION CORRIGE USO CORRECTO

Si el T. de trombina es La solución de trabajo de

prolongado pero se corrige trombina con SP se preparará
Mismas alteraciones en T. hasta dentro de los dos mezclando nueve partes del
trombina prolongago segundos del resultado de reactivo de trombina con una
control,. parte de SP al 40mg%.

OBSERVACIONES Se confirma la
siempre realizar mezclas con presencia de heparina
plasma prueba y plasma
normal (pool)
 ESTUDIO DE
DISFIBRINOGENEMIAS Plasma estándar:
RESULTADO DEL ENSAYO DE Ensayo de fibrinógeno 2,1 g/l
relación fibrinógeno-
CLAUSS NOTABLEMENTE antígeno por inmunodifusión
INFERIOR radial (IDR)

REALIZAR
Fibrinógeno (ensayo de
Clauss modificado)

El ensayo de relación fibrinógeno-antígeno FUNDAMENTO

detecta la disfibrinogenemia por la baja
actividad en el ensayo de Clauss en presencia de.Plasma con contenido conocido
un nivel normal de antígeno. de fibrinógeno en tampón de
glioxalina. El tiempo de
FUNDAMENTO
coagulación se mide tras el
añadido de trombina y se elabora
un gráfico

VALORES DE REFERENCIA Los

resultados podrán estimarse
INTERPRETACION DE LA pasadas las 18 horas, siempre y
AFIBRINOGENEMIA
PRUEBA cuando ningún diámetro
PROCESO DE RESULTADOS ACORTAMIENTO supereDElos
VALORES 5,5 mm.
REFERENCIA

Medir el valor que esté más

Trastornos hemorrágicos
por deficiencias de
coagulación
El tiempodel plasma y en
de coagulación es
la función plaquetaria
proporcional a la concentración
de fibrinógeno y se toma la
dilución 1/10 como valor de la
preparación estándar
próximo a 0,5 mm y hacer
una lectura doble (de
Nodiámetros
se ve afectada por°launo del
a 90
presencia de heparina
otro).a los
niveles que se utilizan para el
tratamiento del
tromboembolismo venoso

SOSPECHA subestimación de Los resultados finales deben

Diámetro >9,3 mm
fibrinógeno. informarse pasados dos
El plasma de prueba se diluye en días, a menos que algún
una proporción de 1/10, y se diámetro sea sup. a los 8
hace una lectura del mm
resultado de la línea estándar.

OBSERVACIONES
UTILIZAR NEUTRALIZANTES Importante: deberá establecerse
una curva de calibración con los
reactivos que se empleen en el
laboratorio

Nivel de
 CARACTERISTICAS CLINICAS DE HEMORRAGIA, PRUEBAS DE COAGULACION SIN CORRELACIN
CLÍNICAS

SOSPECHA DE PURPURA
TROMBOCITOPENICA
IDEOPATICA

SINTESIS Y APLICACIÓN DE LAS PRUEBAS DE COAGULACION

 PRUEBA DE RASTREO DE LOS
INHIBIDORES DE LOS FACTORES DE LA
COAGULACIÓN BASADO EN EL TTPA
PACIENTE CON SOSPECHA DE HEMOFILIA:
VARON, HEMATOMAS ESPONTANEANOS,
HEMARTROSIS.

Los inhibidores de la coagulación

que afectan al TTPA pueden ser
FUNDAMENTO: de acción inmediata o de acción
progresiva.
Hemofilia B

Hemofilia A

SOSPECHA DE INHIBIDOR SOSPECHA DE INHIBIDOR INTERPRETACION DE

DE ACCIÓN INMEDIATA DE ACCIÓN PROGRESIVA RESUTADO

Plasma de prueba Mala corrección en la

Requerirá un período de
mostrará una corrección mezcla preparada
incubación con plasma
escasa o nula del tiempo después de la incubación
normal antes de que se lo
de coagulación cuando se por separado será un
pueda detectar.
mezcle con plasma indicio de la presencia de
normal un inhibidor de ACCIÓN
INMEDIATA

OBSERVACIONES: Mala corrección en la

Preparar 3 tubos de mezcla incubada indica la
plástico: A, B y C presencia de
un inhibidor de acción
VALORACION INICIAL
PACIENTE CON
SOSPECHA ENF VON
WILLEBRAND

Realiar análisis de Multímeros

 ANÁLISIS DE MULTÍMEROS

Ensayo de la actividad del cofactor ristocetina/del

factor von WillebrandEnsayo de enlace
(FvW:RC al )
o FvW:Act
Ensayo de la actividad colágeno
del cofactor ristocetina/del
del factor von
factor von Willebrand (FvW:RC(FvW:CB)
Willebrand o FvW:Act)

El ensayo del cofactor ristocetina es

FUNDAMENTO: esencial para el diagnóstico
Evaluación de la PROVOCADA
de
enfermedad la capacidad del FvW para. ligar
El ensayo delde von Willebrand
cofactor ristocetina esPOR
colágeno puede, en algunos casos,
FUNDAMENTO:
FUNDAMENTO: esencial para el diagnóstico
reflejar de la
mejor su función
enfermedad de von Willebrand.
fisiológica.

VALORES DE
AUMENTO UTILIDAD CLINICA
REFERENCIA
VALORES DE
AUMENTO UTILIDADCON
NO CONCUERDA CLINICA
OTRAS
PROLONGACION REFERENCIA
VALORES DE REFERENCIA
PRUEBAS DE EvW

Especialmente para la Se representa el tiempo

Las plaquetas se EvW de tipo 2A, 2B y que tardan en
asentarán durante su Especialmente
2M en las quepara el la Se representa
aglutinarse el lastiempo
Las plaquetas se
conservación y EvW
antígenode tipo del2A,
FvW2B y que tardan
diluciones de en
plasma
laasentarán losdurante
casos de la su
Rango normal: de 0,49 a 1,32
Enformarán
mayoría desedimentos Algunos autores optan por el aglutinarse las
conservación
EvW, aunque y
no en todos, los puede
uso
2Mresultar
del ensayo
en las que
normal
de FvW:CB
el
si no es normalUI/ml
contra la
sueltos.
resultados del ensayo de o casi
posible antígeno
normal
realizar del FvW
mientras
el de FvW:RCo con diluciones de plasma
dilución/concentración
formarán sedimentos
actividad del FvW:RCo concuerdan puede
que una
el resultar
FvW:RCo normal normal contra la
sueltos.
con los del ensayo de FvW:CB. precisión adecuada. es
onotablemente
casi normal mientrasbajo. dilución/concentración
que el FvW:RCo es
notablemente bajo.
El rango normal deberá
IMPORTANTE:
PROBABILIDAD BAJA DE ENF DE Enestablecerse dentro
una escala lineal del
doble, armar
laboratorio, entre 50 y 150
 Representar los tiempos
obtenidos con las diluciones.
Representar los tiempos
obtenidos con las diluciones.
BUSCAR OTRAS CAUSAS DE
SANGRADO
de prueba
de prueba a partir del estándar
FUNDAMENTO:
PROLONGACION
En la mayoría de los casos de la
EvW, los resultados del ensayo
de actividad del FvW:RCo
concuerdan con los del ensayo
de FvW:CB.
CONFIRMAR ENFERMEDAD
von Willebrand
establecerse dentro del
(líneas) donde seentre
laboratorio, represente
50 y la150
concentración del FvW:CB (en el
UI/dl.
eje x) contra la DO (en el eje y)
Hacer una lectura de la
concentración del cofactor
Hacer unaenlectura
ristocetina de la
el plasma
concentración
cofactor
a partir del estándar
ristocetina en el plasma
Ensayo de enlace al
colágeno del factor von
Willebrand (FvW:CB)
Evaluación
de la capacidad del FvW para
ligar colágeno puede, en
algunos casos, reflejar mejor su
función fisiológica.
NO CONCUERDA CON OTRAS
PRUEBAS DE EvW
VALORES DE REFERENCIA
Algunos autores optan por el Rango normal: de 0,49 a 1,32
uso del ensayo de FvW:CB si no UI/ml
es posible realizar el de
FvW:RCo con una
precisión adecuada.
IMPORTANTE:
En una escala lineal doble,
PROBABILIDAD BAJA DE ENF DE armar un gráf co (a mano o con
VON WILLEBRAND un programa estadístico) de
puntos (líneas) donde se
represente la concentración del
FvW:CB (en el eje x) contra la
DO (en el eje y)
Diagnóstico de la variante Normandía
de la enfermedad de von Willebrand