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LABORATORIO DE
QUÍMICA ORGÁNICA

UNIV. MARCO A. CONDORI COPA .

 CROMATOGRAFIA

1. OBJETIVOS.
1.1 .OBJETIVO GENERAL.

Desarrollar el presente experimento de cromatografía

1.2 .OBJETIVO ESPECIFICO

 Desarrollar la cromatografía en papel.
 Calcular el factor de retención Rf de la cromatografía en papel.
 Desarrollar la cromatografía en capa fina.
 Calcular el factor de retención de la cromatografía en capa fina.
2. FUNDAMENTO TEORICO.

2.1. CROMATOGRAFIA-. La cromatografía es un procedimiento físico químico

que permite separar, aislar e identificar los componentes de una muestra,
sea basa en la velocidad de desplazamiento diferencial de dichos
componentes entre dos fases: una: estacionara o inmóvil, y otra que se filtra a
través de los intersticios o sobre la superficie de la fase estacionaria.

La separación puede realizarse en una columna rellena de un sólido poroso

finalmente dividido, el cual, a su vez puede actuar como fase estacionaria
propiamente dicha, o como soporte de una fase estacionaria liquida. También
se puede efectuar utilizando como fase estacionaria papel filtro o un sólido
finalmente dividido colocado en forma de capa fina sobre una placa de vidrio.

Existes tres tipos de cromatografía estas basadas en los mismos principios

fundamentales y se conocen como: cromatografía en columna, cromatografía
en papel y cromatografía en capa fina.

TIPOS DE CROMATOGRAFIA
FASE MOVIL FASE ESTACIONARIA ABREVIATURA
 Liquido Solido CLS
Gas Solido CGS
Liquido Liquido CLL
Gas Liquido CGL
La cromatografia significa “escribir colores”

2.2 PROCEDIMIENTOS CROMATOGRAFICOS.

2.2.1. CROMATOGRAFIA LÍQUIDO- SOLIDO O DE ADSORCION.

El proceso cromatografico de absorción consiste en hacer pasar una solución

de la muestra a través de un adsorbente o adsorbente convenientes
superpuestos.

Los absorbentes, sustancias pulverulentas, generalmente utilizadas son:

alúmina, carbonato de calcio, cal, carbón activado, resinas sintéticas, gel de
sílice, sacarosa, celulosa, etc. Sin embargo, mayormente se utilizan gel de
sílice porque presenta superficie muy grande en relación con el volumen de la
muestra (este proceso está relacionado con los tipos en columna y en columna
y en capa fina).

2.2.2. CROMATOGRAFIA LÍQUIDO-LIQUIDO O DE PARTICION

En el proceso cromatografico de partición, la fase estacionaria está constituida

por una capa delgada de líquido, fijada sobre la superficie de un sólido poroso
inerte. Consiste en separar los componentes de una muestra teniendo en
cuenta las diferencias de sus coeficientes de reparto (este proceso está
relacionado con los tipos de columna y en papel).

2.2.3. LA CROMATOGRAFIA GAS-SOLIDO.

Es un proceso cromatografico de adsorción, que se utiliza en la purificación de

gases.
2.2.4. CROMATOGRAFIA GAS- LÍQUIDO.

Es un proceso cromatografico de reparto, comúnmente denominado por los

químicos orgánicos como cromatografia en fase vapor.

2.2.5. CROMATOGRAFIA DE INTERCAMBIO IONICO.

Es un procedimiento cromatografico que constituye un campo espacial de CLS.

Consiste en hacer pasar una solución por una columna de intercambiadores
iónicos, la solución intercambia sus cationes por los protones de la resina
catiónica.

2.2.6. CROMATOGRAFIA EN PAPEL.

Este proceso cromatografico que constituye un campo especial de CLL. Aquí el

líquido estacionario es una película de humedad adsorbida en un soporte o
base de papel.

Esta técnica es la más sencilla, ya que, lo que hay que hacer es aplicar la
muestra de la orilla de un trozo de papel y sumergirla en el solvente de elución.
La separación de los componentes de la muestra ocurre por migración
diferencial de los mismos.

2.2.7. CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA.

Es un procedimiento rápido y sencillo para separar mezclas de sustancias y

para identificar/caracterizar o para determinar semi cuantitativamente
componentes individuales. La separación se basa en que las sustancias
investigadas se reparten de modo diferencial entre una fase estacionaria y otra
móvil: en la TLC el eluyente (fase móvil) se desplaza por una capa del solvente
(fase estacionaria), transportando así los componentes individuales de la
mezcla de sustancias más o menos lejos dependiendo de su solubilidad y / o
de su comportamiento frente a la adsorción. Al contrario, que en la
cromatografia en columna, el proceso separativo transcurre en un sistema
abierto, la placa separativa plana , el recorrido particular de cada sustancia se
emplea así para su identificación.

2.3. NOMENCLATURA IUPAC PARA CROMATOGRAFIA.

Cromatografia-. Es un método físico de separación en el que, los componentes

a separar, se distribuyen entre dos fases, una de los cuales, está en reposo
(fase estacionaria), mientras que, la otra(fase móvil)se mueve en una dirección
definida.

Cromatografía-.Es un instrumento empleado para realizar una separación

cromatografía.

Cromatograma-. Es una gráfica u otro tipo de presentación de la respuesta de

un detector. En la cromatografia plana, ”cromatograma” puede referirse al
papel o capa fina con las zonas separadas.

Fase Ligada-.Es una fase estacionaria que está unida de modo covalente a las
partículas de soporte o a la pared interior de la columna.

Fase Inmovilizada-. Es una fase estacionaria que esta inmovilizada sobre las
partículas del soporte o sobre la pared interior de la columna.

Fase Móvil-. Es el fluido que se filtra a través o a lo largo del lecho estacionario
en una dirección definida. Puede ser un líquido (cronograma liquida) o un gas
(cromatografia de gases). En la cromatografia de gases, se puede usar la
expresión Gauss Portador para la fase móvil. En la cromatografia de elución se
usa también la expresión eluyente para la fase móvil.

Eluir. Significa aplicar la cromatografia de elución. En la cromatografia plana..

Se prefiere el término”eluir” que el de “desarrollar”.

Eluyente-. Es la fase móvil portadora dela muestra.

Eluato-. Es el término con que se define la salida de eluyente en el proceso de
elución.

Muestra-. Es una mezcla consiste en cierto número de componentes, cuya

separación se pretende en el lecho cromatografico al ser arrastrado o eluidos
por la fase móvil.

Componentes de la muestra-. Son los constituyentes químicamente puros de la

muestra. Pueden no ser retenidos por la fase estacionario, retenidos
parcialmente o retenidos permanentemente. Se aceptan también los términos
de “eluato” y “analito” para un componente de la muestra.

2.4. FACTOR DE RETARDACION Rf.

El grado de retardación en la cromatografia de absorción y en superficie plana

(cromatografia de reparto), se acostumbra expresar como el factor de
retardación, Rf (denominado también factor de retardación, factor de rotación
de frente).

Matemáticamente se expresa como:

𝐑 𝐯𝐞𝐥𝐨𝐜𝐢𝐝𝐚𝐝 𝐝𝐞 𝐦𝐨𝐯𝐢𝐦𝐢𝐞𝐧𝐭𝐨 𝐝𝐞𝐥 𝐬𝐨𝐥𝐮𝐭𝐨

𝐟=
𝐯𝐞𝐥𝐨𝐜𝐢𝐝𝐚𝐝 𝐝𝐞 𝐦𝐨𝐯𝐢𝐦𝐢𝐞𝐧𝐭𝐨 𝐝𝐞𝐥 𝐬𝐨𝐥𝐯𝐞𝐧𝐭𝐞

Para la cromatografía en capa fina y en papel, el solvente y el soluto empiezan

a moverse desde el mismo punto; por lo tanto, Rf se puede expresar también
como:

𝐑 𝐝𝐢𝐬𝐭𝐚𝐧𝐜𝐢𝐚 𝐫𝐞𝐜𝐨𝐫𝐢𝐝𝐚 𝐩𝐨𝐫 𝐞𝐥 𝐬𝐨𝐥𝐮𝐭𝐨

𝐟=
𝐝𝐢𝐬𝐭𝐚𝐧𝐜𝐢𝐚 𝐫𝐞𝐜𝐨𝐫𝐢𝐝𝐚 𝐩𝐨𝐫 𝐞𝐥 𝐬𝐨𝐥𝐯𝐞𝐧𝐭𝐞

3. PARTE EXPERMENTAL.
3.1. CROMATOGRAFIA EN PAPEL.
 PROCEDIMIENTO
- En el mortero se coloca espinacas y se muele hasta sacar su jugo
 - Utilizando papel filtro, prepare cinco tiras utilizando una plantilla de 120mm
de largo, 12mm en la base superior y 10mm en la base inferior.
- Con el lápiz, trace una línea horizontal a 8mm desde el borde inferior de
cada tira de papel.
- Al centro de cada línea, coloque una gotita de la espinaca con tubo capilar
o muestra que se haya dispuesto, utilizando para ello un tubo capilar.
- Preparar soluciones en cinco de tubos de ensayo ETANOL, METANOL, n-
HEXANO, CLOROFORMO, ACETONA.
- Introducir, con cuidado, la tira del papel en los tubos de ensayo
- Esperar un buen tiempo
- Dejar secar el papel, y calcula los factores de retención Rf.
3.2. CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA.
 PROCEDIMIENTO
- En la placa cromatografía de la capa fina marcar en los bordes con una
regla a 8mm de base inferior
- Sembrar al placa marcando con un micro punta de color azul
- Preparar la solución de etanol a un vaso de 50ml
- Colocar el placa con la siembra al vaso que contiene etanol
- Esperar un buen tiempo
- Hacer secar la placa
- Calcular las relaciones de Rf de la muestra

4. REGISTRO DE DATOS.
 CROMATOGRAFIA EN PAPEL
SOLVENTES DISTANCIA DISTANCIA RECORIDA
RECORIDA POR DE SOLUTO(cm)
SOLVENTE(cm)
ETANOL 8.2 7.4
METANOL 8.6 7.4
n-HEXANO 1.3 1.2
CLOROFORMO 7.3 5.8
ACETONA 10,3 9.5

CROMATOGRAFIA DE CAPA FINA

SOLVENTE DISTANCIA DISTANCIA RECORIDA
RECORIDA POR POR SOLUTO(cm)
SOLVENTE(cm)
ETANOL 3.6 3.5

5. CALCULOS
 PARA CROMATOGRAFIA EN PAPEL
- Etanol

𝑹𝒇=𝟕.𝟒𝒄𝒎 𝑹𝒇=𝟎.𝟗𝟎𝟐𝟒
𝟖.𝟐𝒄𝒎

- Metanol

𝑹𝒇=𝟕.𝟒𝒄𝒎 𝑹𝒇=𝟎.𝟖𝟔𝟎
𝟖,𝟔𝒄𝒎
 - n-hexano

𝑹𝒇=𝟏.𝟐𝒄𝒎 𝑹𝒇=𝟎.𝟗𝟐𝟑
𝟏.𝟑𝒄𝒎

- Cloroformo

𝑹𝒇=𝟓.𝟖𝒄𝒎 𝑹𝒇=𝟎.𝟕𝟗𝟒
𝟕.𝟑𝒄𝒎

- Acetona

𝑹𝒇= 𝟗.𝟓𝒄𝒎 𝑹𝒇=𝟎.𝟗𝟐𝟐

𝟏𝟎.𝟑𝒄𝒎

 Para cromatografía de capa fina

- Etanol

𝑹𝒇=𝟑.𝟓𝒄𝒎 𝑹𝒇=𝟎.𝟗𝟕𝟐
𝟑.𝟔𝒄𝒎

6. ANALISIS DEL RESULTADO

- El mejor solvente que se comportó bien en cromatografía de papel es la
acetona
7. CONCLUSION.
- Se desarrolló el cromatografía en papel, observando que los cinto
solventes, como etanol, metanol, n-hexano, cloroformo, acetona. El mejor
solvente que se comporto es el acetona que se desplazó mayor distancia
que otros solventes.
- Se determinó los factores de retardación, la más retardación que tiene es el
n-hexano por que no presento tanta volatilidad.
- Se desarrolló el cromatografía en capa fina, en este experimento solo se
utilizó una solvente etanol y una una muestra de tinta de un micro punta de
color azul y se desplazó 3.6 cm, separándose dos colores el de debajo de
 color celeste y encima de celeste lo que el azul, entonces concluimos que la
micro punta está compuesto de dos mezclas de tinta de celeste y azul.
- También se determinó el factor de retardación de cromatografía de capa
fina y obteniendo 0. 972cm y una recorrida del solvente 3.6cm. de acuerdo
por su volatilidad que tiene este solvente etanol
8. BIBLIOGRAFIA.
9. McMurry, John; Química Orgánica, Ed. Alhambra S.A.
10. Morrison, Robert N.; Química Orgánica, Ed. Addison- Wesley
11. Invernizzi B., Eduardo y Álvarez C., Alfredo; Practicas de laboratorio de
Química Orgánica I
12. Galagovsky Kurman, Lydia; Fundamentos Teórico - prácticos para el
laboratorio de Química Orgánica; Ed. Eudeba.
13. Guía de laboratorio de Química Orgánica de curso básico facultad de
ingeniería.
9. ANEXOS.

CROMATOGRAFIA EN PAPEL

CROMATOGRAFIA DE CAPA FINA

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